儿童急性白血病多药耐药基因检测的临床价值

随着联合化疗的应用,儿童急性白血病的疗效已有极大提高,但仍有部分患儿达不到完全缓解或缓解后易复发。多年的研究发现,白血病细胞多药耐药性(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)是白血病难以获得良好疗效的障碍。多药耐药基因(ｍｄｒ1)的扩增和过度表达所引起的ＭＤＲ是其中的一个重要机制[1]。我们以半定量逆转录聚合酶链反应(ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴＰＣＲ)技术检测了33例儿童急性白血病细胞中ｍｄｒ1ｍＲＮＡ基因的表达,初步探讨了其与临床耐药的关系。对象…     

P-gp、MRP和LRP在神经母细胞瘤中的表达及意义

对化疗耐药是恶性肿瘤治疗失败的主要原因之一。国内外研究表明 ,肿瘤耐药异常复杂 ,是多基因、多步骤综合作用的结果[1] 。耐药相关标志主要包括多药耐药基因 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅ,ＭＤＲ1)及其编码产物Ｐ 糖蛋白 (ｐ ｇｌｙ ｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐ ｇｐ)、多药耐药相关蛋白(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ ,ＭＲＰ)、肺耐药相关蛋白 (ｌｕｎｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐｒｏｔｅｉｎ ,ＬＲＰ)、谷胱苷肽Ｓ 转移酶、ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ和凋亡相关基因如 ｐ5 3和Ｂｃ…     

儿童实体瘤mdrl的进一步研究

多药耐药 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)是指肿瘤对多种结构不同的化疗药物有交叉耐药现象 ,是化疗失败的主要原因 ,多由ｍｄｒ1基因产物Ｐ糖蛋白(Ｐ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ,Ｐ ｇｐ)介导。本实验对10 6例各类儿童实体瘤ｍｄｒ1基因产物表达进行研究 ,进一步阐明ｍｄｒ1基因表达情况 ,为临床术前术后化疗提供依据。资料与方法一、临床资料标本取自重庆医科大学儿童医院1992～ 1997年未经化疗存档小儿肿瘤石蜡标本共 10 6例 ,其中包括肾母细胞瘤、神经母细胞瘤、恶性淋巴瘤、卵黄囊瘤、胶质瘤等。年龄由 3个月～ 12岁…     

MDR1基因转染K562细胞株及人骨髓干祖细胞的研究

目的 研究应用基因工程技术将外源性ＭＤＲ１基因转染Ｋ５６２及人骨髓干祖细胞,使其获得多药表型,抵抗化疗中出现的骨髓抑制的可行性。方法 采用磷酸钙沉淀法建立产病毒包装细胞有液法分别感染Ｋ５６２细胞和人骨髓干祖细胞;集落筛选法、流式细胞仪、ＳＰ免疫组化法检测基因转染率;ＭＴＴ法、柔红霉素泵出实验检测Ｐｇｐ的功能;流式细胞仪分析细胞周期及ＳＰ法检测ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ基因表达,了解转染行为对靶细胞增殖     

mdr1基因转染骨髓造血细胞移植联合超剂量化疗治疗兔VX2肝癌的实验研究

目的　研究mdr1基因转染骨髓造血细胞移植联合超剂量阿霉素化疗在兔VX2肝癌治疗中的骨髓保护和治疗作用。方法　通过逆转录病毒包装细胞PA317 HaMDR1/A作为载体 ,将mdr1基因转入兔骨髓单个核细胞并自体移植到VX2兔肝癌模型体内 ,在阿霉素超剂量化疗中观察骨髓造血功能的保护和肿瘤的治疗效果。结果　mdr1基因成功转入兔骨髓单个核细胞 ,体外 4d转染率达 35 % ;转染细胞移植后能定植于受体骨髓中并功能性表达 ,定植率为 9.5 %。在超剂量化疗中 ,mdr1基因能有效保护受体骨髓的造血功能 ,荷瘤动物能耐受 3倍剂量阿霉素化疗 ,外周血白细胞数能维持在 (4 .2 6± 1.0 3)× 10 9/L ;同时超剂量化疗能迅速杀灭肿瘤细胞 ,使荷瘤动物存活时间明显延长 (P <0 .0 5 ) ,治愈率明显提高 (P <0 .0 5 )。结论　mdr1基因转染骨髓造血细胞移植能明显提高受体骨髓对化疗药物的耐受性 ,联合超剂量化疗能快速、有效的杀灭肿瘤细胞 ,提高恶性肿瘤的治愈率。     

人参皂甙单体Rb1逆转肿瘤细胞耐药的实验研究

为了观察人参皂甙单体Ｒｂ１逆转由多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）基因过度表达所致的耐药性,本文应用Ｒｂ１直接作用于肿瘤细胞株细胞ＫＢ－８－５,经ＭＴＴ方法检测药物敏感性,流式细胞仪（ＦＡＣＳ）检测细胞内药物浓度。以及免疫组化方法检测ＭＤＲ基因表达产物Ｐ－ｇｐ蛋白表达水平。实验结果显示Ｒｂ１可提高细胞内柔红霉素（ＤＮＲ）浓度,从而增加其对化疗药物的敏感性。但Ｐ－ｇｐ蛋白表达水平无改变,提示Ｒｂ１在体外具有耐药逆转作用,推测其作用的发生可能与Ｒｂ１改变了Ｐ－ｇｐ功能有关。     

先天性巨结肠GDNF表达研究

先天性巨结肠症 (Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇ’ｓｄｉｓｅａｓｅ .ＨＤ)病因多为结肠远端或直肠内缺失神经节细胞 ,目前研究发现与基因ＲＥＴ ,ＥＤＮＲＢ和ＥＤＮ3有关[1] ,并已证实ＲＥＴ基因是引起ＨＤ的主要基因[2 ] 。ＧＤＮＦ(神经胶质细胞衍化亲神经营养因子 )是ＲＥＴ的配基[3 ] ,目前发现其与神经节细胞移行过程有关 ,本试验就ＧＤＮＦ在ＨＤ病变肠段中的表达进行研究 ,从而描述与ＨＤ的发生关系。资料和方法1.标本准备　收集我院 1997～1998年共 15例ＨＤ患儿样本。其中 <3个月 5例 ,3个月～ 3岁 5例 ,>3岁5例。 3例为长段型 ,其余…     

多药耐药基因介导的骨髓保护在肝癌小鼠化疗时的富集效应

目的 探讨多药耐药基因转染小鼠骨髓单个核细胞移植后,化疗时其在体内的表达、分布以及在骨髓和外周血的富集效应.方法 骨髓造血细胞转染外源性多药耐药基因后移植入荷瘤Balb/c小鼠,免疫组化和RT-PCR观察mdr1基因在骨髓造血细胞、外周血单个核细胞及重要脏器的表达和分布;监测外周血白细胞变化及肿瘤组织P-糖蛋白表达.结果 外源性多药耐药基因在重要脏器和肿瘤组织无表达;化疗前骨髓细胞和外周血的P-糖蛋白表达阳性率分别为(9.36±1.84)%、(8.52±1.26)%,化疗药物剂量递增时,P-糖蛋白表达阳性率增高;移植未转染组与移植转染组外周血白细胞计数差异有统计学意义(P＜0.01).结论 外源性多药耐药基因转染在骨髓造血细胞和外周血单个核细胞有持续较高表达,在重要脏器无表达;随化疗药物剂量递增时骨髓和外周血有明显的富集效应;多药耐药基因转染介导保护骨髓在超剂量化疗中获得显著效果.     

具有cagA、vacA基因的幽门螺杆菌及其表达产物的研究

20 0 0年 4月～ 2 0 0 1年 5月 ,我们检测了浙江地区小儿感染的Ｈｐ菌株的ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因及其ＣａｇＡ、ＶａｃＡ蛋白的抗体阳性率 ,以研究Ｈｐ菌株的基因型与消化性溃疡 (Ｐｅｐｔｉｃｕｌｃｅｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＰＵＤ)和慢性胃炎 (Ｃｈｒｏｎｉｃｇａｓｔｒｉｔｉｓ,ＣＧ)的相关性。材料与方法1 研究对象 :Ｈｐ感染患儿 12 6例 ,男 79例 ,女 47例 ,平均年龄 8 8岁 ( 4～ 12岁 )其中ＰＵ 2 6例 ,ＣＧ 10 0例。2 胃粘膜标本 :取距幽门孔 3ｃｍ内胃窦粘膜 3～ 4块 ,分别进行病理切片Ｇｉｅｎｍｓａ染色 ;快速尿素酶试验 (ＲＵＴ ) …     

急性淋巴细胞性白血病儿血清可溶性肿瘤坏死因子受体的临 …

可溶性肿瘤坏死因子受体 (ｓＴＮＦＲ)是从细胞膜上通过蛋白酶水解下来的肿瘤坏死因子受体 (ＴＮＦＲ)片段 ,存在于人的各种体液中 ,与膜表面受体相对应[1] 。ｓＴＮＦＲ能与细胞膜上的ＴＮＦＲ竞争性结合肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ) ,从而调节ＴＮＦ的生物学活性。本文检测了 39例急性淋巴细胞性白血病(ＡＬＬ)患儿血清ｓＴＮＦＲｓ水平 ,报告如下。材料与方法一、对象　 39例ＡＬＬ ,男 2 5例 ,女 14例 ,年龄 3～ 11ａ ,30例初诊未治者经化疗骨髓部分缓解者 (ＢＭＰＲ) 8例 ,骨髓完全缓解者 (ＢＭＣＲ) 2 2例。复发 9例。正常对照组 30例均为健…     

第7届国际治疗药物监测和临床毒理学术会议简介

第七届国际治疗药物监测和临床毒理学术会议 (ＩＣＴ ＤＭＣＴ)于 2 0 0 1年 9月 1～ 6日在美国华盛顿市召开。本次大会由国际治疗药物监测和临床毒理学会 (ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＴＤＭＣＴ ,ＩＡＴＤＭＣＴ)委派当地组委会筹办。与会代表 40     

谷胶病的遗传学进展

谷胶病 (ＣＤ)又称谷蛋白肠病、麸质过敏性肠病 (ＧＳＥ)、乳糜泻、非热带口炎性腹泻 (ｎｏｎｔｒｏｐｈｉｃａｌｓｐｒｕｅ) ,是对小麦、燕麦或黑麦中的谷蛋白或麦胶蛋白不耐受而产生的多因素多基因遗传病。遗传易感基因主要与ＨＬＡ Ⅱ类基因 (ＨＬＡ ＤＱ2或ＨＬＡ ＤＱ8单倍型 )相关。多在白种人发病 ,欧洲和北美的发病率在 1 :2 0 0～ 40 0 ,亚洲和非洲报道较少。近年欧美研究较多 ,主要集中在遗传学研究上。现就于Ｍｅｄｌｉｎｅ(Ｒ)2 0 0 0 / 1～ 2 0 0 0 / 1 0检索的 1 5篇ＣＤ遗传学文章作一综述。一、群体遗传学研究ＣＤ的发病率…     

儿童学习障碍及其治疗

(续 2 0 0 2年第 3期第 190页 )5　分类ＤＳＭ Ⅳ的分类主要是阅读障碍 (ｒｅａｄｉｎｇｄｉｓｏｒｄｅｒ)、计算障碍 (ｍａｔｈｍａｔｉｃｓｄｉｓｏｒｄｅｒ)、书写障碍 (ｄｉｓｏｒｄｅｒｏｆｗｒｉｔｔｅｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ)、不能特定的学习障碍 (ｌｅａｒｎｉｎｇｄｉｓｏｒｄｅｒｎｏｔｏｔｈ ｅｒｗｉｓｅｓｐｅｃｉｆｉｅｄ)等。我国ＣＣＭＤ 2 Ｒ分型亦基本与之相似。而ＮＪＣＬＤ和美国神经心理学家Ｍｙｋｌｅｂｕｓｔ则将儿童学习障碍 (ＬＤ)大致分为言语型和非言语型两大类 ,认为这样分类符合ＬＤ的神经心理模式和当今治…     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究现状

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｕｅｓ,ＭＲＳＡ)是院内感染和社区感染中常见的致病原 ,致病力强而治疗效果差。自 196 1年发现第一株ＭＲＳＡ以来 ,其在世界各地临床分离的金黄色葡萄球菌 (简称金葡菌 )中的比例不断增加 ,耐药程度不断加深 ,目前已发展成为世界范围内存在的一个问题。现介绍ＭＲＳＡ的流行情况、流行的相关原因、耐药机制以及耐药菌感染临床治疗方案。ＭＲＳＡ出现后 ,于 2 0世纪 6 0年代中期扩展至加拿大及欧洲许多国家 ,70年代末期ＭＲＳＡ急…     

先天性巨结肠症EDN-3及EDNRB基因结构的分析

先天性巨结肠症 (Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇ’ｓｄｉｓｅａｓｅ,ＨＤ)是一种小儿常见的消化道发育畸形。导致神经节细胞发育停顿的病因至今仍不完全明了。近年发现内皮素受体 (ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒＢ ,ＥＤＮＲＢ)及其配体内皮素 3(ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ 3,ＥＤＮ3)对肠神经系统发育起重要的作用。本研究利用聚合酶链反应 单链构象多态(ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｐｒｏｄ ｕｃｔｓ,ＰＣＲ ＳＳＣＰ)…     

遗传性血色素沉着症研究进展

1 概述 :遗传性血色素沉着症 (ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｈａｅｍｏｃｈｒｏｍａｔｏｓｉｓ)又称原发性 (或特发性 )血色素沉着症 ,是一种单基因疾患、呈常染色体隐性遗传。本文就近年关于其遗传学及相关研究的进展作一综述。自 1 996年Ｆｅｄｅｒ氏首先确认关于本症铁代谢的遗传控制基因 (称作ＨＦＥ基因 )以来 ,已将它从众多病因的血色素沉着综合征中分离出来。已知ＨＦＥ基因位于第 6号染色体短臂 6ｐ 2 1 3、Ｄ6Ｓ 1 0 5附近 ,邻近人类组织抗原ＨＬＡ复合体的ＨＬＡ-Ｈ等位基因位点。它编码 34 3个氨基酸 ,由单一肽结合部位、α、α2 、类…     

肠神经分布异常的研究进展

小儿便秘是常见的临床现象 ,ＨＤ一直被认为是其首要原因。 1971年Ｍｅｉｅｒ Ｒｕｇｅ首次描述结肠神经元性发育异常 (ｎｅｕｒｏｎａｌｃｏｌｏｎｉｃｄｙｓｐｌａｓｉａ,ＮＣＤ)病变之后 ,相继发现多种其他肠神经异常的现象 ,由此逐渐建立了肠神经 (分布 )异常 (ｎｅｕｒｏｎａｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍａｌｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ,ＮＩＭ/Ｄｙｓｇａｎｇｌｉｏｎｏｓｉｓ)的新概念。ＮＩＭ共同特点是类似于ＨＤ慢性便秘的症状。目前认为临床现象类似ＨＤ的 ,仅5 0 %是典型的神经节细胞缺乏症[1] 。Ｈｏｌｓｃｈｎｅｉｄｅｒ等[1] 将ＮＩＭ…     

LIST OF CONTENTS TO VOLUME 3

ＳＰＥＣＩＡＬＩＳＴＣＯＭＭＥＮＴＡＲＹＧｅｎｅｔｈｅｒａｐｙｆｏｒｈｕｍｅｎｄｉｓｅａｓｅｓ　 (1) :1Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｃｈｉｌｄｎｅｐｈｒｏｔｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ　 (2 ) :12 9ＡｎｕｍｂｅｒｏｆｈｏｔｔｏｐｉｃｓｏｎｅｍｅｒｇｅｎｃｙｃａｒｅｏｆｎｅｏｎａｔｅｓｉｎＣｈｉｎａ　 (3) :2 0 9Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｉｎｃｈｉｌｄｈｏｏｄｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａ　 (6 ) :6 13ＳＰＥＣＩＬＩＳＴＬＥＣＴＵＲＥ…     

硫酸镁对新生鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的实验研究

缺氧缺血性脑损伤 (ｈｙｐｏｘｉｃ ｉｓｃｈｅｍｉｃｂｒａｉｎｄａｍａｇｅ,ＨＩＢＤ)是严重威胁新生儿健康甚至致残的常见原因。为探讨ＨＩＢＤ有效的治疗手段 ,本实验利用新生大鼠ＨＩＢＤ模型 ,观察硫酸镁对脑源性神经营养因子 (ｂｒａｉｎ ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ ,ＢＤＮＦ)表达的影响和对受损神经元的保护作用。材料和方法1 材料 :7日龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠 45只 ,体重 (17 2± 2 3)ｇ,由哈尔滨医科大学实验动物部提供。自制常压缺氧舱。ＢＤＮＦ试剂盒由美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司生产。2 方法 :(1)参…     

多药耐药基因转染脐血单个核细胞及其表达与功能的体外研究

目的：为克服白血病化疗中的骨髓抑制，采用含人多药耐药（MDR1）基因全长cDNA逆转录病毒载体转染入脐血单个核细胞，探索一种MDR1基因导入脐血造血细胞稳定、有效的方法，评价MDR1基因转染脐血细胞及其功能的表达，为体内转染MDR1基因保护骨髓免受大剂量化疗药物损伤提供条件。方法：采用含有MDR1基因表达质粒pHaMDR1/A的包装细胞PA317传代培养产病毒法，通过浓缩病毒上清液将MDR1基因导入人脐血单个核细胞，应用聚合酶链反应（PCR）方法、免疫组化法、流式细胞学等方法从基因、蛋白质、功能及细胞生物学特性等不同水平检测MDR1基因在脐血单个核细胞的表达、转染率及其与转染时间的关系和功能的表达；转染行为是否影响脐血细胞生物学特性。结果：（1）建立了一种安全可行、稳定高效的MDR1基因体外转染脐血造血细胞的体系和方法；（2）PCR方法证实外源性MDR1基因可有效性地体外整合到脐血单个核细胞中；（3）免疫组化法测得2日、4日、6日转染率分别为18.0%、29.8％、34.7%;(4)柔红霉素排出试验证实导入的MDR1基因表达产物P-gp有正常的生物学功能；（5）转染后的脐血细胞周期生物学特异性无异常。结论：MDR1基因体外转染脐血造血细胞是安全可行的，且在体外有稳定、有效的表达。这一方法为进一步在化疗骨髓保护的体内实验提供了有利的依据。