血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病的相关性及其初筛价值

目的]探讨血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病(PCAD)的相关性及其对PCAD的初筛价值。[方法]根据纳入标准及排除标准,纳入6例明确诊断的PCAD患者作为PCAD组,纳入6例健康受试者作为对照组,收集PCAD组和对照组血液,提取血清样本并保存,使用DNBseq平台检测两组血清中miRNA水平,筛选差异水平显著的miRNA。根据纳入标准及排除标准,收集78例PCAD患者、75例晚发冠心病患者和69例健康对照者的血液并对筛选的miRNA进行实时荧光定量PCR验证。分析PCAD患者冠状动脉造影报告,采用Gensini评分评估冠状动脉病变的严重程度。Spearman相关性检验分析有关miRNA水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。ROC曲线分析血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p及miR-30a-3p水平对PCAD的诊断价值,多因素Logistic回归分析PCAD发生的影响因素。[结果]DNBseq平台分析显示,差异表达miRNA 33个,其中上调miRNA 17个,下调miRNA 16个,差异水平最为显著的5个miRNA分别为miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p、miR-424-3p和miR-30a-3p;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,PCAD患者血浆miR-1228-5p升高1.7倍,miR-34a-5p升高1.4倍,miR-192-5p升高0.7倍,miR-30a-3p升高2.5倍(P＜0.05),两组间血浆miR-424-3p水平差异无统计学意义(P＞0.05);血浆miR-1228-5p和miR-34a-5p水平与PCAD患者冠状动脉狭窄程度均呈正相关(r＝0.307,P＝0.004;r＝0.238,P＝0.036);ROC曲线分析显示,miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p诊断PCAD的ROC曲线下面积分别为0.903、0.832、0.731及0.798,其联合诊断PCAD的ROC曲线下面积为0.990,95%CI为0.976～1.000。[结论]PCAD患者血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平显著升高,其联合检测诊断PCAD具有较高的准确性,有望成为初筛PCAD的新型生物标志物。     

膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析

目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达（P〈0.05）。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3（P〈0.05）。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。     

miR-17-5p在不同代骨髓间充质干细胞中的表达

目的:观测miR-17-5p在年轻的和衰老骨髓间充质干细胞（BMMSCs）中的表达,并分析其与细胞衰老的相关性。方法:采用密度梯度离心法分离大鼠BMMSCs并培养至第10代。取第4代（P4）BMMSCs和第10代（P10）BMMSCs的用细胞衰老β-半乳糖苷酶（β-gal）染色法进行染色。采用实时定量PCR检测P4及P10 BMMSCs中miR-17-5p基因的表达,并用2（-ΔΔct）法定量分析。结果:①形态学改变:P4～P10的细胞形态发生改变,P4的细胞形态均一,呈典型的漩涡状生长,P10的细胞失去典型的梭形外观,细胞体积增大而不规则,形状扁平破碎,细胞间隙增大,出现凋亡。②β-gal染色结果:P10的细胞肥大、染呈蓝色（呈阳性）,P4的细胞染色后未着色（呈阴性）。③实时定量PCR检测结果:P4细胞miR-17-5p基因的表达量是P10细胞的6.5倍（P<0.01）。结论:衰老BMMSCs中miR-17-5p的表达量显著降低,提示miR-17-5p可能参与了细胞的衰老过程。     

Caveolin-1和miR-199a-5p在缺血性脑卒中患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中的表达及其意义

目的探讨缺血性脑卒中(IS)患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中miR-199a-5p和膜微囊蛋白(Cav)-1的表达水平及临床意义。方法初发IS患者(发病24 h内)外周血标本24例,同时收集在体检中心体检的健康人外周血标本22例。Ficoll淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC)。荧光定量PCR检测PBMC中miR-199a-5p和Cav-1的表达水平。采用改良Zea Longa线栓法构建SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)模型。再灌注24 h后进行神经功能评分,收集脑皮质和脾脏组织。荧光定量PCR检测脑皮质和脾脏miR-199a-5p和Cav-1表达水平。结果 IS患者外周血PBMC中miR-199a-5p表达明显升高(P0.001),Cav-1 mRNA表达显著下降(P0.05)。与假手术组比较,MCAO模型组脑皮质和脾脏miR-199a-5p明显升高(P0.001,P0.01),Cav-1 mRNA表达显著下降(P0.001,P0.01)。结论 miR-199a-5p和Cav-1可能为IS患者重要的炎症指标。     

慢性心力衰竭患者血清miR-423-5p表达水平及意义

目的 探讨慢性心力衰竭患者血清微小RNA-423-5p（miR-423-5p）的表达水平及其意义。方法 收集2015年7月至2017年3月我院收治的89例慢性心力衰竭患者为病例组,并于同期随机选取35例健康体检者为对照组,采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）法对两组血清miR-423-5p水平进行检测。结果 病例组血清miR-423-5P水平为（0.97±0.32）,高于对照组的（0.41±0.28）,差异有统计学意义（t=9.072,P<0.001）。慢性心力衰竭miR-423-5p高表达患者血清NT-proBNP、LVEDD水平高于miR-423-5p低表达患者,LVEF低于miR-423-5p低表达患者,心功能分级高于miR-423-5p低表达患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。miR-423-5p诊断慢性心力衰竭的灵敏度为89.92%,特异性为93.34%,ROC曲线下面积AUC为0.919（95%CI：0.862~0.975）。结论 miR-423-5p在慢性心力衰竭患者血清中异常表达,并且与心功能密切相关,早期检测可作为评估心力衰竭严重程度、诊断慢性心力衰竭的重要生物学标志物。     

直肠癌患者血清miR-144-5p、miR-876-5p表达变化及其与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨直肠癌患者血清微小RNA-144-5p(miR-144-5p)、miR-876-5p表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法 选择直肠癌患者85例（观察组）、健康志愿者52例（对照组）,采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用RT-q PCR法检测血清miR-144-5p、miR-876-5p表达。分析血清miR-144-5p、miR-876-5p表达与直肠癌患者临床病理特征和预后的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-144-5p、miR-876-5p表达对直肠癌患者预后不良的预测价值。结果 观察组血清miR-144-5p、miR-876-5p表达均显著低于对照组（P均<0.05）。血清miR-144-5p、miR-876-5p表达与直肠癌浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关（P均<0.05）,与性别、年龄、肿瘤最大径、组织分化程度无关（P均>0.05）。随访3年,85例直肠癌患者3年生存率为76.47%(65/85)。miR-144-5p、miR-876-5p高表达者3年生存率均显著高于其低表达者（P均<0.05）。ROC...     

miR-142-5p靶向调控TGF-β2促进人巨噬细胞凋亡

目的探讨miR-142-5p在动脉粥样硬化组织中的表达及对人巨噬细胞凋亡的作用。方法构建动脉粥样硬化大鼠模型,qRT-PCR检测动脉粥样硬化组织中miR-142-5p的表达水平。50μg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激人巨噬细胞、血管平滑肌细胞(VSMC)、内皮细胞24 h后,提取细胞RNA,qRT-PCR检测细胞中miR-142-5p的表达水平。靶基因预测软件预测miR-142-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因鉴定靶基因的正确性。细胞转染miR-142-5p mimic、mimic control、miR-142-5p inhibitor、inhibitor control,Western blot和qRT-PCR检测miR-142-5p对靶基因的调控作用,流式细胞仪检测miR-142-5p和靶基因对巨噬细胞凋亡的作用。结果 miR-142-5p在动脉粥样硬化组织中表达上调,与正常组织相比差异显著(P0.01)。血管平滑肌细胞和内皮细胞经ox-LDL刺激后miR-142-5p的表达水平与刺激前没有明显变化,而巨噬细胞经ox-LDL刺激后miR-142-5p的表达水平较刺激前明显升高(P0.01)。预测miR-142-5p的靶基因为转化生长因子β2(TGF-β2)。miR-142-5p mimic与TGF-β2共转染后荧光素酶活性最低;miR-142-5p mimic组TGF-β2蛋白和mRNA的表达水平与mimic control组相比明显下降,miR-142-5p inhibitor组TGF-β2蛋白和mRNA的表达水平与inhibitor control组相比明显升高(P0.01);miR-142-5p mimic组细胞凋亡率明显高于mimic control组,TGF-β2 siRNA组细胞凋亡率明显高于siRNA control组(P0.01)。结论 miR-142-5p在动脉粥样硬化中过度表达,miR-142-5p通过下调靶基因TGF-β2促进人巨噬细胞凋亡。     

急性胰腺炎患者血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平与病情严重程度的相关性

目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-551-5p(miR-551-5p)、微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)表达水平与AP严重程度的相关性。方法:收集127例AP患者的临床资料,根据病情严重程度分为轻症AP(MAP组) 63例和重症AP(SAP组) 64例;另选取健康体检者60例为对照组。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测3组血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMS)及脂肪酶(LPS)水平;利用Pearson法分析血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平与患者Ranson评分、急性生理与慢性健康评估(APCHEⅡ)评分、血清生化指标的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平对AP的诊断价值;采用Logistic回归分析评估影响AP的危险因素。结果:与对照组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-18、CRP、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05),MAP组血清IL-6、IL-18、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05);与MAP组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、CRP水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-551-5p与TNF-α、IL-6、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分呈正相关(r值依次为0. 755,0. 684,0. 531,0. 519,0. 712,0. 679,均P 0. 05);血清miR-126a-5p与IL-6、IL-18、AMS水平及Ranson评分呈正相关(r值依次为0. 711,0. 678,0. 628,0. 701,均P 0. 05);血清miR-551-5p、miR-126a-5p诊断SAP的ROC曲线下面积(AUC)分别为0. 809、0. 800,截断值分别为2. 01、1. 54,敏感度分别为73. 1%、85. 3%,特异性分别为82. 8%、72. 4%;二者联合诊断的AUC为0. 965,敏感度为96. 5%,特异性为82. 4%;多因素Logistic分析结果显示高水平血清AMS、LPS、miR-551-5p、miR-126a-5p是AP的危险因素。结论:血清高水平miR-551-5p及miR-126a-5p可能反映AP患者病情严重程度,是评估SAP患者预后的潜在指标。     

外周血miR-338-5p、miR-140-5p在HBV相关肝细胞癌患者中表达水平及临床意义

目的?探讨外周血血清中微小RNA（microRNA, miR）-338-5p、miR-140-5p在HBV相关肝细胞癌患者中表达水平及临床意义。方法?选取2017年11月—2020年11月我院收治的HBV相关肝细胞癌患者95例作为肝细胞癌组，另选取同时期HBV相关良性肝病患者100例作为良性组，及健康体检者100例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p表达水平及HBV DNA载量，采用Pearson相关分析分析HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p表达水平与HBV DNA载量的关系，采用多因素Logistic回归模型分析影响HBV相关肝细胞癌发生的危险因素；ROC曲线分析miR-338-5p、miR-140-5p、异常凝血酶原-Ⅱ（abnormal prothrombin-Ⅱ, PIVKA-Ⅱ）表达对HBV相关肝细胞癌的诊断价值。结果?外周血血清中miR-338-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平从高至低依次为肝细胞癌组[（2.73±0.88）、（103.14，319.19）mAU/ml]、良性组[（1.48±0.40）、（32.70，87.15）mAU/ml]、对照组[（1.00±0.27）、（10.36，16.82）mAU/ml]，外周血血清中miR-140-5p表达水平从高至低依次为对照组（1.00±0.25）、良性组（0.72±0.20）、肝细胞癌组（0.38±0.12），两两比较差异均具有统计学意义（P均＜0.05）；肝细胞癌组患者HBV DNA载量（144.97±47.32）明显高于良性组（75.66±21.91）（P＜0.05）。不同TNM分期患者间比较，外周血血清中miR-338-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平及HBV DNA载量从高至低依次为TNM Ⅳ期、Ⅲ期、Ⅱ期、Ⅰ期，外周血血清中miR-140-5p表达水平从高至低依次为TNM Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期，两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）。HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p表达水平与HBV DNA载量呈正相关（P＜0.05），而miR-140-5p表达水平与HBV DNA载量呈负相关（P＜0.05）。HBV相关肝细胞癌发生与患者有无糖尿病史、有无长期饮酒史、HBV DNA载量及外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平有关（P均＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示外周血血清中PIVKA-Ⅱ＞40 mAU/ml、miR-338-5p高表达、miR-140-5p低表达是影响HBV相关肝细胞癌发生的独立危险因素（P＜0.05）。外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平联合诊断HBV相关肝细胞癌的AUC为0.930，明显高于3指标单独诊断的AUC（P均＜0.05），联合诊断的敏感度为98.90%，特异度为87.00%。结论?HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p高表达，miR-140-5p低表达，2者可作为评估HBV相关肝细胞癌发生的血清指标，2者联合PIVKA-Ⅱ更有利于诊断HBV相关肝细胞癌。     

乳腺癌组织中miR-216a-5p、TRIP4表达与患者病理特征和预后的关系

目的 探讨乳腺癌组织中微小RNA(miRNA)-216a-5p、甲状腺激素受体相互作用蛋白4(TRIP4)表达与患者病理特征和预后的关系。方法 选取85例乳腺癌患者,采用qRT-PCR法检测癌组织和癌旁组织中miR-216a-5p、TRIP4表达,并分析二者与患者临床病理特征的关系。随访3年,以二者均值将患者分为miR-216a-5p高表达组（≥0.430,44例）和miR-216a-5p低表达组（<0.430,41例）,TRIP4高表达组（≥1.886,42例）和TRIP4低表达组（<1.886,43例）,比较不同表达患者预后情况。结果 乳腺癌、癌旁组织中miR-216a-5p相对表达量分别为0.430±0.109、1.012±0.166,TRIP4相对表达量分别为1.886±0.388、1.023±0.171,乳腺癌、癌旁组织中miR-216a-5p、TRIP4表达比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。乳腺癌组织中miR-216a-5p与TRIP4表达呈负相关（r=-0.637,P<0.05）,二者与人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达、Ki-67增...     

出血性脑卒中患者血清miR-217-5p表达及临床意义

目的 探讨血清miR-217-5p在出血性脑卒中患者中的表达水平及其临床意义。方法 选取2019年5月至2021年5月邯郸市第一医院收治的出血性脑卒中患者135例作为观察组,另选取同时期健康体检者127例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测所有受试者血清miR-217-5p表达水平并对比;根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将观察组患者分为轻度、中度和重度,比较不同病情程度患者血清miR-217-5p表达水平;根据治疗后随访3个月的预后情况将观察组分为预后良好组和预后不良组,比较预后良好组和预后不良组血清miR-217-5p表达水平及一般资料;采用多因素Logistic回归分析法分析出血性脑卒中患者预后不良的影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-217-5p表达水平对出血性脑卒中患者预后情况的预测价值。结果 观察组血清miR-217-5p表达水平低于对照组(t=37.182,P <0.05);观察组中度、重度患者血清miR-217-5p表达水平低于轻度者(P <0.05),重度者血清miR-217-5p表达水平低于中度者(P &l...     

基于microRNA的冠心病氯吡格雷低反应生物标志物研究

目的探讨相关microRNA(miRNA)与冠心病氯吡格雷低反应的相关性及其作为生物标志物的诊断价值。方法筛选158例稳定型冠心病患者作为研究对象,采用光比浊法检测二磷酸腺苷(ADP)诱导的最大血小板聚集率(MPAR),将其中MPAR≥65%的35例患者纳入氯吡格雷低反应组(低反应组),并按年龄、性别配对将35例MPAR<65%的患者纳入氯吡格雷正常反应组(正常反应组)。采集患者外周血单核细胞并提取总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测miR-34a-5p、miR-370-3p、miR-432-5p和miR-495-3p在两组患者中的表达差异,并通过相关性分析和受试者工作特征(ROC)曲线分析评估差异miRNA对氯吡格雷低反应的诊断价值。结果与正常反应组相比,低反应组患者的miR-34a-5p和miR-495-3p表达显著升高,且差异倍数大于2(P<0.05);而miR-370-3p和miR-432-5p的表达差异不显著(P>0.05)。miR-34a-5p和miR-495-3p的表达与冠心病患者MPAR均呈显著正相关(r=0.709,P<0.01;r=0.5...     

血清miR-92a-1-5p及miR-92a-2-5p表达水平与老年卒中后抑郁的关系

目的 分析血清微小核糖核酸-92a-1-5p ( miR-92a-1-5p)、 miR-92a-2-5p 表达水平与老年卒中后抑郁的关系.方法 选取2018年2月至2020年10月胶州中心医院收治的129例老年卒中患者为研究组,另选取110名同期健康体检者为对照组,均检测血清miR-92a-1-5p、miR-92a-2...     

miR-576-5p通过结合CADM2调节胃腺癌DNA损伤和放化疗敏感性

目的 探究miR-576-5p通过调控细胞黏附分子(CADM)2基因对胃腺癌DNA损伤和放化疗敏感性的影响。方法 GEO2R分析胃腺癌数据集(GSE26595、GSE6174)中表达上调的基因,GSEA分析miR-576-5p与细胞增殖和DNA损伤的关系。按照转染物的不同,分为空白对照组(miR-NC)和miR-576-5p模拟物组(miR-576-5p),向miR-576-5p组的BGC-823、SGC-7901细胞中转染miR-576-5p模拟物组,miR-NC组细胞仅转染对应的对照片段。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测BGC-823、SGC-7901细胞中miR-576-5p的表达水平,细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞活力。将miR-576-5p过表达的BGC-823细胞皮下注射至裸鼠体内,成瘤后检测小鼠瘤重和体积,qRT-PCR检测肿瘤组织中miR-576-5p表达水平。以不同剂量的γ射线照射BGC-823、SGC-7901细胞,Western印迹检测γH2AX的蛋白表达。CCK8检测细胞对多柔比星化疗的敏感性。双荧光素酶活性实验验证miR-576-5p和CADM2的...     

血浆miR-181a-5p可评估急性脑梗死的病情及预后

摘要 目的：探讨急性脑梗死（ACI）患者血浆中微小RNA(miR)-181a-5p的表达水平及临床价值。方法：收集148例ACI患者（ACI组）的临床资料，根据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分将其分为：轻度72例、中度35例、重度41例。ACI患者发病4.5h内用阿替普酶静脉溶栓治疗。根据出院后第90天的预后情况，将患者分为预后良好组（102例）和预后不良组（46例）。另选取同期健康体检者100例为对照组。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测血浆miR-181a-5p表达水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中凋亡分子B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase-1）表达水平。相关性检验用Pearson分析；用Logistic多因素回归分析影响预后的因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析血浆miR-181a-5p预测预后的价值，计算曲线下面积（AUC）、灵敏度及特异性。结果：与对照组比较，ACI组血浆miR-181a-5p和caspase-1表达水平较高，而Bcl-2表达水平较低（P均＜0.05）。miR-181a-5p与caspase-1呈正相关（r=0.176，P=0.032），与Bcl-2呈负相关（r=-0.209，P=0.011）。轻度、中度和重度ACI患者血浆miR-181a-5p表达水平分别为（1.35±0.32）、（1.79±0.20）、（2.34±0.59），经单因素方差分析，组间比较差异有统计学意义（F=32.001，P＜0.001），病情越重，血浆miR-181a-5p表达水平越高。与预后良好组比较，预后不良组年龄更大，入院时NIHSS评分、血浆miR-181a-5p和caspase-1水平较高，而Bcl-2水平较低（P均＜0.05）。多因素分析显示，年龄、入院时NIHSS评分及血浆miR-181a-5p水平是ACI患者预后不良的独立影响因素（OR=1.532、1.832、3.111，P均＜0.05）。血浆miR-181a-5p预测不良预后的AUC为0.856（95%CI：0.815~0.886，P＜0.01），灵敏度为89.56%，特异性为70.12%。结论：ACI患者血浆中miR-181a-5p表达水平明显升高，对ACI病情和预后的早期评估有一定价值。     

结直肠癌组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白的表达变化及其意义

目的 观察结直肠癌（CRC）组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DNA损伤结合蛋白1和CUL4相关因子7(DCAF7)蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法 CRC患者98例,均接受手术治疗,术中留取CRC组织和癌旁组织,采用Real-time PCR法检测CRC组织和癌旁组织中miR-138-5p、miR-876-5p,采用蛋白印迹法检测CRC组织和癌旁组织中DCAF7蛋白,分析miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者临床病理参数的关系。以CRC组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量的中位数为临界值,将CRC患者分为miR-138-5p高表达组和miR-138-5p低表达组、miR-876-5p高表达组和miR-876-5p低表达组、DCAF7蛋白高表达组和DCAF7蛋白低表达组,并分析miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者预后的关系。结果 CRC组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量分别为1.36±0.29、1.41...     

circ_0001785与miR-330-5p在结直肠癌中的表达及其生物学意义

背景结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病机制尚未cular RNA, circ RNA)在CRC等肿瘤中表达异常并可调控细胞增殖、迁移及侵袭等生物学过程,但关于其具体作用机制尚未完全阐明,因而探寻新型circ RNA分子并探究其可能作用机制对进一步揭示CRC发病机制具有重要意义.目的探讨circ_0001785与miR-330-5p在CRC中的表达及其生物学意义.方法采用q RT-P C R法检测C R C组织、癌旁组织中circ_0001785、miR-330-5p的表达量;采用Pearson法检测CRC中circ_0001785与miR-330-5p的相关性;根据circ_0001785、miR-330-5p表达量的平均值将患者分为circ_0001785高表达组41例、circ_0001785低表达组39例与miR-330-5p高表达组45例、miR-330-5p低表达组35例,观察circ_0001785、miR-330-5p表达量与CRC患者临床病理参数的相关性;体外培养人CRC细胞SW480,分别将si-NC、si-circ_0001785、sicirc_0001785与anti-miR-NC、si-circ_0001785与antimiR-330-5p转染至SW480细胞;采用q RT-PCR法检测细胞中circ_0001785、miR-330-5p的表达量;采用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验检测circ_0001785与miR-330-5p的靶向关系; Western blot法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量.结果circ_0001785在CRC组织及细胞系中表达水平显著升高(P0.05), miR-330-5p的表达水平显著降低(P0.05);circ_0001785与m i R-330-5p呈负相关(r=-0.985,P 0.0001);circ_0001785、miR-330-5p表达量与分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期密切相关(P0.05);与si-NC组比较,si-circ_0001785组细胞活力及MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P 0.05),迁移及侵袭细胞数显著减少(P0.05);双荧光素酶报告实验证实circ_0001785可靶向结合miR-330-5p;下调miR-330-5p表达可降低干扰circ_0001785表达对CRC细胞SW480增殖、迁移及侵袭的作用.结论circ_0001785在CRC中表达上调,而miR-330-5p表达下调,干扰circ_0001785表达可通过上调miR-330-5p的表达从而抑制CRC细胞增殖、迁移及侵袭.     

miR-188-5p在胃癌组织中的表达及临床意义

[目的]探讨miR-188-5p在胃癌组织中的表达及临床意义。[方法]采用回顾性研究方法选择在本院进行诊治的120例胃癌患者(胃癌组)与120例胃良性病变(良性组)患者作为研究对象,取2组患者的病理组织,采用qRT-PCR检测miR-188-5p表达水平,调查患者的临床特征与随访患者的预后,判断miR-188-5p的诊断价值与预测预后效果。[结果]胃癌组的miR-188-5p相对表达水平与表达阳性率显著高于良性组(P<0.05)。胃癌组中不同Dukes分期、淋巴结转移、分化程度、远处转移、浸润深度患者的miR-188-5p表达阳性率对比差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示miR-188-5p预测诊断胃癌的曲线下面积为0.794(95%CI:0.812～0.923),诊断阈值为1.242时,灵敏度为60.2%,特异度为95.8%。胃癌组患者随访至今,平均随访时间为(15.22±2.48)个月,死亡12例,死亡率为10.0%;单因素和多因素Cox回归分析显示miR-188-5p表达阳性率、Dukes分期、淋巴结转移、分化程度、远处转移、浸润深度均为影响胃癌患者预...     

sPE患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达变化及与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系

目的 观察重度子痫前期（sPE）患者血清微小核糖核酸-199a-5p(miR-199a-5p)、微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)表达变化，并分析其与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系，为围产儿结局的改善提供参考。方法选取sPE患者200例（观察组）和产检健康孕妇200例（对照组），采用RT-PCR法测算两组血清miR-199a-5p、miR-142-3p，酶联免疫吸附试验检测两组血清可溶性细胞内皮因子（sEng）、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子（VEGF）,Pearson相关分析法分析观察组血清miR-199a-5p、miR-142-3p与血管内皮功能相关指标的相关性。根据围产儿结局将观察组分为结局不良组（29例）和结局良好组（171例），采用单因素分析法及多因素Logistic回归分析法分析患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达与围产儿结局的关系。结果 与对照组比较，观察组血清miR-199a-5p表达及VEGF水平降低，血清miR-142-3p表达及sEng、sFlt-1、ET-1水平升高...     

miR-524-5p靶向FABP5调控非小细胞肺癌增殖、凋亡的机制研究

目的探讨非编码小RNA-524-5p(miR-524-5p)是否通过靶向调控脂肪酸结合蛋白5(FABP5)从而影响非小细胞肺癌的增殖和凋亡。方法实时定量PCR(qPCR)检测非小细胞肺癌细胞(A549、H1299、H1650)和正常肺上皮细胞(BEAS-2B)中miR-524-5p和FABP5表达,选择miR-524-5p表达量最低的细胞系用于后续实验;运用生物学信息预测miR-524-5p靶基因,双荧光素酶报告基因进行验证;蛋白质印迹法(Western Blot)检测上调或下调miR-524-5p对FABP5的影响,以及A549细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bax蛋白水平;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡。结果与正常肺上皮细胞相比,miR-524-5p在非小细胞肺癌细胞系中表达下调(P0.05),FABP5 mRNA和蛋白表达上调(P0.05)。miR-524-5p在A549细胞中的表达量最低。FABP5是miR-524-5p的靶基因。miR-524-5p过表达可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,降低CyclinD1、Bcl-2蛋白水平,提升p21、Bax蛋白水平,差异均达到显著水平(P0.05),与抑制FABP5表达(si-FABP5)作用结果相同。FABP5过表达可以逆转miR-524-5p过表达对细胞增殖的抑制作用,以及对细胞凋亡的促进作用。结论 miR-524-5p能够抑制非小细胞肺癌增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制与靶向调控FABP5表达有关。