急性脑梗死患者外周血Keap1-Nrf2/ARE信号通路变化与预后的相关性分析

目的 分析急性脑梗死(ACI)患者外周血Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路变化与预后的相关性。方法 选取2020年6月—2022年3月安徽医科大学附属巢湖医院神经内科诊治ACI患者110例作为研究对象,根据溶栓后3个月的改良Rankin量表(mRs)评分分为近期预后良好组与近期预后不良组,随访1年ACI是否复发分为远期预后良好组与远期预后不良组,比较不同近远期预后组溶栓前、溶栓后7 d、溶栓后3个月外周血Keap1、醌氧化还原酶1(NQO1)、Nrf2、ARE蛋白相对表达量、神经功能缺损(NIHSS)评分,分析各蛋白与NIHSS评分的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)评价各蛋白对预后的预测价值。结果 110例ACI患者,近期预后良好患者78例,近期预后不良患者32例;随访1年,失访6例,远期预后良好患者83例,远期预后不良患者21例。近远期预后不良组溶栓后7 d、3个月Keap1蛋白相对表达量、NIHSS评分高于近远期预后良好组,NQO1、Nrf2、ARE蛋白相对表达量低于近远期预后良好组(P均<...     

金匮肾气丸对慢性肾衰竭大鼠Keap1/Nrf2/ARE通路及肾功能的影响

目的观察金匮肾气丸(JSP)对慢性肾衰竭大鼠肾功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法将SD大鼠随机分为对照组(n=12)、模型组(n=13)、JSP低(n=12)、中(n=13)和高(n=13)剂量组,除对照组外分别给予250 mg/kg腺嘌呤灌胃,连续28 d,复制慢性肾衰竭模型,对照组给予等量盐水。造模成功后JSP低、中和高剂量组大鼠给予0.6、1.2和2.4 g/kg JSP进行灌胃处理,1次/d,连续给药15周,对照组和模型组给予等量生理盐水。酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清肾功能指标尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和尿酸(UA)及肾组织炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况;苏木素伊红(HE)染色法观察各组大鼠肾组织病理学变化情况;采用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)试剂盒检测各组大鼠肾组织中氧化应激指标变化情况;蛋白免疫印迹分析检测各组大鼠肾组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达情况。结果对照组大鼠肾组织中肾小球和肾小管排列整齐,结构正常,模型组大鼠肾组织中肾小球变形,肾小管扩张,水肿渗出,出现轻度坏死和炎性细胞浸润等病理学变化,给予JSP治疗后,以上病理变化得到改善。与对照组比较,模型组肾功能指标(BUN、Scr、UA)、ROS、MDA、炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平和Keap1蛋白表达显著增加,SOD、CAT活性、Nrf2磷酸化水平和HO-1蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,JSP低、中和高剂量组肾功能指标(BUN、Scr、UA)、ROS、MDA、炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平和Keap1蛋白表达显著降低,SOD、CAT活性、Nrf2磷酸化水平和HO-1蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P0.05),且呈剂量依赖性。结论 JSP能够缓解慢性肾衰竭大鼠肾功能损伤,可能与抑制Keap1蛋白表达,激活Nrf2/抗氧化响应元素(ARE)通路,降低炎症反应与氧化应激相关。     

刺五加苷B对疲劳小鼠学习记忆能力的改善作用及其激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制

目的：探讨刺五加苷B（ELB）对疲劳小鼠学习记忆能力的影响,阐明其可能的作用机制。方法：60只ICR小鼠随机分为对照组（灌胃给予蒸馏水,静坐实验）、模型组（灌胃给予蒸馏水,游泳实验）、ELB（C）组（灌胃给予80 mg·kg^-1 ELB,静坐实验）及ELB（M）组（灌胃给予80 mg·kg^-1 ELB,游泳实验）,每组15只。持续给药4周后采用转棒实验观察小鼠的抗疲劳能力,采用Morris水迷宫实验和避暗实验检测疲劳小鼠的学习记忆能力,采用比色法检测小鼠血清中乳酸（LD）水平,微量酶标法检测小鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）活性,脲酶法检测小鼠血清中尿素氮（BUN）水平,羟胺法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性,硫代巴比妥酸法（TBA）检测小鼠脑组织中丙二醛（MDA）水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠脑组织中活性氧簇（ROS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、γ氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（GLU）水平,分光光度法检测小鼠脑组织中三磷酸腺苷酶（ATPase,包括Na⁺K⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase和Ca²⁺Mg²⁺-ATPase）活性,Western blotting法检测小鼠脑组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶1（HO-1）蛋白表达水平,HE染色法观察小鼠脑组织海马区神经元结构。结果：与对照组比较,模型组小鼠转棒时间明显缩短（P<0.05）,水迷宫潜伏期明显延长（P<0.05）,避暗潜伏期缩短（P<0.05）,错误次数增加（P<0.05）,血清中LDH活性和LD、BUN水平升高（P<0.05）,脑组织中eNOS水平和SOD、Na⁺K⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase、Ca²⁺Mg²⁺-ATPase活性及GLU/GABA比值降低（P<0.05）,MDA和ROS水平升高（P<0.05）,脑组织中Keap1蛋白表达水平升高（P<0.05）,Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低（P<0.05）;ELB（C）组小鼠转棒时间延长（P<0.05）,但其余各检测指标差异均无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较,ELB（M）组小鼠转棒时间延长（P<0.05）,水迷宫潜伏期缩短（P<0.05）,避暗潜伏期延长（P<0.05）,错误次数减少（P<0.05）,血清中LDH活性和LD、BUN水平降低（P<0.05）,脑组织中eNOS水平和SOD、Na⁺K⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase、Ca²⁺Mg²⁺-ATPase活性及GLU/GABA比值升高（P<0.05）,MDA和ROS水平降低（P<0.05）,脑组织中Keap1蛋白表达水平降低（P<0.05）,Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高（P<0.05）。与对照组比较,模型组小鼠海马区神经元排列松散,层次不清,部分海马区神经元形态有明显的病理学改变;与模型组比较,ELB（C）和ELB（M）组小鼠脑组织海马区结构层次清晰,神经元增多,排列较为紧密有序,海马区神经元形态和体积趋于正常。结论：ELB能够改善疲劳小鼠的学习记忆能力,其机制可能与调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路的相关因子表达有关。     

Keap1/Nrf2信号通路在非小细胞肺癌氧化应激机制中的作用

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 (Keap1)、核因子E2相关因子2 (Nrf2)蛋白表达水平,分析其与临床病理参数、氧化应激指标的相关性,为临床治疗提供潜在靶点。方法 选取2017年4月至2020年4月郑州市第三人民医院收治的100例NSCLC患者为研究对象,免疫组化法检测并比较癌组织、癌旁组织中Keap1、Nrf2蛋白表达水平;比较不同临床病理参数患者Keap1、Nrf2蛋白表达水平;比较不同Keap1、Nrf2蛋白表达患者血清超氧化物歧化酶(SOD)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)水平,并采用Spearman法分析SOD、i NOS、MDA与临床病理参数的相关性,采用Pearson法分析SOD、iNOS、MDA与Keap1、Nrf2蛋白水平的的相关性;比较不同Keap1、Nrf2蛋白表达患者的生存率。结果 癌组织、癌旁组织Keap1蛋白阳性率分别为77.00%、53.00%,Nrf2蛋白阳性率分别为74.00%、45.00%,Keap1蛋白OD值分别为0.41±0.07、0.33±0.05,Nrf2蛋白OD值分别为0...     

Nrf2/Keap1/ARE信号通路和髓核细胞自噬的研究进展

近年来,核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1/抗氧化应答元件信号通路和细胞自噬之间的相互作用机制成为国内外的研究热点之一。泛素结合蛋白p62介导的自噬诱导对Nrf2活化、消除线粒体功能障碍和氧化应激至关重要。椎间盘退变是各种脊柱退行性疾病的病理基础,在退变的椎间盘中可以观察到不同水平的髓核细胞自噬。炎症、营养缺乏、低氧、压力和高糖等因素均能诱导髓核细胞自噬,但自噬在椎间盘退变中的确切作用尚存在争议。     

红景天苷对糖尿病足溃疡大鼠Nrf2/Keap1信号通路及伤口愈合的影响

目的 探究红景天苷(Sal)对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠核转录因子E2相关因子2/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Nrf2/Keap1)信号通路及伤口愈合的影响.方法 采用高脂高糖饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,并于足背部除毛剪皮至筋膜,制作面积约为3 mm×7 mm的溃疡创面建立DFU大...     

microRNA-125b通过调控Nrf2/Keap1信号通路影响光感受器细胞氧化应激

目的研究在H₂O₂诱导的光感受器细胞氧化应激模型中microRNA-125b (miR-125b)调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)信号通路的作用机制,探讨其在干性年龄相关性黄斑变性(AMD)发病过程中的作用。方法利用H₂O₂ (800μmol/L)构建小鼠视锥细胞系661W细胞氧化应激模型,用实时荧光定量PCR (q PCR)检测mi R-125b及Keap1/Nrf2/HO-1 mRNA的表达。分别转染miR-125b模拟物、模拟物对照、抑制物、抑制物对照至661W细胞中,调控细胞miR-125b的表达,48h后用qPCR在661W细胞氧化应激模型中检测miR-125b及Keap1/Nrf2/HO-1 mRNA的表达。用Western blotting检测Keap1蛋白的表达。结果与对照组相比,miR-125b的表达在661W细胞氧化应激模型中显著降低,Nrf2及其下游基因HO-1 mRNA表达显著升高,Keap1 mRNA表达明显降低;与转染m...     

Keap1-Nrf2/ARE信号通路在糖尿病脑缺血中的保护作用

当糖尿病脑缺血发生时机体立即启动抗氧化应激机制,此时内源性Keap1-Nrf2/ARE信号通路被激活,调控下游多种细胞因子、蛋白酶体及Ⅱ相解毒酶对缺血缺氧脑细胞启动抗氧化应激保护机制,对受损的脑细胞给予相应保护。启动抗氧化应激后Keapl-Nrf2在细胞质中解离,随后Nrf2进入核内与ARE相结合抑制氧化应激引起的脑细胞、缺血半暗带损伤以及氧化应激诱导的胰岛素抵抗,从而达到对糖尿病脑缺血的神经保护作用。本文将初步阐述该通路在糖尿病脑缺血中的作用机制。     

Nrf2/HO-1信号轴在氧化应激性疾病中的机制

在氧化应激性疾病发生发展过程中,活性氧(reactive oxygen species,ROS)的清除障碍或生成过多导致爆发性释放后,可损伤机体各组织器官。最新研究证明：核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related actor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)信号轴通过发挥抗炎、抗氧化、减少线粒体损伤、调节钙离子内流、调控细胞凋亡(apoptosis)、焦亡(pyroptosis)、铁死亡(ferroptosis)及自噬(autophagy)等作用,抵抗氧化应激损伤,这为它在不同脏器(呼吸、心血管、神经、消化、泌尿、血液)的氧化应激性疾病中的治疗潜力提供了分子机制上的理论基础。因此,有效调控Nrf2/HO-1信号轴可成为治疗氧化应激性疾病的重要靶点。     

右美托咪定调控Nrf2/HO-1通路对H2O2诱导心肌细胞氧化应激损伤的作用研究

目的 探讨右美托咪定调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路对过氧化氢(H₂O₂)诱导心肌细胞氧化应激损伤的作用。方法 体外培养大鼠H9C2心肌细胞,设置对照组、H₂O₂组、1μmol右美托咪定+H₂O₂组、5μmol右美托咪定+H₂O₂组、10μmol右美托咪定+H₂O₂组。CCK-8法检测各组H9C2细胞增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组H9C2细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测各组H9C2细胞Nrf2、HO-1 mRNA相对表达量;Western blotting检测各组H9C2细胞Nrf2、HO-1蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,H₂O₂组H9C2细胞存活率、SOD水平、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白相对...     

Keap1-Nrf2/ARE信号通路介导黄连素调节氧化应激改善小鼠糖尿病肾病

目的 采用小鼠糖尿病肾病的模型并结合氧化应激,探讨黄连素改善糖尿病并发症中肾脏病变的作用和机制。方法 将糖尿病肾病（DN）小鼠分别灌胃给予二甲双胍（0.2g/kg）、黄连素低、中、高剂量（0.036、0.072、0.144g/kg）8周。检测血清中相应指标;检测肾脏中活性氧（ROS）及超氧化物歧化酶（SOD）水平,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）及还原型辅酶Ⅱ氧化酶4（NOX4）蛋白表达;检测24h尿蛋白等指标。结果 黄连素可显著降低DN小鼠血糖,增加胰岛素分泌,降低24h尿蛋白、血清尿素氮和肌酐、上调SOD和Nrf2水平,下调ROS、Keap1及NOX4水平。结论 黄连素具有改善小鼠糖尿病肾病的作用,且中、高剂量作用较优,其相关机制可能与调控Keap1-Nrf2/ARE信号通路,从而改善氧化应激有关。     

根皮素抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞氧化应激反应

目的 探讨根皮素(phloretin, PHL)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤的抑制作用及可能的分子机制。方法 利用LPS建立BV2小胶质细胞的氧化应激损伤模型,对该模型予以不同浓度的PHL 预处理。利用MTS方法检测细胞活力。ELISA法检测氧化应激相关产物一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。双荧光素酶活性检验方法检测抗氧化响应元件荧光素酶报告基因质粒(antioxidant reaction element luciferase reporter plasmid,ARE-LUC)报告基因转录活性。Western blotting法检测磷酸化核因子-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和血红蛋白加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达。结果 与对照组相比,LPS处理后的BV2小胶质细胞活力显著降低,氧化应激产物NO和MDA水平明显升高,GSH含量和SOD活性明显下降,但Nrf2磷酸化水平、ARE-LUC报告基因转录活性和HO-1蛋白表达略有增高。与模型组比较,高剂量PHL(20 μmol/L)预处理明显改善了LPS导致的BV2小胶质细胞活力下降,降低NO和MDA的含量,增高GSH的含量和SOD的活性,且进一步增加了Nrf2的磷酸化水平,上调ARE-LUC的转录活性和HO-1蛋白的表达。结论 PHL可以显著抑制LPS导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤,Nrf2/ARE通路可能是根皮素发挥抑制BV2小胶质细胞氧化应激损伤作用的途径之一。     

肢体缺血后处理通过Nrf2/ARE通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨肢体缺血后处理通过核转录因子红细胞系相关因子-2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响.方法 45只大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、肢体缺血后处理组(LpostC组)3组,每组15只.分别建立I/R组、LpostC组的脑缺血再灌注模型,在该基础上建立LpostC组的肢体缺血后处理模型.于造模后24 h分别比较三组的神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑组织病理形态学、Nrf2和超氧化物歧化酶(SOD)1蛋白表达.结果 S组大鼠无神经功能缺损、脑梗死,LpostC组神经功能缺损评分和脑梗死体积低于I/R组(均P<0.05);S组脑组织无病理学改变,I/R组呈急性缺血性改变,LpostC组病理学改变轻于I/R组;I/R组、LpostC组的Nrf2和SOD1蛋白表达均高于S组,且LpostC组高于I/R组(均P<0.05).结论 肢体缺血后处理上调大鼠Nrf2和SOD1蛋白表达,通过激活Nrf2/ARE信号通路减轻CIRI.     

金丝桃苷通过激活Keap1/Nrf2/HO-1通路保护小鼠GC-2细胞的氧化损伤

目的 从Keap1/Nrf2/HO-1通路角度研究金丝桃苷（Hyp）对H2O2所诱导的小鼠精母细胞（GC-2）氧化损伤的保护作用。方法 将GC-2细胞随机分为正常组、模型组、氮乙酰半胱氨酸组（阳性组,NAC,2.5 mmol/L)以及金丝桃苷组（50、100、200 μmol/L）,各组按剂量孵育48 h后,除正常组外其余各组细胞加入H2O（2 150 μmol/L）处理2 h,正常组给予等容量培养基。采用CCK-8法检测细胞的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,酶联免疫法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）活力以及丙二醛（MDA）含量,Western blot和RT-qPCR检测Nrf2、Keap1、HO-1蛋白及mRNA的相对表达水平,免疫荧光法检测Nrf2核转位水平。结果 150 μmol/L H2O2干预2 h可制备GC-2细胞氧化损伤模型。与正常组比较,模型组GC-2细胞增殖率以及SOD、GSH、CAT活力显著降低,MDA含量、细胞凋亡率,Keap1和Nrf2 mRNA表达显著升高（P<0.05）以及Keap1蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,NAC组和金丝桃苷200 μmol/L组细胞增殖率和SOD、GSH-PX、CAT活力显著升高,MDA含量、细胞凋亡率显著下降（P<0.05）;金丝桃苷200 μmol/L组Keap1 mRNA表达显著下降,HO-1 mRNA表达显著升高（P<0.01）;金丝桃苷200 μmol/L组Nrf2核蛋白（NEs-Nrf2）以及HO-1的蛋白表达显著升高（P<0.05）,Keap1蛋白表达显著下降（P<0.01）;金丝桃苷组出现了明显的核转位现象（P<0.05）。结论 金丝桃苷可能通过激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,对H2O2诱导的GC-2细胞氧化损伤具有保护作用。     

醉茄素A对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其机制

探讨醉茄素A对缺血性脑卒中大鼠神经功能的保护作用,阐明其可能作用机制。     

黄芪糖蛋白通过调控Nrf2/NQO1信号通路保护急性脊髓损伤大鼠模型神经功能

目的 探讨黄芪糖蛋白对急性脊髓损伤大鼠模型的神经保护功能及机制。方法 选取30只SD大鼠,随机分为3组:假手术组、模型组及观察组。观察黄芪糖蛋白对大鼠肢体运动功能的影响,检测各组大鼠脊髓组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase,NQO1)表达水平。结果 观察组、模型组大鼠运动功能评分低于假手术组(P＜0.05);观察组评分高于模型组(P＜0.05)。观察组、模型组大鼠TNF-α、MPO、IL-6水平高于假手术组(P＜0.05);观察组炎性因子水平低于模型组(P＜0.05)。观察组、模型组大鼠脊髓组织Nrf2、NQO1mRNA表达水平低于假手术组(P＜0.05);观察组表达水平高于模型组(P＜0.05)。模型组与观察组Nrf2、NQO1蛋白量降低;观察组高于模型组(P＜0.05)。结论 黄芪糖蛋白可通过上调脊髓组织Nrf2、NQO1表达水平发挥急性脊髓损伤大鼠神经保护功能。     

姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的抗衰老作用及其Keap1/Nrf2/ARE信号转导途径机制

目的：研究姬松茸酸性多糖A级分（ABP-A）对D-半乳糖（D-Gal）所致衰老模型小鼠的抗衰老作用,并探讨姬松茸多糖（ABP）的抗衰老机制。方法：水提醇沉法提取姬松茸粗多糖,并进行DEAE-纤维素离子交换柱层析分级及成分分析,得到ABP-A。48只ICR雄性小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物（吡拉西坦）组和ABP-A组,每组12只。给药70 d后进行小鼠Morris水迷宫、避暗和跳台行为学实验;检测各组小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平、总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）活性和活性氧（ROS）水平,Western blotting法检测各组小鼠脑组织中Nrf2、Keap1和HO-1蛋白表达水平。结果：ABP的总糖含量为75.1%,DEAE-纤维素离子交换柱层析分级得到ABP-A。行为学实验,与模型组比较,ABP-A组小鼠避暗潜伏期明显延长（P<0.05）,错误次数明显减少（P<0.05）,跳台潜伏期明显延长（P<0.05）,错误次数明显减少（P<0.05）,定位航行潜伏期明显缩短（P<0.05）,进入平台次数明显增加（P<0.05）。生化指标检测,与模型组比较,ABP-A组小鼠血清中SOD和CAT活性升高（P<0.05）,T-AOC升高（P<0.05）,MDA和ROS水平降低（P<0.05）。Western blotting法,与模型组比较,ABP-A组小鼠脑组织中HO-1蛋白表达水平升高（P<0.05）,Nrf2和Keap1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：ABP可改善衰老模型小鼠学习记忆能力,其机制可能与调节以Nrf2为核心的Keap1/Nrf2/ARE氧化应激通路相关因子Nrf2、Keap1和HO-1发挥抗衰老作用有关。