姜黄素诱导小鼠皮下前脂肪细胞棕色化的作用及机制

目的：本研究探究了姜黄素促进白色脂肪细胞棕色化的作用及其潜在机制。方法：抽提小鼠皮下原代脂肪细胞,并诱导其分化成熟。予姜黄素（10、20、40 μmol/L）孵育48 h,油红O染色观察脂肪细胞脂滴形态;使用线粒体绿色荧光探针（Mito Tracker Green）检测白色脂肪细胞内线粒体数量;运用线粒体超氧化物红色荧光探针（Mito SOX Red）测定细胞线粒体内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;应用ATP试剂盒检测细胞内ATP含量;Real?time PCR检测棕色化相关标志性基因的表达水平;最后利用β3肾上腺素能受体（β3 adrenergic receptor,β3?AR）拮抗剂（SR59230A）进行阻断实验。结果：姜黄素能够减小脂肪细胞脂滴大小,增加脂肪细胞线粒体数量（P < 0.001）。同时,低剂量姜黄素（10、20 μmol/L）可减少线粒体ROS产生（P < 0.01）,提高细胞内ATP含量（P < 0.05）。姜黄素干预能上调棕色脂肪标志性基因［β3?AR基因、PPARγ共激活因子?1α（PPARγ coactivator?1α,PGC1α）、解偶联蛋白1（uncoupling protein 1,Ucp1）］的mRNA表达水平（P < 0.05）。而阻断β3?AR则能抑制姜黄素促进白色脂肪细胞棕色化的作用。结论：姜黄素通过β3?AR促进白色脂肪细胞线粒体生物合成并改善其功能,诱导白色脂肪细胞棕色化。     

奥氮平下调SD大鼠棕色脂肪产热基因UCP1介导代谢综合征的分子机制

目的:探究抗精神病药物奥氮平通过棕色脂肪产热基因解偶联蛋白1(UCP1)介导代谢综合征的分子机制.方法:24只SD大鼠适应饲养和自主进食空白药物糖丸训练各7 d后,随机分为对照组和奥氮平给药组,每组12只.奥氮平给药组给予奥氮平(1 mg/kg),对照组给予等量空白糖丸,3次/d,共28 d.Western bolot和生化检测奥氮平介导的代谢综合征与棕色脂肪组织(BAT)中UCP1的变化情况;体外细胞实验研究奥氮平对C3H10T1/2间充质干细胞定向分化为棕色脂肪细胞的影响及UCP1蛋白的变化.结果:体内实验表明,奥氮平明显增加大鼠的体重和白色脂肪的重量(P<0.05),同时升高血清中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及游离脂肪酸(FFA)的水平(P<0.05),降低高密度脂蛋白(HDL)的水平(P<0.05),降低大鼠基础体温和棕色脂肪组织的重量(P<0.05),改变棕色脂肪组织的形态,并减少了棕色脂肪组织中UCP1、PRDM16及β3-AR蛋白的表达(P<0.05);体外实验证明奥氮平抑制了棕色脂肪细胞分化发育及UCP1的表达(P<0.05).结论:奥氮平通过降低大鼠棕色脂肪组织的产热活性与棕色脂肪细胞的发育分化介导机体代谢紊乱.     

PAQR9对棕色脂肪产热及UCP1表达的影响

目的 初步探究孕激素和脂联素受体家族成员9（progestin and adipoQ receptor family member 9,PAQR9）对棕色脂肪产热及解偶联蛋白1（uncoupling protein 1,UCP1）表达的影响。方法 选取C57BL/6J小鼠的白色脂肪组织（white adipose tissue,WAT）、棕色脂肪组织（brown adipose tissue,BAT）及前棕色脂肪细胞系DE2-3和间充质干细胞C3H10T1/2细胞系进行研究。实时荧光定量PCR技术检测不同条件下PAQR9及UCP1的mRNA水平,蛋白免疫印迹法检测UCP1的蛋白质水平。实时荧光定量PCR技术和油红O染色法检测脂肪细胞的成脂分化情况。结果 C57BL/6J小鼠BAT中PAQR9的mRNA水平显著高于WAT。冷刺激诱导下,BAT和腹股沟皮下WAT中PAQR9的mRNA水平显著升高。DE2-3细胞诱导分化成熟即第6天时,PAQR9的mRNA水平显著高表达。在DE2-3细胞中过表达PAQR9,UCP1的mRNA水平显著上调,细胞耗氧量显著增加,而DE2-3细胞成脂分化功能无显著性差异。在DE2-3细胞中敲低PAQR9,UCP1的mRNA水平显著下调。在C3H10T1/2细胞第4~6天脂肪细胞分化成熟时,PAQR9的mRNA水平显著上调,在敲低PAQR9后UCP1蛋白质水平下调,而C3H10T1/2细胞成脂分化功能无显著性差异。结论 PAQR9能够促进棕色脂肪细胞产热,调控产热基因UCP1的表达。     

脾阳虚模型小鼠产热障碍机制及附子理中汤的干预作用

目的:研究附子理中汤对脾阳虚模型小鼠骨骼肌解偶联蛋白3(uncoupling protein3,UCP3)及其mRNA表达以及对骨骼肌能荷的影响。方法:小鼠随机分为4组,每组11只,取3组造模,剩下的1组作为正常组,对造模的3组贯序采取以下措施:施行肩胛骨棕色脂肪切除术;连续饲以高脂饲料28d;从造模的3组中取2组,每只鼠每天灌饲黄连解毒汤和附子理中汤,分别称为黄连组和附子组,均普通饮食和饮水,另外1组则为模型组,饲以高脂饲料和普通饮水,正常组作为对照组,普通饮食和饮水,第99天取左侧腓肠肌,测腓肠肌UCP3相对含量及其mRNA表达和肌能荷值。结果:附子组肌能荷值显著低于其他3组,和黄连组比较,差异有统计学意义(P<0.01),和模型组及对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),对照组和黄连组比较,差异有统计学意义(P<0.01),对照组和模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);附子组UCP3mRNA表达较高,各组和附子组比较,差异有统计学意义(P<0.01);黄连组UCP3相对含量较低,各组和黄连组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脾阳虚动物产热障碍的部分机制可能在于骨骼肌UCP3含量降低、UCP3mRNA表达下调,使产热和产能过程失平衡,附子理中汤通过提高骨骼肌UCP3含量及其mRNA表达而发挥治疗效用。     

保元解毒汤对癌症恶病质小鼠血清脂质及白色脂肪组织棕色化的影响

[目的] 探讨保元解毒汤对癌症恶病质小鼠血清脂质及白色脂肪组织棕色化的影响。[方法] 将4～6周龄无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6雄性小鼠分为对照组、模型组、保元解毒汤组和醋酸甲羟孕酮组,连续干预21 d,观察记录小鼠体质量、摄食饮水量和肿瘤体积,以多维质谱“鸟枪”法脂质组学(multidimensional mass spectrometry-based shotgun lipidomics,MDMS-SL)技术测定血清脂质含量,检测小鼠附睾白色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织质量;以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察白色脂肪组织形态及脂滴面积;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测白色脂肪组织棕色化相关mRNA表达;免疫印迹法和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色检测白色脂肪组织解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)的蛋白表达。[结果] 与模型组比较,保元解毒汤组小鼠摄食饮水量改善,一般状态良好,肿瘤增长受到抑制,体质量明显增加(P<0.05)。MDMS-SL技术检测提示,模型组小鼠血清中共有61种脂质分子发生了异常调节(P<0.05),而保元解毒汤影响了其中30种脂质的异常变化(P<0.05)。与模型组比较,保元解毒汤抑制癌症恶病质小鼠附睾白色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织丢失和脂滴面积减少(P<0.05),抑制白色脂肪组织棕色化相关基因UCP1、Cidea、Prdm16的mRNA表达(P<0.05)以及白色脂肪组织棕色化标志蛋白UCP1的蛋白表达(P<0.05)。[结论] 保元解毒汤能抑制癌症恶病质小鼠体质量丢失,改善血清脂质异常变化,抑制附睾白色脂肪组织和腹股沟白色脂肪组织棕色化。     

NR对C57BL/6J小鼠糖耐量、胰岛素抵抗的影响及其机制

目的探索尼克酰胺核糖(NR)能否通过保护棕色脂肪(BAT)中线粒体,增加BAT代谢活性,改善高脂加酒精诱导的小鼠糖耐量和胰岛素抵抗。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、高脂酒精组(H+E组)、400 mg/(kg·d)NR干预组、800 mg/(kg·d)NR干预组和治疗组(T组),进行为期16周的动物干预实验。采用糖耐量实验(OGTT)、胰岛素抵抗实验(IPITT)观察小鼠糖耐量及胰岛素抵抗情况;小动物PET/CT显像技术检测棕色脂肪形态及活性改变;透射电镜观察棕色脂肪及白色脂肪(e WAT)中线粒体数目及形态改变。结果糖耐量实验中,120 min时800NR组、T组血糖变化比值较H+E组小鼠低(P0.05)。800NR组血糖曲线下面积(AUC)对比H+E组显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。胰岛素抵抗试验中,对比H+E组,60 min时400NR组、800NR组、T组血糖变化比值均降低(P0.05),30 min及90 min时,T组血糖变化比值降低(P0.05)。PET/CT显示400NR组、800NR组、T组小鼠BAT较H+E组小鼠形态增大。透射电镜显示H+E组小鼠BAT线粒体数目减少,形态不完整,400NR组小鼠线粒体数目增多,线粒体嵴增加。结论 NR可通过增加线粒体数目,保护线粒体结构,增加BAT活性,改善高脂酒精诱导的小鼠葡萄糖不耐受和胰岛素抵抗。     

大黄素对ApoE基因敲除小鼠脂肪棕色化的影响

目的观察大黄素(emodin)对载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E knockout,ApoE~(-/-))小鼠脂肪棕色化的影响,从而探讨其改善高脂血等血瘀状态的作用机制。方法雄性8周龄ApoE~(-/-)小鼠高脂饮食12周后,随机分为3组,模型组、辛伐他汀5.7 mg/kg组、大黄素80 mg/kg组;同周龄雄性C57BL/6J小鼠为正常对照组,给予基础饲料喂养。各组小鼠按剂量分别灌胃相应药物或者饮用水干预18周。检测指标包括体重(body weight,BW)、腹股沟白色脂肪组织(inguinal white adipose tissue,iWAT)重量、棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)重量、血脂、心功能、iWAT病理特征,以及解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)的iWAT原位表达。结果大黄素可显著降低小鼠体重(P0.05)、iWAT重量/体重比值(P0.05)及血清中TC、TG含量(P0.05),增加BAT重量/体重比值(P0.05)及心脏的射血分数(ejection fraction,EF)、短轴缩短率(fractional shortening,FS)(P0.01);HE染色结果显示,iWAT细胞出现多室,细胞变小、变圆,组织更加致密;免疫组化结果显示,iWAT中UCP1蛋白阳性表达的平均光密度(average optical density,AOD)显著增加(P0.01)。结论大黄素能促进ApoE~(-/-)小鼠腹股沟白色脂肪组织棕色化及减少白色脂肪堆积改善高脂血症状,可能与其逐瘀作用有关。     

Jmjd3基因慢病毒干扰载体的构建及其去H3K27三甲基化作用研究

目的 构建针对小鼠Jmjd3基因的RNAi慢病毒载体,感染小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBM-MSCs)后观察其对Jmjd3基因表达的影响及对组蛋白H3K27me3的去甲基化作用.方法 根据Jmjd3mRNA序列设计并合成3对shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入PLL3.7慢病毒干扰载体,双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,重组质粒与其他3种辅助包装质粒(pRsv-REV,pMDlg-pRRE,pMD2G)共转染293T细胞生产病毒液,病毒液感染mBM-MSCs,荧光定量PCR和Western blot检测目的基因Jmjd3的表达,筛选出最有效的干扰序列.Western blot检测组蛋白H3 K27 me3的表达量,分析Jmjd3的生物学功能.结果 双酶切和测序结果证实Jmjd3基因shRNA序列正确插入慢病毒载体.荧光定量PCR和Western blot结果显示,感染后Jmjd3表达显著下调,与空载体对照组相比,Jmjd3-shRNA1组、Jmjd3-shRNA2组和Jmjd3-shRNA3组分别下调88.9％ (P ＜0.001)、67.9％ (P ＜0.001)和72.4％ (P ＜0.001),Jmjd3-shRNA1组为最佳干扰组.Western blot结果显示干扰Jmjd3之后,H3K27me3的表达较空载体对照组升高.结论 成功构建了针对小鼠Jmjd3基因的慢病毒干扰载体,并能有效抑制mBM-MSCs中Jmjd3基因的表达,Jmjd3具有组蛋白H3K27me3的去甲基化作用.     

中链甘油三酯对C57BL/6J小鼠棕色脂肪组织的影响

目的观察中链甘油三酯（MCT）对C57BL/6J小鼠棕色脂肪组织的影响。方法选择4-5周龄C57BL/6J雄性小鼠30只,随机分为中链甘油三酯高脂组（MCT）,大豆油高脂组（LCT）及普通饲料对照组,每组10只,喂饲15周。观察研究前后各组间小鼠体质量、饲料消耗量及食物功效比、棕色脂肪组织重量差异以及解偶联蛋白-1（UCP1）表达水平的变化。结果研究结束时,MCT高脂组小鼠的体质量、体脂肪量显著低于LCT组（P〈0.05）,饲料消耗量MCT组和LCT组之间无统计学差异（P〉0.05）,MCT组棕色脂肪组织重量及UCP1蛋白表达量显著高于LCT组。结论 MCT可促进棕色脂肪组织增殖,提高棕色脂肪组织UCP1的表达,增强棕色脂肪组织的产热功能,从而抑制高脂饲料诱发的C57BL/6J小鼠体质量增加和体脂肪积累。     

GLUT4和脂联素在3T3-L1脂肪细胞中共享囊泡转运机制

目的 观察葡萄糖转运蛋白GLUT4和脂联素在3T3-L1细胞中的亚细胞分布。方法 诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,比较细胞分化前后GLUT4和脂联素的表达情况;通过蔗糖密度梯度离心比较GLUT4囊泡和脂联素囊泡的密度;采用结构照明超高分辨率显微镜（3D-SIM）观察GLUT4和脂联素在3T3-L1脂肪细胞内的分布情况。结果 3T3-L1前脂肪细胞呈梭形,胞质内无脂滴,细胞分化成熟后呈圆形,胞质内含有大量脂滴;GLUT4和脂联素在3T3-L1前脂肪细胞中不表达,在分化成熟的脂肪细胞中高表达;GLUT4囊泡和脂联素囊泡具有相似的密度;GLUT4和脂联素在细胞中共定位。结论 GLUT4和脂联素在3T3-L1脂肪细胞中分布于相似的细胞囊泡结构,共享转运机制。     

Medium-Chain Triglyceride Activated Brown Adipose Tissue and Induced Reduction of Fat Mass in C57BL/6J Mice Fed High-fat Diet

Objective To investigate activation of brown adipose tissue (BAT) stimulated by medium-chain triglyceride (MCT). Methods 30 Male C57BL/6J obese mice induced by fed high fat diet (HFD) were divided into 2 groups, and fed another HFD with 2% MCT or long-chain triglyceride (LCT) respectively for 12 weeks. Body weight, blood biochemical variables, interscapular brown fat tissue (IBAT) mass, expressions of mRNA and protein of beta 3-adrenergic receptors (β3-AR), uncoupling protein-1 (UCP1), hormone sensitive lipase (HSL), protein kinase A (PKA), and adipose triglyceride lipase (ATGL) in IBAT were measured. Results Significant decrease in body weight and body fat mass was observed in MCT group as compared with LCT group (P<0.05) after 12 weeks. Greater increases in IBAT mass was observed in MCT group than in LCT group (P<0.05). Blood TG, TC, LDL-C in MCT group were decreased significantly, meanwhile blood HDL-C, ratio of HDL-C/LDL-C and norepinephrine were increased markedly. Expressions of mRNA and protein ofβ3-AR, UCP1, PKA, HSL, ATGL in BAT were greater in MCT group than in LCT group (P<0.05). Conclusion Our results suggest that MCT stimulated the activation of BAT, possible via norepinephrine pathway, which might partially contribute to reduction of the body fat mass in obese mice fed high fat diet.     

中链甘油三酯对肥胖小鼠棕色脂肪及其β3肾上腺素能受体表达的影响

目的 观察中链甘油三酯对肥胖小鼠棕色脂肪中β 3肾上腺素能受体表达的影响.方法 复制高脂肪饲料肥胖小鼠模型,选取成功造模的小鼠30只,随机分为中链甘油三酯高脂组(MCT)和大豆油高脂组(LCT),每组15只,喂饲12周.观察研究前后各组小鼠体质量、体脂肪、血脂、棕色脂肪组织重量的差异以及棕色脂肪组织中β 3肾上腺素能受体mRNA表达水平的变化.结果 研究结束时,MCT组小鼠的体质量、体脂肪量显著低于LCT组(P＜0.05),血甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度均显著低于LCT组(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度以及HDL-C/LDL-C比值显著高于LCT组.MCT组棕色脂肪组织中环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶(PKA)及激素敏感脂酶(HSL)均显著高于LCT组.MCT组棕色脂肪组织重量及β 3肾上腺素能受体mRNA表达水平显著高于LCT组(P＜0.05).结论 MCT可促进棕色脂肪组织增殖及其β3肾上腺素能受体mRNA的表达.     

棕色脂肪剔除对高脂饲料诱导的肥胖小鼠体脂肪及血脂的影响

目的 观察棕色脂肪剔除对高脂饲料诱导的肥胖小鼠体脂肪及血脂的影响.方法 选择4-5周龄C57BL/6J雄性小鼠22只,随机分为肩胛下棕色脂肪剔除组和手术对照两组,每组11只,术后均喂饲高脂饲料16周.观察两组小鼠体质量、体脂肪、Lee氏指数、饲料消耗量、食物功效比及血脂的差异.结果 研究结束时,棕色脂肪剔除组小鼠的体质量、体脂肪量、Lee氏指数及血甘油三酯浓度均显著高于对照组(P＜0.05),棕色脂肪剔除组食物功效比显著低于手术对照组(P＜0.05),两组小鼠饲料消耗量及能量摄入量均无统计学差异(P＞0.05).结论 在棕色脂肪剔除情况下,高脂饲料喂养的小鼠体内脂肪蓄积增加、肥胖度增加、血甘油三酯浓度增加,提示小鼠棕色脂肪对防止肥胖的发生具有一定作用.     

Supplementation of Fermented Barley Extracts with Lactobacillus Plantarum dy-1 Inhibits Obesity via a UCP1-dependent Mechanism

Objective We aimed to explore how fermented barley extracts with Lactobacillus plantarum dy-1(LFBE) affected the browning in adipocytes and obese rats.Methods In vitro, 3T3-L1 cells were induced by LFBE, raw barley extraction(RBE) and polyphenol compounds(PC) from LFBE to evaluate the adipocyte differentiation.In vivo, obese SD rats induced by high fat diet(HFD) were randomly divided into three groups treated with oral gavage:(a) normal control diet with distilled water,(b) HFD with distilled water,(c) HFD with 800 mg LFBE/kg body weight(bw).Results In vitro, LFBE and the PC in the extraction significantly inhibited adipogenesis and potentiated browning of 3T3-L1 preadipocytes, rather than RBE.In vivo, we observed remarkable decreases in the body weight, serum lipid levels, white adipose tissue(WAT) weights and cell sizes of brown adipose tissues(BAT) in the LFBE group after 10 weeks.LFBE group could gain more mass of interscapular BAT(IBAT) and promote the dehydrogenase activity in the mitochondria.And LFBE may potentiate process of the IBAT thermogenesis and epididymis adipose tissue(EAT) browning via activating the uncoupling protein 1(UCP1)-dependent mechanism to suppress the obesity.Conclusion These results demonstrated that LFBE decreased obesity partly by increasing the BAT mass and the energy expenditure by activating BAT thermogenesis and WAT browning in a UCP1-dependent mechanism.     

低温对中缅树鼩褐色脂肪组织及肝脏解偶联蛋白mRNA表达的影响

目的研究低温对中缅树鼩褐色脂肪组织及肝脏解偶联蛋白（UCP2）mRNA表达的影响.方法中缅树鼩冷驯化28d,观察低温对中缅树鼩体重、BAT的影响,并应用RT-PCR方法测定中缅树鼩褐色脂肪组织及肝脏UCP2mRNA表达水平.结果实验前各组体重无统计学意义（P〉0.05）,冷驯化28d后,实验组的体重与对照组相比有统计学意义（P〈0.05）;实验组BAT显著高于对照组（P〈0.05）.冷驯化28d后,实验组与对照组相比,肝脏的UCP2基因表达增强（P〈0.05）,实验组BAT的UCP2基因表达显著高于对照组（P〈0.05）.结论低温可增强中缅树鼩UCP2mRNA表达.     

牛黄熊脱氧胆酸抑制TNF-α刺激3T3-L1细胞脂肪分解

目的探讨牛黄熊脱氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid,TUDCA)对TNF-α刺激3T3-L1细胞脂肪分解及其可能的机制。方法以3T3-L1前脂肪细胞经1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、地塞米松、胰岛素诱导分化成3T3-L1脂肪细胞,设:①对照组;②TNF-α(50 ng/ml)组;③TUDCA(1 mmol/L)+TNF-α(50 ng/ml)组;④TUDCA组(1 mmol/L)。通过油红O染色观察脂滴形态变化并测定培养基中甘油含量作为评价脂肪分解的指标,同时用Western blot检测脂滴包被蛋白perilipinA蛋白表达。结果 TNF-α可以显著刺激3T3-L1细胞脂肪分解,包括功能学显示甘油释放量显著增加[(2.784±0.104)mmol/L,P<0.01],形态学显示脂滴碎裂;TUDCA可以明显抑制TNF-α刺激的3T3-L1细胞脂肪分解,包括阻止脂滴形态的改变,逆转甘油的释放[(1.718±0.085)mmol/L,P<0.01]。通过Western blot检测结果显示TNF-α可以下调perilipin A蛋白表达[(0.227±0.004),P<0.01],而TUDCA可以阻断TNF-α对perilipin A蛋白表达的下调作用[(0.705±0.066),P<0.01]。结论 TUDCA可能通过阻止perilipin A蛋白下调而抑制TNF-α诱发脂肪分解,通过减少游离脂肪酸FFA,从而对胰岛素抵抗、糖尿病等具有一定的改善作用。     

血液系统条件性DNMT 3B 基因敲除小鼠的构建及鉴定

目的 构建可在血液系统中条件性敲除DNMT 3B 基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT 3B 基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型。方法 将引进的DNMT3Bflox/flox 小鼠与Mx1-Cre+ 小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3Bflox/+Mx1-Cre+ 及DNMT3Bflox/+Mx1-Cre- 两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR 法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3Bflox/flox Mx1-Cre+ 的小鼠,通过腹腔注射pI-pC 共5 次诱导DNMT3B 敲除,然后用半定量PCR 方法鉴定DNMT 3B 基因敲除情况。结果 基因型鉴定确认在13 只子鼠中有2 只为DNMT3Bflox/flox Mx1-Cre+,经pI-pC 腹腔注射后,DNMT 3B 基因通过Cre/loxP 系统被成功敲除。结论 该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT 3B 基因的小鼠,并进行敲除后鉴定。