RBM4a基因表达与功能研究进展

RNA结合基序4（RNA?binding motif 4,RBM4）是一个参与不同细胞生物学过程的RNA结合蛋白（RNA?binding protein,RBP）,其结构包含两个RNA识别基序和一个CCHC型锌指结构。RBM4表达于多种组织,参与前体mRNA的选择性剪接、翻译控制和RNA沉默等转录后基因调控过程。RBM4具有多种生物学功能,包括维持胚胎和性腺发育、控制昼夜节律及介导细胞分化等。RBM4的表达异常可导致多种疾病的发生,特别是与肿瘤的关系密切,但具体分子机制尚需进一步研究。文章就RBM4的相关研究进展作一综述。     

RBM家族在肝癌中作用及其机制的研究进展

RNA结合基序蛋白是一类RNA结合蛋白，广泛参与RNA的转录、翻译、代谢等生物学过程，并与RNA可变剪切事件息息相关，在细胞的增殖凋亡等生命过程中起到重要的调控作用。近年来许多研究者发现，RBM蛋白家族的异常表达及功能失调，与肝癌的发生发展密切相关。本文就RBM蛋白家族成员在肝癌中的作用进行综述，了解RBM家族中各成员蛋白在肝癌中发生发展的作用及机制，为肝癌的治疗及预后提供一定的参考。     

RNA结合蛋白RBM45在肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨核糖核酸结合基序蛋白45(RNA-binding motif protein 45,RBM45)在肝癌中的表达及其临床应用价值。方法 应用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库分析RNA结合蛋白RBM45在肝癌中的表达,并关联临床资料及病理特征进行统计学分析。运用基因富集分析软件GSEA对肝癌组织中与RBM45相关的基因进行KEGG信号通路富集分析。结果 与癌旁组织相比,肝癌组织中RBM45表达明显升高（P <0.001）,且RBM45表达水平与患者临床分期、肿瘤分级及预后均显著相关（P <0.05）,通过构建单变量和多变量COX风险回归模型分析RBM45表达与临床资料的相关性,结果表明RBM45可做为肝癌患者独立预后的危险因素（HR:2.756 95%CI:1.785-4.255,P=4.813e-06）;KEGG富集分析显示,RBM45可能与细胞周期、卵母细胞减数分裂、泛素介导的蛋白水解等信号通路密切相关。结论 RBM45在肝癌组织中高表达,且其高表达的患者预后较差;RBM45表达可作为肝癌患者预后判断的独立标志物。     

RNA结合基序蛋白3的作用研究进展

RNA结合蛋白(RBPs)参与RNA转录后调控和翻译,它在细胞凋亡、细胞周期等细胞生命活动中发挥着至关重要的作用,并且基于其在肿瘤和神经保护方面的相关研究显示,它是目前研究细胞内RNA调节方式的热点,但对其的机制研究尚不清楚,本文以RNA结合基序蛋白3(RBM3)分子为代表就RNA结合蛋白的基本结构、机制和研究进展进行综述。     

血液病相关的 RBM15 分子的研究进展简

RBM15可编码一种RNA结合蛋白,此蛋白可调控Notch、Wnt等多条信号通路,RBM15参与的这些信号通路均在细胞（特别是血细胞）的生长、凋亡过程中发挥重要作用.近年来,针对RBM15的研究逐渐兴起,已发现RBM15与多种疾病以及衰老的发生发展存在紧密联系.本文旨在对RBM15在急性/慢性髓性白血病、Kaposi＇s肉瘤、外周B淋巴细胞减少症等疾病和衰老过程中的作用及可能的作用机制进行详细总结,以期为相关研究提供参考.     

基于分子结构的IncRNA分子功能的研究进展

研究表明,lncRNA以转录本的形式调控蛋白编码基因的表达,并参与染色质修饰、染色体沉默、基因组印迹以及转录激活等多种生物学过程。lncRNA的自身结构及所结合的靶点不同,其所具有的生物学功能亦不同。本综述将解析lncRNA的结构,包括RNA结构域、蛋白结构域、DNA结构域及模块结构,并分析其生物学功能;着重介绍几种新近的研究方法,包括染色质构象捕获（3C）、三维DNA的筛选和交联（3D-DSL）、RNA反义纯化（RAP）。     

RBM7在乳腺癌细胞BT474中的表达及其与P21的关系

目的：探索RNA结合蛋白7（RNA binding protein 7，RBM7）在人源性乳腺癌细胞BT474中的过表达及干扰后的表达改变，并研究其与P21之间的关系。方法：在人源性乳腺癌细胞BT474中分别转染RBM7过表达、干扰慢病毒（实验组）和相应对照慢病毒（对照组），从而构建稳定转染的细胞株，用qRT?PCR和Western blot实验分别验证转染后的RBM7的表达情况。用CCK?8实验、流式细胞周期实验分别评估RBM7表达改变后对乳腺癌细胞增殖能力和细胞周期分布的影响。通过qRT?PCR和Western blot实验观察BT474细胞中RBM7表达改变后对P21表达的影响。进一步通过RNA结合蛋白免疫共沉淀（RIP）实验来研究RBM7与P21之间的关系。结果：在乳腺癌细胞BT474中分别转染RBM7过表达、干扰慢病毒48 h后，通过荧光显微镜检测细胞的绿色荧光表达情况；经嘌呤霉素稳定筛选后，获得RBM7过表达及干扰的稳转细胞株。CCK?8和流式细胞周期实验显示，过表达RBM7后可促进乳腺癌细胞的增殖，而干扰RBM7后能抑制乳腺癌细胞的增殖。qRT?PCR和Western blot实验显示，过表达RBM7能下调P21的mRNA（P < 0.05）及蛋白的表达，干扰RBM7能上调P21的mRNA（P < 0.05）及蛋白的表达。RNA结合蛋白免疫共沉淀（RIP）实验显示，RBM7能直接结合P21的mRNA从而发挥其对P21的调节作用。结论：RBM7在人乳腺癌细胞BT474中通过结合P21的mRNA从而下调P21的表达。     

高迁移率族蛋白A与肿瘤的关系

高迁移率族蛋白A（HMGA）蛋白家族是一类以AT—hooks高度保守的DNA结合基序和一个酸性拖尾为特征的小分子非组蛋白染色体蛋白。人HMGA蛋白家族包括3个主要成员：HMGA1a、HMGA1b、HMGA2。研究显示,HMGA蛋白广泛参与细胞内多种重要的核内生物学功能,包括调节DNA复制、转录、重组和修复等。本文就HMGA的结构及在肺癌、妇科肿瘤中的表达做一综述。     

TRIM11在肿瘤中的作用及其分子机制研究进展

三基序蛋白家族（TRIM）在人类癌症中起着至关重要的作用,TRIM11为该家族重要成员之一,作为新型生物标志物受到广泛关注。TRIM11在多种肿瘤中过表达与其病理特征及临床分期相关,并且参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学过程,TRIM11可能是肿瘤诊断和预后研判的潜在标志和治疗靶点。本研究综述TRIM11的结构、生物学作用以及与肿瘤的关系及其信号传导通路机制的研究进展。     

Oncol2012: RNA结合蛋白RBM3在人脑星形细胞瘤中的表达研究

背景：在低温和缺氧诱导的条件下,RNA结合蛋白RBM3（RNA结合基序蛋白3）的转录水平升高,近些年来在人类许多系统肿瘤中发现其转录水平也发生上调。然而,其在人脑星形细胞瘤中的表达情况尚缺乏相关研究,本文主要针对RBM3在不同病理级别星形细胞瘤和正常脑组织中的表达情况进行实验研究。 方法：本实验采用实时定量PCR,免疫组化和蛋白印迹的方法分别对RBM3 mRNA及蛋白水平进行检测。统计学方法采用方差分析（ANOVA）对实时定量PCR的数据进行分析,表示为均值?标准差。采用Fisher确切概率法用于免疫组化结果的分析。其中P值小于0.05,认为差异有统计学意义。 结果：一方面,首先对X-染色体相关的RBM基因（RBMX,RBM3,RBM10）进行实时定量PCR检测,结果表明,RBMX和RBM10的 mRNA水平在不同级别的星形细胞瘤和正常脑组织中无显著性差异。然而,实时定量PCR结果显示在高级别星形细胞瘤中RBM3 mRNA水平上调,其中高级别（WHO III-IV级）与低级别（WHO I-II级）星形细胞瘤相比差异有统计学意义（5.06?0.66比1.60?0.58,P<0.05）,高级别星形细胞瘤与正常脑组织相比差异也存在统计学意义（5.06?0.66比1.03?0.22,P<0.05）。另一方面,免疫组化结果显示RBM3在星形细胞瘤和正常脑组织中呈细胞核染色,并且随着病理级别的升高其表达水平也逐渐增高（阳性率：星形细胞瘤Ⅳ级92.9％,Ⅲ级81.8％,I-II级：50％,正常脑组织：37.5％;高级别星形细胞瘤与正常脑组织相比：P <0.05;高级别与低级别星形细胞瘤相比：P<0.05）。同时蛋白印迹的结果再次验证了RBM3在高、低级别星形细胞瘤与正常脑组织中的表达差异变化趋势。 结论：本研究初步认为RBM3在人脑星形细胞瘤和正常脑组织中存在一定程度的表达差异,并且随着星形细胞瘤恶性程度的加剧其表达逐渐增高提示其可能影响星形细胞瘤形成、恶性进展及预后等诸多环节。     

RBM5 基因表达载体构建、稳定转染A549 细胞系的建立及功能的初步研究

目的：通过构建表达载体、建立稳定转染RNA结合基序5(RNA binding motif 5,RBM5)的A549细胞系, 初步研究RBM5基因过表达对A549 细胞增殖以及天冬-谷-丙-组氨酸盒多肽15[DEAH box polypeptide 15,DHX15]表 达的影响。方法：应用分段克隆法构建pcDNA3.1(+)/RBM5真核表达载体;将测序验证后的重组质粒pcDNA3.1(+)/ RBM5转染肺腺癌A549细胞并以G418进行筛选,采用Western印迹鉴定RBM5基因过表达阳性细胞,流式细胞仪分别 检测经pcDNA3.1(+)/RBM5稳定转染的A549细胞[pcDNA3.1(+)/RBM5-A549]及pcDNA3.1(+)空白质粒转染的A549细胞 [pcDNA3.1(+)-A549]的周期分布;运用RT-PCR技术分别检测pcDNA3.1(+)/RBM5-A549和pcDNA3.1(+)-A549细胞中剪 接相关因子DHX15的表达情况。结果：成功构建出pcDNA3.1(+)/RBM5真核表达载体,筛选出RBM5基因稳定转染过 表达阳性细胞株;pcDNA3.1(+)/RBM5-A549较pcDNA3.1(+)-A549细胞处于G1期细胞比例增大、S期细胞比例减小(均 P<0.01);cDNA3.1(+)/RBM5-A549较pcDNA3.1(+)-A549细胞的DHX15表达上调(P<0.01)。结论：成功构建重组质粒 pcDNA3.1(+)/RBM5,并建立了RBM5稳定转染的A549细胞系;初步证实RBM5基因过表达可抑制肺腺癌A549细胞的细 胞周期,并使DHX15表达上调。     

Downregulating activated epidermal growth factor receptor has no effect on RBM5 expression

Background  We were interested in determining how the tumor suppressor gene RBM5 is regulated in lung cancers. Previous studies suggested that the gene expression is related to histological subtype and smoking exposure, since in small cell lung cancers the RBM5 gene is deleted whereas in non-small cell lung carcinomas (NSCLC) RBM5 expression is reduced. Of particular interest was the recent finding that in lung adenocarcinomas, a histological subtype of NSCLC, smoking exposure correlated with mutational activity in the transforming growth factor alpha (TGF-a) signaling pathway. Lung adenocarcinomas from smokers were associated with activating KRAS mutations, whereas lung adenocarcinomas from never-smokers were associated with activating epidermal growth factor receptor (EGFR) mutations. We hypothesized that inhibition of RBM5 in lung adenocarcinomas is achieved indirectly via these activating mutations. The objective of the research described herein was to determine if EGFR activation and RBM5 expression are negatively correlated.

Methods  EGFR expression in the lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 was inhibited using small interfering RNA. RBM5 expression was examined by real-time quantitative polymerase chain reaction and Western blotting.

Results  Reduced EGFR expression did not correlate with any change in RBM5 expression at either the RNA or protein level.

Conclusion  These results suggest that RBM5 expression is not directly regulated by EGFR in non-smoker related lung adenocarinomas, and that some other mechanism operates to inhibit either the expression or function of this potential tumour suppressor in lung cancers that retain the RBM5 gene.

     

新型肿瘤靶标环状RNA的研究进展

环状RNA(circRNA)是内源非编码性RNA,多数circRNA被发现可通过发挥微小RNA(miRNA)海绵功能来调控基因表达,此外某些circRNA也会被翻译或与RNA结合蛋白互作发挥作用。circRNA广泛表达于组织和体液中,其表达量的改变与肿瘤的发生发展相关。circRNA的环化特性使其对核糖核酸酶R(RNase R)稳定而不易降解。由于circRNA稳定、种类丰富、可特异性调控肿瘤发生、在体液中高表达,因此有望成为肿瘤相关的诊断、预后和治疗靶标。目前对circRNA的认识相对较少,其发生机制和功能尚未完全解析,circRNA的注释也有待充实。本文总结了circRNA的发生机制、生物学功能和在肿瘤研究中的重要应用。     

二甲双胍通过miR-194-5p/RBM6通路抑制肝细胞癌细胞的恶性细胞表型的机制研究

目的 观察二甲双胍对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞HepG2增殖、凋亡的影响,并探究其潜在机制与miR-194-5p/RNA结合基序蛋白6(RNA binding motif protein 6,RBM6)通路之间的关系。方法 随机将100例接受手术的HCC患者分为对照组、试验组,每组50例。对照组患者给予安慰剂口服,试验组给予二甲双胍口服。脂质体法将antagomiRNA、antagomiR-194-5p、pcDNA 3.1、pcDNA 3.1-RBM6、二甲双胍+si-NC、二甲双胍+si-RBM6、antagomiR-194-5p+si-NC、antagomiR-194-5p+si-RBM6转染至HepG2细胞。荧光定量聚合酶链式反应实验检测血清、组织、细胞中miR-194-5p、RBM6的表达;噻唑蓝法、5-溴-2-脱氧尿嘧啶染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性;蛋白免疫印迹实验检测细胞RBM6蛋白。结果 试验组患者的2年无瘤生存期显著延长,患者治疗后血清miR-194-5p表达明显降低(P...     

雌二醇体外诱导对调节性B细胞分泌IL-10的影响

目的：探讨雌二醇体外诱导小鼠脾B淋巴细胞分泌表达白细胞介素（IL）-10的作用。方法利用磁珠分选技术分选纯化小鼠B细胞,雌二醇体外作用3 d后,收集细胞,分别利用ELISA、Q-PCR、流式细胞仪及Western印迹法检测细胞培养上清中IL-10的水平,细胞内IL-10、PD-L1及RBM47 mRNA的表达,以及细胞内IL-10、细胞膜表面PD-L1和细胞内RBM47的蛋白表达水平。结果雌二醇能够诱导B细胞分泌表达IL-10;上调IL-10+调节性B细胞（Breg细胞）比例,同时能够上调B淋巴细胞表面PD-L1的表达。另外,雌二醇作用能够上调B淋巴细胞RBM47的转录及蛋白表达水平。结论雌二醇体外诱导能够上调产生IL-10的Breg细胞,雌二醇的这种作用可能与上调RBM47分子有关。     

长链非编码RNA MIAT在心血管疾病发生发展中的研究进展

长链非编码RNA是一类转录本长度超过200 bq的功能性RNA,广泛存在于多种组织和细胞中,其具有多种生物学功能,在心血管系统的发育及病理生理过程中发挥着关键的调节作用。心肌梗死相关转录本是长链非编码RNA中的一员,近年来,越来越多的研究结果显示,心肌梗死相关转录本通过参与细胞增殖、调亡、迁移、自噬、氧化应激等多条通路介导冠心病、心房颤动、糖尿病性心肌病、心脏肥大、高血压等心血管疾病的发生发展。对其作用机制的深入研究,有助于使心肌梗死相关转录本成为心血管疾病中一种新型生物学标志物或药物治疗靶点。