类风湿关节炎成纤维滑膜细胞端粒保护蛋白TPP1及POT1 mRNA表达的研究

目的 检测端粒保护蛋白TPP1及POT1 mRNA在类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者及健康人成纤维样滑膜细胞(SFs)的表达水平.探讨其在RA发病机制中可能的作用.方法 体外培养SFs,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测28例RA、15例OA和3名健康者SFs TPP1,POT1mRNA的表达水平,并与疾病活动性等临床指标进行分析.结果 TPP1,POT1 mRNA在RA SFs组的表达低于OA组及健康对照组(P均＜0.05).OA组和健康对照组间差异无统计学意义.TPP1 mRNA在RA SFs的表达水平与RA患者抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及类风湿因子(RF)呈负相关(P均＜0.05),与疾病活动指数(DAS)、红细胞沉降率(ESR)、血清C反应蛋白(CRP)无相关性;POT1 mRNA表达与DAS、CCP、RF均无相关性.结论 端粒保护蛋白TPP1、POT1基因表达的降低可能在RA SFs出现转化细胞特性中发挥重要作用;TPP1基因表达降低可能与RA出现关节侵蚀性改变密切相关.通过调整端粒保护蛋白TPP1、POT1基因的表达水平,有望为RA的治疗寻找新的靶点.     

系统性红斑狼疮外周血B淋巴细胞激活及TOLL样受体9表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)外周血单个核细胞(PBMCs)中B淋巴细胞的激活状态及TOLL样受体9(TLR9)表达水平。方法用流式细胞术测定25例SLE患者PBMC中CD19 B细胞及CD19 CD38 B细胞的比例。用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量方法检测38例SLE患者PBMCs中TLR9mRNA的表达水平。分析TLR9mRNA的表达水平与SLE活动性指数(SLEDAI)的相关性。结果SLE患者PBMCs中CD19 B细胞和CD19 CD38 B细胞的百分数均高于正常对照组(P<0.01)。活动期SLE患者PBMCs的TLR9mRNA表达低于缓解组(P<0.01)及正常对照(P<0.01),缓解期和正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。TLR9mRNA的表达与SLEDAI评分呈负相关。结论SLE患者PBMC中激活B细胞增多。活动期SLE患者PBMC的TLR9的表达水平降低,与SLEDAI呈负相关。TLR9可能参与SLE的病理发病过程。     

系统性红斑狼疮患者磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2表达的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中磷脂酶C-γ1、磷脂酶C -γ2的表达水平及其与SLE疾病活动性的相关性.方法 运用半定量聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测30例SLE患者与25名健康对照人的磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达水平,并采用Pearson相关性检验分析它们与补体C3、C4、抗双链DNA (dsDNA)抗体及SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分的相关性.结果 ①SLE组与健康对照组相比,磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达显著增高(分别为P＜0.01);②磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达水平之间呈正相关(r=0.726,P＜0.01);③SLE组磷脂酶C-γ1 mRNA表达水平与补体C3、C4、抗dsDNA抗体均无相关性,而与SLEDAI积分呈正相关(r=0.002,P＜0.05).磷脂酶C-γ2与补体C3、C4呈显著负相关(r=-0.914,P＜0.01;r=-0.829,P＜0.05),与抗dsDNA抗体正相关(r=0.171,P＜0.05),与SLEDAI积分相关性不明显.结论 本研究发现SLE患者磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2的表达水平在SLE患者中增高,磷脂酶C-γ1与SLEDAI积分呈正相关,磷脂酶C-γ2与补体C3、C4呈负相关,与抗dsDNA抗体正相关,可能对SLE患者的诊断和病情评估有较大价值.     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞DcR3 mRNA表达研究

目的研究凋亡相关基因诱骗受体3(DcR3)在系统性红斑狼疮患者(SLE)外周血单个核细胞(PBMCs)中的mRNA表达水平。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测38例SLE患者(21例活动期,17例缓解期)和15例正常人PBMCs中DcR3 mRNA的表达水平,分析其与狼疮活动指数(SLEDAI)的相关性。结果SLE患者PBMCs中,DcR3mRNA表达水平明显高于正常人(P<0.01),但疾病不同病期(活动期与缓解期)其表达水平无统计学差异(P>0.05);DcR3 mRNA表达与SLEDAI不相关(r=-0.024,P>0.05)。结论SLE患者PBMCs DcR3 mRNA表达增加,提示DcR3可能与SLE免疫细胞凋亡异常和免疫调节的紊乱有关,参与了SLE的发病过程。     

系统性红斑狼疮患者干扰素诱导基因的表达及其与疾病活动性的相关性研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中5个干扰素(IFN)诱导基因(IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15)的表达及其与SLE疾病活动度的相关性.方法 运用SYBRgreen dye I实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测76例SLE患者与54名健康对照人的IFIT1、IFIT4、OASL、OASL及ISG15 mRNA表达水平(以-AACt值表示),并且与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、C4、抗核抗体(ANA)及抗dsDNA抗体等指标比较,分析IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平以及上述常规检测指标与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分之间的相关性.结果 ①SLE组与正常对照组相比,IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达显著增高(P＜0.01);SLE活动组与SLE缓解组比较,IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达增高(P＜0.05);SLE组IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达水平之间呈正相关(r＞0.5,P＜0.05).②SLE组IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达水平均与SLEDAI积分呈显著正相关(r＞0.5,P＜0.05).③ESR、CRP、补体C3、C4、ANA与IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平及SLEDAI积分均无相关性,抗dsDNA抗体与IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平及SLEDAI积分呈正相关(r＞0.5,P＜0.05).结论 SLE患者IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15的表达水平在SLE患者中显著增高,并且与SLEDAI积分呈显著正相关,对SLE患者病情活动度和病情严重度的判断均有较大价值,抑制这5个基因的表达可能为SLE的治疗提供新的靶点.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞增殖诱导配体及其受体的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)、跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子(TACI)mRNA的表达和意义.方法 应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术,检测66例SLE患者及25名正常人PBMC中APRIL及其受体mRNA的表达,采用2-AACT对目标基因的表达量进行评估.结果 SLE活动组和缓解组的APRIL mRNA、BCMA mRNA和TACI mRNA的表达水平均明显高于正常对照组(均P<0.01);且SLE活动组的APRIL mRNA和TACI mRNA的表达水平显著高于SLE缓解组(分别P<0.01,P<0.05),BCMA mRNA的表达在SLE活动组与缓解组之间比较差异无统计学意义;此外,APRILmRNA和TACI mRNA在SLE肾损组的表达显著高于非肾损组(均P<0.01).结论 SLE患者PBMC中APRIL及其受体的表达水平增高,可能在SLE发病机制中发挥重要作用.     

IKB激酶在系统性红斑狼疮患者中表达及与干扰素-α产生的关系

目的 研究系统性红斑狼疮(SEE)患者外周血白细胞中IKB激酶(IKK-α)、干扰素(IFN)-αmRNA的表达,并检测血浆中IFN-α的水平,以探讨SLE患者中IKK-α在IFN-α产生中的作用.方法 SYBR green dye I实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测外周血白细胞IKK-α和IFN-α的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清IFN-α的水平.结果 ①SLE患者外周血IKK-α mRNA表达高于对照组(P<0.05);在活动组SLE患者中IKK-α mRNA的表达高于非活动组SLE患者(P<0.01).②SLE患者IFN-αmRNA的表达低于对照组(P<0.01),IFN-α mRNA的表达在非活动组SLE患者中低于活动组SLE患者(P<0.01).③SLE患者血清中IFN-α的水平高于对照组(P<0.01),其中,活动组SLE患者血浆IFN-α水平显著高于非活动组患者(P<0.05);SLE患者血浆中IFN-α浓度与抗双链DNA(dsDNA)抗体呈正相关(P=0.001),与补体C3水平呈负相关(P=0.005).④SLE患者IKK-α mRNA的表达与血浆中IFN-α的水平呈正相关(P=0.001).结论 SLE患者IKK-α mRNA的表达明显增高,且与血浆中IFN-α的水平呈正相关;而血浆中IFN-α的水平与SLE的发病及病情活动相关,提示IKK-α可能在SLE的发病中发挥重要的作用.     

系统性红斑狼疮患者CpG基序甲基化状态与淋巴细胞功能相关抗原-1表达的研究

目的 研究系统性红斑狼疮患者(SLE)CpG基序甲基化状态和淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)mRNA的表达水平,并探讨两者的关系.方法 提取26例SLE患者与17名健康人外周血淋巴细胞,分别用5-甲基胞嘧啶抗体与流式细胞仪检测CpG基序甲基化状态和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析LFA-1 mRNA表达水平.结果 SLE患者的CpG基序甲基化水平(10.0±1.2)低于健康对照组(11.9±1.0,P<0.05),并与SLE疾病活动指数(SLEDAI)旱负相关(r=-0.62,P<0.05);SLE患者IJFA-1 mRNA表达(0.55±0.11)明显高于健康对照组(0.25±0.08,P<0.05),并与SLEDAI呈正相关(r=0.54,P<0.05);SLE患者CpG基序甲基化水平与LFA-1 mRNA表达呈负相关(r=-0.57,P<0.05).结论 SLE患者存在CpG基序低甲基化状态,并与LFA-1高表达相关联,表观遗传学在SLE发病机制中具有重要作用.     

FOXO1和FOXO3a在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及其与疾病活动性的关系

目的 探讨转录因子FOXO1和FOXO3a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及其与SLE疾病活动性的关系.方法 选择SLE活动性、SLE非活动性患者和正常对照,运用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测SLE患者和健康对照组PBMC中FOXO1和FOXO3a mRNA及蛋白的表达水平.结果 活动性SLE患者PBMC中FOXO1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者FOXO1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常对照(P<0.05).FOX03a mRNA和蛋白的表达水平在3组间差异无统计学意义.FOXO1 mRNA水平与狼疮活动指数(SLEDAI)呈显著负相关(r=-0.651,P<0.05).结论 SLE患者PBMC中FOXO1 mRNA和蛋白的表达水平显著低于健康对照,随着SLE患者病情的好转,FOXO1 mRNA和蛋白的表达水平逐渐增高.FOXO1与SLE疾病的活动性呈负相关.FOXO3a与SLE疾病的活动性无关.     

系统性红斑狼疮初发患者外周血中维生素D及其受体mRNA的水平和意义

目的 ①检测初发系统性红斑狼疮(SEE)患者外周血中维生素D内分泌系统的水平,探讨维生素D内分泌系统在SLE发病中的作用.②分析维生素D内分泌系统水平与SLE患者骨密度和病情活动程度的关系.方法 选择初发SLE患者43例,健康对照组44名,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者外周血浆中25羟基维生素D3(250HD3)和1,25-二羟基D3[1,25(OH)2D3]的水平,利用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测患者外周血维生素D受体(VDR)表达水平.双能X线分别检测患者腰椎(L1-4)和股骨近端2个部位的骨密度,根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分评估SLE病情活动程度.采用统计学单因素分析分别检验25OHD3、1,25(OH)2D3和VDR基因mRNA表达水平与SLE患者骨密度和病情活动程度的关系.结果 初发SLE患者25OHD3和1,25(OH)2D3激素水平与健康对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.01);初发SLE患者组与健康对照组比较,VDR基因mRNA表达水平的差异有统计学意义(P<0.01);SLE患者2个部位的骨密度均低于健康对照组,且两组间的差异有统计学意义(P<0.05),SLE患者组骨量异常的发生率为35%,骨量异常与骨量健康对照组之间25OHD3、1,25(OH)2D3激素水平及VDR基因mRNA表达水平的差异无统计学意义(P0.05);250HD3、1,25(OH)2D3激素水平和VDR基因mRNA表达水平与SLE患者骨密度的情况不存在相关性(r=0.187,P0.05;r=0.172,P0.05;r=0.287,P0.05),它们与SLE患者的病情活动度之间也不存在相关性(r=0.054,P0.05;r=0.190,P0.05;r=0.046,P0.05).结论 SLE患者维生素D激素的水平及VDR基因的表达异常提示维生素D内分泌系统可能参与了SLE的发病,但与SLE患者骨量异常的发生和SLE病情活动度不存在相关性.     

Changes in the expression of telomere maintenance genes might play a role in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus

Previous studies demonstrated that telomerase activity increased while telomere length shortened in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with systemic lupus erythematosus (SLE). This study aimed to examine the changes of telomere maintenance genes and their clinical significance in SLE. The mRNA level of telomeric proteins in PBMCs, including shelterin complex (TRF1, TRF2, POT1, TPP1, TIN2 and hRAP1), a set of multifunctional proteins involved in telomere maintenance (MRE11, KU80 and RPA1), and Ki67, was measured using real-time quantitative PCR in 56 SLE patients (36 treated and 20 untreated; 32 with renal involvement and 24 without renal involvement) and 46 healthy subjects (controls). The expression of TPP1, TIN2, POT1 and KU80 was significantly reduced while that of TRF2 and MRE11 increased in SLE patients (p??0.05, respectively). The expression of TRF2, MRE11 and Ki67 was much higher in untreated SLE patients than in controls or treated SLE patients (p?相似文献   

转化生长因子βⅡ型受体在狼疮肾炎患者外周血单个核细胞表达的意义

目的 探讨狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMCs)转化生长因子βⅡ型受体(TβR Ⅱ) mRNA表达水平及其与疾病活动性的关系.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测44=例LN患者(均为活动期患者)、21例其他非LN患者和40名健康对照组PBMCs中TβRⅡ mRNA的表达水平,LN患者中未使用与使用激素和(或)免疫抑制剂患者分别为16例和28例.结果 LN患者PBMC中T13R H mRNA水平1.7±1.0显著低于非LN组4.0±3.1及健康对照组4.1±2.5(P<0.01);LN患者中未使用激素和(或)免疫抑制剂组T13R H mRNA的表达水平1.3±1.0低于用药组2.0+0.9(P<0.05);LN患者PBMCs中的T13RII mRNA表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分标准(r-0.309,P<0.05)及抗双链DNA抗体(r-0.401,P<0.01)呈显著负相关,与补体C3呈显著正相关(r=0.621,P<0.01).结论 LN患者PBMCs中的TβRⅡmRNA表达水平降低,TβRⅡ参与了LN的发病过程,并与疾病的活动性显著相关;应用激素和(或)免疫抑制剂可以提高TTβRⅡ mRNA的表达,减轻炎症损害.     

狼疮肾炎患者Ⅰ型干扰素诱导基因表达的研究

目的 了解Ⅰ型干扰素(IFN)诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3在狼疮肾炎(LN)患者的表达,并分析IFN积分与临床特征之间的相关性.方法 ①同步收集12例弥漫增生型LN患者.肾组织和外周血,抽提总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测Ⅰ型IFN诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3的表达水平.②收集119例LN患者的临床资料,计算每例患者的IFN积分,并与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)积分、抗dsDNA抗体、补体、蛋白尿水平等指标进行相关性检验.结果 ①弥漫增生型LN患者肾组织高表达OAS2[(1.46±1.15)与(0.60±0.59)]和OAS3[(2.16±1.63)与(0.93±0.95)],P<0.05;IFIT4[(1.68±1.76)与(0.96±0.71)]、IFI44[(3.23±2.67)与(1.65±1.95)]、Ly6e[(3.54±2.09)与(2.34±2.57)]、OAS1[(2.52±1.86)与(1.34±0.28)]的表达量高于对照组1个循环左右.狼疮患者外周血高表达IFIT4[(11.2±7.7)与(1.56±2.71)]、IFI44[(9.5±6.1)与(2.6±4.4)J、Ly6e[(17.5±13.7)与(7.1±10.3)]、OAS1[(8.68±6.36)与(1.15±1.89)]、OAS2[(10.41±7.71)与(0.66±0.82)]、OAS3[(8.75±4.34)与(0.89±1.34)],P<0.05.Ⅰ型IFN诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3在肾脏组织和外周血的表达呈同步增高趋势.②根据119例患者IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3的表达计算IFN积分,发现IFN积分与SLEDAI、抗dsDNA抗体呈正相关(r分别是0.216和0.394,P<0.05),与血清补体水平呈负相关(r=0.315,P<0.01).结论 Ⅰ型IFN诱导基因IFIT4、IFI44、Ly6e、OAS1、OAS2和OAS3外周血表达的水平在一定程度上反映LN肾损害情况,IFN积分对监测LN患者的疾病活动有一定的特异性.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞B细胞刺激因子的异常表达及其临床意义

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中B淋巴细胞刺激因子(Blys)的表达情况,并探讨Blys的转录水平与狼疮活动性和狼疮肾炎(LN)的关系,分析Blys在狼疮发病中的作用。方法应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测活动期组(26例)和缓解期组(22例)SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)BlysmRNA的表达水平,以健康志愿者(20例)作为对照;同时将BlysmRNA的表达水平与患者临床检验指标进行相关分析;采用流式细胞仪技术检测20例SLE患者和16例健康对照膜结合型Blys蛋白水平。结果SLE患者PBMCsB1ysmRNA的表达明显高于正常人(P<0.01),活动期患者的表达高于缓解期(P<0.05);BlysmRNA的表达与狼疮活动指数(SLEDAl)和蛋白尿呈正相关,与补体C3、C4水平呈负相关;抗dsDNA抗体阳性和尿蛋白阳性的SLE患者BlysmRNA的表达高于阴性患者(P<0.05);而且SLE患者PBMCs中Blys的平均荧光强度也显著增加(P<0.05)。结论SLE患者PBMC的膜Blys和BlysmRNA表达均增强,且与狼疮活动性及尿蛋白呈正相关,提示Blys可能参与SLE及狼疮肾炎的发病过程,且有望成为临床观察和疗效评价的新指标。     

Elevated Th17 cells are accompanied by FoxP3+ Treg cells decrease in patients with lupus nephritis

To investigate the variations of T-helper 17 (Th17) and regulatory T (Treg) cells in patients with lupus nephritis (LN), a total of 60 systemic lupus erythematosus patients and 28 healthy controls (HCs) were enrolled. The frequency of Th17 cells and Treg cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was evaluated by flow cytometric analysis. The serum concentrations of interleukin-17 (IL-17) and transforming growth factor-beta 1 (TGF-β1) were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results demonstrated in LN patients a significant decrease in the frequency of CD4+CD25^high and CD4+CD25+FoxP3+ T cells and a significant increase in the frequency of Th17 cells in peripheral blood, and the ratio of Th17 to Treg cell frequency was significantly increased along with increased SLEDAI scores. LN patients had a lower percentage and expression of FoxP3 in CD4+CD25^high T cells than SLE patients without nephritis. The concentration of TGF-β1 was found decreased in SLE patients compared with that from healthy controls, though no significant difference was found between LN patients and SLE patients without nephritis. The expression of IL-17 levels in LN patients exhibited a significant increase compared with patients without nephritis and healthy controls. Based on our results, the significantly elevated Th17 cells are accompanied by FoxP3+ Treg cells decrease in lupus nephritis, suggesting that Th17/Treg functional imbalance may be involved in the pathogenesis of renal damage in SLE patients.     

C1q and anti-C1q antibody levels are correlated with disease severity in Chinese pediatric systemic lupus erythematosus

The aim of this study was to measure the level of serum complement lq(Clq) and anti-C1q antibodies (ClqAb) in pediatric systemic lupus erythematosus (PSLE), and then analyze the correlation between the levels of serum Clq and ClqAb with disease activity and kidney damage. We investigated 90 PSLE patients, including 43 patients in active stage and 47 patients in remission. Our results showed that the level of serum Clq of PSLE patients was significantly lower than the level of healthy children and children with other rheumatic diseases. In contrast, the level of ClqAb of PSLE patients was significantly higher than the other groups. The level of serum Clq was negatively correlated with systemic lupus erythematosus (SLE) disease active index (SLEDAI) and the level of ClqAb was positively correlated with SLEDAI and kidney damage. The sensitivity of using ClqAb levels to diagnose PSLE was 95.6% and the specificity was 97.5%. 93.0% SLE patients who had high C1qAb levels also showed kidney damage. Therefore, the levels of C1q and C1qAb in serum reflect the disease severity of SLE. Decreased Clq and increased C1qAb is closely correlated with lupus nephritis (LN) in children and may have diagnosis values for child LN.     

系统性红斑狼疮患者血浆单核细胞化学吸引蛋白-1检测及其临床意义

目的 分析血浆单核细胞化学吸引蛋白-1(MCP-1)水平与系统性红斑狼疮(SLE)脏器受累及病情严重性的关系,探讨检测血浆MCP-1水平的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测95例SLE患者血浆MCP-1水平,并与21名健康体检者对照.结果 血浆MCP-1水平在SLE患者为(849±289)pg/ml,显著高于健康对照组的(426±266)pg/ml(P<0.01);在SLE患者,血浆MCP-1水平在有狼疮肾炎(LN)者明显高于无LN患者(P<0.01),并发狼疮脑病的患者也明显高于无中枢神经系统损害的患者(P相似文献