非传统的镜检技术在疟疾诊断中的应用

疟疾是广泛分布于热带、亚热带及温带边缘地区的一种重要蚊媒传染病。据 WHO估计 ,目前世界上仍有 10 0多个国家和地区流行疟疾 ,2 3亿人受到威胁。每年 3～ 5亿人患病 ,15 0～ 2 70万人死亡 ,其中包括 10 0万 5岁以下的儿童。因此 ,快速、准确地诊断疟疾对提高临床疗效和控制流行具有重要意义。传统的厚、薄血膜染色镜检法仍是当前疟疾诊断的主要方法 ,但费时费力、需专业培训人员 ,且对低原虫血症者易漏诊。这些不足促进了更敏感、简便的新技术的发展 ,如荧光染色镜检、抗原检测及 PCR技术等。本文就非传统的镜检技术在疟疾诊断中的研…     

套式/多重PCR方法应用于疟疾诊断与监测的初步评价

目的 与镜检法比较评价标签引物-套式/多重PCR（UT-PCR）在疟疾监测中的应用价值。 方法 在海南、云南省恶性疟和间日疟混合流行区和广西疟疾控制区的疟疾监测中,采集初诊为疟疾或疑似疟疾的发热患者的血片与滤纸血样400份,在双盲条件下比较镜检法与UT-PCR的初检结果,对结果不一致的血片再次镜检复查,同时对其滤纸血样重复PCR 2～3次;评估UT-PCR与镜检法的敏感性和特异性。 结果 400例发热患者血样中,镜检法初检检出疟原虫阳性234例,其中恶性疟125例,间日疟109例;UT-PCR检出疟原虫阳性235例,其中恶性疟124例,间日疟109例;恶性疟和间日疟混合感染2例。两法初检结果一致的血样占92.5%（370/400）,其中阴性154例,阳性216例（间日疟117例,恶性疟99例）。复查25份初检结果不一致的血样,包括镜检阴性PCR阳性11例,镜检阳性PCR阴性10例,镜检为恶性疟PCR为间日疟3例,镜检为间日疟而PCR为混合感染1例,其中15份与UT-PCR的初检结果一致,7份“假阳性”原因不明,仅3份为PCR的假阴性。根据复查结果评估PCR的敏感性为99.6%,特异性为98.8%。 结论 采用更敏感的UT?鄄PCR疟疾诊断方法有助于解决疟疾诊断与鉴别诊断中的疑难问题,提高疟疾监测的质量和效率。     

疟疾的基因诊断

疟疾的早期诊断和治疗是控制疟疾流行的关键。在控制疟疾时 ,大范围的普查是十分必要的 ,此时利用显微镜的一些诊断方法便显得力不从心 ,应用PCR技术的DNA诊断法便应运而生。它能在短时间内处理大量的标本 ,并且操作简便 ,结果容易判定 ,敏感度及特异度高 ,在流行病学调查时非常实用 ,同时可用于临床上原虫种类的确诊。本文中主要就疟原虫DNA诊断法的微量板杂交法(microtiterplate hybridization ,MPH)的实用性作一介绍。自从 1 880年Laveran等发现疟原虫以来 ,疟疾的诊断便采用血涂片标本经吉氏染色后镜检的显微镜法。此法可直接观察…     

贵州省县级和省级疟疾诊断实验室检测结果比较分析

贵州省省级疟疾诊断实验室通过PCR法和镜检法对各县级疟疾诊断实验室上报的疟疾网报病例进行复核,以PCR和镜检一致的结果作为判定依据,对县级疟疾诊断实验室镜检结果进行评价。共对89份血样进行复核,PCR检出24份阳性,15份为恶性疟原虫,7份为间日疟原虫,2份为卵形疟原虫,均为输入性病例;省级镜检和PCR结果一致的有21份。县级与省级检测结果的总符合率为79.8%(67/84),县级漏检率为9.5%(2/21),误检率为23.8%(15/63),两级实验室检测的Kappa值为0.6,属于中、高度一致。     

1998～2003年海南省不同疟区居民疟疾血清学纵向调查

目的　调查海南省不同疟区疟疾流行情况 ,了解其流行趋势 ,为制定防治措施提供依据。方法　应用间接荧光抗体试验 (IFAT)对南桥、毛阳高低疟区进行纵向调查 ,并与镜检法及 PCR技术进行比较研究。结果　南桥、毛阳居民 IFAT抗体阳性率分别为 2 8.85 % (2 96 / 10 2 6 )和 6 .4 7% (6 4 /989) ,低年龄组阳性率为 9.92 % (39/ 393)和 3.98% (14 / 35 2 ) ;原虫阳性率依次为 6 .6 2 % (6 8/ 10 2 6 )和 1.4 2 % (14 / 989) ,PCR与镜检比较 ,阳性符合率为 86 .90 %。结论　南桥居民抗体阳性率和原虫阳性率均明显高于毛阳 ,显示疟疾传播仍较严重 ,毛阳疟疾虽有效控制 ,但仍有低年龄组阳性 ,说明疟疾传播尚未阻断。 PCR可用作流行病学调查和监测。     

巢式PCR技术在输入性疟疾监测中的应用

目的评价巢式PCR技术在高疟区回国人员疟疾监测中的应用价值。方法收集2007-2009年自非洲、东南亚等疟疾流行区回国人员中疟疾现症患者及其他无症状高危人群的滤纸血,采用巢式PCR技术检测疟原虫ssRNA基因,并与血片镜检结果进行比对。结果巢式PCR检测53例血检确诊的疟疾现症患者均为阳性,两法的阳性符合率为100%,其中PCR检出恶性疟、间日疟混合感染6例,高于镜检检出的3例。检测疟疾流行区返回的高危人群157人,镜检阳性3例,阳性率1.91%;巢式PCR阳性5例,阳性率为3.18%;其中,镜检阳性、巢式PCR阴性的1例,镜检阴性、巢式PCR阳性的3例,两种方法的阳性符合率为66.7%,阴性符合率为98.1%,两法检测结果一致的血样占检测血样的97.5%。结论巢式PCR技术对输入性疟疾的监测具有实用价值。     

2012年河南省疟疾标本的实验室检测分析

目的比较疟疾实验室检测方法,分析疟疾标本的检测结果。方法分别用吉氏染色镜检、巢氏PCR和序列分析方法对2012年河南省收集的165份疟疾标本进行检测,并对检测方法及结果进行分析比较。结果综合分析镜检、巢氏PCR和序列分析等3种方法的检测结果,165份疟疾标本的阳性率为93.94%,其中镜检和巢氏PCR阳性率分别为87.88%和90.30%;两种方法对疟原虫虫种的误判率为10.32%,其中对间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫的误判率分别为42.86%、40.00%和28.57%,而对恶性疟原虫的误判率为0.85%。结论姬氏染色镜检和巢氏PCR两种方法在疟疾检测中各有优缺点,建议2种方法结合使用以提高疟疾诊断的准确率。     

云南省龙陵县50年疟疾发病及死亡调查

疟疾在龙陵县流行已久 ,特别是在旧中国时常暴发流行 ,民间曾有“谷子黄 ,病上床 ,闷头摆子似虎狼”的歌谣 ,严重威胁龙陵人民的身体健康。为全面了解龙陵县疟疾的发病及死亡情况 ,为今后制定相应的防治措施提供科学依据 ,我们对龙陵县195 1～ 2 0 0 0年疟疾发病及死亡进行了统计调查。1　资料与方法依据《中华人民共和国急性传染病管理条例》的疫情报告制度 ,凡采血镜检发现疟原虫 ,临床诊断为疟疾或抗疟治疗有效者 [1 ]逐年统计 ;人口资料由当地公安、统计部门提供。以 10年为一阶段 ,分 5个阶段进行分析。2　结果龙陵县 195 1～ 2 0 0 0…     

贵州省疟疾实验室诊断能力与疫情风险分析

目的评价贵州省疟疾报告病例的实验室诊断情况、基层实验室诊断能力与疟疾疫情风险。方法以贵州省近3年的疟疾疫情数据及省疾病预防控制中心疟疾实验室复核的血片和PCR检测结果进行实验室间比对分析。结果贵州省疟疾疫情从2008年开始逐年下降,年报告发病率从2008年的3.43/10万降至2010年的1.04/10万。2009～2011年全省92.26%的网报病例进行了镜检,省级实验室对县级镜检的血片进行抽检,阴性片符合率达100%(303/303),阳性片符合率达89.57%(103/115),镜检总体符合率为97.13%(406/418)。县级实验室镜检阳性病例的滤纸血,采用PCR方法检测,阳性率为96.00%(24/25),镜检阴性的病例或临床诊断为疟疾、疑似疟疾和不明原因的发热病人滤纸血,经PCR检测,阴性率为98.92%(92/93),县级实验室镜检结果与PCR法检测结果的总体符合率为98.31%(116/118)。结论经省级实验室镜检复核和PCR方法比对,县级实验室镜检结果的可靠性较高,特别是阴性结果更为可靠,阳性结果有10%的误诊,因此全省各级疾病预防控制及医疗机构,应当依据实验室检测结果对网报病例进行订正。     

间日疟原虫PCR检测试剂盒用于疟疾监测的现场评价

为评价间日疟原虫PCR检测试剂盒在疟疾现场监测中的效果,采用该试剂盒和常规镜检法对安徽省疟疾流行区的940份血样进行了检测,结果显示,该PCR检测试剂盒对234例在校中学生的人群带虫调查的阳性检出例数（5例）高于常规镜检（2例）,所需检测时间和费用均低于常规镜检。同时,采用两法对519例门诊发热病人血片（镜检初检阳性16例,阴性503例）进行复核,镜检复核发现漏诊2例,PCR复核发现漏诊6例,所需复核时间和费用也均低于常规镜检。采用两法对187例门诊“三热”病人进行被动病例检测,PCR检出阳性例数略高于镜检,但单位检测时间和费用也高于镜检。现场评价结果提示,该PCR检测试剂盒可替代镜检用于疟疾监测中大样本检测,且具有敏感、特异、高效和价廉的特点。