糖尿病患者外周血白细胞介素18分泌及基因表达

目的　探讨糖尿病 (DM)患者血浆白细胞介素 18(IL 18)水平及外周血单个核细胞 (PBMCs)IL 18mRNA表达量变化。方法　选取 10名健康志愿者及 30例DM患者 (Ⅱ型糖尿病 15例 ,Ⅰ型糖尿病 15例 )。应用IL 18特异的酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL 18血浆水平 ,同时采用半定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)技术 ,分析PBMCsIL 18mRNA表达量。结果　Ⅱ型糖尿病患者血浆IL 18水平及PBMCsIL 18mRNA表达量与正常对照组差异无统计学意义 [(2 73.1± 99.4 6 )vs (2 4 8.86± 82 .6 8)and(0 .731± 0 .12 9)vs (0 .715± 0 .116 ) ,P >0 .0 5 ];Ⅰ型糖尿病患者血浆IL 18水平及PBMCsIL 18mRNA表达量较正常对照组增高 ,差异有显著统计学意义 [(36 0 .17± 12 5 .4 8)vs (2 4 8.86± 82 .6 8)and (0 .935± 0 .132 )vs (0 .715± 0 .116 ) ,P <0 .0 5 ]。结论　Ⅰ型糖尿病患者外周血IL 18的高表达 ,提示其可能介导本病发病过程 ;IL 18可能不参与Ⅱ型糖尿病的发病过程     

白细胞介素-18基因多态性与广西壮族系统性红斑狼疮的遗传易感性

目的 探讨白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)基因单核苷酸多态性与广西壮族系统性红斑狼疮(systematic lupus erythematosus,SLE)易感性之间的关系.方法 以115例SLE患者和160名健康对照者为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和DNA测序的方法对IL-18基因-137G/C、-607C/A单核苷酸多态性进行基因分型.结果 IL-18基因-137G/C多态性在SLE组和正常人群中的分布差异无统计学意义(P>0.05),而IL-18基因-607C/A多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,-607 C等位基因携带者患系统性红斑狼疮的风险是-607A等位基因的1.619倍(OR=1.619,95%CI:1.150-2.281).联合基因型分析发现,IL-18的-137G/-607C等位基因频率在SLE组中显著高于对照组(P<0.05).-137G/-607C等位基因携带者显著增加了SLE的发病风险(OR=1.484,95%CI:1.056-2.087).结论 IL-18基因-607C/A多态性与SLE的发病具有相关性,其中-607 C等位基因可能是SLE的遗传易感基因.     

汉族人白细胞介素-18基因启动子多态性与慢性乙型肝炎的相关性研究

目的 探讨中国汉族人白细胞介素-18（interleukin-18,IL-18）基因启动子单核苷酸多态性及其与慢性乙型肝炎易感性之间的关系。方法 应用序列特异性引物一聚合酶链反应技术，检测231例慢性乙型肝炎患者和300名正常人儿．馏基因启动子-607C/A、-137G／C单核苷酸多态性位点基因型。结果 正常对照组和慢性乙型肝炎组中，IL-18基因启动子-607C/A位点3种基因型频率分别为CC型：0．22（66／300）和0．27（62／231），CA型：0．53（160／300）和0．50（116／231），AA型：0．25（74／300）和0．23（53／231）；IL-18基因启动子-137G／C位点3种基因型频率分别为GG型：0．67（202／300）和0．79（182／231），GC型：0．30（90／300）和0．19（45／231），CC型：0．03（8／300）和0．02（4／231）。经Y0检验，慢性乙型肝炎组IL-18基因启动子-137GG分布频率显著高于正常对照组（X^2=8．55，P=0．003），而-607C／-137C和-607A／-137C单倍型频率显著低于正常对照组。进一步比较慢性乙型肝炎患者儿．馏基因启动子多态性与乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）DNA复制的关系，发现高水平HBV—DNA组-607位点AA基因型分布频率明显低于低水平HBV—DNA组（Y2=6．03，P=0．014）。结论 汉族人慢性乙型肝炎与IL-18基因启动子-607C/A、-137G／C单核苷酸多态性相关，其中IL-18基因启动子-137位点C等位基因可能对机体HBV感染有保护作用，而启动子-607位点AA型对感染后HBV—DNA的复制可能有抑制作用。     

湖北汉族人群白细胞介素18基因启动子区多态性研究

目的 :研究白细胞介素 18(IL 18)基因启动子区 - 137G/C、- 6 0 7C/A位点多态性在湖北汉族健康人群中的分布。方法 :随机选择 187例湖北地区无血缘关系的汉族健康人 ,用序列特异性引物聚合酶链反应技术检测IL 18基因启动子区 - 137G/C、- 6 0 7C/A位点单核苷酸多态性 (SNP) ,并进行不同种族间比较。结果 :湖北地区汉族健康人群IL 18基因启动子区 - 137位点基因型以GG型 ( 6 7% )多见 ,其次为GC型 ( 30 % )和CC型 ( 3% ) ;其等位基因以G型 ( 82 % )最为常见。而 - 6 0 7位点基因型以CA型 ( 6 0 % )多见 ,其次为CC型 ( 2 1% )和AA型 ( 19% ) ;其等位基因以C型 ( 51% )多见。与瑞典、波兰、澳大利亚等人群相比 ,该位点多态性分布差异存在显著性 (P <0 .0 5) ,而 - 137G/C位点基因型分布与亚洲日本人群相接近 (P >0 .0 5)。结论 :湖北地区汉族人群IL 18基因启动子区 - 137G/C、- 6 0 7C/A位点存在多态性 ,其在不同种族间的分布可能存在显著性差异。     

中国桂西地区壮族人群白细胞介素-18基因rs360722G/A多态性研究

目的:了解白细胞介素-18(IL-18)基因单核苷酸多态性(SNP)各等位基因及基因型在中国桂西地区壮族人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异。方法:采用单碱基延伸的PCR技术和DNA测序法检测150例桂西地区壮族人群的IL-18基因rs360722G/A多态性,并与人类基因组计划(Hapmap)公布的四组人群(中国北京汉族人、非洲黑人、欧洲白种人和日本东京人)的SNP分型数据中该基因的基因型及等位基因的分布频率进行比较分析。结果:中国桂西地区壮族人群IL-18rs360722基因型GG、GA、AA频率分别为39.3%、48.7%和12.0%;等位基因G、A频率分别为63.7%和36.3%,男女性别间比较差异无统计学意义(P0.05);但与欧洲白种人、非洲黑人和北京汉族人群比较,其基因型和等位基因分布频率的差异均有统计学意义(P0.05)。结论:中国桂西地区壮族人群中存在的IL-18基因多态性差异可能是一些疾病的临床表现与其它地区或种族有所不同的原因之一。     

白细胞介素-1基因多态性与疾病

白细胞介素-1(IL-1)是一组主要起免疫调节作用的激素样肽类物质,即炎症前期细胞因子,包括IL-1α、IL-1β、IL-1受体拮抗物,即IL-1r和IL-18,四者同属IL-1家族[1]。基于氨基酸序列的保守性以及基因结构和三维结构的一致性,IL-1家族中又增加了6个新成员。所有这些新的基因都定位于     

白细胞介素-6基因多态性与疾病的易感性

白细胞介索-6（interleukin-6，IL-6）作为一种多功能的炎症细胞因子，具有调节免疫应答、参与炎症反应、影响神经内分泌系统功能、活化破骨细胞等多种功能，参与了多种疾病的发生、发展。IL-6基因存在基因变异及基因多态性，这些基因多态性影响IL-6的转录和表达，造成个体间差异。IL-6基因还是多种临床疾病的相关基因，其基因多态性亦与这些临床疾病的易感性及发病机制相关。本文对IL-6的基因多态性与相关疾病的研究进展做一综述。     

白细胞介素18受体在人类外周血单个核细胞及肾组织表达的研究

目的 :进一步明确白细胞介素 (IL 18)在肾组织免疫性损伤中的作用。方法 :应用半定量逆转录 多聚酶链反应(RT PCR)技术检测 16例正常人 ,16例原发性系膜增生性肾小球肾炎 (MsPGN)患者以及 18例狼疮性肾炎 (LN)患者外周血单个核细胞 (PBMC)白细胞介素 18受体 (IL 18R)α链mRNA的表达量 ,并用免疫组化方法检测 6例正常肾组织 ,16例MsPGN)患者及 18例LN患者肾组织IL 18Rα链蛋白表达量。结果 :MsPGN患者PBMCIL 18RmRNA表达量较正常组有所增高 ,但未达统计学意义 (P >0 0 5 ) ,LN患者PBMCIL 18RmRNA表达量较正常人显著增高 (P <0 0 0 1) ;正常肾组织存在较弱的IL 18R表达 ,MsPGN患者肾组织IL 18R表达量较正常肾组织有所增强 ,但未达统计学差异 ,而LN患者肾组织IL 18R的表达量较正常肾组及MsPGN组均显著增强 (P <0 0 0 1) ,但Pearson相关分析发现LN患者PBMC及肾组织IL 18R表达量均不与血清肌酐 (Scr)水平及 2 4小时尿蛋白排泌量 (2 4h UPE)存在相关关系。结论 :IL 18信号在全身系统及肾组织局部的免疫调节中起一定的作用 ;IL 18在肾功能未严重损害MsPGN患者的发病过程中可能所起作用不大 ;LN患者不但存在IL 18的过量产生 ,而且存在着IL 18过度作用的问题 ,抑制过强的IL 18作用信号可能是LN治疗的新途径。     

白细胞介素-10基因多态性与卵巢癌的相关性研究

目的探讨白细胞介素-10（IL-10）基因启动子区域-1082、-819和-592位点单核苷酸多态性与卵巢癌的关系。方法用序列特异性引物聚合酶链（PCR-SSP）技术,检测33例卵巢癌患者和90例正常对照组IL-10基因多态性。结果-819位点卵巢癌患者C/T基因型频率显著高于健康对照组（45.5%比21.0%,P〈0.05）,C/C和T/T基因型频率虽然低于对照组（分别为6.1%比20.0%和48.4%比59.0%）,但是差异无统计学意义（P〉0.05）;-592位点卵巢癌患者C/A基因型频率显著高于健康对照组（45.5%比21.0%,P〈0.05）,C/C和A/A基因型频率虽然低于对照组（分别为6.1%比20.0%和48.4%比59.0%）,但是差异无统计学意义（P〉0.05）;-1082位点基因型频率在卵巢癌患者和正常对照组间差异无统计学意义（P〉0.05）。-1082、-819、-592位点等位基因频率在卵巢癌患者和正常对照组间差异均无统计学意义。结论IL-10基因启动子区域-819C/T和-592C/A基因型可能与卵巢癌的发生有关。     

葡萄糖转运体1基因多态性与低氧适应性的关系

应用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性的方法,对90例中国平原汉族人与86例藏族登山运动员葡萄糖转运体1基因G 22999T、A-2841T单核苷酸多态性进行检测并分析基因型和等位基因的分布特点,探讨其与低氧适应性的关系。结果表明86例藏族登山运动员在 22999位点GG、GT、TT 3种基因型的分布频率分别为44．2％,46．5％和9．3％,而平原汉族对照组为66．7％,31．1％和2．2％,两组比较差异有统计学意义(P< 0．05);高原藏族组等位基因G、T的分布频率为67．4％和32．6％,而平原汉族对照组为82．2％和17．8％,两组比较差异有统计学意义(P<0．05),高原藏族人突变基因T明显高于平原汉族对照组。-2841位点各基因型构成和等位基因分布在两组间差异无统计学意义。提示GLUT1基因G 22999T单核苷酸多态性可能与藏族人对高原低氧的良好适应性有关,但该位点的突变怎样影响GLUT1的功能还有待于进一步研究。     

冠心病与ACE基因多态性的相关性研究

为研究血管紧张素转移酶（angiotensin coverting enzyme,ACE)基因插入/缺失（insertion/deletion,I/D)多态性与冠心病（coronary artery disease,CAD)的相关性，我们对105例CAD患者{其中50例合并原发性高血压（essential hypertension,EH）}和102例正常人以多聚酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)方法检测其ACE基因多态性。发现CAD组（含合并EH）与正常对照组比较，ACE基因型无显著差异，CAD组（不含合并EH）与CAD组（合并EH）比较，ACE基因型无显著差异，CAD组（不含合并EH）或CAD组（合并EH）分别与正常对照组比较，ACE基因型也无显著差异。提示ACE基因I/D多态性与CAD及CAD合并EH均无相关性。     

利用GeneHub软件多角度分析基因功能相关与表达相关的联系

我们研制的GeneHub软件可以用来评价基因功能分类体系中各个功能单元的表达相关性的显著性，从而筛选与实验条件相关的功能单元。采用不同的相似性测度与不同的数据集，使用GeneHub研究了分别按染色体定位、蛋白质细胞位置与互作、代谢通路、信号传导通路等五个方面分类的基因的表达相关性，结果显示按照这些不同的方面分类的基因显著共表达，并且这种共表达现象往往受相关实验条件影响。为基因表达谱分析中广泛采用的假设“功能相关的基因表达相关”提供了进一步的实验证据。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞基因表达谱的研究

目的 分析慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞差异表达基因，探索慢性乙型肝炎形成的分子机制。方法 应用含14000条人体cDNA的微阵列芯片和来自外周血单个核细胞的标记cDNA，分析了10例慢性乙型肝炎患者和10例健康人基因表达谱。通过应用GenePix 4000B扫描仪和ImaGene3．0分析软件比较cy5标记的慢性乙型肝炎来源cDNA与Cy3标记的健康人来源cDNA的杂交结果，获得个体基因的相对表达比值。结果 在分析的14000条基因中，差异表达的基因有92条，占0．66％。其中51条基因表达水平显著上调，41条基因表达水平显著下调。这些差异表达的基因主要为细胞信号转导，细胞周期和代谢，凋亡及炎症相关类基因。结论 在乙型肝炎病毒致慢性乙型肝炎过程中，涉及到了众多基因的差异表达，为进一步阐明慢性乙型肝炎形成的分子机制提供基础。     

RAS及其基因多态性与原发性高血压

肾素-血管紧张素系统(RAS)在调节盐代谢和血压的调控以及高血压的发病中起着重要的作用,RAS是迄今为止研究最广泛的高血压相关基因。现对RAS中的3个重要成员血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素原(AGT)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的特性、分布、基因定位、基因结构、基因多态性及其与高血压的关系进行了系统的综述。     

人白细胞介素18cDNA编码区存在基因变异

目的：为了获得中国人白细胞介素１８ｃＤＮＡ。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从中国人７种组织标本中获取ＩＬ－１８ｃＤＮＡ。结果：７种组织中有６种组织标本ＩＬ－１８ｃＤＮＡ序列与报道序列存在有意义突变。结论：ＩＬ－１８基因在人体多种组织表达,且存在多态性。     

小鼠白细胞介素-18的cDNA克隆及在真核细胞中初步表达的研究

目的 克隆小鼠白细胞介素－１８（ＩＬ－１８）编码区的ｃＤＮＡ,并实现在真核细胞中的表达。方法 用小鼠白细胞介素 －１８（ｍＩＬ－１８）的ｃＤＮＡ核苷酸序列,设计、合成基因序列特异性引物,应用逆转录多聚酶链反应ＲＴ－ＰＣＲ,以植物血凝（ＰＨＡ）和细胞脂多糖（ＬＰＳ）刺激的小鼠非粘附性脾细胞的ｍＲＮＡ为模板,扩增获得全长ｍＩＬ－１８,转染小鼠成纤维细胞系ＳＶＴ２,并进行ＩＬ－１８生物学活性的检测。结果     

乳腺癌外周血单个核细胞与间质免疫微环境的关系研究

目的探讨乳腺癌免疫微环境与外周血的关系。方法应用BRB-Array Tools软件对公共基因芯片数据库GEO中的乳腺癌间质及乳腺癌患者外周血单个核细胞基因芯片表达数据进行统计学分析,找出在乳腺癌间质及外周血单个核细胞均发生变化的基因,DAVID工具进一步分析其功能及参与的生物学通路。PINA蛋白质互作平台分析这些基因的蛋白质相互作用情况。结果比较后得到共同差异表达的103条基因,失调方向一致的基因70条,功能涉及炎症反应、髓系细胞分化、白细胞激活、抗原加工提呈等多种免疫相关的生物学过程。结论乳腺癌患者外周血单个核细胞基因表达改变,与肿瘤间质微环境具有一定相似度,有望建立基于外周血的免疫微环境分子预测,为乳腺癌的治疗靶点及预后判断的研究开辟新思路。     

狼疮性肾炎患者外周血IL-18水平及其基因表达

为了探讨白细胞介素 18(IL 18)在狼疮性肾炎 (LN )发生、发展中的作用。我们采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR )及酶联免疫吸附 (ELISA )法测定 16例正常人及 18例LN患者外周血单个核细胞 (PBMC )IL 18mRNA表达量及其血浆水平。结果提示LN患者PBMCIL 18mRNA表达量及血浆IL 18水平均较正常对照组显著增高 [IL 18mRNA表达量为 :1 2 6 2± 0 189vs0 84 4± 0 15 5 ,P <0 0 0 1;IL 18血浆水平为 :(82 2 0 9± 5 32 77)pg/mlvs (2 39 5 7± 75 0 6 )pg/ml,P <0 0 0 1]。且WHOIV型LN增高较非IV型LN更为显著 [IL 18mRNA表达量为 :1 32 9± 0 2 1vs 1 138± 0 15 2 3,P <0 0 5 ;IL 18血浆水平为 :(1135 5 4± 5 15 34)pg/mlvs (5 0 8 6 5± 341 36 )pg/ml,P <0 0 1]。另外 ,血浆IL 18水平与肾组织活动指数 ,肾小管间质损害程度呈等级相关 (r分别为 :0 6 10和 0 4 99,P均 <0 0 5 ) ,也与血清肌酐 (Scr) ,血清内生肌酐清除率 (Ccr)及 2 4h尿蛋白排泄量 (2 4hUPQ )呈直线相关 (r分别为 :0 898、 0 6 2 8和 0 5 37,P均 <0 0 5 )。本研究认为循环IL 18表达和分泌增高可能参与LN的免疫发病过程 ,并与狼疮活动有一定的关系     

Gene expression signature in peripheral blood cells from medical students exposed to chronic psychological stress

To assess response to chronic psychological stress, gene expression profiles in peripheral blood from 18 medical students confronting license examination were analyzed using an original microarray. Total RNA was collected from each subject 9 months before the examination and mixed to be used as a universal control. At that time, most students had normal scores on the state-trait anxiety inventory (STAI). However, STAI scores were significantly elevated at 2 months and at 2 days before the examination. Pattern of the gene expression profile was more uniform 2 days before than 2 months before the examination. We identified 24 genes that significantly and uniformly changed from the universal control 2 days before the examination. Of the 24 genes, real-time PCR validated changes in mRNA levels of 10 (PLCB2, CSF3R, ARHGEF1, DPYD, CTNNB1, PPP3CA, POLM, IRF3, TP53, and CCNI). The identified genes may be useful to assess chronic psychological stress response.