碱性成纤维细胞生长因子抗体的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ)是一种重要的多肽生长因子 ,也是ＦＧＦ家族中原型成员之一。从 1 974年Ｇｏｓｐｏ ｄａｒｏｗｉｃｚ等[1 ] 从牛脑中分离出ＦＧＦ以来 ,近二十多年研究表明 ,ｂＦＧＦ在促进血管生成[2 ] 、创伤愈合[3] 、骨骼修复[4] 、神经营养与修复[5] 、眼晶体再生[6] 以及胚胎的发育与分化[7] 方面均显示出生物学活性。近年研究发现ｂＦＧＦ在恶性肿瘤组织中有强烈表达 ,并与肿瘤病理分级、分期呈正相关 ,同时血清中ｂＦＧＦ水平亦明显增高 ,这提示ｂＦＧ…     

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的生物学特性研究进展

早在１９４０年就有人发现，大脑和垂体的初提物能促成纤维细胞生长。１９８４年，Ｇｏｓｐｏｄａｒｏｗｉｃｚ等〔１〕最先从牛脑中分离出ｂＦＧＦ，其分子量为１６×１０４１ｕ，等电点（ＰＩ）为９６；并发现ｂＦＧＦ能引起Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３成纤维细胞的增殖与表型转化。自此，对ｂＦＧＦ的研究蓬勃发展。１　ｂＦＧＦ的一般性质目前，已发现９种结构相似的多肽属于ＦＧＦ家族，其中研究较多的是ｂＦＧＦ。ｂＦＧＦ是阳离子多肽，对热和酸敏感，酸性（ＰＨ＝２０）或５６℃条件下作用２ｈ可使其失活，由１４６—１６４个氨基酸组…     

碱性成纤维细胞生长因子与肝素结合性质的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ｂＦＧＦ)是成纤维细胞生长因子 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ ,ＦＧＦｓ)这一大家族的原型成员 ,自 1974年首次从牛垂体中分离ｂＦＧＦ以来[1] ,ＦＧＦ家族的成员目前已增加至 19位[2 ] 。ＦＧＦｓ各成员结构相关、功能相似 ,调节多种细胞的生长、分化、迁移、凋亡 ,此外 ,该家族成员均能结合肝素或硫酸肝素[3 ] 。ｂＦＧＦ和硫酸肝素的结合是它所具有的复杂生化调节机制的基础。肝素和ｂＦＧＦ及其受体三者共同组成复杂的ｂＦＧＦ…     

血管紧张素Ⅱ对细胞因子诱导一氧化氮合酶的表达 引起心肌成纤维细胞凋亡的调控作用

目的 :本实验采用大鼠心肌成纤维细胞培养的方法 ,观察Ａ细胞因子引起的心肌成纤维细胞 (ＣＦｂｓ)死亡时 ,是否与诱导型一氧化氮合成酶 (ｉＮＯＳ)的表达有关 ;Ｂ .血管紧张素Ⅱ是否具有抗ｉＮＯＳ表达引发ＣＦｂｓ死亡的保护作用。方法 :Ａ实验分为空白对照组 ,ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ - 1 β组 ( 5ｎｇ/ｍＬ) ,ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ -γ组 ( 1 0ｎｇ/ｍＬ) ,ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-α组 ( 1 0ｎｇ/ｍＬ)。Ｂ实验分为空白对照组 ,ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ - 1 β( 5ｎｇ/ｍＬ)组 ,ｉｎｔｅｒ ｌｅｕｋｉｎ - 1 β Ａｎｇ…     

急性脊髓损伤后aFGF、bFGF的表达

成纤维细胞生长因子 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃ ｔｏｒ ,ＦＧＦ)在体外能促进多种中枢及外周神经元的存活及突起生长 ,体内也能促进神经元的修复与再生。ＦＧＦ是 1974年Ｇｏｓｐａｄａｒｏｗｉｃｚ[1] 从牛脑的垂体中分离纯化出的一种多肽分子。根据等电点的不     

应用DNA疫苗制备猪温病毒单克隆抗体的研究

猪瘟病毒（ｃｌａｓｓｉｃａｌ ｓｗｉｎｅ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ, ＣＳＦＶ）是影响畜牧业最重要的病原体之一。单克隆抗体（ｍＡｂ）以其高度的特异性和敏感性而在ＣＳＦＶ的生物学特性研究与诊断中起着重要的作用。由于不易获得高质量的ＣＳＦＶ抗原,我国开展这项工作较晚,所建立的抗ＣＳＦＶ ｍＡｂ细胞株较少。这对于研究ＣＳＦＶ的生物学特性及流行病学调查来说,在数量上还很不够,仍需继续研制抗ＣＳＦＶ ｍＡｂ。 ＤＮＡ疫苗是９０年代出现的一种新型疫苗［１］。其特点是：基因免疫后,蛋白质抗原在宿主细胞内表达,其加工处…     

肿瘤坏死因子α诱导胶质瘤细胞凋亡和p38丝裂素活化蛋白激酶表达

一、材料和方法1.材料 :胶质瘤细胞Ｃ6购自本校全军神经外科研究所。重组人肿瘤坏死因子α(ＲｈＴＮＦ α)购自Ｓｉｇｍａ公司 ,按照所需浓度以ＰＢＳ稀释。噻唑蓝 (ＭＴＴ)购自Ａｍｒｅｓｃｏ公司。二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)购自Ｆｌｕｋａ公司。ＲＰＭＩ 16 40培养液购自Ｓｉｇｍａ公司。小牛血清购自杭州四季青生物制品公司。ｐ38丝裂素活化蛋白激酶 (ｐ38ｍｉｔｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ,ｐ38ＭＡＰＫ)抗体由新加坡国立大学林圣彩教授惠赠。免疫组织化学ＳＡＢＣ试剂盒购自武汉博士德公司。2 .方法 :(1)Ｍ…     

抗bFGF单克隆抗体的鉴定及其意义

用重组牛ｂＦＧＦ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，通过细胞融合，以反向间接血凝和间接ＥＬＩＳＡ筛选，以及有限稀释法克隆化，建立了９株稳定分泌抗ｂＦＧＦ单克隆抗体（ｍＡｂ）杂交瘤细胞。对其中３株用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生物活性抗体中和实验进行了鉴定。结果显示，ｍＡｂ可结合重组牛或人ｂＦＧＦ，并能抑制ｂＦＧＦ刺激Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞的生长；腹水的ＥＬＩＳＡ滴度为１∶３０００；用其中２株ｍＡｂ建立的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法灵敏度可达５０ｐｇ／孔。本文还讨论了抗ｂＦＧＦｍＡｂ的应用价值。     

血管生成因子及其受体表达与Keloid瘤样增生的关系

碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ，ｂＦＧＦ）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）或血管通透因子（ｖａｓｃｕｌａｒｐｅｒｍｅａｂｉｌ－ｉｔｙｆａｃ...     

血小板源生长因子对培养内皮细胞移行的影响及其与血管内皮细 …

一、材料与方法1 材料与试剂 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)株(ＥＣＶ30 4)由武汉大学菌种保存中心提供。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＤＭＥＭ/Ｆ12 、胎牛血清 (ＦＢＳ)及青霉素 链霉素均为美国Ｇｉｂｃｏ公司产品。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)抗血清为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＳＡＢＣ试剂盒抗血清及二氨基联苯胺(ＤＡＢ)由博士德公司提供。2 血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)对培养ＨＵＶＥＣ移行的影响 :参照Ｇａｊｄｕｓｅｋ等[1] 介绍的方法 ,并加以改进。选用生长良好的ＨＵＶＥＣ悬液 ,调整细胞密度为 2× 10 4 个 /…     

软骨发育不全FGFR3基因突变的研究

目的了解中国人软骨发育不全患者成纤维细胞生长因子受体３（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ３，ＦＧＦＲ３）基因变异情况。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和限制性内切酶酶切方法，分析辽宁地区７例软骨发育不全（ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ，ＡＣＨ）患者外周血ＤＮＡ标本中ＦＧＦＲ３基因第１０外显子区域。结果７例患者均检测到相同的Ｇ３８０Ｒ点突变。结论表明Ｇ３８０Ｒ为中国人ＡＣＨ患者常见突变。应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和限制性内切酶酶切的方法检测ＦＧＦＲ３基因突变是产前诊断和早期诊断ＡＣＨ患者的简便、快速、可靠的手段     

bFGF及KGFmRNA在口腔粘膜中的表达分析

成纤维细胞生长因子超家族（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ＦＧＦ）是包括９个成员的肽类生长因子，参与了胚胎发育、损伤修复、血管生成等多种重要的生理和病理生理过程。ｂＦＧＦ（ｂａｓｉｃＦＧＦ）及ＫＧＦ（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｇｒｏｗ...     

碱性成纤维细胞生长因子对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响

促进内皮细胞在聚氨酯材料上粘附是实现人工心和人工血管内皮细胞化的关键一环。用荧光法观察了碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响。结果表明，ＦＮ实验组和Ⅳ型胶原实验组的细胞粘附率分别７１％和６８－５％，而对照组分别是６２－５％和５５－２５％，Ｐ均＜０－０５，表明ｂＦＧＦ能够促进内皮细胞在聚氨酯材料上的粘附。提示ｂＦＧＦ作为一种辅助因素加入培养基中将有助于实现人工心、血管聚氨酯材料的内皮细胞化。     

肺炎衣原体转运、储存及传代条件的探讨

进行临床标本肺炎衣原体 (Ｃｈｌａｍｙ ｄｉａＰｎｅｕｍｏｎｉａｅ,ＣＰ)的分离 ,标本接种前转运、储存及营养液选择等 ,均是影响培养阳性率的重要因素。本研究选用 3株ＣＰ标准毒株Ｋ6、Ｋ7、ＣＭ1模拟临床标本的转运过程 ,对在ＳＰＧ(Ｓｕｃｒｏｓｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄｂｕｆｆｅｒ)、含ＳＰＧ (10 %ＦＢＳ)、ＣＰ培养分离用营养液ＩＭＤＭ (10 %ＦＢＳ)及标准转运培养基Ｍ4中转运后的毒力进行比较 ,并对保存于上述培养液中已知ＣＰ含量的菌株进行复苏后毒力的比较 ,同时对液体因素及传代条件进行了观察。将…     

高频心电图对心肌炎诊断的价值

本文通过对临床诊断为心肌炎,放射性核素心肌灌注检查（ｓｉｎｇｌｅｐｈｏｔｏｎｅｍｉｓｓｉｏｎｃｏｍｐｕｔｅｄｔｏｍｏｇｒａｐｈｙＳＰＥＣＴ）阳性的５例患者,治疗前后进行心电图（ＥＣＧ）及高频心电图（ｈｉｇｈｆｒｅｑｕｅｎｃｙｅｌｅｃｔｒｏｃａｒｄｉｏｇｒａｍＨＦＥＣＧ）检查。结果显示：治疗前ＥＣＧ阴性,ＨＦＥＣＧ阳性,切迹数１４～２５个,治疗后ＥＣＧ阴性,ＨＦＥＣＧ阴性切迹数５～７。提示ＨＦＥＣＧ诊断心肌炎的敏感性高于ＥＣＧ,且可作为心肌炎动态变化的指标。     

产黑普氏菌内毒素脂多糖的免疫生物学活性研究

目的在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性。方法采用Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）、集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＳＦ）、白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１,ＩＬ－１）的诱导活性以及局部皮肤斯氏反应（ＳＰＤ５０）。结果产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素可显著地诱导ＴＮＦ、ＣＳＦ和ＩＬ－１的产生,在一定剂量范围内呈剂量依赖型。并可导致家兔典型的皮肤局部斯氏反应。结论产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖在动物模型中具有显著的炎症性细胞因子诱导活性     

在大肠杆菌中高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）能促进大多数来源于中胚叶及神经外胚叶细胞的增殖，它对神经再生、创伤愈合、蝾螈断肢及晶体再生等具有促进作用。利用基因工程手段将牛ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ插入到ｐＢＶ２２１高效表达质粒载体中，并使之在大肠杆菌中表达。经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－肝素亲和层析获得重组ｂＦＧＦ纯品。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示两条带，其中１８ ０００系２１ ０００降解所致，加入蛋白酶抑制剂可抑制其降解，并经免     

医学细胞遗传学检验的质量控制

随着医学科学的飞速发展 ,医学遗传学检验在临床诊断中的作用显得日益重要。而细胞遗传学检验是医学遗传学检验的基础 ,尤其是在细胞遗传学基础上发展起来的细胞 -分子遗传学技术比如 :荧光原位杂交 (ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉ ｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＦＩＳＨ) ,染色体涂抹 (ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｉｔｉｎｇ ,ＣＰ) ,引物介导的原位标记 (ｐｒｉｍｅｄｉｎｓｉｔｕｌａｂｅｌｌｉｎｇ ,ＰＲＩＮＳ) ,比较基因组杂交 (ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｇｅｎｏｍｉｃｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,ＣＧＨ)等均需要获得质量优…     

肿瘤碱性蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了４株抗人血清肿瘤碱性蛋白（Ｔｕｍｏｕｒｂａｓｉｃｐｒｏ－ｔｅｉｎ，ＴＢＰ）杂交瘤细胞株（１Ｃ３、４Ｆ４、５Ｆ４、３Ｇ９），并以制备的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对其抗原决定簇及免疫学特性进行了分析。Ｉｇ亚类测定：均为ＩｇＧ２ａ，腹水效价为１×１０－６～１×１０－８。特异性测定：ＴＢＰＭｃＡｂ与ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ和Ａｌｂ无交叉反应。单抗相加试验证实：５Ｆ４、４Ｆ４和１Ｃ３为识别ＴＢＰ上同一抗原决定簇，３Ｇ９则为识别ＴＢＰ上另一抗原决定簇。分别利用单株和混合株ＭｃＡｂ标酶建立了可应用于人血清ＴＢＰ含量测定的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，并用于人血清ＴＢＰ含量测定。     

多药耐药性相关蛋白MRP在胃癌耐药细胞SGC7901中的表达

肿瘤多药耐药性的产生是导致临床上化疗失败的主要原因。本研究观测了胃癌阿霉素耐药细胞ＳＧＣ７９０１／Ａｄｒ中，多药耐药相关蛋白（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＲＰ）的表达，以了解其在胃癌细胞耐药中的作用。１材料和方法１．１药物与试剂阿霉素（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ，ＡＤＲ）（ＦａｒｍｉｔａｌｉａｃａｒｌｏＥｒｂａ），ＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏ），ＱＣＲＬ１杂交瘤上清（加拿大Ｃｏｌｅ教授惠赠［１］）。１．２细胞培养人胃低分化腺癌细胞系ＳＧＣ７９０１（军事医…