抗乙酰胆碱受体抗体与重症肌无力

重症肌无力(MG)是一种以肌肉无力和易疲劳为特点的神经肌肉性疾病,发病率为1/20,000～1/30,000.1973年Patrick和Lindstrom首先在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物体内检测到     

重症肌无力的免疫学——关于乙酰胆碱受体的抗体

乙酰胆碱受体(AChR)是细胞膜的一种糖蛋白,嵌于骨骼肌浆膜的二层脂质分子中。在正常神经支配的肌纤维中,AChR群集于神经肌肉接头处的突触后膜上,少数在接头之外。重症肌无力的血清中含有一种因子,能降低在培养中的肌肉细胞对乙酰胆碱的敏感性。这种因子有免疫球蛋白的特性,能与AChR相结合。有90％的重症肌无力患者     

烟碱型乙酰胆碱受体与临床疾病

烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是配体门控的离子通道受体家族成员,广泛分布于中枢神经、神经肌肉接头以及其他细胞表面。构成亚基不同和分布部位的差异表现为受体功能的多样性。早期研究发现,nAChR主要与神经电信号传导有关;近期研究认为它是胆碱能抗炎通路的关键受体。阐明这些功能的生理机制对重症肌无力、癫痫以及多器官衰竭等相关疾病有重要的临床意义。     

重症肌无力患者抗Ryanodine受体抗体检测及其意义

本实验应用Westernblot分析 4 4例伴不同胸腺病理类型重症肌无力 (MG )患者血清中Ryanodine受体 (RyR )抗体特异性 ,同时应用ELISA法检测 1 6 9例伴不同胸腺病理类型MG血清中RyR抗体水平。结果显示在Westernblot法分析中 ,2 4例伴胸腺瘤重症肌无力 (MGT )患者血清中有 1 9例可见到RyR抗体阳性条带 ,2 0例非胸腺瘤重症肌无力 (NTMG )患者血清中仅1例可见RyR抗体阳性条带 ,2 5例非MG个体 (NMG )均未见RyR抗体阳性条带。MGT患者血清中RyR抗体阳性条带检出率明显高于NTMG和NMG组 (P <0 0 1 )。在ELISA法检测中 ,MGT组患者血清中RyR抗体水平明显高于NTMG组、其他神经系统疾病 (OND )组、正常对照 (NC )组 (P <0 0 1 ) ;5 9例MGT患者血清中 4 6例RyR抗体阳性 ,2 83例NTMG、OND、NC组检测血清中 1 9例RyR抗体阳性 ,ELISA法检测MGT患者血清中RyR抗体敏感性为 78% ,特异性为 93 3%。结果表明RyR抗体检测是诊断MGT特异性较高的实验室指标 ,具有重要的临床意义     

重症肌无力中抗受体自身抗体的特异性

重症肌无力(MG)的特点是肌无力,是由抗体介导的对乙酰胆碱受体的自身免疫应答损伤了神经肌肉传递造成的。用纯化受体免疫可导致实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)。在MG和EAMG中,与抗体交联的受体发生内活化而增加受体损伤,或由补体介导的局部溶解     

重症肌无力患者乙酰胆碱酯酶抗体的测定

纯化人脑组织中的乙酰胆碱酯酶为抗原包被免疫板，建立血清中乙酰胆碱酯酶抗体测定的ＥＬＩＳＡ法。探讨了检测方法的特异性和可重复性，并对３组样本进行了测定。证明此方法特异、灵敏、可重复。提示对下肌无力的研究可能提供１个新的实验检测指标。     

烟碱型乙酰胆碱受体在认知功能中的作用

烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）是化学（配体）门控的离子通道蛋白，属于半胱氨酸环受体家族，广泛分布于中枢和周围神经系统中。中枢nAChR参与许多复杂的功能，如：注意、学习、觉醒和认知等。越来越多的研究表明，中枢nAChR在认知功能活动中发挥了重要的作用。临床资料提示，nAChR与一些认知功能障碍性疾病的发病机制有关，如：阿尔茨海默病（AD）、帕金森氏病（PD）以及癫痫等。     

重症肌无力患者血清IgG-乙酰胆碱受体和突触前膜受体抗体亚型分析

应用ABC-ELISA法分析43例重症肌无力（MG）病人血清中IgG-乙酰胆碱受体和突触前膜受体抗体亚型。结果提示,大部分MG病人均以IgG2亚型抗体增高和IgG3亚型降低为特征;认为IgG抗体亚型的差异可能与种族有关,但未见到与临床类型相关。     

间接ELISA检测抗核抗体及其临床应用

用小鼠肝细胞核包被聚苯乙烯反应板建立了间接ＥＬＩＳＡ法检测抗核抗体。通过特异性、精密度试验，达到方法学要求。对临床５１例病人检测，与间接荧光抗体法比较，两种方法检出率无明显差异（ｘ２＝３．６７Ｐ＞０．０５）。可进行半定量分析及大批量操作。     

烟碱型乙酰胆碱受体结构和通道特性

本文描述了烟碱型乙酰胆碱受体分子结构和单通道特性的新进展。主要涉及ＣＤＮＡ文库中新推导出的亚基特性，ｎＡＣｈＲ的跨膜方式，Ａｃｈ结合位点，离子通道的组成和电学特性．     

用电压钳检测烟碱型乙酰胆碱受体导电孔道的重要位点

目的 利用双电极电压钳技术检测组成人烟碱型乙酰胆碱受体离子导电孔道的主要氨基酸位点.方法 用定点突变的方法将人alpha 7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)亚基跨膜区段M2的氨基酸(Leu248-Ala258)逐一突变为亲水性的丝氨酸,随后利用cDNA质粒体外转录获得cRNA,并将单个突变体的cRNA注射到非洲爪...     

抗MPO抗体的ELISA检测和应用

本文应用Ｍａｔｈｅｓｏｎ方法从人白细胞中提取髓过氧化物酶ＭＰＯ，建立ＥＬＩＳＡ法检测６３份血清标本中抗ＭＰＯ抗体，同时与间接免疫荧光法（ＩＩＦ）作比较，结果是：１９例结节性多动脉炎（ＰＡＮ）患者中６例抗ＭＰＯ抗体阳性（３２％），较ＩＩＦ法阳性率提高（１９例中１例），而２２例正常人及２２例其他肾脏病患者血清均为阴性。提示ＥＬＩＳＡ法既可从分子水平鉴定系统性血管炎致病的特异性抗体，又是系统性血管炎敏感的诊断方法。     

重症肌无力的自身免疫性研究Ⅰ.重症肌无力抗突触前膜抗体的检测

本文报道应用特异与突触前膜结合的β-银环蛇毒素(β-Bungarotoxin,β-BGT)和特异与乙酰胆碱受体(AchR)结合的α-银环蛇毒素(α-Bungarotoxin,α-BGT)包被检测板,纯化人骨骼肌提取液中各自特异结合的蛋白质,以ABC-ELISA法检测正常人和重症肌无力病人血清中各自抗体。凡与β-BGT板结合蛋白起反应者为抗突触前膜抗体,凡与α-BGT板结合蛋白起反应者为抗AchR抗体。文章详细介绍了检测方法的特异性、重复性和可比性。我们认为应用β-和α-银环蛇毒素纯化后进行的ABC-ELISA法,是研究重症肌无力交触前、后膜抗体可靠的手段。     

乙酰胆碱受体制剂对实验性自身免疫性重症肌无力的抑制作用

在采用乙酰胆碱受体免疫Ｌｅｗｉｓ大鼠诱发实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）前，让动物口服ＡｃｈＲ产生免疫耐受，并采用ＥＬＩＳＡ测定血清抗ＡｃｈＲＩｇＧ抗体水平和放射免疫法测定肌肉ＡｃｈＲ含量。结果显示能预防ＥＡＭＧ临床发病，明显地抑制血清抗ＡｃｈＲＩｇＧ抗体反应，并减少肌肉ＡｃｈＲ损失。本研究结果表明口服ＡｃｈＲ产生免疫耐受是一种简单、有效、特异性抑制ＥＡＭＧ的方法。     

单链抗体融合人血白蛋白对重症肌无力患者血清与乙酰胆碱受体结合的抑制

目的:研究抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(ScFv637)融合人血白蛋白(HSA-ScFv637)在体外对重症肌无力(MG)的治疗作用.方法:构建出HSA-ScFv637基因,利用甲醇诱导表达出HSA-ScFv637蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹试验分析融合蛋白的分子量及特异性;应用竞争性ELISA测定法对HSA-ScFv637抑制MG患者血清与人AChR结合率及表达产物稳定性进行测定.结果:HSA-ScFv637对MG患者血清与人AChR结合的抑制率最高可达77.4%,对AChR的这种保护能力可持续3天,随着样品的衰变HSA-ScFv637保护作用减弱至消失.结论:HSA-ScFv637在体外能抑制MG患者血清与AChR的结合,对AChR具有保护作用.     

ELISA定量检测抗卵巢抗体及其应用

用提取的人卵巢抗原，以兔抗人卵巢抗血清为定量标准，建立定量检测抗卵巢抗体的ＥＬＩＳＡ。结果表明：以３．０Ｕ／ｍｌ为正常上限，闭经、不孕和流产患者血清抗卵巢抗体的阳性率分别为７４．３％、３６．７％和２５．０％，均明显高于健康对照组（１．２％），Ｐ＜０．０１。本法批内、批间ＣＶ分别为５．４～８．７％和７．５～９．０％；特异性为９８．８％；对原因不明的早期闭经患者敏感性为７４．３％。此抗体的检测，有助于了解早期闭经、不孕和流产的病因。     

受体相关蛋白对实验性自身免疫性重症肌无力的乙酰胆碱受体的作用

目的：探讨受体相关蛋白(Rapsyn)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物终板乙酰胆碱受体的作用。方法：用基因工程的方法制备提取pcDNA-Rapsyn，并将其注入动物肌肉左大腿外侧，右大腿相应部位注射相同剂量的空白质粒(Vector)，以方波刺激使其进入细胞膜内，2周后用单克隆抗体35(mAb35)诱导出EAMG模型并进行症状评估，mAb35诱导48小时后取双大腿外侧肌，用放射免疫法检测AChR，并计算出AChR的损失率。结果：在EAMG模型中，被pcDNA-Rapsyn预处理的肌肉AChR损失率明显低于未经处理的肌肉。结论：Rapsyn蛋白对EAMG模型的AChR有保护作用。     

重症肌无力神经肌肉接头抗体的检测

重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是一种以异常体液免疫反应为主的神经免疫性疾病,抗体主要作用在神经-肌肉接头突触后膜,引起神经递质信号传递障碍。目前在MG患者中发现的神经肌肉接头抗体包括:抗乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,AChR)抗体、抗肌特异受体酪氨酸激酶(muscle-specific tyrosine kinase,MuSK)抗体、抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low-density lipoprotein receptor-related protein 4,LRP4)抗体、抗肌联蛋白抗体、抗雷诺丁受体(ryanodine receptor,RyR)抗体和抗皮动蛋白(cortactin)抗体。而其中抗AChR抗体在MG诊断中起到至关重要的作用,临床上常用的检测手段包括ELISA和放射免疫沉淀法(radioimmunoprecipitation assay,RIPA),但灵敏度较细胞模型检测法(cell-based assay, CBA)仍有一定差距。文章就MG神经肌肉接头抗体及现有检测手段进行综述。     

烟碱型乙酰胆碱受体通道的动力学和机能重建研究

离子通道可分为二大类:一类是电兴奋性的,电压门控,通道的开关受膜电位改变的影响,如钠、钾、钙等通道;另一类是非电兴奋性的,如化学突触传递的调制或感觉刺激的换能,虽然这些通道也有闸门离子的运动和产生电信号,但它们只对非电刺激产生反应,它们对特异的化学递质,如乙酰胆     

抗乙酰胆碱受体单链抗体对致病性抗体结合活性的抑制作用

为探讨单链抗体 (ScFv )对重症肌无力 (MG )的特异性免疫治疗作用 ,从分离自MG患者胸腺的抗乙酰胆碱受体(AchR )抗原结合片段Fab6 37构建单链抗体ScFv6 37。应用放射免疫测定法测定了ScFv6 37与刺激抗原人AchR的特异性结合活性以及与相关抗原大鼠AchR和电鳐AchR的交叉反应 ,应用竞争性ELISA测定抑制致病性抗AchR完整抗体IgG6 37与人AchR结合活性。结果发现ScFv6 37只能与人AchR结合 ,不能与大鼠和电鳐的AchR结合。对IgG6 37与人AchR结合的抑制率为 17 5 %～ 32 9%。表明单链抗体对AchR具有一定的“保护”作用。