成人急性髓性白血病免疫学表型分析

目的：分析成人急性髓性白血病（AML）免疫学表型特征。方法：采用三色流式细胞仪（FCM）,以CD45/SSC双参数散点图设门,对213例AML患者进行免疫学表型分析。结果：AML主要表达CD117（88.73%）、CD13（90.61%）、CD33（75.59%）、CD34（62.91%）、HLA-DR（63.85%）抗原;CD14和CD64在AML-M4中表达率为54.55%和31.82%,在AML-M5中表达率为40.00%和60.00%,CD14的特异性高于CD64。30.5%的AML患者伴有淋系抗原表达,主要是CD7（23.0%）。AML-M3患者CD117表达率为86.67%,CD34和HLA-DR表达率偏低（P〈0.05）。结论：CD13、CD117和CD33联合应用更有利于确定髓性白血病。CD14和CD64有助于确定AML-M4、M5,前者特异性更强。CD34及HLA-DR低表达为AML-M3的特征。     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

目的研究成人急性白血病免疫分型及与预后的关系。方法以CD45/SSC双参数散点图设门,采用流式细胞术检测106例成人急性白血病患者免疫分型情况。结果(1)71例急性髓系白血病(AML)患者主要表达CD13、CD33、HLA-DR、CD34和CD117抗原,23.9%的AML患者伴有淋系抗原表达,15.5%的AML病人伴有CD56抗原的表达。(2)29例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者主要表达HLA-DR、CD10、CD19、CD34和CD7,34.5%的ALL患者伴有髓系抗原的表达。(3)伴有淋系抗原表达的AML患者化疗完全缓解(CR)率为52.9%(9/17),显著低于未伴有淋系抗原表达的AML病人(77.8%)(P<0.05);伴有髓系抗原表达的ALL患者化疗后CR率为70.0%,而未伴有髓系抗原表达的ALL患者CR为94.7%,两者差异无显著性(P>0.05);CD56 AML患者化疗后CR率仅36.4%,显著低于CD56- AML患者(78.3%)(P<0.025);CD34 AML患者化疗后CR率为56.0%,显著低于CD34- AML患者(80.4%)(P<0.05)。结论采用CD45和SSC双标记设门可较好地排除正常骨髓细胞的影响,较准确地反映病人的免疫学分型;伴淋巴系抗原表达的AML、CD56 AML及CD34 AML化疗后CR率低,预后差。     

125例成人急性髓系白血病免疫表型特点分析

目的：探讨成人急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)患者的免疫表型特点及临床意义。方法2011年5月-2014年6月在河北省涿州市医院和解放军总医院就诊的125例成人AML患者为研究对象,采用多色流式细胞术,以CD45/SSC双参数散点图设门,对其骨髓进行免疫表型检测。结果 AML患者髓系特异性抗原表达阳性率依次为CD13(90.4%)、CD33(86.4%)、MPO(80.0%)、CD117(73.6%);CD14和CD15主要在M4和M5中表达,CD64和CD15同时强阳性伴HLA-DR高表达,提示M5可能性大;在M3患者中有较强的自发荧光,表达髓系抗原CD13、CD33和MPO,低表达CD34和HLA-DR。造血干/祖细胞标记抗原CD34、HLA-DR、CD38在AML中呈高表达,分别为53.6%、70.4%、71.2%。125例中56例伴有淋系抗原表达,各抗原表达率依次为CD56(25.6%)、CD7(19.2%)、CD19(9.6%)、CD4(7.2%)、CD2(6.4%)。有淋系抗原表达(LymAg+)组表达CD34+比例和肝脾大患者比例明显高于无淋系抗原表达(LymAg-)组(P＜0.01)。伴有CD7+患者完全缓解(CR)率明显低于CD7-患者(P＜0.05),而伴有淋系抗原表达的AML患者CR率(55.6%)与未伴有淋系抗原表达的AML患者CR率(76.2%)差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 AML患者高表达CD13、CD33、MPO,部分患者同时表达髓系、淋系抗原;伴有CD7+表达的患者,化疗后CR率低,预后较差。     

成人急性髓细胞系白血病免疫分型特点

目的：探讨成人急性髓细胞系白血病（AML）三色流式细胞术免疫分型特点及AML抗原表达规律.方法：采用CD45/侧散射（SSC）双参数散点图设门方法对156例成人AML进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果：156例AML主要表达CD117（90.4%）、CD13（87.2%）、CD33（71.8%）、CD34（64.7%）、HLA-DR（60.9%）.34.0%的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7（24.4%）.结论：流式细胞仪三色荧光标记法进行AML免疫分型,对白血病的准确分型诊断、发生发展和预后判断有重要的指导意义.     

成人急性白血病细胞三色流式细胞术的免疫分型

目的:探讨成人急性白血病(AL)细胞三色流式细胞术免疫分型的特点.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法、三色流式细胞术对197例急性白血病细胞进行免疫表型分析.结果:急性淋系白血病细胞均表达淋系抗原,46.7%和11.1%的成人ALL细胞表达CD13和CD33;急性髓系白血病细胞均表达髓系抗原,M3中只有1例表达CD34,HLA-DR均无表达;同时AML中有12例表达淋系抗原CD7,21例表达CD10;197例急性白血病中有11例(占5.6%)为杂舍型急性白血病(HAL),其中有6例B/M型.结论:CD45/SSC设门方法能排除骨髓中正常细胞的干扰,免疫表型的检测和研究对急性白血病的分型和明确诊断有帮助.     

急性粒-单核细胞白血病免疫分型及与预后的关系探讨

目的 分析急性粒-单核细胞白血病(AML-M4)患者的免疫分型及与预后的关系.方法 使用流式细胞仪检测白血病细胞的免疫分型,通过免疫分型评价患者预后.结果 25例患者中,髓系抗原总表达率为100%.其中CD13、CD33表达比例80%以上,CD117、CD64表达比例在50%~80%之间,CD14表达为16%.淋系抗原总表达率为55.6%,单个抗原表达率均小于20%,HLA-DR、CD34及CD38表达率为64%~88%.采取化疗的23例患者中,单一表达的病例占60.8%,缓解率为71.4%;杂合表达的病例占39.2%,缓解率为55.6%.结论 杂合表达的AML-M4患者的预后比单一表达的AML-M4患者差,其对制定治疗方案具有一定的指导意义.     

急性髓细胞白血病免疫分型特点及临床意义

目的: 探讨急性髓细胞白血病(AML)免疫分型特点及其临床意义。方法: 采用流式细胞术(FCM)对145例AML患者进行白血病免疫分型检测。结果: 145例AML患者中MPO、CD13、HLA-DR、CD33、CD34表达率分别为93.1%、90.3%、77.2%、71.7%、70.3%。CD14仅表达于急性粒单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)。AML伴淋系抗原表达者以CD7(34.5%)最为多见,其中以预后较差的M5型表达率为最高,其次为CD19(10.3%),且在急性粒细胞白血病部分分化型(M₂)中表达率最高。CD2仅表达于部分急性早幼粒细胞白血病(M3),共发现2例急性混合细胞白血病,同时有淋系和髓系抗原表达。结论: MPO、CD13、CD33为髓系最敏感的抗原,CD7、CD19、CD2淋系抗原在AML诊断及预后判断上有重要指导意义,FCM免疫分型对白血病的准确分型诊断,预后判断有重要的指导意义。     

118例急性白血病五色流式细胞术免疫分型与FAB分型的结果分析

目的：探讨急性白血病五色流式细胞术免疫分型与FAB分型的关系和表达规律。方法通过CD45/SSC设门的五色流式细胞仪检测118例急性白血病患者骨髓细胞的表面抗原,并进行免疫表型分析。结果在88例AML患者中髓系相关抗原的表达率依次为CD33(93.2%)>CD13(88.6%)>CD117(86.4%),部分AML患者伴表达淋系相关抗原,主要为CD56(25.2%)、CD7(11.3%)、CD19(2.2%)、CD20(2.2%);M3中高表达CD117(83.7%)、CD13(83.7%)、CD33(83.7%),但均不表达CD34、HLA-DR,且SSC较大;M4、M5中可见CD64、CD4、CD14明显表达高于AML其他亚型(P<0.01)。19例B-ALL患者中CD19的表达率最高(100%),其次为CD34(90.1%)、HLA-DR (90.1%)、CD10(90.1%);9例T-ALL患者中CD7的表达率最高(100%),其次为CD4(77.8%)、CD5(77.8%)、CD2(66.7%)、CD3(66.7%)、CD34(55.6%)。结论通过五色流式细胞术进行白血病免疫分型是形态学分型诊断重要的补充,能够提供更客观的诊断依据,对提高急性白血病的诊断正确率、预后判断和治疗方案的选择有重要的意义。     

急性髓细胞白血病免疫分型特点及预后分析

目的：探讨成人急性髓细胞白血病（AML）免疫分型特点及与临床预后的关系.方法：选择2009年2月至2013年6月在我院住院的成人AML患者98例,采用三色流式细胞术CD45/SSC双参数散点图设门方法进行免疫表型分析,全部病例给予常规方案化疗,化疗1个疗程后观察其缓解情况.结果：98例AML主要表达CD33 （94.9％）,CD13 （85.7％）,MPO（73.5％）,CD117（62.2％）,某些免疫表型与FAB分类具有相关性,包括MPO主要表达于M2、M3、M4,单核细胞相关抗原CD14主要表达于M4和M5,干、祖细胞抗原CD34和HLA-DR多表达于M1、M5、M2,M3中未见HLA DR的表达,CD34的表达也极低（4.8％）.98例AML患者中,37例（37.8％）伴有淋系抗原表达,最常见为CD7 （20.4％）,经化疗1个疗程后CD7＋AML完全缓解（CR）率（45.0％）低于CD7 AML（非M3）CR率（75.4％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：流式细胞术免疫表型检测对AML的诊断、分型及预后判断具有重要意义,CD7＋的AML化疗后CR率低,预后差.     

急性髓细胞白血病免疫分型与交叉表达的临床意义

目的研究急性髓细胞白血病(AML)免疫表型及交叉表达的特征及临床意义,分析免疫表型对AML诊断及预后的指导意义。方法利用三色流式细胞术分析169例AML免疫表型。结果169例AML患者各亚型中,M2发病率最高,其次为M5,M3,M0,M4,M1,M7,而M6发病率最低。各种抗原表达阳性率依次为CD117占89.3%(151例),CD13占74.0%(125例),CD33占70.4%(119例),HLA-DR占65.1%(110例),CD64占55.6%(94例),CD34占49.7%(84例),CD14占10.1%(17例);169例AML中伴淋系抗原表达(LY+AML)占36.7%(62例),62例LY+AML中淋系抗原表达率最高为CD7占74.2%(46例),其次分别为CD19占17.7%(11例),CD10占8.1%(5例)。伴淋巴细胞抗原交叉表达的AML(LY+AML)完全缓解(CR)率明显低于无髓系抗原表达的AML(LY-AML),差异有统计学意义(52.8%vs76.5%,P<0.05)。结论免疫分型对AML及LY+AML的诊断、治疗方案选择及预后判断有重要临床意义。     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

OBJECTIVE: To study the immunophenotyping of adult patients with acute leukemia and its association with the prognosis. METHODS: Immunophenotyping was performed in 106 adult patients with acute leukemia by three-color flow cytometry analysis using CD34/SSC gating. RESULTS: The antigens expressed in 71 patients with acute myeloid leukemia (AML) were mainly CD13, CD33, HLA-DR, CD34 and CD117. Lymphoid antigen expression was identified in 23.9% adult AML patients and CD56 antigen expression in 15.5% of the AML patients. In 29 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), the expressed antigens were mainly HLA-DR, CD10, CD19, CD34 and CD7, and 34.5% of these patients were found to be positive for myeloid antigen expression. Complete remission (CR) rate in AML patients with lymphoid antigen expression after chemotherapy was lower than that in AML patients without lymphoid antigen expression (52.9% vs 77.8%, P<0.05), and no significant impact was noted of myeloid antigen expression in ALL on the CR of the patients (70.0% vs 94.7%, P>0.05). The CR rate in AML with CD56 antigen expression was lower than that in AML without CD56 expression (36.4% vs 78.3%, P<0.025), and the CR rate in CD34+ AML was lower than that in CD34- AML (56.0% vs 80.4%, P<0.05). CONCLUSIONS: Gating of CD45/SSC can eliminate the interference of normal cells to render more reliable immunophenotyping results. The expressions of CD56+, CD34+, lymphoid antigen in adult AML patients, who have lower CR rate, often signify poor prognosis.     

对539例HIV感染者皮肤黏膜表现的临床分析

目的通过研究H IV感染者/AIDS患者皮肤黏膜表现的种类数及严重程度及其与CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值的关系,评估皮肤黏膜病变作为预测和评估患者免疫状态的临床指标的可行性。方法对北京佑安医院2001年5月~2006年4月收集的539例住院及门诊H IV感染者/AIDS患者的临床资料作回顾性研究,采用流式细胞仪技术检测350例出现不同皮肤黏膜表现及189例无皮肤黏膜表现患者的CD4+T细胞计数、CD4+/CD8+比值,观察H IV感染人群中各种皮肤病的发生率,并研究出现皮肤病的种类数、严重程度与艾滋病患者免疫功能的相关性。结果H IV阳性患者的皮肤病发生率为65%,其中口腔黏膜念珠菌感染最常见。H IV阳性有皮肤黏膜表现组CD4+T细胞计数的平均数与CD4+/CD8+比值(分别为53.04个/μL与0.202 4)明显低于无皮肤黏膜表现组(分别为281.97个/μL与0.312 9),2组间比较差异具有明显的统计学意义(P<0.05),且CD4+T细胞计数与所患皮肤病的种类数及严重程度呈负相关。结论H IV感染者/AIDS患者的常见皮肤病临床表现,即患者皮肤疾病的种类数、发生率及严重程度与CD4+T细胞计数呈负相关,某些皮肤黏膜表现可以作为预测和评估资源有限国家患者免疫状态的临床指标。     

HLX基因的表达与急性髓系白血病相关性

目的 研究HLX表达水平与AML的临床变量及AML不同危险度分层的相关性。方法 应用实时荧光定量PCR方法检测32例初治AML患者骨髓单个核细胞中HLX表达量,分析其与患者FAB分型、血象、骨髓原始细胞、分化程度及AML不同危险度分层关系。结果 初治AML患者HLX表达量在AML-M₃中明显降低（P<0.01）,AML-M₅中明显升高（P<0.05）;HLX表达水明与骨髓原始细胞数呈负相关（P<0.01）,与外周血血小板水平呈正相关（P<0.05）,且AML-M₃ HLX表达量与外周血白细胞水平呈正相关（P<0.05）,AML-M₅ HLX表达量与外周血白细胞水平呈负相关（P<0.05）;AML-M₅组中分化不良组HLX表达水平明显高于分化良好组,（P<0.05）,病例组及非M₃组初治AML患者中,低危组与中危组HLX表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论 HLX表达水平在部分亚型（如AML-M₅）中表达升高,且在不同的FAB分型中有差异。该基因与白血病细胞的增殖、分化和成熟相关。本研究暂无证据表明HLX在不同AML危险度分层中有差异,仍需进一步实验研究。     

小肠黏膜下层作为组织工程支架材料的免疫原性研究

目的检测小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)的免疫原性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法取SIS材料制备成体积为10mm×4mm×3mm的组织块,埋植于新西兰大白兔背部一侧骶脊肌内,以术前情况作自身对照,以新鲜SIS组作为阳性对照。分别于SIS材料植入前及植入后1、4、8周从兔耳缘静脉取血,用流式细胞仪检测家兔外周血中CD4+T和CD8+T细胞亚群的动态变化。结果流式细胞仪检测结果显示,脱抗原处理后的SIS植入兔体内后,其外周血CD4+T和CD8+T细胞较术前均有不同程度升高,术后一周达最高峰,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05)。术后逐渐回落,至第4周时基本恢复正常。而植入新鲜SIS组的兔外周血CD4+T和CD8+T细胞较术前升高明显,与术前及实验组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SIS植入后T细胞亚群反应初始结果显示SIS有较低的免疫原性,提示其具有作为组织工程支架材料的可行性和可能性。     

成人急性髓细胞白血病异常免疫表型特点及临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病(acute myelocytic leukemia,AML)患者的异常免疫表型特点及临床意义。方法采用多色流式细胞术对初诊的38例AML患者进行白血病免疫表型检测。结果 AML患者髓系特异性抗原表达阳性率高低依次为:CD33、CD13、cMPO、CD117、CD11b;部分患者异常表达淋巴系抗原,表达率高低依次为CD19、cCD79a、CD7等。CD19+、CD7+患者完全缓解(complete remission,CR)率低于CD19-、CD7-患者,差异有统计学意义(P<0.05);部分患者表达非特异性早期抗原CD34、HLA-DR、CD38,CD34+患者CR率与CD34-患者CR率相比差异无统计学意义(P>0.05),CD56+患者CR率与CD56-患者CR率相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CD33、CD13、cMPO、CD117为髓系常见且敏感的抗原。伴有CD19、CD7表达的患者,化疗后完全缓解率低于阴性者。     

严重急性呼吸综合征的临床特点及遗留肺纤维化相关因素分析

目的分析严重急性呼吸综合征(SARS)患者急性期的临床特点及诊治经验,探讨SARS患者遗留肺纤维化病变的相关因素。方法对54例SARS患者的急性期临床资料进行回顾性分析,对各组数据进行统计学分析。结果38例(70.4%)患者有明确的SARS接触史,潜伏期为1~16 d,平均(6±4)d。92.6%的患者以发热为首发症状。氧合指数(PaO2/FiO2)≤200者14.8%(7/47),PaO2/FiO2介于200~300之间者42.6%(20/47)。白细胞总数、淋巴细胞绝对值计数及血小板降低者分别为24.1%、46.2%和10.0%,心肌酶异常升高的患者占44.4%。CT影像以不规则实变融合病灶或伴支气管充气征(61.1%)及双肺弥散性磨玻璃影或碎石路样改变(53.7%)为主。病灶常累及双肺,以双下肺受累为主。重症SARS组应用激素和无创通气治疗的比例(100%、55.6%)均高于普通SARS组(77.8%、9.0%)(P<0.01和P<0.05)。营养支持及提高免疫力等治疗是有效的辅助措施。肺纤维化遗留组急性期的肺部病灶累及肺叶数量多、氧合指数低,与无肺纤维化遗留组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论SARS的发病与密切接触病人有关,肺CT对于早期诊断至关重要,综合治疗措施可以取得很好的治疗效果。急性期肺部病灶累及肺叶数量多、氧合指数低的SARS患者易遗留肺纤维化。     

Application of CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry in the classification of acute leukemia — An analysis of 139 cases

Summary In order to study the significance of flow cytometry immunophenotyping in the diagnosis of acute leukemia, CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry (FCM) was utilized to analyze the immunophenotypes of 139 cases of acute leukemia. 139 cases of acute leukemia were enrolled in our hospital from April 1998 to April 2000. Morphological analysis and FCM immunophenotypic tests were conducted on all cases. Our results showed that CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry immunophenotyping could reflect the origin of leukemic cells specifically. It is one of the important methods for the diagnosis of ALL, AML, and HAL. CD45/SSC gating multiparameter FCM analysis is a good technique for immunophenotyping. FCM immunophenotypic analysis can help improve the diagnosis and classification of acute leukemia, and extend the use of FCM in clinical practice.