金芪降糖片HPLC指纹图谱的研究

目的 建立金芪降糖片的HPLC指纹图谱,为金芪降糖片的质量控制及其作用机理的初探提供依据.方法 采用HPLC测定了11批不同批次的金芪降糖片样品,通过对检测波长、色谱柱及流动相的选择,确定最佳检测条件,且运用中药指纹图谱相似度评价软件分析其结果.结果 11批金芪降糖片的HPLC指纹图谱共有峰特征明显,但不同批次的指纹图谱略有差异.结论 该方法操作简单、快捷、结果准确、重现性好,可用于金芪降糖片的质量控制.     

姜黄素与牛血清白蛋白结合的反应机制研究

目的：研究中药化学成分姜黄素与牛血清白蛋白（BSA）结合的反应机制。方法：在不同温度下采用荧光光谱法研究了姜黄素与BSA~．E作用,实验数据采用Linewearver—Burk静态猝灭公式处理,计算了不同温度下的结合常数及结合位点数n。结果：姜黄素对BSA有猝灭作用,二者结合常数较大,可形成一个结合位点,且温度对结合常数Ka的影响较小。结论：姜黄素对BSA内源荧光的猝灭机制为静态猝灭。     

金芪降糖片对血管内皮细胞损伤影响的研究

本试验运用电子顺磁共振法研究金芪降糖片对自由基的清除能力;以培养人脐静脉内皮细胞为靶细胞,观察金芪降糖片作用后的糖尿病大鼠血清对内皮细胞受损的保护。1药品与试剂EPR SPECTROMETER EMX-E德国Bruker公司出品。黄嘌呤(HPX;Alfa公司);二乙三胺五乙酸(DTPA;Sigam公司);黄嘌     

金芪降糖片对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

[目的]观察金芪降糖片对糖尿病大鼠肾组织晚期糖化终末产物受体(RAGE)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。[方法]测定造模后20周糖尿病组(DM组)、糖尿病给药组(DD组)和对照组(N组)大鼠24 h尿微量白蛋白定量(UMA)、平均血糖(APG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、内生肌酐清除率(Ccr)、RAGE、TGF-β1、VEGF、CTGF水平及肾脏形态学改变,评价金芪降糖片的肾保护作用。[结果]与DM组相比,DD组平均血糖、TC差异无统计学意义,Ccr高于DM组,而UMA、TG、RAGE、TGF-β1、VEGF、CTGF水平降低,差异有统计学意义;光镜和电镜下,DD组肾组织损伤程度均轻于DM组。[结论]金芪降糖片可以减轻糖尿病慢性肾损伤的程度,其肾保护作用可能与其降脂及降低RAGE、TGF-β1、VEGF、CTGF水平有关。     

丹参酚酸与牛血清白蛋白结合反应的特性和结构相关性研究

目的研究丹参酚酸与牛血清白蛋白的结合反应特性及其结构相关性。方法运用荧光和紫外光谱法研究了4种小分子天然丹参酚酸类化合物迷迭香酸、紫草酸、丹参酚酸A、丹参酚酸B(SAⅠ~Ⅳ)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果计算得到各SA-BSA结合体系的静态表观结合常数(KA)、结合位点数(n)、能量转移效率(E)、空间距离(r)及热力学常数ΔG、ΔH和ΔS。4种丹参酚酸均能与BSA结合形成非共价复合物,通过静态猝灭和非辐射能量转移共同导致BSA内源荧光的猝灭。结论丹参酚酸A(SAⅢ)主要通过疏水作用力与BSA结合,而其余3种丹参酚酸与BSA的结合则主要由氢键和范德华力驱动。SA-BSA相互作用体系的结合强度可以用综合反应参数[Y=lg(KA×E×n/r)]来表征,其在数值上按SAⅢ→SAⅣ→SAⅡ→SAⅠ的顺序递减,并与分子中所含游离羟基数目和分子体积等结构特性密切相关,可以利用脂-水分配系数(clogP)和单位相对分子质量下的拓扑分子极性表面积(tPSA/Mr)来预测丹参酚酸化合物与蛋白的结合程度。     

高效液相色谱-超滤法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷的蛋白结合率

目的建立毛蕊花糖苷血浆蛋白结合率的测定方法,比较常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷蛋白结合率 的异同。方法将大鼠置于低压低氧动物实验舱中,于海拨7 500 m 下缺氧暴露3 d 制备缺氧大鼠模型。采用 超滤法处理样品,结合高效液相色谱（HPLC）法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷游离型药物浓度（Cf）和 总药物浓度（Ct）,并考察超滤膜非特异性结合率（NSB）,对Cf 进行矫正后,计算血浆蛋白结合率。结果大鼠 血浆中毛蕊花糖苷浓度为3、6、12 μg·mL-1 时,毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（62.02± 8.51）%、（60.17±5.59）%和（62.60±3.77）%;与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为（32.79±4.20）%、（33.16± 1.74）%和（32.72±2.20）%,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆蛋白属于 中强度结合,且在研究的浓度范围内,不具浓度依赖性,而毛蕊花糖苷与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于 常氧大鼠血浆。     

金芪降糖片治疗2型糖尿病大鼠的血清代谢组学研究

目的：本研究采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,探讨了金芪降糖片(JQJT)治疗2型糖尿病(T2DM)的作用机制。方法：采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)诱导T2DM模型,检测大鼠体质量、血糖等指标。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析对照组、模型组、阳性药组、正常给中药组、模型给中药组大鼠的血清样品代谢谱。采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对差异代谢物进行筛选和鉴别。结果：从血清中筛选出15个潜在的生物标志物,并利用Met PA构建了1条相关的代谢通路,即甘油磷脂代谢通路。在2型糖尿病(T2DM)大鼠血清中,溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)(18∶0)和LysoPC(16∶1)等9种代谢物下调,LysoPC(18∶1)和LysoPC(20∶0)等6种代谢物上调。结论：金芪降糖片给药组能使这15种潜在的生物标志物有良好的回调趋势,推测金芪降糖片可能通过调节脂代谢紊乱而缓解T2DM的进程。     

荧光法研究姜黄素与牛血清白蛋白的结合作用

目的研究姜黄素(CU)与牛血清白蛋白(BSA)之间的作用机制。方法采用变温试验研究二者之间的猝灭类型,求算结合数(n)和结合常数。结果静态猝灭是导致BSA荧光猝灭的主要原因,CU与BSA结合反应的平衡常数(K0)为5.26×106(21℃)和4.60×106(31℃),n为1.35。通过计算结合反应的热力学参数,推断CU与BSA之间的作用力以疏水力为主。结论荧光法适合于研究CU与蛋白质的结合反应,具有简便快速、灵敏度高等优点。     

HPLC测定金银花及金芪降糖片中6种成分的含量

目的:建立同时测定金银花及金芪降糖片中6种成分的反相高效液相色潽法。方法:色谱柱为依利特ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速1 mL.min-1;检测波长355 nm;柱温30℃。结果:6种成分在上述条件下分离良好。绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷和4,5-O-双咖啡酰奎宁酸分别在3.24～64.80,0.24～4.79,1.22～24.40,0.09～0.44,0.68～13.55,1.19～23.87 mg.L-1线性良好,平均回收率均大于97%(RSD<3%,n=9)。结论:本方法操作简单、结果准确、回收率高、重复性好,可用于金芪降糖片及其相关制剂的质量控制。     

金芪降糖片对糖尿病引发的认知功能障碍的影响及机制

目的:探讨金芪降糖片对糖尿病引发的认知功能障碍的影响,并初步探讨其作用机制。方法:选用C57BL/6J小鼠,采用ip链脲佐菌素(STZ,120 mg·kg-1)复合高脂饮食的方法诱导复制2型糖尿病模型。利用Morris水迷宫试验筛选出存在糖尿病认知功能障碍的小鼠,并随机将其分为4组,每组14只,分别为模型组,阳性药组(盐酸二甲双胍0.45 g·kg-1),金芪降糖片高(2倍临床等效剂量1.31 g·kg-1)及低(临床等效剂量0.655 g·kg-1)剂量组。正常组和模型组均给予等量蒸馏水,连续ig给药10周。在给药前及给药10周后,各测一次小鼠的空腹血糖(FBG)和体重。10周后,Morris水迷宫实验检测小鼠学习忆能力;尼式染色观察海马CA1区形态学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测小鼠海马组织突触素(SYN)mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组糖尿病小鼠FBG明显升高,记忆能力下降,海马神经损伤明显,血清BDNF水平明显降低,海马SYN mRNA表达水平明显降低,体重明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,金芪降糖片高剂量组可降低糖尿病小鼠FBG,改善学习记忆能力,改善海马神经损伤状况,显著升高血清BDNF水平,显著增加海马SYN mRNA表达水平,各治疗组小鼠体重较稳定,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:金芪降糖片可以改善糖尿病小鼠的学习记忆能力,可能是通过上调BDNF含量对海马神经细胞保护及营养修复,并促进海马SYN mRNA表达上调调节海马神经突触可塑性实现的。     

金芪降糖片组分体外抗糖尿病的作用及机制

目的:探讨金芪降糖片各组分体外抗糖尿病的作用及机制。方法:采用DPPH自由基清除,活性氧自由基清除,AGEs形成抑制,α-糖苷酶抑制,醛糖还原酶抑制,脂肪酶抑制,脂多糖(LPS)诱发小鼠腹腔巨噬细胞活化一氧化氮(NO)释放抑制建立系统的体外抗糖尿病活性评价筛选模型,考察金芪降糖片的4个标准组分芪总黄酮、黄芪总皂苷、金银花总有机酸、黄连总生物碱对以上各模型的作用。结果:黄芪总黄酮、金银花总有机酸、黄连总生物碱具有清除DPPH自由基和活性氧自由基活性;各组分对AGEs形成无明显抑制活性;黄芪总黄酮、金银花总有机酸对糖苷酶有抑制活性;黄芪总黄酮、黄芪总皂苷、金银花总有机酸对醛糖还原酶有抑制活性;黄芪总黄酮、黄芪总皂苷、金银花总有机酸对胰脂肪酶具有抑制活性;黄芪总皂苷、黄连总生物碱对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞释放NO有抑制作用。结论:金芪降糖片具有多组分多靶点协同抗糖尿病的作用,机制涉及抑制α-糖苷酶、抑制脂肪酶、清除自由基、抑制醛糖还原酶、抑制NO释放。     

松果菊苷的血清蛋白质结合机制研究

目的 研究血清白蛋白（serum albumin,SA）结合松果菊苷（echinacoside,ECH）的分子作用机制。方法 生理条件下,光谱法测定药物与蛋白质的结合参数,分子模拟构建ECH与牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）的结合模型,考察药物与SA结合机制。结果 构建的药物与BSA结合模型表明,药物与蛋白质的相互作用力主要是氢键和范德华力,兼有疏水作用力。光谱实验表明ECH与BSA的相互作用为静态结合过程,结合强度较强,ECH与BSA分子的结合距离（r）值较小,说明发生了能量转移现象。ECH对BSA的结构域微区构象产生影响,使结合位域的疏水性发生改变。分析荧光相图得出ECH与BSA反应构象型态的变迁为“二态”模型。BSA与ECH相互作用的热力学参数表明ECH与BSA之间是以氢键和范德华力为主的分子间作用。荧光偏振定量证明了BSA与ECH相互作用过程中生成了非共价复合物。结论 光谱实验与计算机模拟结果一致,可为研究ECH与BSA相互作用机制提供一定的参考。     

RP-HPLC同时测定黄连及金芪降糖片中3种小檗型生物碱

目的:建立同时测定黄连及金芪降糖片(金银花、黄连、黄芪)中3种小檗型生物碱(药根碱、巴马汀、小檗碱)的反相高效液相色谱法.方法:色谱柱为Diamomil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钾(30:70)为流动相,检测波长为345 nm,流速为1.0 mL/min.结果:在上述条件下测定黄连中药根碱、巴马汀、小檗碱的平均含量分别1.34%、1.61%、7.12%,金芪降糖片中药根碱、巴马汀、小檗碱的平均含量分别为0.35%、0.64%、1.54%.结论:本方法操作简单、结果准确、回收率高、重现性好,可用于黄连及金芪降糖片的质量控制.     

Chemical profiling of Jinqi Jiangtang tablets by HPLC-ESI-Q-TOF/MS

AIM： To profile the chemical constituents in Jinqi Jiangtang tablets. METHOD： Based on the chromatographic retention behavior, fragmentation patterns of chemical components, and published lit- eratures, a high-performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization quadrnpole time-of-flight tandem mass spectrometry （HPLC-ESI-Q-TOF/MS） method was established to characterize and identify components in Jinqi Jiangtang tablets. RESULTS： A total of 52 chemical compounds, including eight iridoid glycosides, seven phenolic acids, twelve alkaloids, six fla- vonoids, and nineteen saponins, were identified in Jinqi Jiangtang tablets. CONCLUSION： The established method could serve as a powerful tool for structural characterization and quality control of this Chinese herbal preparation.     

金芪降糖片配伍对小檗碱大鼠体内药动学的影响

目的探讨金芪降糖片中黄连、黄芪和金银花配伍对主要活性成分小檗碱体内药动学的影响。方法雄性SD大鼠分别单次ig金芪降糖片(0.42 g/kg,相当于5 mg/kg盐酸小檗碱)、盐酸小檗碱(5 mg/kg)+绿原酸(3 mg/kg)及盐酸小檗碱(5 mg/kg),采用LC-MS/MS法检测不同时间点血浆中盐酸小檗碱的血药浓度,并采用非房室模型、统计矩法计算盐酸小檗碱在大鼠体内的药动学参数。结果各组MRT0~∞、tmax及t1/2无显著变化;盐酸小檗碱组AUC0~∞及Cmax最大,绿原酸与盐酸小檗碱合用组AUC0-∞及Cmax最小,但其CLz和Vz显著高于其他2组(其他2组无显著变化)。结论绿原酸与小檗碱合用可以降低小檗碱的体内吸收、促进小檗碱的血浆清除及体内分布。黄芪、金银花与黄连配伍可能对小檗碱的血浆消除与体内分布存在相反的影响。     

金芪降糖片与保护血管内皮、糖尿病肾病及胰岛素抵抗相关研究进展

金芪降糖片是一种治疗2型糖尿病的中成药,本文对近年来研究发现金芪降糖片在保护血管内皮、糖尿病肾病及胰岛素抵抗方面的作用做归纳整理,为其治疗糖尿病相关并发症提供证据。     

养阴降糖片的薄层色谱鉴别

目的：控制养阴降糖片的质量。方法：用薄层色谱法鉴别黄芪、党参、知母、葛根、虎杖。结果：定性方法简便、快速、准确、可靠,重现性好。结论：该方法可作为养阴降糖片的质量控制方法。