结直肠腺癌中TKT的表达及临床意义

目的 探讨结直肠腺癌中转酮醇酶(transketolase,TKT)的表达及与临床病理特征的关系.方法 通过Oncomine和GEO数据库分析TKT基因在结直肠腺癌和癌旁组织中的表达.收集配对结直肠腺癌及癌旁正常肠黏膜组织,分别采用qRT-PCR、Western blot法检测TKT mRNA和蛋白表达,运用免疫组化法...     

宫颈腺癌前驱病变的组织学及免疫组织化学观察

目的：探讨宫颈腺癌前驱病变的诊断和鉴别诊断。方法：对101例病理诊断为宫颈腺癌前驱病变－宫颈腺上皮内肿瘤的标本进行病理形态学观察,同时采用免疫组织化学SP法进行癌胚抗原（CEA）、增殖细胞核抗原（PCNA）、雌激素受体（ER）及人乳头瘤病毒（HPV6／11）的检测,结果：病理形态学分级标准根据核染色质的增多、核的异型性及细胞内粘液的数量将宫腺上皮内肿瘤分为3级,宫颈原位腺癌纳入Ⅲ级宫颈腺上皮内肿瘤中,其中46．53％（47／101）的病例合并鳞状上皮内病变或宫颈原位癌。免疫组织化学检查结果：CEA阳性率为44．55％（45／101）,此外37．62％（38／101）阳性部位表浅、仅局限于细胞的顶端及腔缘;PCNA强阳性率为63．54％（61／96）,在Ⅲ级宫颈腺上皮内肿瘤中全部呈强阳性表达;ER阳性率为81．48％（66／81）,但在部分阳性病例中ER不是均匀分布,仅局限阳性;HPV6／11在Ⅰ－Ⅲ级宫颈腺上皮内肿瘤中的检出率分别为34．09％（30／88）、31．82％（28／88）和3．41％（3／88）。结论：宫颈腺上皮内肿瘤的病理组织学分级具有重要的临床意义,CEA、PCNA及ER等免疫组织化学表达在诊断及鉴别诊断中具有一定的参考价值。     

结直肠腺癌中Fascin-1、β-catenin蛋白表达及其与K-ras基因突变状态的相关性

目的探讨结直肠腺癌中Fascin-1、β-catenin蛋白的表达和K-ras基因突变状态,分析三者在结直肠腺癌侵袭转移过程中的相关性。方法应用免疫组化En Vision两步法检测Fascin-1、β-catenin蛋白的表达,采用ARMS荧光定量PCR法检测Kras基因突变情况,分析Fascin-1、β-catenin蛋白的表达及K-ras基因突变与结直肠腺癌临床病理特征的关系,并对三者进行相关性分析。结果 112例结直肠腺癌中,Fascin-1蛋白高表达率为27. 7%(31/112),显著高于癌旁正常组织(P 0. 01);β-catenin蛋白核的高表达率为29. 5%(33/112),显著高于癌旁正常组织(P 0. 01); Fascin-1蛋白的高表达及β-catenin蛋白核的高表达与淋巴结转移(P=0. 022,P=0. 027)、TNM分期(P=0. 042,P=0. 019)相关; Fascin-1蛋白的高表达与肿瘤位置相关(P=0. 004); K-ras基因突变39例,突变率为34. 8%(39/112); K-ras基因突变与患者年龄、性别、肿瘤位置、分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无关(P 0. 05); Fascin-1蛋白高表达、β-catenin蛋白核表达与K-ras基因突变存在相关性(rs=0. 252,rs=0. 258,P 0. 05); Fascin-1蛋白高表达与β-catenin蛋白核表达呈正相关(rs=0. 213,P 0. 05)。结论 Fascin-1蛋白和β-catenin蛋白参与结直肠腺癌的侵袭转移,与K-ras基因突变相关; K-ras可能通过β-catenin蛋白促进Fascin-1蛋白的表达,从而为K-ras基因突变型结直肠癌的靶向治疗提供新的研究方向。     

结直肠肿瘤中CXCR7、NDRG1的表达

目的 探讨CXCR7、NDRG1蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其对结直肠肿瘤发生、发展的影响.方法 采用免疫组化染色技术观察人结直肠正常黏膜组织、结直肠腺瘤、无淋巴结转移(无LNM)结直肠腺癌组织及伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠腺癌组织中CXCR7、NDRG1蛋白的表达水平.结果 (1)结直肠正常黏膜组织、腺瘤组织、无LNM结直肠腺癌组织及有LNM结直肠腺癌组织中CXCR7蛋白表达逐渐增高,其中后者CXCR7的表达与其他组别相比,差异有统计学意义(P＜0.05);CXCR7的表达与淋巴结转移呈正相关关系(rs=0.341),与肿瘤TNM分期有关(P＜0.05).(2)NDRG1蛋白表达逐渐增高,差异均有统计学意义(P＜0.05);NDRG1的表达与淋巴结转移呈正相关关系(rs＝0.402),与肿瘤TNM分期有关(P＜0.05).(3)CXCR7与NDRG1在结直肠肿瘤中的表达呈正相关关系(P=0.003,rs=0.334),2者均具有诊断准确性.结论 CXCR7、NDRG1在结直肠腺癌发生发展整个过程的不同阶段起着重要的作用,两者在促进肿瘤转移方面具有正相关性.     

典型遗传性非息肉病性结直肠癌家系临床病理及分子遗传学分析

目的 了解国人遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）的临床病理及分子遗传学特征。方法 用微解剖、微卫星不稳定性分析、免疫组织化学及直接DNA测序方法,检测4例HNPCC患者的肿瘤组织微卫星不稳定性状态、错配修复基因hMSH2及hMLH1蛋白水平的表达变化以及生殖细胞突变。结果 4例先证者5个肿瘤组织均表现为高度微卫星不稳定性,3例表现为hMSH2蛋白表达异常,1例表现为hMLH1蛋白表达异常。检测出3个生殖细胞病理性突变。结论 中国人典型HNPCC病例中错配修复基因突变率较高。高度微卫星不稳定性、错配修复基因hMSH2及hMLH1蛋白表达异常与错配修复基因生殖细胞突变密切相关。微卫星不稳定性和错配修复基因蛋白分析可作为DNA测序前的筛选手段。     

结直肠锯齿状病变104例形态学及细胞增殖活性的观察

目的 探讨结直肠锯齿状病变增生性息肉(HP)、广基锯齿状腺瘤(SSA)、传统锯齿状腺瘤(TSA)的临床特征,组织病理学诊断,鉴别诊断及细胞增殖状况.方法 复习北京军区总医院2002年11月至2007年12月2628例病理诊断为结直肠息肉/腺瘤的病理切片,从中收集104例结直肠锯齿状病变,综合文献标准进行分类,观察各类型病变临床病理学特征,以及细胞增殖指数Ki-67的表达特点.结果 104例锯齿状病变中包括HP 60例,TSA 20例,SSA 11例,混合性锯齿状息肉/腺瘤7例,混合件锯齿状息肉/腺瘤+普通腺瘤6例.对各型组织学特征进行总结归纳.免疫组织化学显示正常结肠黏膜Ki-67阳性细胞位于基底(隐窝下1/3),呈间隔分布;51例HP中阴性或阳性细胞数最<25%的40例(78%),大多数阳性位于隐窝下1/3(基底);15例TSA中11例阳性细胞数量在25%～50%或>50%,其中大多数位于隐窝中1/3,少数(2例)隐窝弥漫分布;SSA的数量与分布和TSA相似;相比之下低级别管状腺瘤26例中24例(92%)阳性数量>50%,18例(69%)分布于隐窝表面,6例(23%)弥漫分布;高分化管状腺癌10例全部呈弥漫分布,7例Ki-67阳性指数在70%左右.阳性细胞多少与分布部位差异有统计学意义,阳性细胞)χ2=34.601,P=0.000,阳性分布χ2=63.077,P=0.000.结论 HP、SSA、TSA组织学鉴别诊断的主要难点是在HP与SSA两者之间,SSA锯齿状隐窝基底扩张结构特征是诊断的关键,比细胞学改变更重要.TSA与SSA的主要形态鉴别在于TSA锯齿状腺体有明显异型增生(普通腺瘤样增生)以及几乎所有TSA异型增生的腺体都不与黏膜肌相邻(ECF现象).细胞增殖指数Ki-67数量及分布的表达可为HP、SSA及TSA鉴别诊断提供一定帮助.锯齿状腺瘤中TSA和SSA的Ki-67表达指数都比普通腺瘤要低.     

结直肠腺瘤及腺癌组织中FOXO1表达及其临床意义

目的检测结直肠腺瘤及腺癌组织中转录因子FOXO1的表达,在组织学水平上初步探讨FOXO1在结直肠腺瘤癌变过程中的作用及其与临床病理特征的关系。方法采用Western blot法免疫组化SP两步法检测146例结直肠腺瘤、48例结直肠腺癌及48例癌旁组织中FOXO1蛋白的表达水平。结果 FOXO1在结直肠腺瘤及腺癌组织中的表达明显低于正常组织,组间比较差异有统计学意义(P0.01)。结直肠腺瘤组织中FOXO1表达与肿物大小相关,腺癌组织中FOXO1表达与肿瘤分化程度相关。结论 FOXO1在人类肠道癌前病变(腺瘤)及腺癌组织细胞核表达减少和缺失,可能是导致结肠腺癌发病的机制之一,其在结直肠癌的发生、发展过程中起抑癌基因的作用,有望成为下一个潜在的临床治疗靶点。     

DCC、P53及VEGF在结直肠腺癌癌组织中的表达

目的检测DCC、P53及VEGF在41例结直肠癌中的表达情况，以探讨三者表达的相关性。方法应用免疫组化二步法检测。结果41例结直肠癌的组织中，DCC表达阳性10例，阳性率为24．4％，而P53与VEGF的阳性率分别为63．4％及65．9％。DCC基因表达与P53、VEGF无明显相关性。结论P53与VEGF表达存在明显相关关系（P〈0．05）。     

大肠癌及癌前病变的粘液组化研究

应用粘液组化方法AB—PAS、HID—AB、OR—AB、PAT—KOH—PAS、PATB—KOH—PAS显示大肠上皮分泌粘液的类型。结果发现:大肠慢性炎、大肠克隆病及炎性息肉、增生性息肉、幼年性息肉分泌粘液类型与正常粘膜相似(P>0.05),而伴有异型增生的溃疡性结肠炎、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、家族性息肉、腺瘤癌变、大肠癌及癌旁粘膜粘液分泌性质与量均有变化。在这些病变中氮乙酰化及含有邻位羟基的氧乙酰化粘液阳性率明显高于正常粘膜(P<0.05)。其检出阳性率与异型增生的程度有关。笔者认为应用粘液组化方法分析大肠癌前病变粘液性质对于判断粘膜上皮恶性倾向提供了有价值的手段。     

结直肠腺癌DCC基因微卫星丢失与预后

结直肠腺癌ＤＣＣ基因微卫星丢失与预后赵坡胡颖川王德文王芝萍徐兴钊易平勇高亚兵杨光华结直肠癌缺失基因（ｄｅｌｅｔｅｄｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｒｃｉｎｏ－ｍａ，ＤＣＣ）定位于１８号染色体长臂２区１带（１８ｑ２１）。近年来国外学者发现结直肠癌中该基因水...     

人乳头状瘤病毒感染与宫颈癌前病变的关系

目的 探讨人乳头状瘤毒（ＨＰＶ）感染与宫颈湿疣、癌前病变的相关性。方法 对１７９例宫颈细胞涂片异常患者行宫颈多点活检,病理形这观察,其中１２８例同时采用ＰＣＲ方法检测ＨＰＶ－ＤＮＡ,１０例行原位杂交分析。结果（１）形态学观察：宫颈湿疣多为扁平型（９７．３％）;除表现经典的诊断性控空细胞（３９．７％）外,国可见异型性明显的非典型性控空细胞（６０．３％）;宫颈湿疣常伴宫颈上皮内肿瘤（ＣＩＮ,４２．５％     

Promoter hypermethylation of multiple genes in early gastric adenocarcinoma and precancerous lesions

Promoter hypermethylation is an alternative mechanism of gene silencing in human cancers including gastric cancer. To date, several reports on methylation of various genes in gastric cancer have been published. However, most of these studies have focused on cancer tissues or only a single gene. In this study, we determined the methylation frequency of 5 genes, including p16, Runx3, MGMT, DAPK, and RASSF1A, by methylation-specific polymerase chain reaction, in a series of formalin-fixed paraffin-embedded tissues including normal gastric mucosa (n = 20), intestinal metaplasia (n = 14), gastric epithelial dysplasia (n = 27), and early gastric adenocarcinoma (n = 16). Immunohistochemistry was used to determine expression of MGMT and RASSF1A protein. All 20 histologically normal gastric biopsy specimens were methylation-free for all 5 genes. Aberrant hypermethylation of RASSF1A was not detected in any case from intestinal metaplasia to early gastric adenocarcinoma. The methylation rate of the other 4 genes increased with the histological progression from intestinal metaplasia to gastric epithelial dysplasia, to early gastric adenocarcinoma. Methylation was detected in 28.6% of intestinal metaplasia (4/14), in 77.8% of gastric epithelial dysplasia (21/27), and in 87.5% of early gastric adenocarcinoma (14/16). The average number of methylated genes in intestinal metaplasia, gastric epithelial dysplasia, and early gastric adenocarcinoma was 0.43, 1.3, and 1.8, respectively. Concurrent methylation in 3 or more genes was found in 7.1% of intestinal metaplasia, 11.1% of gastric epithelial dysplasia, and 31.3% of early gastric adenocarcinoma. No correlation was found between hypermethylation and other clinicopathologic parameters such as age, sex, Helicobacter pylori infection, and location of lesions. However, we observed a significant association between hypermethylation of p16 and MGMT and elevated serum carcinoembryonic antigen level. No reduction or loss of RASSF1A expression was observed in our study. Weak or loss of MGMT expression was found in 20 lesions and was significantly associated with promoter hypermethylation (P < .01). Our results suggest that promoter hypermethylation of the p16, Runx3, MGMT, and DAPK genes may play an important role in the pathogenesis of gastric precancerous lesions and early gastric adenocarcinoma. Hypermethylation and inactivation of RASSF1A, however, could be a later event in malignant transformation. Further studies are warranted to determine whether the presence of promoter hypermethylation in gastric precancerous lesions is associated with higher risk of subsequent cancer development and how to interrupt the malignant transition from intestinal metaplasia and gastric epithelial dysplasia to early gastric adenocarcinoma by developing some gene-targeting therapies that may reverse aberrant methylation.     

胃癌及癌前病变的克隆性分析及其与Ki-67表达的相关性

目的 通过人雄激素受体基因位点克隆性分析技术对胃癌及其癌前病变进行克隆性分析,探讨胃癌发生发展过程中单克隆发生率的变化趋势及与Ki-67表达之间的关系及其意义.方法 肠型胃癌根治标本24例,胃镜活检标本150例.采用激光显微切割技术准确获取病变腺上皮细胞,基因组DNA经甲基化敏感的Hpa Ⅱ限制性内切酶消化后,PCR扩增人雄激素受体基因,采用基因扫描技术对PCR产物进行分析.应用免疫组织化学EnVision二步法检测Ki-67在以上病变组织中的表达,并探讨其与克隆性分析结果的相关性.结果 单克隆发生率在胃黏膜肠上皮化生(15.63%,5/32)、低级别上皮内瘤变(22.22%,10/45)、高级别上皮内瘤变(69.44%,25/36)及肠型胃癌(100.0%,20/20)中逐渐增加,除胃黏膜肠上皮化生和低级别上皮内瘤变之间的差异没有统计学意义(P=0.47),其他各组之间差异均有统计学意义(P<0.01).Ki-67的阳性表达率随着病变的发展而不断升高.低级别上皮内瘤变组织中单克隆病例的Ki-67的阳性表达率显著高于多克隆病例(P<0.01),且克隆性与Ki-67的阳性表达率之间存在显著相关性(P<0.01).结论 单克隆的发生率及Ki-67的阳性表达率在胃癌发生发展过程中逐渐增加.且单克隆病变的发生与Ki-67的表达存在一定的相关性,两者的联合可用于胃癌的早期诊断及易感性的预测.     

结直肠锯齿状病变发病情况及其恶性潜能的病理学观察

目的 分析结直肠锯齿状病变发生情况,并对锯齿状腺瘤与普通腺瘤的恶性潜能进行病理学比较观察.方法 收集北京军区总医院、海军总医院、解放军第二五二医院、河北省巨鹿县医院、北京中医药大学东直门医院约5年中病理诊断为结直肠各类息肉和腺瘤的病例5347例,进行回顾性分析,经3名病理医师4～5轮阅片从中筛选出腺体具有锯齿状特征的息肉及腺瘤共258例,按文献标准分类,观察传统锯齿状腺瘤(TSA)及普通腺瘤异型增生程度.随机收集普通腺瘤(管状腺瘤160例及绒毛管状腺瘤27例)187例,浸润性腺癌36例作为对照.对部分TSA、广基锯齿状腺瘤(SSA)、管状腺瘤、浸润性腺癌进行免疫组织化学(Max Vision法)Ki-67、p53、β-catenin染色.结果 五所医院的5347例结直肠息肉/腺瘤中共筛选出锯齿状病变258例,占4.8%.其中增生性息肉(HP)112例,占锯齿状病变43.4%(112/258);TSA 78例,占锯齿状病变30.2%(78/258);SSA26例,占锯齿状病变10.1%(26/258);锯齿状病变合并高级别黏膜内肿瘤及浸润性腺癌11例,占锯齿状病变4.3%(11/258).重点观察62例TSA的异型增生等级.62例TSA呈中度异型增生13例,高级别黏膜内肿瘤4例,浸润性腺癌癌旁有TSA成分2例.中度以上异型增生占30.6%(19/62),高级别黏膜内肿瘤和浸润性腺癌占9.6%(9/62).收集的普通腺瘤187例,其中中度异型增生27例,高级别黏膜内肿瘤12例,13例在不同部位伴有浸润性腺癌,中度以上异型增生占27.8%(52/187),高级别黏膜内肿瘤和浸润性癌占13.3%(25/187).TSA与普通腺瘤比较X2=19.373,P=0.000.北京军区总医院19个月期间结直肠同时、不同部位具有锯齿状腺瘤及普通腺瘤13例(管状或绒毛管状腺瘤),其中锯齿状腺瘤13例中12例旱轻度异型增生,1例呈轻-中度异型增生;13例管状腺瘤中7例呈轻度异型增生,2例呈轻-中度异型增生,4例呈中度异型增生(两者相比X2=5.432,P=0.052).对两组病例进行了Ki-67、p53、β-catenin检测,在锯齿状腺瘤(TSA、SSA)和普通腺瘤(管状)中的表达差异无统计学意义(P>0.05),但锯齿状腺瘤与腺癌表达差异有统计学意义(P=0.000).结论 结直肠锯齿状病变发病率似较低.锯齿状腺瘤有明显恶性潜能.与普通腺瘤相比,锯齿状腺瘤合并高级别黏膜内肿瘤及浸润性癌的病例有所减少.     

人核糖体蛋白S15a在大肠癌组织中的表达及其意义

 目的 研究人核糖体蛋白S15a（RPS15a）在大肠癌组织中的表达情况及其与大肠癌发生发展的关系。方法 大肠癌及癌旁正常组织取自82例术前未经放疗、化疗患者的手术切除标本。利用RPS15a多克隆抗体进行免疫组织化学 SP染色，检测RPS15a在大肠癌及正常组织中的表达。结果 RPS15a阳性表达率在大肠癌组织中为72.0%（59/82），在癌旁正常组织中为40.2%（33/82），二者间差异有统计学意义（χ2 = 17.76，P < 0.05）；在浆膜浸润大肠癌组织中为80.8%（42/52），在无浆膜浸润大肠癌组织中为56.7%（17/30），二者间差异有统计学意义（χ2 = 5.47，P < 0.05）；在无淋巴结转移者为58.3%（21/36），在有淋巴结转移者为82.6%（38/46），二者间差异有统计学意义（χ2 = 5.89，P < 0.05）。结论 RPS15a在大肠癌组织中呈高表达状态，RPS15a基因可能在大肠癌的发生、发展中起重要作用。     

肺癌和肺癌前病变组织中维甲酸受体的表达

目的： 探讨维甲酸受体（RAR）在肺癌癌前病变（支气管黏膜上皮不典型增生）和肺癌病变中的表达。方法: 在40例正常肺组织、41例支气管黏膜上皮不典型增生组织及143例肺癌患者手术标本中,用免疫组化的方法检测RAR的表达,分析RAR基因在肺癌变不同阶段间的变化。结果: 80.0%（32/40）的正常肺组织中可检测到RAR基因的蛋白表达;68.3%（28/41）的支气管黏膜上皮不典型增生组织和57.6%（83/143）的肺癌组织中可检出RAR（P<0.05）;且随着肺组织癌变过程的变化,RAR基因蛋白的表达呈逐渐降低的趋势（P<0.01）。吸烟者RAR蛋白检出率低于非吸烟者。结论: RAR表达下降与肺组织癌变过程密切相关,吸烟暴露可导致RAR基因表达降低,检测RAR基因表达下降可能为肺癌的早期临床诊断提供科学依据。     

Prognostic significance of p53 expression in relation to DNA ploidy in colorectal adenocarcinoma

p53 expression, DNA ploidy and S-phase fraction were analysed retrospectively in colorectal adenocarcinomas from 293 patients in whom the long-term outcome was known. The frequency of nuclear p53 staining was increased in non-diploid tumours (42%) when compared with diploid tumours (33%). Cytoplasmic p53 positive tumours were more common in the proximal colon (32%) than in the distal sites (21%). In univariate survival analysis, nuclear p53 and cytoplasmic staining were significantly associated with poor prognosis in patients with Dukes' A-C tumours. The patients showing both nuclear and cytoplasmic p53 staining had the poorest survival and the patients with tumours negative in both the nucleus and cytoplasm showed the best prognosis. The patients with tumours positive in the nucleus alone or in the cytoplasm alone presented an intermediate survival. In multivariate survival analyses, nuclear p53 expression, cytoplasmic p53 expression and DNA ploidy were prognostic indicators independent of Dukes' stage and each other. Further analysis suggested that the prognostic importance of cytoplasmic p53 expression was greater in diploid than in non-diploid tumours. We conclude that nuclear p53 expression, cytoplasmic p53 expression and DNA ploidy provide important prognostic information in colorectal adenocarcinomas.