乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群比例和Th1/Th2细胞因子水平检测及其临床意义

目的：研究各型乙型肝炎患者和健康者外周血T淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子水平变及其临床意义,为诊断、治疗疾病提供实验依据。方法：采用流式细胞仪检测34例乙型肝炎患者（其中慢性乙型肝炎中度组14例,慢性乙型肝炎重度组7例,重型乙型肝炎组8例,急性乙型肝炎组5例）和20例健康对照者(对照组)的外周血CD3+、CD4+和CD8+T细胞占淋巴细胞的比率;采用酶联免疫吸附技术（ELISA）夹心法检测研究对象血清中IL-2、IL-4及IFN-γ水平的变化。结果：对照组比较,急性乙型肝炎患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞、血清IL-2、IFN-γ水平明显升高（P<0.05）;重型乙型肝炎患者CD3+、CD8+T淋巴细胞数量下降（P<0.05）,IFN-γ水平升高（P<0.05）;慢性乙型肝炎患者的IL-4和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）。结论：Th1细胞因子在乙型肝炎病毒(HBV)感染的疾病发展中可能起一定的作用,HBV感染慢性化可能与Th2细胞因子增高有关。     

麻疹患儿细胞免疫及临床分析

目的探讨小儿麻疹的临床特征和外周血淋巴细胞亚群的变化。方法收集2008年3月~2010年7月杭州市六医院的住院麻疹患儿794例作为病例组,分析其临床资料分布特征,同时采集285例麻疹患儿外周血,用荧光标记的抗体染色,流式细胞术分析麻疹患儿外周血淋巴细胞亚群的变化。结果 794例麻疹患儿以农村及流动人口为主(占83.9%),临床均有发热、咳嗽和特征性皮疹,热峰均高于39.0℃(肛温),大部分患儿可见柯氏斑(占68.4%),19.5%并发支气管肺炎。麻疹患儿外周血淋巴细胞亚群中CD8+T淋巴细胞和NK细胞百分率明显高于正常组(P<0.05),而CD3+T淋巴细胞百分率、CD4+T淋巴细胞百分率和CD4/CD8比值没有统计学差异(P>0.05)。结论麻疹流行原因与患儿未按时接种疫苗、复种不及时及人员流动性较强有关。柯氏斑诊断特异性仍较高。并发症以支气管肺炎最常见。麻疹患儿的细胞免疫中以CD8细胞和NK细胞增加为主。     

含金属硫蛋白蛋奶粉对小鼠肝细胞实体瘤的治疗作用

目的：观察含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对荷瘤小鼠肝癌有无治疗作用。方法：70只BALB/c小鼠随机分为正常对照组10只、荷瘤鼠组20只、低剂量和高剂量含MT蛋奶粉肿瘤治疗组各20只。除正常对照组小鼠外，在其余小鼠体内移植H-22小鼠肝癌细胞株形成移植性肝癌模型，连续用含MT蛋奶粉给荷瘤小鼠灌胃2周后，每组断头处死10只小鼠，取其脾脏，采用MTT法检测各组小鼠淋巴细胞转化功能和IL-2活性，及流式细胞术检测脾脏CD4⁺、CD8⁺和CD25⁺ T细胞百分率以及淋巴细胞周期进程和凋亡的变化，以及³H-TDR 掺入法检测CTL和NK细胞杀伤活性，并采用细胞病变抑制法检测小鼠IFN-γ活性以及L929 体外杀伤法检测 TNF-α 活性。并于开始灌胃MT蛋奶粉后的第21～31天观察小鼠肿瘤大小。结果：在BALB/c小鼠形成肝癌第27、29及31天，含低剂量和高剂量MT蛋奶粉组小鼠肿瘤体积均明显小于肿瘤对照组（P<0.05）；含低剂量和高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组淋巴细胞刺激指数(SI)较肿瘤对照组均显著增加 （P<0.01），含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠脾脏CD4⁺细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺比值较肿瘤对照组均显著增加（P<0.01，P<0.05），其CD25⁺ T细胞百分率较肿瘤对照组显著降低（P<0.01）；与肿瘤对照组比较，含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠淋巴细胞G₀/G₁期细胞百分率显著降低（P<0.05），G₂/M期细胞百分率显著增加（P<0.05）；同时，含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠淋巴细胞凋亡百分率较肿瘤对照组(荷瘤鼠组)显著降低（P<0.05）；荷瘤小鼠脾脏CTL细胞毒活性显著低于正常对照组（P<0.05），含高剂量MT组CTL细胞毒活性显著高于荷瘤小鼠（P<0.05）；荷瘤小鼠脾脏NK细胞毒活性明显低于正常对照组（P<0.05），而含MT肿瘤治疗组NK细胞毒活性明显高于荷瘤组小鼠，尤其以高剂量组为显著（P<0.01）。与肿瘤对照组比较，含高剂量MT蛋奶粉显著增加了荷瘤小鼠的IL-2和TNF-α活性（P<0.01），含低剂量MT蛋奶粉对荷瘤小鼠的TNF-α活性亦有明显提高作用（P<0.01），对IFN-γ活性并无显著影响。结论：含MT蛋奶粉对肿瘤的治疗性效应可能是通过增强荷瘤小鼠的免疫功能实现的。     

新型结核病疫苗菌株对T淋巴细胞免疫记忆及增殖能力的影响研究

背景　结核病是世界范围内单一致病菌感染导致死亡率最高的慢性感染性疾病,目前缺乏安全有效的疫苗预防成人结核病。而预防接种主要是利用机体具有免疫记忆的特征以阻止病原体的再次入侵,因此,研究T淋巴细胞的免疫记忆及增殖能力对新型结核病疫苗的设计至关重要。目的　探讨新型结核病疫苗菌株（简称B/R菌株）对T淋巴细胞免疫记忆及增殖能力的影响。方法　2019年1月,选取6~8周龄、SPF级雌性C57BL/6小鼠48只,随机分为磷酸盐缓冲液（PBS）组、卡介苗（BCG）组、结核分枝杆菌国际标准毒株（H37Ra）组和新型结核病疫苗（B/R）菌株组,各12只。PBS组、BCG组、H37Ra组和B/R菌株组分别皮下接种PBS、BCG、H37Ra和B/R菌株。4组分别于免疫后8周、12周、16周各取3只小鼠提取脾淋巴细胞体外刺激培养,利用流式细胞技术检测中央型记忆性淋巴细胞（TCM）及效应型记忆性淋巴细胞（TEM）,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测脾淋巴细胞分泌的抗原特异性Th1/Th2型细胞因子〔白介素2（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）和白介素4（IL-4）〕水平;羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记法检测CD4+T淋巴细胞增殖率、CD8+ T淋巴细胞增殖率。结果　免疫后8、12、16周BCG组、H37Ra组、B/R菌株组CD4+的TCM和TEM高于PBS组（P<0.05）;免疫后8周B/R菌株组CD4+的TEM低于H37Ra组（P<0.05）;免疫后16周B/R菌株组CD4+的TCM高于H37Ra组和BCG组（P<0.05）;免疫后16周B/R菌株组CD4+的TEM高于BCG组（P<0.05）。免疫后8、12、16周BCG组、H37Ra组、B/R菌株组CD8+的TCM和TEM高于PBS对照组（P<0.05）;免疫后12周B/R菌株组CD8+的TEM高于H37Ra组和BCG组（P<0.05）;免疫后16周,B/R菌株组CD8+的TCM和TEM高于BCG组（P<0.05）。免疫后8、12、16周PBS组IL-2和IFN-γ低于BCG组、H37Ra组、B/R菌株组（P<0.05）;免疫后12周,B/R菌株组IFN-γ高于BCG组（P<0.05）;免疫后16周,B/R菌株组IFN-γ和IL-2高于BCG组和H37Ra组（P<0.05）。BCG组、H37Ra组和B/R菌株组CD4+T淋巴细胞增殖率、CD8+ T淋巴细胞增殖率高于PBS组（P<0.05）;B/R菌株组的CD4+T淋巴细胞增殖率、CD8+T淋巴细胞增殖率均高于BCG组和H37Ra组（P<0.05）。结论　B/R菌株免疫小鼠后,可促进机体产生更高水平的免疫保护性记忆细胞,以Th1型细胞免疫应答为主,并可增强T淋巴细胞增殖能力。     

Clinical value of specific autoantibodies against platelet glycoprotein and lymphocyte subpopulations in immune thrombocytopenia

目的 检测血小板特异性自身抗体和外周血淋巴细胞亚群在免疫性血小板减少症(ITP)患者中的水平,并探讨两者之间的联系以及自身抗体与ITP病情间的关系,评价其在ITP中的临床价值.方法 应用改良的单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法检测40例ITP患者血小板膜糖蛋白(GPⅡbⅢa、GPIbα)特异性自身抗体;利用流式细胞术(FCM)检测ITP患者外周血淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD19+CD5+)水平.结果 ITP组抗GPⅡbⅢa抗体阳性30例,抗GPIbα抗体阳性26例,其中25%患者仅为单一抗GPⅡbⅢa抗体阳性,15%患者仅为单一抗GPIbα抗体阳性,50%患者为双抗体阳性,10%患者为双抗体阴性.非免疫性血小板减少组与对照组均为阴性.单抗体阳性组采血时血小板计数平均值明显低于双抗体阴性组(P<0.05);双抗体阳性组血小板计数平均值亦明显低于单抗体阳性组和双抗体阴性组(P< 0.05).ITP组与正常对照组相比较,CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例减低,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均明显高于对照组(P<0.05).双抗体阳性组CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率明显高于单抗体阳性组(P<0.05).结论 血小板特异性自身抗体检测对鉴别ITP和非免疫性血小板减少症有一定价值,自身抗体与ITP的病情有一定关系;血小板特异性自身抗体和T、B淋巴细胞可能共同参与了ITP的发病过程,并在其中起重要作用.     

类风湿关节炎病人外周血中趋化因子受体CXCR4与其配体SDF-1α的表达研究

目的:探讨类风湿关节炎病人外周血中趋化因子受体CXCR4与其配体SDF-1α的表达水平。方法:选取类风湿性关节炎病人52例为观察组。另外选取同期健康体检的健康人群30名为对照组。采集受试者静脉血,检测外周血CXCR4、SDF-1α及白细胞介素（IL）-8表达水平。结果:观察组外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞表面CXCR4表达百分率和血清SDF-1α、IL-8表达水平均高于对照组（P<0.01）。随着病程的延长,外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞表面CXCR4表达百分率和血清SDF-1α表达水平上升（P<0.01）。直线相关性分析结果显示,外周血CXCR4及SDF-1α表达水平与IL-8均呈正相关关系（P<0.05）。结论:SDF-1α/CXCR4信号转导通路和IL-8与类风湿性关节炎的发病和进展过程有关。     

含金属硫蛋白蛋奶粉对H-22小鼠肝癌的预防作用

目的：观察含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对BALB/c小鼠H-22肝癌的预防作用。方法：雌性BALB/c纯系小鼠70只随机分为正常对照组(10只)、荷瘤鼠对照组(20只)、含MT蛋奶粉预防肿瘤低剂量及高剂量组(各20只)。将MT低和高剂量蛋奶粉给小鼠灌胃2周后,皮下接种H-22细胞,建立小鼠移植肿瘤模型,观察MT蛋奶粉对肿瘤出现时间及肿瘤大小和生长的影响;观察1个月后处死小鼠,MTT法检测脾脏淋巴细胞转化功能,流式细胞术检测脾脏CD4⁺、CD8⁺和CD25⁺ T细胞百分率以及细胞周期进程和凋亡的变化,³H-TdR掺入法检测CTL和NK细胞杀伤活性。结果：与荷瘤对照组相比,含MT蛋奶粉组小鼠其肿瘤生长速率显著降低（P<0.05）,淋巴细胞增殖率显著增加 （P<0.01）,脾脏CD4⁺和CD8⁺ T细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺比值显著升高（P<0.05或P<0.01）, CD25⁺ T细胞百分率和淋巴细胞凋亡百分率均显著降低（P<0.05或P<0.01）, NK细胞毒性显著提高 （P<0.05或P<0.01）,CTL细胞毒性亦显著增高（P<0.01）。结论：含MT蛋奶粉可明显增强荷瘤小鼠的免疫功能,对小鼠移植性肿瘤的生长起到一定程度的抑制作用。     

雷公藤多甙对小鼠异种骨移植急性排斥反应的抑制作用

目的：观察雷公藤多甙对小鼠异种骨移植急性排斥反应的抑制作用。方法：BALB/C小鼠随机分为治疗组（n=20）和对照组（n=20）,治疗组小鼠行雷公藤多甙（30 mg·kg^-1·d^-1）灌胃3 d,对照组给予等量生理盐水灌胃,将猪骨作为供体分别移植至治疗组和对照组小鼠体内,移植2周后,通过流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞数量,ELISA法检测2组小鼠血清中白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的含量,观察移植骨周围组织形态学改变,比较2组小鼠异种骨移植后发生急性排斥反应的情况。结果：骨移植2周后治疗组小鼠脾脏中的CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞数量、CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞的比值较对照组均明显降低（P<0.05）,治疗组小鼠血清中IL-2、IFN-γ和IL-4含量较对照组均明显降低（P<0.05）,治疗组较对照组小鼠移植骨周围组织中淋巴细胞浸润明显减少。结论：雷公藤多甙可以减轻小鼠异种骨移植急性排斥反应。     

加味逍遥散合激光对尖锐湿疣患者免疫功能的影响

目的:探讨加味逍遥散对尖锐湿疣(CA)患者细胞免疫功能是否有调节作用。方法:采用流式细胞仪对治疗组(加味逍遥散)66例及对照组(正常人)14例外周血T淋巴细胞亚群进行检测,并行两组间和治疗前后对比。结果:治疗前,治疗组外周血CD3 T淋巴细胞百分率及CD4 T淋巴细胞百分率明显低于对照组,有显著性差异(P<0.05);CD4 /CD8 比值均明显低于正常组,CD8 T淋巴细胞百分率明显高于对照组,差异有非常显著性(P<0.01)。治疗后,未复发组45例CD3 、CD4 T淋巴细胞百分率及CD4 /CD8 比值明显升高,CD8 T淋巴细胞百分率明显降低(P<0.05);复发组16例CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞百分率及CD4 /CD8 比值均无明显变化(P均>0.05)。结论:CA患者存在细胞免疫功能低下,中药加味逍遥散对其有调节作用。     

呼吸道感染细菌联合疫苗制备及其免疫效果评价

目的探讨呼吸道感染细菌联合疫苗对免疫效果的影响。 方法分离培养6种呼吸道感染细菌(溶血性链球菌、流感嗜血杆菌B型、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯菌),制成联合疫苗。根据联合疫苗质量浓度分为对照组(生理盐水)、低水平组(0.1 g/L疫苗)、中水平组(0.3 g/L疫苗)及高水平组(0.5 g/L疫苗)。各组疫苗作用于人外周血单个核细胞,检测外周血单个核细胞增殖活性、淋巴细胞表型的变化及细胞因子水平。各组疫苗作用于SPF级小鼠,测定各组小鼠迟发型超敏反应、脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬指数及血清溶血素含量。 结果人外周血各组单个核细胞增殖活性、γ干扰素、白细胞介素-2水平均随时间延长而升高,且在相同时间,联合疫苗质量浓度越高,各指标水平越高(P＜0.05)。与对照组比较,低、中、高水平组单个核细胞CD4＋、CD19＋水平升高,CD8＋水平降低,且随着联合疫苗质量浓度越高,各指标水平变化越明显(P＜0.05)。与对照组小鼠比较,低、中、高水平组小鼠迟发型超敏反应、脾脏指数、胸腺指数、吞噬指数、溶血素水平升高,且随着联合疫苗质量浓度越高,各指标水平越高(P＜0.05)。 结论呼吸道感染细菌联合疫苗有利于提高细胞及体液免疫能力,且联合疫苗质量浓度为0.5 g/L时,可获得的免疫效果最佳。     

甲乙型肝炎联合疫苗小鼠的免疫原性

目的观察甲乙型肝炎联合疫苗的免疫原性.方法制备甲乙型肝炎联合疫苗,不同配比的甲乙型肝炎联合疫苗于第0、4、24周3次接种小鼠,连续测定甲型和乙型肝炎抗体水平;1次免疫后测定小鼠脾脏单个核细胞增殖情况及CD4 和CD8 细胞数量变化情况.结果3次免疫后,各组甲、乙型肝炎抗体阳转率均达到100%,且联合疫苗组早于单价对照组阳转;所诱导的甲、乙型肝炎抗体水平在数值上超过了单价对照,但无显著差异.1次接种后,联合疫苗能有效诱导机体的细胞免疫应答,小鼠脾脏单个核细胞增殖,CD4 和CD8 细胞数量增加.结论所制备的联合疫苗具有良好的免疫原性.     

外周血及肝组织T细胞亚群、NK细胞在慢性乙型肝炎不同转归中的变化及其意义

目的探讨外周血及肝组织T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞（natural killer cells,NK细胞）在慢性乙型肝炎不同临床转归中的变化及其意义。方法慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者34例;HBV相关肝衰竭患者54例,其中,慢性肝功能衰竭（chronicliverfailure,CLF）31例,慢加急性肝功能衰竭（acute-on-chronic liver failure,ACLF）23例。10例CHB患者经肝脏活检、5例ACLF患者行肝脏移植获得肝组织标本。流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞（regulatory T cells,Treg细胞）、CD3＋、CD4＋、CD8＋T淋巴细胞亚群,免疫组织化学观察肝组织中CD8＋T细胞、NK细胞频率。结果 ACLF患者外周血Treg细胞频率（4.79%±2.58%）明显高于CLF患者（3.24%±2.22%）及CHB患者（3.46±1.78%,P〈0.05）;CLF患者Treg细胞频率低于CHB患者,但无显著性差异。动态观察发现,CLF患者Treg细胞频率持续低水平;而ACLF患者Treg细胞频率先升高,随着肝功能恢复,Treg细胞频率下降。CLF患者外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋T淋巴细胞计数分别为939.2±466.2、544.1±300.9、391.8±240.6,明显低于CHB患者（1567.4±556.6、864.2±289.4、563.3±315.1）及ACLF患者（1596.1±1151.6、923.1±701.5、576.8±392.2,P〈0.01）。ACLF患者外周血T淋巴细胞亚群计数与CHB患者比较无显著性差异。免疫组化显示,ACLF患者肝组织CD8＋T细胞、NK细胞浸润较CHB患者明显增加。结论 CLF患者存在严重的T淋巴细胞＂耗竭＂。外周血Treg细胞在ACLF发生机制中可能具有重要的免疫调节作用。肝组织CD8＋、NK细胞浸润增加与慢性乙型肝炎肝脏病理恶化有关。     

保元汤对慢性乙型肝炎患者免疫调节的作用

对６０例慢性乙型肝炎患者外周血ＴＬ－ＣＦＵ，ｍＩＬ－２Ｒ，Ｔ细胞亚群免疫指标进行测定。结果表明：患者外周血ＴＬ－ＣＦＵ值，ｍＩＬ－２Ｒ，ＣＤ３＾＋，ＣＤ４＾＋和ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋值下降。ＣＤ８＾＋值均增高。经保元汤治疗后，上述各项指标（ＣＤ８＾＋降低外）均明显提高。提示慢性乙型肝炎患者存在免疫调节紊乱；保元汤有提高其免疫功能的作用。     

生物素—链霉亲和素系统检测乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群

应用生物素－链霉亲和素方法检测了乙型病毒性肝炎（ＨＢＶ）患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群。旨在探讨乙型病毒性肝炎患者的Ｔ淋巴细胞的功能，其结果为各患者的ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋、ＣＤ３＾＋和ＣＤ４＾＋／ＣＤ４＾＋均明显高于正常人，其与正常人相比较，差别均有高度显著性（Ｐ〈０．０１）。表明乙型病毒性肝炎主要是杀伤性Ｔ淋巴细胞（Ｔｃ）参与了肝损害。     

补肝汤加味治疗慢性乙型病毒性肝炎临床疗效及其对免疫功能的影响

目的研究补肝汤加味治疗慢性乙型病毒性肝炎的临床效果及对免疫功能的影响。方法选择2013年1月-2015年12月在我院感染科诊治的慢性乙型病毒性肝炎患者97例,随机分为2组,观察组48例,对照组49例。2组均给予恩替卡韦分散片和注射用还原型谷胱甘肽进行治疗,观察组联合服用补肝汤加味治疗。比较2组临床治疗效果,治疗前后的CD4~+、CD3~+、CD8~+以及CD4~+/CD8~+等细胞免疫功能指标,层黏连蛋白、透明质酸、Ⅲ型前胶原蛋白肽以及Ⅳ型胶原等肝纤维化指标,并比较2组HBeAg转阴率以及HBV-DNA转阴率。结果观察组有效率明显高于对照组(P0.05);治疗后对照组和观察组细胞免疫功能变化、血清肝纤维化变化差异均有统计学意义(P0.05);观察组HBeAg转阴率、HBV-DNA转阴率显著高于对照组(P0.05)。结论补肝汤加味治疗慢性乙型病毒性肝炎具有较好的临床效果,可有效对抗肝纤维化,促进HBeAg、HBV-DNA转阴,其机制与补肝汤促进肝细胞修复再生、增强机体的免疫功能相关。     

热休克蛋白-抗原肽复合物疫苗预防肝癌术后复发32例

目的:探讨热休克蛋白-抗原肽复合物(HSP)疫苗预防肝癌术后复发的效果. 方法:回顾性分析32例应用HSP疫苗的原发性肝癌患者,并检测治疗前后T细胞亚群、NK细胞活性和血清IL-2受体水平的变化,计算3 a内的生存率,并与对照组比较. 结果:治疗组术后3 mo CD3 , CD8 , CD4 /CD8 水平与术前和对照组比较有显著性差异(P<0.05),NK细胞活性较治疗前明显升高(P<0.01);治疗组3 a生存率为68.8%,与对照组37.5%比较明显升高(P<0.05). 结论:肝癌术后应用HSP疫苗能明显提高患者免疫功能,且可预防术后复发、提高远期生存率.     

血清VEGF、TK-1和T淋巴细胞亚群与乙型肝炎病毒相关性肝病发生和进展的关系

目的探讨血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、可溶性胸苷激酶-1(TK-1)和T淋巴细胞亚群与乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病的发生和进展的关系。方法选择HBV相关性肝病病人188例,其中单纯乙型肝炎(乙肝)52例,肝纤维化40例,肝硬化56例,肝癌40例。另选择30名健康体检者为对照组。采用PCR法检测HBV-DNA负荷量,常规生化法检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,ELISA法检测VEGF和TK-1水平,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比和CD4+/CD8+。结果单纯乙肝组、肝纤维化组、肝硬化组、肝癌组的HBV-DNA负荷量及ALT、AST水平差异均无统计学意义(P>0.05)。肝癌组、肝硬化组、肝纤维化组、单纯乙肝组、对照组VEGF和TK-1、CD4+/CD8+水平逐渐降低;各组CD3+、CD4+和CD8+水平差异均无统计学意义(P>0.05)。HBV相关性肝病病人血清中VEGF与TK-1呈明显正相关关系(r=0.745,P<0.01),VEGF与CD4+/CD8+呈明显负相关关系(r=-0.217,P<0.01),TK-1与CD4+/CD8+呈明显负相关关系(r=-0.208,P<0.01)。结论HBV相关性肝病病人血清中VEGF、TK-1和CD4+/CD8+水平与疾病的发生和进展相关,VEGF和TK-1表达升高、CD4+/CD8+下降可能参与了乙肝、肝纤维化、肝硬化和肝癌的发生和进展。     

MIF基因修饰的瘤苗免疫小鼠后T细胞数量和功能的分析

目的：研究了细胞在巨噬细胞游走抑制因子（MIF）基因修饰的瘤苗诱导抗肿瘤免疫反应中的应用。方法：将重组MIF腺病毒转染小鼠FBL3红白血病细胞制成的瘤苗接种于小鼠体内,观察脾脏和淋巴结中T细胞数量和功能的改变。结果：经MIF基因修饰的瘤苗免疫后,小鼠脾细胞和腹股沟引流淋巴结细胞数量明显增多,脾细胞CTL活性显增强,引流淋巴结中CD3^ 、CD28^ 、CD4^ 和CD8^ T细胞百分率均较对照组增加。MIF基因修饰的瘤苗免疫对小鼠受野生型FBL3肿瘤细胞再攻击具有明显的保护作用。结论：MIF基因修饰的瘤苗能诱导T细胞介导的抗肿瘤免疫反应,有可能作为肿瘤基因治疗的候选。     

香菇多糖对食管癌病人放化疗前后淋巴细胞亚群的影响及其临床意义

目的观察香菇多糖对食管癌放化疗病人淋巴细胞亚群的影响。方法采用随机对照研究,食管癌患者60例,将患者分为单纯放化疗组30例,联合放化疗组30例,并设置正常对照组。单纯放化疗组单用DF方案化疗+适型调强放射治疗,联合放化疗组给予DF方案化疗+适型调强放射治疗+香菇多糖,观察免疫指标变化。结果单纯放化疗组和联合放化疗组之间治疗前CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均无显著差异(P>0.05),均与正常对照组有明显差异(P<0.01)。联合放化疗组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与治疗前比较无显著差异(P>0.05);治疗后联合放化疗组与单纯放化疗组比较CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均有显著差异(P<0.05)。结论食管癌患者免疫功能低下,加用香菇多糖可以提高患者放化疗后的免疫功能。     

病毒含量不同的慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群比较

[目的]研究慢性乙型肝炎患者外周血乙肝病毒量与外周血T淋巴细胞亚群变化的关系,探讨患者体内病毒含量与患者免疫功能状态的关系。[方法]用流式细胞仪检测60例慢性乙型肝炎患者和15名体检的健康人外周血T淋巴细胞亚群CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋,荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA。[结果]慢性乙肝患者CD4^＋,CD4^＋／CD8^＋下降,CD8^＋升高。高病毒量的患者比低病毒量患者T淋巴细胞亚群变化更明显。从HBV-DNA阴性组、低病毒量组到高病毒量组随病毒量增加,CD4^＋细胞减少,而CD8^＋升高,CD4^＋／CD8^＋下降。HBV—DNA阴性组,低病毒量组患者CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋数值与正常对照比较无显著差异。[结论]高病毒量的患者比低病毒量患者T淋巴细胞亚群变化更明显。HBV-DNA阴性组,低病毒量患者CD4^＋,CD8^＋,CD4^＋／CD8^＋,与正常对照比较数量无显著差异,提示细胞功能低下。