儿童急性白血病端粒酶活性与p15基因表达关系的研究(英文)

目的：探讨端粒酶活性与pINK4b(p15)基因表达在儿童急性白血病(AL)发病中的关系。方法：采用改良端粒重复序列PCR扩增和逆转录聚合酶链反应检测27例儿童AL骨髓单个核细胞端粒酶活性和p15基因表达情况,并与9例正常骨髓单个核细胞端粒酶活性及p15基因表达进行比较。结果：初诊时,AL患儿骨髓细胞端粒酶活性(34. 5±37. 0)TPG较对照组(2. 4±2. 2 )TPG明显增高(P<0. 001 ); AL患儿p15基因表达水平(9. 8±16. 2)%, 明显低于对照组(45. 8±16. 9)% (P<0. 001 )。AL患儿骨髓细胞端粒酶活性与p15基因表达水平之间无相关关系(r= 0.01304, P> 0. 05)。结论：端粒酶活化和p15基因表达水平降低与急性髓性白血病发展有关,但两者可能通过不同的机制作用于白血病。     

儿童急性髓细胞白血病血液端粒酶活性测定及其临床意义

为了探讨儿童急性髓细胞白血病(AML)血液端粒酶活性(TA)与AML各种临床指标的关系，采用PCR—ELISA法检测了健康儿童及患儿的外周血单个核细胞的端粒酶活性(PBTA)。结果显示健康儿童的PBTA为阴性；32例患儿中27例初诊的PBTA为阳性，但与患儿的性别、年龄和外周血白细胞计数之间无相关性(P＞0．05)。在不同的FAB分型之间，初诊时PBTA的表达特点是M2＞M4＞M5＞M3，M2与M5之间差异具有显著性(P＜0．05)；完全缓解超过1年的患者初诊PBTA小于1年内复发者和无完全缓解者，前两者的差异具有显著意义(P＜0．05)；同一患者完全缓解时PBTA显著小于初诊时PBTA值(P＜0．05)；复发患儿初诊与复发时的PBTA值无明显差异(P＞0．05)。提示儿童AML患者初诊时外周血单个核细胞端粒酶活性检测可能对AML的诊断、治疗和预后判断具有意义。     

白细胞介素-8及其受体在小儿急性白血病骨髓单个核细胞中的表达和临床意义

目的：探讨白细胞介素8(IL8)及受体(IL8R)在小儿急性白血病骨髓单个核细胞中的表达和临床意义。方法：RTPCR法检测32例急性白血病骨髓单个核细胞IL8,IL8RmRNA表达。结果：急性髓系白血病(AML)组中有5例表达IL8(5/10),4例表达IL8R(4/10);急性淋巴细胞白血病(ALL)组中有13例表达IL8(13/22),9例表达IL8R(9/22)。IL8在急性髓系白血病组中的表达水平高于急性淋巴细胞白血病组,差异有显著性(P<0.05)。AML组中M4M5亚型中的表达水平高于M2M3,差异有显著性(P<0.05)。ALL组中B系列ALL表达水平高于TALL,差异有显著性(P<0.05)。化疗后患儿骨髓单个核细胞IL8,IL8R水平显著低于化疗前(P<0.05)。结论：小儿急性白血病有IL8,IL8R的表达,IL8尤其在AML组M4M5亚型及B系列ALL更明显,化疗后两者水平显著下降。     

儿童急性白血病骨髓单个核细胞内细胞因子与其病理变化关系及临床意义

目的 研究儿童急性白血病(AL)骨髓单个核细胞内IL-3、GM-CSF、TNFα和TGFβ1的表达与白血病细胞增殖、分化与病理变化的关系,并观察上述细胞因子在治疗过程中变化的临床意义.方法 抽取43例AL患儿在诱导缓解化疗前、化疗后、缓解及复发时骨髓,提取单个核细胞,用免疫荧光流式细胞术检测其细胞内上述细胞因子的表达,同期还以32例非AL患儿骨髓作对照研究.结果 无论是急性淋巴细胞白血病(ALL)还是急性髓性白血病(AML),化疗前骨髓单个核细胞内IL-3和GM-CSF的表达均高于对照组(P＜0.01),而在TNFα和TGFβ1的表达均低于对照组(P＜0.01).化疗后缓解患儿IL-3和GM-CSF的表达与化疗前比较均有所下降(P＜0.01),与对照组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),TNFα和TGFβ1的表达与化疗前比较均有所上升(P＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后未缓解和复发患儿IL-3和GM-CSF的表达均高于对照组(P＜0.01),且TNFα和TGFβ1的表达均低于对照组(P＜0.01).结论 AL患儿骨髓单个核细胞内IL-3和GM-CSF的表达较多,TNFα和TGFβ1的表达较少,与骨髓白血病细胞增殖失控、分化障碍所产生的病理变化有关.在治疗儿童AL时,骨髓单个核细胞内IL-3、GM-CSF、TNFα和TGFβ1可作为病情转归的参考指标.     

端粒酶活性与儿童急性淋巴细胞白血病相关性的研究

目的了解端粒酶在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达情况。方法采用端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）检测了１４例儿童急性淋巴细胞白血病骨髓单个核细胞端粒酶活性水平，并与１０例正常健康儿童外周血和骨髓单个核细胞端粒酶活性相比较。结果白血病细胞端粒酶活性显著升高，可高达Ｋ５６２白血病细胞端粒酶活性的７５％～９８％，而正常外周血和骨髓单个核细胞具有适度低水平的酶活性，其相对活性为Ｋ５６２细胞的１．３％～５．７％。结论端粒酶的激活在急性淋巴细胞白血病的发生发展中可能具有重要作用。     

CD133表达与儿童急性髓细胞白血病临床特征的相关性研究

目的探讨CD133在儿童急性髓细胞白血病(AML)中的表达及意义。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法,对20例AML患儿和10例非肿瘤患儿(对照组)的骨髓单个核细胞进行CD133 mRNA的表达检测。结果 (1)AML患儿的CD133 mRNA阳性表达率为45%,显著高于对照组(P<0.05)。(2)AML患儿骨髓细胞CD133 mRNA表达与CD34表达相关。(3)CD133 mRNA的表达与儿童AML FAB分型及临床危险度分型有关(P<0.05),与外周血白细胞数、淋巴结肿大、性别、年龄等因素无相关性。结论 AML患儿CD133 mRNA表达率较高;CD133 mRNA表达与AML分型有关。     

自身造血干细胞移植治疗儿童晚期恶性实体肿瘤

目的　评价自身干细胞移植治疗儿童晚期恶性实体肿瘤的安全性及疗效。方法13例次患儿直接采集骨髓 ,另 15例患儿经粒细胞集落刺激因子 (G CSF)动员后从外周血获取单个核细胞 ,对 1例疑有肿瘤细胞浸润的采集物经CliniMACS进行了CD 3 4 细胞分选的净化处理。除 2例霍奇金淋巴瘤患儿经CBV方案 (CTX BCNU VP16 ) (环磷酰氨、卡氮芥及依托泊甙 )治疗外 ,其余患儿均采用VP16 卡铂 马法兰的预处理方案。结果　采集骨髓及外周血得到的单个核细胞分别为 ( 5 4± 2 1)× 10 8/kg和 ( 4 1± 1 9)× 10 8/kg。所有患儿移植后均获得造血重建 ,中性粒细胞恢复至 0 5×10 9/L的时间为 ( 11 8± 5 7)d ,血小板大于 2 0× 10 9/L的时间为 ( 2 1 0± 9 3)d。移植过程中 3例患儿分别合并表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和枯草杆菌败血症 ,无一例因移植相关并发症而死亡。但 1例出现急性肾功能不全、肺水肿、心包积液并发展为呼吸窘迫综合征 ,经机械通气、应用肺表面活性物质等积极治疗后康复 ;另 1例出现BCNU相关的肺损伤 ,导致严重的肺动脉高压、嗜酸性细胞增多 ,经皮质激素等治疗后逐渐好转。本组平均随访 13个月 ,2 7例患儿中 5例移植后 5个月内因疾病复发而死亡 ;1例非霍奇金淋巴瘤患儿移植后 3个月中枢神经系统复     

白血病骨髓单个核细胞体外培养分泌IL-6,TNF-α的观察

为观察儿童白血病骨髓单个核细胞体外培养上清液白细胞介素 (IL 6) ,肿瘤坏死因子 (TNF α)含量。对 19例儿童白血病骨髓单个核细胞 (PMMNC)体外培养。 9例正常骨髓单个核细胞 (CMMNC)作对照 ,培养 72小时收集上清液 ,用双抗夹心法检测IL 6和TNF α。结果 ,病人及对照骨髓单个核细胞均有自分泌IL 6,TNF α的能力。但CMMNC自分泌IL 6,TNF α的作用明显比PMMNC强 ,P <0 0 5。急性髓性白血病 (AML)与急性淋巴细胞性白血病 (ALL)比较 ,分泌IL 6有差异 ,P <0 0 5 ,但分泌TNF α无差异 ,P >0 0 5。病人血浆IL 6较正常人血浆IL 6含量高。而在病人血浆和正常人血浆中 ,TNF α含量未发现明显差异。结果显示白血病骨髓单个核细胞以及对照单个核细胞均自分泌IL 6,TNF α。植物血凝素 (PHA)诱生IL 6,TNF α在白血病病人和正常人有明显差别     

cAMP反应元件结合蛋白在儿童急性髓细胞白血病中的表达及其意义探讨

目的测定cAMP反应元件结合蛋白(Cyclic-AMP Response Binding Protein,CREB)在不同类型儿童急性髓细胞白血病(AML)中的表达,探讨其在儿童AML发生、发展和预后判断中的意义。方法(1)用实时定量RT-PCR法检测不同类型AML患儿骨髓单个核细胞内CREB的mR-NA水平的表达,以非白血病患儿(NL)作对照。(2)用ELISA法测定AML患儿骨髓单个核细胞内CREB总蛋白水平和蛋白磷酸化水平的表达。(3)AML患儿中,是否存在MICM分型的高危因素与CREB的mRNA是否高表达相比较。(4)对3例AML患儿骨髓单个核细胞内CREB的mRNA水平进行动态观察。结果(1)NL、低危型AML(LR-AML)、高危型AML(HR-AML)各组患儿骨髓单个核细胞内CREB的mRNA水平的表达量分别为1.13±0.81、1.23±1.14、11.88±19.64;其中,LR-AML组与NL组无明显差别,HR-AML组明显高于NL组、LR-AML组,差别有统计学意义,P<0.05。(2)HR-AML组患儿骨髓单个核细胞内CREB总蛋白水平的表达(ng/106cell)明显高于LR-AML组,分别为9.97±13.84、1.06±1.14,P=0.005;HR-AML组患儿骨髓单个核细胞内CREB蛋白磷酸化水平的表达(U/106cell)明显高于LR-AML组,分别为19.76±29.11、1.36±1.84,P=0.01。(3)在AML患儿中,CREB的mRNA水平、总蛋白水平、蛋白磷酸化水平的表达量间两两存在正相关关系。(4)HR-AML患儿中,60.00%的患儿存在MICM分型的高危因素,70.00%的患儿CREB的mRNA呈高表达,两者相结合诊断符合率可达90.00%。(5)CREB的mRNA表达量的升高提示AML的未缓解。结论(1)CREB在儿童HR-AML中呈高表达。(2)儿童AML中CREB的mRNA水平、总蛋白水平、蛋白磷酸化水平的表达量间存在正相关关系。(3)CREB的表达与MICM分型从不同的水平判断AML患儿的预后,对临床危险度分型有一定的意义。(4)实时定量RT-PCR进行CREB的mRNA表达量的动态监测对白血病疗效的判断意义值得进一步探讨。     

HOXA10基因在儿童急性白血病中的表达及意义

目的探讨急性白血病患儿同源盒(HOX)A10基因的表达及其临床意义。方法选择50例初治急性白血病患儿,其中急性髓系白血病(AML)25例、急性淋巴细胞白血病(ALL)25例,以及13例对照儿童,分离其骨髓单个核细胞,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓单个核细胞HOXA10 mRNA;检测急性白血病患儿外周血白细胞计数(WBC),分析不同类型急性白血病患儿HOXA10基因表达之间的关系。结果对照儿童HOXA10基因的阳性表达率为23.08%,ALL患儿为40%,AML患儿为100%;平均表达灰度比值(ODR)分别为对照儿童0.022±0.001,AML患儿0.373±0.113,ALL患儿0.151±0.006,三组间阳性表达率及表达水平差异均有统计学意义(P<0.01),其中尤以AML患儿最高。HOXA10基因在各型AML中均有表达,其表达水平依次为M1和(或)M2型、M3型、M4和(或)M5型,差异有统计学意义(P<0.01)。WBC≥30×109/L的急性白血病患儿的HOXA10基因阳性表达率显著增高;高危组急性白血病患儿的HOXA10基因的阳性表达率也明显高于中危组和低危组。结论 HOXA10基因的高表达与儿童急性白血病,尤其是与AML明显相关,并且随着AML白血病细胞分化成熟表达逐渐下降;HOXA10基因的阳性表达率与儿童急性白血病危险程度呈正相关,有望成为儿童急性白血病诊断、治疗及判断预后的一个靶点。     

Range of Motion of the Joints of the Lower Extremities of Newborns

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早产儿视网膜病的危险因素分析及随访调查

研究早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity,ROP)的发生率、高危因素、治疗与随访情况。方法对2005年7月-2007年12月温州医学院附属第一医院NICU收治的符合ROP筛查标准的早产儿,于生后2周开始由资深眼科医师开始行间接眼底镜检查眼底,并进行随访。结果434例早产儿中ROP的发生率为5.5%(24/434例),24例ROP中Ⅰ期19例,Ⅱ期3例,Ⅲ期2例。Ⅲ期阈值病变者行激光光凝治疗,全部患儿均恢复正常。对434例早产儿行单因素分析得出,胎龄、出生体重、住院时间、吸氧、吸氧浓度、吸氧时间、呼吸暂停、新生儿肺透明膜病(RDS)、肺表面活性剂(PS)的应用、机械通气、输血、光疗时间、感染与ROP的发生有相关性(P<0.05)。Logistic回归分析显示胎龄、出生体重、胎数、吸氧时间、光疗时间、代谢性酸中毒、母亲妊高症、颅内出血是影响ROP发生的主要因素。结论早产是ROP的根本原因,防治各种并发症、合理的氧疗是预防ROP的关键。建立完善有效的ROP筛查制度,早期发现、早期治疗ROP,可改善ROP的预后。