三苯双脒、青蒿琥酯和蒿甲醚抗华支睾吸虫及其他吸虫的实验研究进展

吡喹酮是目前用于治疗血吸虫病和其他吸虫病的主要药物。近年的实验研究发现,治疗肠道线虫感染的新药三苯双脒具有抗华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫和卡氏棘口吸虫(Echinostoma caproni)的作用,特别是对感染华支睾吸虫的大鼠,其顿服接近治愈的剂量为300 mg/kg,低于吡喹酮的治愈剂量375～500 mg/kg。抗疟药青蒿琥酯和蒿甲醚不仅已被发展为预防血吸虫病的药物,而且发现它们对多种吸虫有效,特别是对华支睾吸虫,其顿服对大鼠华支睾吸虫感染的治愈或高效剂量为75 mg/kg。本文系综述这些药物单用或联合用药治疗大鼠、小鼠、仓鼠或犬的华支睾吸虫及其他吸虫感染的实验研究进展。     

三苯双脒、青蒿琥酯和吡喹酮治疗感染华支睾吸虫金色仓鼠的疗效观察

目的 观察三苯双脒、青蒿琥酯和吡喹酮对感染华支睾吸虫金色仓鼠的疗效。 方法 93只仓鼠各感染30个华支睾吸虫囊蚴, 分组后灌胃顿服给药治疗, 观察各组疗效。① 31只感染仓鼠中, 20只于感染后14 d随机均分为4组, 分别为青蒿琥酯300 mg/kg组、三苯双脒100 mg/kg和200 mg/kg组、吡喹酮200 mg/kg组, 观察药物对华支睾吸虫童虫的作用;另6只于感染后24 d随机均分为2组, 分别为三苯双脒200 mg/kg组和青蒿琥酯300 mg/kg组;余5只作对照组。② 22只仓鼠于感染后28 d随机分成5组（每组4～5只）, 分别为三苯双脒25 mg/kg和50 mg/kg组、青蒿琥酯25 mg/kg组、吡喹酮50 mg/kg组, 以及对照组。③ 40只仓鼠于感染后28 d随机分成8组（每组4～6只）, 分别为三苯双脒50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg组, 青蒿琥酯100 mg/kg和200 mg/kg组, 吡喹酮100 mg/kg和200 mg/kg组, 以及对照组。各组受治鼠于治疗后2周剖杀, 收集胆道系统内的残留华支睾吸虫, 计算各组的平均虫数和减虫率。 结果 仓鼠感染华支睾吸虫囊蚴后14 d, 三苯双脒100 mg/kg和200 mg/kg组, 以及吡喹酮200 mg/kg组的平均虫数均显著低于对照组（P<0.05）, 减虫率分别为90.6%、85.9%和71.9%;青蒿琥酯300 mg/kg组平均虫数与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。感染后24 d, 童虫已发育为成虫, 三苯双脒200 mg/kg组平均虫数显著低于对照组（P<0.01）, 减虫率为89.8%;青蒿琥酯300 mg/kg组的减虫率为100%。感染后28 d, 三苯双脒25 mg/kg组平均虫数显著低于对照组（P<0.05）, 减虫率为71.8%, 剂量增至100 mg/kg时, 减虫率为100%;青蒿琥酯25 mg/kg和100 mg/kg组的减虫率分别为20.0%和56.4%, 剂量增至200 mg/kg时, 减虫率为98.5%, 其平均虫数显著低于对照组（P<0.01）。吡喹酮100 mg/kg和200 mg/kg组的减虫率分别为78.9%和83.5%, 其平均虫数均与对照组的差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 三苯双脒和吡喹酮对感染华支睾吸虫童虫和成虫的仓鼠均有较好的疗效, 青蒿琥酯仅对成虫有效。     

阿苯达唑和吡喹酮治疗华支睾吸虫感染的比较

阿苯达唑和吡喹酮治疗华支睾吸虫感染的比较刘宜升，吴云明，杜文平，胡绪铮，吴中兴，陈有贵，郑蔡阳，尤春法，李广悦，拾景美阿苯达唑（Ａｌｂｅｎｄａｚｏｌｅ）治疗肠道线虫病和绦虫病的作用已被公认。在驱治华支睾吸虫（Ｃｓ）时因疗程较长，尽管有较满意的疗效，但...     

三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚和吡喹酮单剂、多剂或联合用药治疗大鼠华支睾吸虫感染的实验研究

目的 观察三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚、或吡喹酮单剂、多剂给药,及其伍用治疗感染华支睾吸虫大鼠的疗效。 方法 147只SD大鼠各感染50个华支睾吸虫囊蚴,于感染后42～44 d分组治疗。各药物采用灌胃给药。①60只感染大鼠随机分为11组（每组4～5只）,分别为三苯双脒150 mg/kg（顿服）、75 mg/（kg·d）×2 d、50 mg/（kg·d）×3 d和25 mg/kg（tid）×2 d组;吡喹酮150 mg/kg（顿服）、75 mg/（kg·d）×2 d和25 mg/kg（tid）×2 d;青蒿琥酯或蒿甲醚75 mg/kg（顿服）和37.5 mg/（kg·d）×2 d组。②另87只感染大鼠随机分为15组（每组4～6只）,用青蒿琥酯或蒿甲醚（30 mg/kg）分别与吡喹酮（150 mg/kg）、三苯双脒（50 mg/kg和75 mg/kg）伍用组;三苯双脒（50 mg/kg）与吡喹酮（150 mg/kg）伍用组;三苯双脒（75 mg/kg）与吡喹酮（187.5 mg/kg）伍用组,及各药的单用组。并设同批感染未治疗对照组。受治鼠于治疗后2周剖杀,收集胆管和肝组织内的残留华支睾吸虫,计算各组的平均虫数和减虫率,用非参数统计方法（Mann-Whitney秩和检验）对相应组间的平均虫数进行分析。 结果 感染华支睾吸虫的大鼠口服单剂三苯双脒或吡喹酮（150 mg/kg）的减虫率分别为57.2%和63.8%。三苯双脒各小剂量多次给药组的减虫率稍高,达77.1%～79.4%,而吡喹酮小剂量多次给药组的减虫率则为50.6%～54.2%。但两种药物各组间的平均虫数的差异无统计学意义。青蒿琥酯和蒿甲醚各单剂给药组与小剂量多次给药组的减虫率均较高,分别为90.4%～98.5%和100%。三苯双脒小剂量（50或75 mg/kg）与吡喹酮（150 mg/kg 或187.5 mg/kg）伍用治疗,减虫率为74.9%～100%,高于其各单药组的减虫率（26.9%～79.6%）。青蒿琥酯或蒿甲醚小剂量（30 mg/kg）与吡喹酮（150 mg/kg）或三苯双脒（50或75 mg/kg）伍用治疗,减虫率为74.9%～97.9%,亦高于其各药组的减虫率（24.8%～79.6%）。 结论 青蒿琥酯、蒿甲醚、吡喹酮和三苯双脒均为有效的抗华支睾吸虫药物,各药物小剂量伍用具有增效作用。     

吡喹酮治疗后华支睾吸虫的组织化学变化

吡喹酮是目前治疗华支睾吸虫病的最有效药物。关于该药对华支睾吸虫的杀虫作用,迄今仅见虫体组织学方面的研究,为了进一步探讨该药对华支睾吸虫的作用机理。本文进行了组织化学方面的研究。     

吡喹酮对华支睾吸虫的皮层、表皮细胞和肌肉影响的超微结构观察

我们在进行吡喹酮治疗华支睾吸虫病的实验研究中,发现感染大鼠一次口服吡喹酮300mg/kg后12小时,虫体即发生明显的挛缩、卷曲,表皮有轻重不同的皱褶,这提示本药对虫体体壁有损伤作用。关于本药对华支睾吸虫超微结构的影响,迄今只见Rim等的报道,本文对吡喹酮损害的华支睾吸虫的皮层、表皮细胞和肌纤维进行了动态观察。     

保护性免疫大鼠感染华支睾吸虫后吡喹酮化疗效果

[目的 ]研究吡喹酮与宿主保护性免疫对华支睾吸虫感染的协同作用。 [方法 ]用粗成虫抗原 (AWAg)和排泄分泌抗原 (ESAg)免疫大鼠或感染 2 0条华支睾吸虫囊蚴获得保护性免疫 ,用 5 0个华支睾吸虫囊蚴感染大鼠 ,用亚致死量吡喹酮(5 0 mg/ kg)治疗 ,以回收虫体数观察疗效。统计学上显著性差异用 PC- SAS系统的 ANOVA和 Nparlway Kruskal- Wallis检验法。 [结果 ]1在对照组 ,ESAg免疫接种组和 AWAg免疫接种组吡喹酮杀幼虫效果明显高于成虫 ,3组均为 P<0 .0 1。2感染后的减虫率 ,与对照组比较 ,ESAg免疫接种组 (35 .6 % ,P<0 .0 1)和华支睾吸虫囊蚴感染组 (97.5 % ,P<0 .0 1)较高 ,而在 AWAg免疫接种组 (2 3.4% )较低。吡喹酮的疗效在 ESAg免疫接种组显著增高。 [结论 ]吡喹酮对华支睾吸虫的疗效在大鼠具有获得性免疫的情况下相协性的提高。     

用三苯双脒、吡喹酮和青蒿琥酯临床给药方案治疗感染华支睾吸虫大鼠的研究

目的观察临床应用三苯双脒、青蒿琥酯和吡喹酮的给药方案治疗感染华支睾吸虫大鼠的疗效。方法将临床试用于治疗华支睾吸虫感染的三苯双脒、青蒿琥酯和吡喹酮剂量用不同种属动物等效剂量换算法换算为大鼠用的剂量,并按临床药物联合用药方案,设置了以下的剂量疗程,即三苯双脒16或32mg/(kg·d)×1d、2d和3d(bid),8或16mg/(kg·d)×3d;青蒿琥酯12mg/(kg·d)×3d(tid)和16mg/(kg·d)×3d(bid);吡喹酮143mg/(kg·d)×2或3d(tid),143mg/(kg·d)×2d或3d(bid)和47.7或71.5mg/(kg·d)×3d。151只大鼠(每鼠灌胃感染华支睾吸虫囊蚴50只)分2批,第1批79只大鼠于感染后5周分为13组,每组5～6鼠,其中6组单用三苯双脒、青蒿琥酯或吡喹酮治疗,另7组用三苯双脒与青蒿琥酯或吡喹酮联合治疗,或吡喹酮与青蒿琥酯联合治疗,余8鼠作对照。第2批72只大鼠于感染后6周,分为13组(每组5只),其中7组和6组分别用三苯双脒和吡喹酮的不同剂量疗程治疗,余7鼠作对照。于治疗结束后2周剖杀小鼠,收集胆管和肝组织内的华支睾吸虫,计算各组的平均虫数和减虫率,用非参数统计方法 (Mann-Whitney秩和检验)进行分析。结果第1批试验中,三苯双脒16或32mg/(kg·d)×3d(bid),吡喹酮143mg/(kg·d)×3d(tid)或143mg/(kg·d)×3d(bid)各治疗组的平均虫数均明显低于对照组(P﹤0.01),减虫率为94.2%～96.0%。感染大鼠用青蒿琥酯12mg/(kg·d)×3d(tid)治疗无效,而16mg/(kg·d)×3d(bid)则有57.2%的减虫率,其平均虫数明显低于对照组(P﹤0.05)。三苯双脒16或32mg/(kg·d)×3d(bid)与吡喹酮143mg/(kg·d)×3d(bid),或与青蒿琥酯16mg/(kg·d)×3d(bid)联合治疗组,各组平均虫数均显著少于对照组(P﹤0.01),减虫率为94.2%～99.4%,即联合治疗的疗效与三苯双脒和吡喹酮单用组相仿,但显著高于青蒿琥酯单用组。吡喹酮143mg/(kg·d)×3d(tid)与青蒿琥酯12mg/(kg·d)×3d(tid),或吡喹酮143mg/(kg·d)×3d(bid)与青蒿琥酯16mg/(kg·d)×3d(bid)联合治疗组的减虫率达93.6%～100%。第2批试验中,三苯双脒16或32mg/(kg·d)×2d和3d(bid)治疗组的平均虫数间差异无统计学意义(P0.05),减虫率为86.5%～95.1%,而三苯双脒32mg/(kg·d)×1d(bid)治疗组,减虫率仅为73.0%,但8或16mg/(kg·d)×3d(qd)的减虫率为88.3%～92.6%,吡喹酮143mg/(kg·d)×3d(tid)治疗组的减虫率为96.9%,若同剂量给药2d的减虫率降至63.2%,而47.7mg/(kg·d)×3d(qd)则无效;吡喹酮143mg/(kg·d)×2d和3d(bid)的减虫率相仿,达87.7～95.1%,若同剂量每日顿服,连服3d则无效。结论以人用的三苯双脒、吡喹酮和青蒿琥酯的剂量换算为大鼠用的剂量,并按临床用的疗程治疗感染华支睾吸虫的大鼠,除青蒿琥酯外,均有很好的治疗效果,其中三苯双脒的疗程可由3d缩减为2d。由于单用三苯双脒和吡喹酮已有很高的疗效,故它们之间以及和青蒿琥酯的联合治疗不易显现增效作用。     

吡喹酮引起麝猫后睾吸虫表皮的改变

作者用扫描电镜(SEM)观察了不同浓度的吡喹酮对麝猫后睾吸虫表皮的影响。电镜标本制备:虫体经2.5%戊二醛和0.1%锇酸固定,各级酒精脱水,临界点干燥,最后镀金。体外实验:虫体取自感染囊蚴后3～4个月的叙利亚仓鼠以及后睾吸虫病人。虫体在0.01μg—100μg/ml 不同浓度的吡喹酮作用下,即刻麻痹、收缩,出现收缩的时间随药物浓度而异。如延长虫体在药液中的时间,虫体开始松弛,最后呈线状,特别明显的是拉长了两个吸盘之间的距离。SEM观察到新鲜正常的虫体表皮复盖着粗短的微绒毛,在微     

吡喹酮对华支睾吸虫糖原代谢影响的研究

0.1ug/ml吡喹酮对华支睾吸虫体外作用6小时后,用组织化学方法观察到虫体内的糖原颗粒非常显著地减少;作用时间延长至24小时,大部分虫体的糖原基本消失。吡喹酮浓度提高到0.5ug/ml以上时,其对糖原的影响与0.1ug/ml相比,无明显差别。提示体外实验吡喹酮浓度为0.1ug/ml时,其抑制华支睾吸虫吸收葡萄糖、促使虫体内糖原减少的作用已达到最大限度。     

华支睾吸虫富甘氨酸2a类抗原Cs4重组蛋白的免疫学特性与定位

目的 对华支睾吸虫富甘氨酸2a(glycine rich antigen 2a,GRA2a)类抗原Cs4重组蛋白(rCs4)进行免疫学特性分析,并对GKA2a类抗原进行组织定位.方法 使用蛋白质印迹(Western印迹)分析rCs4与华支睾吸虫病患者混合血清的免疫反应性,并分析GRA2a类抗原的分泌性.应用ELISA法检测rCs4免疫小鼠血清中抗rCs4特异性IgG水平,并动态检测华支睾吸虫感染兔0～44周的血清中抗rCs4特异性IgG水平.通过免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)对华支睾吸虫GRA2a类抗原进行组织定位.结果 纯化的rCsd可被华支睾吸虫病患者混合血清识别.rCs4单抗(mAb Cs4-31)与华支睾吸虫排泄分泌抗原和可溶性抗原在相对分子质量(Mr)26 000与55 000之间分别有13、15个反应条带,均呈阶梯状分布.ELISA检测rCs4免疫小鼠抗rCs4和ESA的IgG效价均达1:64 000,感染兔的抗rCs4特异性抗体平均水平自感染第4周开始上升,于第6周达到高峰,此后逐步递减,至第20周已呈较低水平.IFA检测发现GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫的表皮.结论 Cs4蛋白是华支睾吸虫在感染早期的分泌型蛋白,具较好的抗原性.GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫表皮.

Abstract：

Objective To study immunological characteristics of Cs4 recombinant protein(rCs4)of Clonorchis sinensis,one of the glycine rich antigen 2a(GRA2a)gene family member,and the histolocalization of GRA2a antigens. Methods The immunological reactivity of Clonorcihs sinensis Cs4 protein to pooled sera from clonorchiasis patients was investigated by using purified rCs4 in Western blotting.The secretory property of GRA2a antigens was also analyzed by Western blotting.The level of specific antibodies against rCs4 in the sera from mice immunized with rCs4,and the dynamic change of antibodies against rCs4 in the sera of C. sinensisinfected New Zealand rabbits(O-44 w post infection)were examined by ELISA.Immunofluorescence assay (IFA)was performed using the anti-rCs4 monoclonal antibody Cs4-31(mAb Cs4-31)to determine the localization of GRA2a antigens in C. sinensis adult worm.Results The purified rCs4 was recognized by pooled sera from clonorchiasis patients.13 and 15 bands appeared at the sites between M,26 000 and 55 000 after mAb Cs4-31 reacting with excretory-secretory antigen(ESA)and soluble adult worm antigen(AWA),respectively.The anti-rCs4 and anti-ESA serum antibody titers in mice immunized with rCs4 were 1:64 000.In C. sinensis infected rabbits,antibody level began to elevate at 4 w after infection,peaked at 6 w,and declined rapidly to a lower level at 20 w.IFA revealed that GRA2a antigens were localized in the tegument of C.sinensis adult worm.Conclusion The Cs4 protein was a secretory antigen appeared in the early stage of infection,and exhibited high antigenieity.GRA2a antigens were localized in tIle tegument of C. sinensis adult worm.     

华支睾吸虫成虫总RNA的一步法提取与纯化

目的 对华支睾吸虫cDNA文库的构建提供基础。方法 采用硫氰酸胍－酚－氯仿一步法提取华支睾吸虫成虫总RNA。结果与结论 3.5h左右可自华支睾吸虫成虫获得高纯度、完整性好的RNA。其总RNA存在体内缺口现象,28s电泳主带缺如。     

华支睾吸虫未脱脂和脱脂成虫抗原的免疫印迹分析

目的 寻找华支睾吸虫成虫抗原中具有特异性诊断价值的抗原组分。方法 应用SDS—PAGE和Westernblot分析华支睾吸虫成虫未脱脂、脱脂的可溶性抗原蛋白组分的血清学反应特征。结果 未脱脂成虫抗原有14条蛋白带可与华支睾吸虫病病人血清反应，其中分子质量单位为180、170、100、67、41、37、35、32、26ku是主带，180、170、37、35ku条带还可与日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病病人血清发生交叉反应。脱脂成虫抗原有10条蛋白带可与华支睾吸虫病病人血清反应，其中分子质量单位为180、100、67、37、35、24、20ku是主带，此外，180ku带可与日本血吸虫病和卫氏并殖吸虫病病人血清发生交叉反应，78ku带可以与血吸虫病病人血清发生交叉反应。结论 华支睾吸虫成虫抗原经脱脂处理后可减少与日本血吸虫病和卫氏并殖吸虫病病人血清交叉反应的蛋白组分数量。华支睾吸虫未脱脂和脱脂成虫抗原中主要的特异性抗原组分分别是100、67、41、32、26ku和100、67、37、35、24、20ku，这些组分抗原可用于华支睾吸虫病的免疫诊断。     

华支睾吸虫糖基转移酶基因全长序列的克隆和生物信息学分析

目的分析和预测华支睾吸虫囊蚴全长cDNA质粒文库中编号为cs091c06的糖基转移酶基因EST序列结构和功能特征及其编码蛋白的理化性质,预测该基因的生物学意义和应用前景。方法利用NCBI网站和ExPaSy等生物信息学在线分析工具和Vector NTI suite等软件包,分析华支睾吸虫囊蚴全长cDNA质粒文库中cs091c06的EST序列及编码蛋白的理化性质、结构与功能特征。结果 BLASTx工具分析该EST序列是糖基转移酶的同源基因,序列全长为1 402bp,其完整的编码框为37～1 011bp,编码325个氨基酸。Target P和Signal P软件预测该编码氨基酸前30个氨基酸是分泌信号肽,蛋白的理化性质较稳定。蛋白质一级结构扫描发现两个糖基转移酶的保守功能区分别位于67～178aa和69～253aa,且在该基因的N端发现明显的蛋白质糖基化位点,分别位于76～79aa和190～193aa。在该基因的氨基酸序列中,共发现8个B细胞表位和6个T细胞表位。RT-PCR结果显示,该基因在华支睾吸虫成虫阶段高表达,囊蚴和虫卵阶段低表达。结论华支睾吸虫糖基转移酶基因与多个物种同源,编码蛋白可能是华支睾吸虫重要的虫体分泌排泄抗原成分;阶段特异性表达特征提示该基因很可能参与华支睾吸虫重要虫源蛋白糖基化过程,可作为华支睾吸虫病疫苗候选分子和药物靶标。     

肝吸虫感染大鼠模型的建立及肝损伤的观察

目的 观察不同剂量的肝吸虫囊蚴感染大鼠后粪便中虫卵检出率及肝组织的病理变化.方法 分离采自疫区麦穗鱼体内的囊蚴,分别以25、50、100和200个囊蚴经口感染四组大鼠,同时设生理盐水灌注对照组.生理盐水涂片法检查大鼠粪便中虫卵,虫卵检出率达100％时宰杀动物,取肝脏制备组织切片.结果 成功建立了肝吸虫感染Wistar大鼠的实验动物模型,观察到肝吸虫感染大鼠和肝吸虫病患者肝组织有典型的肝胆管病理学改变.感染组大鼠感染后3w粪便虫卵检出率为70.8％;感染后4w为85.4％;感染后5w为93.8％;感染后6w检出率为100％.感染25个囊蚴组虫体回收率为17.3％;感染50个囊蚴组虫体回收率为15.7％;感染100个囊蚴组虫体回收率为42.8％;感染200个囊蚴组虫体回收率为31.7％.对照组均未检出虫卵及成虫.结论 感染后6w肝吸虫虫卵的检出率达高峰;感染100个囊蚴组虫体回收率最高.肝吸虫感染可以引起宿主肝细胞变性和坏死,是患者的临床表现及肝损伤的病理基础.     

华支睾吸虫蛋白酶体β2新基因的识别与克隆表达

目的识别华支睾吸虫蛋白酶体β2亚单位新基因(CsPSMB2),表达其重组蛋白,为进一步研究CsPSMB2的功能奠定基础。方法通过大规模cDNA文库随机测序,发现CsPSMB2新基因。并将其定向插入到pGEX-4T-1载体中。构建成功的载体在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定。结果发现了编码PSMB2基因的一个新成员CsPSMB2,CsPSMB2全长708个核苷酸,编码一个201个氨基酸残基的蛋白,理论分子量为22.5kD,预测的蛋白与人的PSMB2蛋白同源性为58%并且含有一个蛋白酶体结构域,成功登录GeneBank,登录号为AY849972。构建成功重组质粒pGEX-4T-1-CsPSMB2,经IPTG诱导后表达出PSMB2的GST融合蛋白。结论发现华支睾吸虫新基因CsPSMB2,成功构建了pGEX-4T-1-CsPSMB2重组表达载体并表达出了CsPSMB2的GST融合蛋白。为进一步研究CsPSMB2在华支睾吸虫中的功能和可能的应用研究奠定基础。     

华支睾吸虫来源极性差异化合物的高效薄层色谱免疫分析

目的探索华支睾吸虫ESPs、虫卵和虫体水溶性组分中生物大分子极性和抗原性的差异并寻找可行的分离方法。方法用HPTLC法分离华支睾吸虫ESPs、虫卵和虫体的水溶性组分,同时结合免疫染色法研究极性差异组分的抗原性。结果用有机溶剂组合可将ESPs、虫卵和虫体水溶性组分中极性强弱差异的化合物分离开。氯仿︰甲醇︰水（11︰9︰2）溶剂组合对弱极性化合物各组分有较好的分离效果。与虫卵相比较,ESPs和虫体的弱极性组分较复杂。不能被有机溶剂展开的强极性组分的抗原性较强,未检测出弱极性组分的抗原性反应。通过有机溶剂提取的弱极性组分可完全在水中复溶并被有机溶剂重新展开。结论华支睾吸虫来源的水溶性组分中的弱极性化合物成分能通过有机溶剂组合进行有效分离。这为分离华支睾吸虫来源的脂类等弱极性生物大分子以及研究其病原相关分子模式的性质奠定了基础。     

Artemether, artesunate, praziquantel and tribendimidine administered singly at different dosages against Clonorchis sinensis: a comparative in vivo study

We comparatively assessed the in vivo efficacy of artemether, artesunate, praziquantel and tribendimidine against different stages of Clonorchis sinensis. Rats were infected with 40-50 C. sinensis metacercariae, and drugs were administered singly by the oral route at different dosages. Rats were dissected 2-4 weeks post-treatment and C. sinensis trematodes were removed from the liver and bile ducts and counted. We used a negative binomial regression model to test the effect of drug and dosage in terms of worm burden reduction. Single 150 mg/kg oral doses of artesunate, artemether, tribendimidine and praziquantel, administered to rats infected with adult C. sinensis, resulted in mean worm burden reductions of 100, 100, 89.5 and 80.7%, respectively (all P<0.001). Halving the dose to 75 mg/kg still resulted in highly significant worm burden reductions for artesunate, artemether and tribendimidine (71.4-100%), but not for praziquantel (20.7%). In the juvenile infection model, a single 150 mg/kg oral dose of tribendimidine and praziquantel resulted in mean worm burden reductions of 99.1 and 90.0%, respectively, whereas considerably lower reductions were observed for artemether (59.2%) and artesunate (57.6%) when used at the same single dose. The in vivo results presented here with the artemisinins and tribendimidine provide further data for clinical investigations to assess the safety and efficacy of these drugs in clonorchiasis patients.     

Discrimination of Opisthorchis viverrini from Haplorchis taichui using COI sequence marker

This study aimed to discriminate infections of two common fish-borne trematodes in Thailand, Opisthorchis viverrini from Haplorchis taichui, based on mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I (COI) gene. Designed primers (COI-OV-Hap F&R primers) amplified partial COI fragments of O. viverrini and H. taichui with high sensitivity in different developmental stages (adult, metacercaria, and egg). Polymerase chain reaction (PCR) amplicons were generated with low genomic DNA concentration ( approximately 10(-4)ng) of O. viverrini and H. taichui at 50 and 56 degrees C annealing temperatures, respectively. At 50 degrees C, COI fragments of Clonorchis sinensis and H. taichui were also obtained, but this was less sensitive than O. viverrini. At 56 degrees C, only H. taichui could be amplified and discriminated from H. pumilio, H. yogokawai, O. viverrini, and C. sinensis. Between 50 and 56 degrees C, the PCR amplicons of H. pumilio and H. yogokawai were amplified with low specificity and low sensitivity. The genetic characters among O. viverrini, C. sinensis, and H. taichui were distinguished by PCR-RFLP method. The PCR-RFLP profiles might be useful for diagnosing mixed O. viverrini and H. taichui infections in endemic areas, and for detecting metacercariae of O. viverrini, C. sinensis and H. taichui in epidemiological surveys of infections in fish hosts.     

三种抗原用于斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)诊断华支睾吸虫病的研究

应用斑点免疫金银染色技术(Dot-IGSS),以华支睾吸虫成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(CWU)和硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)诊断华支睾吸虫病,60例血清抗体检出率均达100.0％,与正常人血清反应(60例)阴性符合率为93.3～96.6％,与日本血吸虫病人(60例)的交叉反应为0～5.0％,与囊虫病人(30例)和肝炎病人(15例)的交叉反应分别为3.3～6.7％和0。各抗原间未见显著性差异(P>0.05)。但与混合阳性血清反应,AW活性似较AWA和CWU强。