肝星状细胞活化与细胞周期调控

肝星状细胞活化是肝纤维化形成的中心环节,目前尚未能完全阐明其复杂机制,近年研究发现该过程与细胞周期调控紊乱有密切关系。现对近年来 HSC活化和肝纤维化时 HSC细胞周期调控研究作一综述。     

肝星状细胞活化与细胞周期调控

肝星状细胞活化是肝纤维化形成的中心环节，目前尚未能完全阐明其复杂机制，近年研究发现该过程与细胞周期调控紊乱有密切关系。现对近年来HSC活化和肝纤维化时HSC细胞周期调控研究作一综述。     

干扰素β对肝星状细胞活化调控机制的影响

以往的研究已经证实干扰素β（IFNβ）不仅具有抗肝炎病毒的作用，还具有抗肝纤维化的作用，但其作用机制尚不明确。本研究旨在探讨能否经过调控转化生长因子β1（TGFβ1）、Smad4、Smad7、血小板衍生生长因子（PDGF）-BB等细胞因子的表达而影响肝星状细胞（HSC）的激活。     

肝星状细胞活化的分子生物学机制研究进展

肝纤维化的实质是细胞外基质的过度沉积。活化的肝星状细胞是肝内细胞外基质的主要来源。在各种致肝纤维化因素的作用下,肝星状细胞从富含维生素A的静息细胞表型转变为具有增殖性、分泌性的肌成纤维细胞表型。肝星状细胞活化以及活化后如何维持其致纤维化的特征,需要进一步去研究和探讨,以期找到更多的治疗肝纤维化的方法和策略。这里主要将肝星状细胞的活化及其分子生物学机制作一综述。     

肝星状细胞活化的分子机制研究进展

肝星状细胞(HSC)的活化是肝纤维化发生、发展的细胞学基础。近年来,有关细胞膜受体信号转导以及核转录因子的调控在HSC活化中的研究取得了很大进展。此文回顾近年来细胞膜受体与核转录因子家族在HSC激活中的介导、调节作用。     

肝星状细胞活化的启动、维持和调控

肝纤维化的形成是一个多因素、多细胞参与的复杂过程，肝星状细胞（HSC）的活化是其中的中心环节。PDGF、TGFβ、RA、PPAR及ROS等均参与了HSC活化过程的调节。     

肝星状细胞活化的启动、维持和调控

肝纤维化的形成是一个多因素、多细胞参与的复杂过程,肝星状细胞(HSC)的活化是其中的中心环节。PDGF、TGFβ、RA、PPAR及ROS等均参与了HSC活化过程的调节。     

调控Notch信号对肝星状细胞活化的影响

目的 探讨肝星状细胞(HSC-T6)内是否存在功能激活的Notch信号分子以及调控Notch信号转导对HSC-T6活化的影响. 方法 用PCR方法检测Notch信号分子mRNA在HSC-T6细胞内的表达,TaqMan探针检测转化生长因子(TGF)β 1刺激HSC-T6后Notch信号分子的表达变化.细胞免疫荧光法检测Notch3和Jagged1在HSC-T6内的表达定位.用携带Notch3胞内域(ICD)的真核表达质粒pcDNA3.1-N3ICD和特异性干扰Notch3的siRNA(Notch3-siRNA)分别转染HSC-T6细胞,Western blot检测Notch3、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)和Ⅰ型胶原的表达变化.对数据采用t检验和方差分析. 结果 HSC-T6细胞内存在功能激活的Notch信号转导.TGF β 1(2.0 ng/ml)刺激HSC-T6导致Jagged1、Notch3和HES-1的mRNA水平明显上调,分别提高了2.9、3.2、2.2倍,F值分别为2543.482,287.982和1719.851,P值均＜0.01.pcDNA3.1-N3ICD转染后促使HSC-T6合成α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白增加,较对照组分别提高了5.8倍和4.5倍,t值分别为13.157和9.810,P值均＜0.01;相反,Notch3- siRNA明显抑制HSC-T6表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白,较对照组分别下降了约90％和84％,t值分别为19.863和10.376,P值均＜0.01.而且,Notch3-siRNA能拮抗TGFβ1诱导HSC-T6表达α-SMA和Ⅰ型胶原的作用.结论 Notch信号通路可能通过调控肝星状细胞的活化参与肝纤维化的形成,选择性地干预Notch3信号转导可能成为抗肝纤维化的新途径.     

肝星状细胞活化的关键路径

肝星状细胞（HSC）为肝纤维发生发展中心环节,活化状态HSC的凋亡是纤维化的关键特征。HSC激活转变为肌成纤维细胞（MFC）表型,收缩、增生,分泌胶原蛋白和其他细胞外基质（ECM）参与肝内结构的重建,通过集成信号网络调节ECM的沉积从而促进纤维化或者修复损伤。肝纤维化进展和逆转都需要特定信号通路,了解其在肝损伤中如何互动和演变对揭示肝纤维发生发展的复杂机制尤为关键。     

整合素与肝星状细胞活化

整合素(integrin)参与细胞和细胞外基质(ECM)、细胞和细胞间的黏附,介导与细胞活化、增殖、运动和凋亡等有关的信号,在免疫调节、肿瘤浸润、损伤修复中起重要作用。慢性肝损伤中静止的肝星状细胞(HSC)活化、增殖、表型转变,ECM异常沉积,星状细胞整合素表达水平和受体亲和力改变,并与生长因子协同作用参与肝纤维化的分子机制。一、整合素家族(一)整合素分子结构整合素(或整合素受体)是由α、β两个亚基非共价结合成的异源二聚体细胞表面糖蛋白。目前已发现8种类型的β亚基和18种α亚基,装配成至少24种不同的亚型受体,分布有选择性和时序…     

肝星状细胞激活与信号转导

肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段,是所有慢性肝病的共同病理基础.目前认为肝星状细胞的激活是肝纤维化形成的关键,各种致病因素作用下引起肝损伤,释放多种细胞因子,如转化生长因子β、血管紧张素、瘦素,通过各种信号转导使肝星状细胞激活.本文就肝星状细胞激活过程中一些重要的膜受体、核受体信号转导途径及其研究进展作一综述.     

大鼠肝细胞对肝星状细胞增殖与活化的影响及其机制探讨

目的观察肝细胞对原代肝星状细胞（HSC）增殖、表型、胶原表达等生物学特性的影响，并为探讨其作用机制提供线索。方法原位灌流分离大鼠HSC，与大鼠肝细胞系BRL共培养48h。在相差显微镜下观察HSC的表型变化，用Westernblot方法检测其α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型前胶原的表达，TUNEL方法检测其凋亡。取BRL细胞的培养上清液培养原代HSC，用MTT法检测其增殖。采用抗体芯片投水碌示BRL细胞的培养上清液与对照培养基之间细胞凶子的表达差异。结果BRL细胞的培养上清液明显促进HSC增殖（P〈0．01）。与BRL细胞共培养的原代HSC胞体收缩性增强，Ⅰ型前胶原及α-SMA的表达上调，凋亡增加（P〈0．01）。较对照培养基，BRL细胞的培养上清液中帆管内皮生长因子（VEGF）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP-1）等三种细胞因子显著上调。结论肝细胞可促进原代HSC的增殖与活化，其机制可能与肝细胞分泌VEGF、MCP-1、TIMP-1等细胞因子有关。     

高血糖对大鼠肝纤维化及肝星状细胞活化的影响

目的探讨高血糖对大鼠肝纤维化及肝星状细胞活化的影响。方法取大鼠66只,随机分为4组,A组和B组均采用STZ(链脲佐菌素)和CCl4(四氯化碳)诱导为肝纤维化并糖尿病模型。A组诱导成功不做处理。B组糖尿病诊断成立后,皮下注射门冬胰岛素,3次/d控制血糖。C组单纯利用CCl4(四氯化碳分析纯)诱导为肝纤维化模型。D组(空白对照组)常规喂养,不做处理。观察各组大鼠一般情况(包括鼠食消耗、毛发变化、活动指数),8周后处死,测量大鼠体质量、肝脏体积及重量,采集血液及肝脏标本,分析对比各组大鼠肝脏系数,HE染色后光镜下肝组织纤维化情况;免疫组化SP法检测肝组织内α-SMA表达。结果实验各组与对照组大鼠相比体质量明显减轻(P<0.05),肝脏系数明显增加(P<0.05),肝组织α-SMA表达均不同程度增强(P<0.05);其中A组的体质量减轻最明显,肝纤维化、肝脏系数增加最显著(P<0.05),肝组织α-SMA表达亦有显著性差异(P<0.05);B组与C组相比体质量无明显减轻(P>0.05),肝脏系数无明显增加(P>0.05),而肝组织α-SMA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论高血糖可促进大鼠肝纤维化形成及肝星状细胞的活化。     

Molecular mechanism of hepatic stellate cell activation and antifibrotic therapeutic strategies

Activation of hepatic stellate cells (HSCs) is the dominant event in liver fibrosis. The early events in the organization of HSC activation have been termed initiation. Initiation encompasses rapid changes in gene expression and phenotype that render the cells responsive to cytokines and other local stimuli. Cellular responses following initiation are termed perpetuation, which encompasses those cellular events that amplify the activated phenotype through enhanced growth factor expression and responsiveness. Multiple cells and cytokines play a part in the regulation of HSC activation. HSC activation consists of discrete phenotype responses, mainly proliferation, contractility, fibrogenesis, matrix degradation, chemotaxis and retinoid loss. Currently, antifibrotic therapeutic strategies include inhibition of HSC proliferation or stimulation of HSC apoptosis, downregulation of collagen production or promotion of its degradation, administration of cytokines, and infusion of mesenchymal stem cells. In this review, we summarize the latest advances in our understanding of the mechanisms of HSC activation and possible antifibrotic therapeutic strategies.     

钙通道阻滞剂维拉帕米抑制肝星状细胞活化和功能

探讨维拉帕米（Ver）对人肝星状细胞系（HSC）-LX2的活化及分泌转化生长因子（TGF-β）的抑制作用。方法体外用内皮素-1（endothelin,ET-1）刺激HSC-LX2活化建立培养体系,设对照、ET-1和ET-1＋Ver 3组,对照组仅加入培养基,ET-1组加入ET-1和培养基,ET-1＋Ver组加入ET-1、Ver和培养基,分别在（0、12、24、48、72 h）观察HSC分沁α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和细胞因子的能力,采用细胞爬片和免疫组化技术鉴定活化HSC的细胞形态;流式细胞术分析HSC表达α-SMA水平,ELISA测定不同组HSC分泌TGF-β的浓度。结果与对照组比较,ET-1组HSC活化和分泌TGF-β的能力较强（P〈0.05）;与ET-1组比较,ET-1＋Ver组HSC活化和分泌TGF-β能力较弱（P〈0.05）。结论 Ver体外实验中能抑制HSC的增殖和活化,具有潜在的抗纤维化作用。     

MicroRNAs在肝星状细胞活化过程中表达差异谱的研究

目的 应用MicroRNAs基因芯片技术筛选静止和活化肝星状细胞差异表达的MicroRNAs.方法 用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSCs,并进行体外培养,借助荧光倒置显微镜观察细胞形态,MicroRNAs基因芯片技术和荧光定量PCR检验MicroRNAs在HSCs静止期(2天)和活化期(14天)的表达.结果 HSCs的miRNAs表达谱中差异表达miRNAs共21个,其中上调12个,下调9个(P＜0.01);荧光定量RT-PCR证实其表达水平在静止和活化期肝星状细胞中均有差异(P＜0.01).结论 MicroRNAs基因芯片筛选差异表达miRNAs可望为肝纤维化的基因治疗提供全新的靶标和策略,为肝纤维化的发病机制和诊断治疗研究提供了新的思路.     

氧化应激在肝星状细胞活化中的作用

肝纤维化是肝脏对各种慢性损伤的一种修复应答反应，其病理中心环节是肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ　ｃｅｌｌ，ＨＳＣ）由静止状态转变为活化状态，成为肝纤维化形成的细胞学基础。ＨＳＣ的活化具体表现在：（１）细胞体积增大，伸出伪足，含维生素Ａ的脂滴减少，表型向肌成纤维细胞样细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ—ｌｉｋｅ ｃｅｌｌ）转化。（２）细胞获得增殖能力。（３）纤维化能力增强，大量生成细胞外基质。（４）表达平滑肌细胞骨架蛋白如α－平滑Ｌ动蛋白。许多因素如炎性因子、细胞外基质的改变、生长因子以…     

Notch3 regulates the activation of hepatic stellate cells

AIM: To investigate whether Notch signaling is involved in liver fibrosis by regulating the activation of hepatic stellate cells (HSCs).METHODS: Immunohistochemistry was used to detect the expression of Notch3 in fibrotic liver tissues of patients with chronic active hepatitis. The expression of Notch3 in HSC-T6 cells treated or not with transforming growth factor (TGF)-β1 was analyzed by immunofluorescence staining. The expression of Notch3 and myofibroblastic marker α-smooth muscle actin (α-SMA) and collagen I in HSC-T6 cells transfected with pcDNA3.1-N3ICD or control vector were detected by Western blotting and immunofluorescence staining. Moreover, effects of Notch3 knockdown in HSC-T6 by Notch3 siRNA were investigated by Western blotting and immunofluorescence staining.RESULTS: The expression of Notch3 was significantly up-regulated in fibrotic liver tissues of patients with chronic active hepatitis, but not detected in normal liver tissues. Active Notch signaling was found in HSC-T6 cells. TGF-β1 treatment led to up-regulation of Notch3 expression in HSC-T6 cells, and over-expression of Notch3 increased the expression of α-SMA and collagen I in HSC-T6 without TGF-β1 treatment. Interestingly, transient knockdown of Notch3 decreased the expression of myofibroblastic marker and antagonized TGF-β1-induced expression of α-SMA and collagen I in HSC-T6.CONCLUSION: Notch3 may regulate the activation of HSCs, and the selective interruption of Notch3 may provide an anti-fibrotic strategy in hepatic fibrosis.