宫颈癌组织中抑癌基因Syk启动子甲基化的研究

目的 探讨宫颈癌组织中脾酪氨酸激酶(Syk)基因启动子甲基化程度及其临床意义.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测60例宫颈癌、50例宫颈上皮内瘤变(CIN)和20例正常宫颈组织中Syk基因启动子甲基化情况.结果 宫颈癌组织中Syk基因启动子甲基化率明显高于CIN组织及正常宫颈组织(χ2=17.13、19.71,P<0.05);Syk基因甲基化程度在宫颈癌组织中的表达与肿瘤淋巴结转移有明显相关性(χ2=10.22,P<0.01),但与病人年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学类型及病理类型无明显相关性(P>0.05).结论 Syk 基因启动子甲基化可能与宫颈癌发生及其淋巴转移有关.     

子宫内膜癌中SFRP1基因启动子甲基化及其mRNA表达

目的研究子宫内膜癌中SFRP1基因启动子甲基化及其对SFRP1 mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性PCR技术检测36例子宫内膜癌组织和对应癌旁组织中SFRP1基因启动子甲基化状态,RT-PCR方法检测上述样本的mRNA表达水平,并对结果进行统计学分析。结果子宫内膜癌组织中SFRP1基因启动子甲基化的阳性率为47.2%,癌旁组织中为11.1%,两者比较差异有统计学意义(P=0.001)。14例存在启动子甲基化和5例无启动子甲基化的子宫内膜癌组织中缺乏SFRP1 mRNA表达或表达较癌旁组织明显下降。结论SFRP1基因启动子甲基化在子宫内膜癌中常见,部分成为其表达下降的原因。     

子宫内膜癌组织中FHIT基因启动子区域CpG岛甲基化状况的研究

目的 :检测子宫内膜癌组织中FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化状况 ,分析其与临床病理特征之间的关系 ,探讨FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法 :采用甲基化特异的PCR方法对亚硫酸氢盐修饰过的 35例子宫内膜癌组织、癌旁组织及患者自身外周血白细胞DNA和 2 0例非癌患者子宫内膜组织DNA的FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化状况进行分析。结果 :癌组织中FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化率为 2 5 .71 % ,癌旁组织和外周血中也存在相似的甲基化率。非癌患者的子宫内膜组织中FHIT基因的CpG岛无甲基化。癌组织与非癌患者子宫内膜组织的甲基化率之间的差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。DNA甲基化与临床病理特征之间无相关性。FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化为子宫内膜癌发生中的早期事件。结论 :子宫内膜癌组织中存在FHIT基因启动子区域CpG岛的甲基化 ,CpG岛的甲基化与临床病理特征之间无相关性。DNA甲基化为子宫内膜癌发生中的早期事件。癌旁组织和外周血可用于癌相关基因启动子区域CpG岛甲基化的检测     

子宫内膜癌组织血栓调节蛋白基因的表达及甲基化分析

<正>子宫内膜癌是以阴道出血或排液为主要临床表现的病因尚未明确的妇科肿瘤疾病,发病人群呈年轻化趋势。有研究认为异常DNA甲基化^[1]在子宫内膜癌发生发展过程中具有关键作用^[2],DNA甲基化水平明显升高,对于散发性子宫内膜癌具有较高的诊断价值^[3],周芮琪^[4]则发现CHST11低甲基化诱导子宫内膜癌的发生,且与临床密切相关。近年来,血栓调节蛋白(THBD)基因受到研究者广泛关注,认为THBD是一种新型抑癌基因,该基因表达失活与肿瘤的发展有一定关系,而THBD启动子的低甲基化可能是导致该基因低表达的一个重要因素。     

子宫内膜癌与p16INK4a基因5'CpG岛甲基化的关系

目的探讨子宫内膜癌中p16^INK4a基因甲基化状态及其与子宫内膜癌发生发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR检测37例子宫内膜癌组织患者（观察组）和10例因其他疾病而切除子宫的患者（对照组）的子宫内膜组织中p16^INK4a基因5’CpG岛甲基化状态。结果对照组子宫内膜无甲基化,观察组中12例甲基化,占32．43％;p16^INK4a基因甲基化与临床分期密切相关（P〈0．05）。结论p16^INK4a基因5’CpG岛高甲基化是该基因在子宫内膜癌中失活的重要机制,可能是子宫内膜癌发生的早期事件,并与其发生发展有关。     

人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B中RASSF1A基因的甲基化及其表达

目的:研究Ras相关结构域家族1A基因(RASSF1A)启动子区域在子宫内膜癌细胞株HEC-1-B中的甲基化状态及其与RASSF1A基因表达的关系。方法:采用甲基化特异性PCR(Methylation specialPCR,MSP)技术检测HEC-1-B细胞RASSF1A基因甲基化状态;采用逆转录PCR(RT-PCR)技术检测HEC-1-B细胞RASSF1A mRNA表达;并观察去甲基化药物5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用后RASSF1A基因甲基化状态和RASSF1A mRNA表达。结果:子宫内膜癌细胞株HEC-1-B存在RASSF1A高甲基化,RASSF1A mRNA表达缺失或低表达。结论:子宫内膜癌细胞株HEC-1-B中的RASSF1A基因启动子区域DNA存在高甲基化,可能在子宫内膜癌的发生发展中起作用。     

SOCS-3和3-OST-2基因甲基化在子宫内膜癌中的作用及其临床病理意义

目的 研究子宫内膜癌(EC)中相关抑癌基因(SOCS-1、SOCS-3、3-OST-2、DLC-1)的启动子甲基化状态,探讨其临床病理意义.方法 收集60例EC、79例增生子宫内膜和27例正常子宫内膜标本,运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测4个抑癌基因的甲基化状态;MSP和实时荧光定量PCR法检测表观遗传学药物处理前后Ishikawa细胞株中抑癌基因甲基化及mRNA表达变化.结果 在EC中,SOCS-1和DLC-1基因甲基化率较低(分别为13.3％和21.7％),SOCS-3和3-OST-2基因甲基化率很高(分别为88.3％和78.3％),且SOCS-3在复杂和不典型增生中就出现高频率的甲基化(分别为53.3％和54.2％).3-OST-2甲基化与肿瘤分化呈正相关(P＜0.05).SOCS-3和3-OST-2在Ishikawa细胞株中均呈完全甲基化状态,DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂5-Aza-dC或组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂TSA处理后甲基化均得到部分逆转,mRNA表达明显增加,且TSA效果优于5-Aza-dC;两药联合处理后甲基化被完全逆转,mRNA水平显著升高.结论 SOCS-3、3-OST-2基因启动子甲基化在EC中是一个频发事件,且SOCS-3甲基化的发生早于3-OST-2.DNA甲基化和组蛋白修饰共同参与了3-OST-2和SOCS-3的基因表达调控,并存在交叉作用.     

抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中的表达

目的探讨抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中的表达及与子宫内膜癌临床、病理等因素的相关性。方法运用免疫组织化学（SP法）检测10例增生期子宫内膜、28例子宫内膜增殖症、8例不典型增生和54例子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达情况,并比较PTEN蛋白表达与内膜癌临床、病理等因素之间的相关性。结果PTEN蛋白在增生期子宫内膜、子宫内膜增殖症、不典型增生和子宫内膜癌中阳性表达率呈下降趋势,分别为100％（10／10）、89．29％（25／28）、87．5％（7／8）和55．56％（30／54）,在子宫内膜癌中的表达率显著低于增生子宫内膜（P=0．0087）和子宫内膜增殖症（P=0．0022）,PTEN蛋白表达与内膜癌组织学类型、临床分期、组织分化有关。结论PTEN与子宫内膜癌发生、发展密切相关,与子宫内膜癌的组织学类型、临床分期、组织分化密切相关,PTEN有望成为内膜癌治疗的靶蛋白及判定预后的标记物。     

胃癌组织中相关肿瘤抑制基因启动子区甲基化状态

目的分析胃癌组织中肿瘤抑制基因启动子区甲基化状态及其与临床分期、分型的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应方法,检测106例胃癌及其邻近胃小凹上皮、16例慢性胃炎小凹上皮石蜡标本中E钙黏素（E—CD）、错配修复酶hMLH1、APC和6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因启动子区甲基化状态,并对其中46例胃癌采用免疫组化方法检测E—CD蛋白表达情况。结果在胃癌、胃癌邻近小凹上皮及慢性胃炎小凹上皮中,基因甲基化频率分别为72．6％（77／106）、44．3％（47／106）和12．5％（2／16）,三者问差异有统计学意义（P〈0．01）。Laurén弥漫型胃癌甲基化（80．6％,50／62）明显高于肠型胃癌甲基化（61．4％,27／44）,两者间差异有统计学意义（P〈0．01）。甲基化与患者的年龄、性别、Ming分型及区域淋巴结转移无关（均P〉0．05）,甲基化与胃癌的浸润深度、pTNM分期和分化程度有关（均P〈0．05）。行E—CD蛋白检测的46例胃癌中,22例有E—CD基因甲基化,其中20例（90．9％）E—CD蛋白呈异质性减弱或基本消失表达;24例无E—CD基因甲基化,其中9例（37．5％）E—CD蛋白呈异质性减弱或基本消失表达,两者间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论上述肿瘤抑制基因启动了区甲基化可能是胃癌发生的早期事件。胃癌E—CD基因甲基化与E—CD蛋白异质性减弱或消失表达密切相关。     

胃癌中E-cadherin基因甲基化状况及其表达的研究

目的:检测胃癌组织中E-cadherin基因启动子区域的甲基化状况,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达及其临床病理指标的关系。方法:采用甲基化特异性PCR方法对胃黏膜中E-cadherin基因启动子区域甲基化状况进行检测,并采用免疫组织化学方法相应检测了E-cadherin蛋白表达。结果:胃癌中E-cadherin基因甲基化率为3 4.6% (2 8/81 ) ,显著高于正常胃黏膜该基因甲基化率(P =0 .0 2 8)。E-cadherin蛋白表达阳性率为64.2 % (5 2 /81 )。E-cadherin基因甲基化与其蛋白表达无相关性(P >0 .0 5 ) ,与肿瘤组织学类型、淋巴结转移及性别均无相关性,但与年龄有关,随着年龄增加病人甲基化率呈增高趋势。结论:E-cadherin基因甲基化与年龄有关,E-cadherin基因异常甲基化是常见的一种基因异常改变,可能参与了胃癌的发生发展过程。     

子宫内膜癌组织P27蛋白的表达及其临床意义

目的探讨子宫内膜癌中P27蛋白的表达及其临床意义.方法采用免疫组化SP法检测42例子宫内膜癌中P27蛋白的表达,并与正常子宫内膜和增生内膜进行了对比.结果子宫内膜癌中P27蛋白胞核高表达率为21.4%,明显低于正常子宫内膜和增生子宫内膜,差异有显著性（χ^2=5.470、12.306,P〈0.05）;P27蛋白胞核表达与组织学分级有关,分化差者P27蛋白胞核表达率低（χ^2=12.715,P〈0.01）;内膜癌中P27蛋白胞浆表达阳性率为47.6%,明显高于正常子宫内膜和增生内膜（H=57.656,P〈0.01）.结论 P27蛋白胞核表达缺失与子宫内膜癌的发生发展及恶性程度的增高有关;P27蛋白胞核定位缺失与其功能丧失有关.     

癌基因bcl—2和抑癌基因p16在子宫内膜癌的表达及意义

目的：研究癌基因ｂｃｌ－２和抑癌基因ｐ１６在子宫内膜癌的表达及发生、发展中的作用。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法检测５８例子宫内膜癌中ｂｃｌ－２、ｐ１６基因表达。结果：子宫内膜癌中ｂｃｌ－２的阳性表达率为５６．９％；ｐ１６阳性表达率为４３．１％。子宫内膜癌组织学分级：高度分化腺癌（Ｇ１）、中等分化腺癌（Ｇ２）中ｂｃｌ－２和ｐ１６的阳性表达率显著高于未分化癌（Ｇ３）的阳性表达率（Ｐ〈０．０１）。ｂｃｌ－     

原发性子宫内膜癌组织p15基因及其蛋白的表达

①目的 检测原发性子宫内膜癌组织中p15基因以及相应蛋白的表达，以探讨该基因在原发性子宫内膜癌发生发展中的作用。②方法 应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）及免疫组化方法，对62例原发性子宫内膜癌及15例正常子宫内膜组织的p15基因和相应蛋白的表达进行检测。③结果 62例子宫内膜癌组织中有24例p15基因表达缺失（38.71%)，蛋白表达缺失者27例（43.55%)；15例正常子宫内膜组织p15基因及其蛋白均表达；p15基因和相应蛋白表达缺失率与原发性子宫内膜癌的FIGO分期以及组织学分级有关（χ^2=11.57-15.52，P均＜0.05)，且有随临床期别及组织学分级的增高其表达缺失率呈增加趋势（χ^2=11.04-11.98，P均＜0.05)。④结论 p15基因及其蛋白的异常表达与原发性子宫内膜癌的发病有关。     

ApoaⅡ基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床价值

目的:探讨载脂蛋白AⅡ(ApoaⅡ)基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义.方法:采用RT-PCR技术检测39例卵巢恶性肿瘤、16例良性肿瘤及18例正常卵巢组织ApoaⅡ mRNA的表达情况,分析其与,临床诊断、治疗及预后的关系.结果:①卵巢恶性肿瘤表达ApoaⅡ基因,正常卵巢及良性肿瘤不表达Apoa Ⅱ基因,即Apoa Ⅱ基因与临床诊断有关(P<0.05).②ApoaII基因与患者年龄有关(P<0.05),但ApoaⅡ基因与组织学类型、病理分期及预后无关(P>0.05).结论:Apoa Ⅱ基因表达异常可能不是卵巢肿瘤细胞基因的改变,而是化疗引起机体代谢变化的结果或是先期化疗不足以引起卵巢肿瘤细胞分子水平的改变.     

COX-2与芳香化酶在增生子宫内膜及子宫内膜癌组织表达及意义

目的 研究环氧化酶-2（COX-2）与芳香化酶（P450arom）在单纯与复杂增生子宫内膜、非典型增生内膜及子宫内膜癌组织中的表达,并分析两者表达的相关性和意义。方法 选取94例手术及刮宫组织标本,其中正常子宫内膜10例、单纯与复杂增生子宫内膜29例、非典型增生子宫内膜17例、子宫内膜癌38例,运用免疫组织化学Envision法检测COX-2与P450arom蛋白的表达。结果 COX-2蛋白在单纯与复杂增生子宫内膜、非典型增生子宫内膜和子宫内膜癌中的表达均高于正常子宫内膜,差异均有统计学意义（χ^2=5.283~14.928,P〈0.05）;P450arom蛋白在子宫内膜癌中的表达高于正常子宫内膜,差异有统计学意义（χ^2=9.023,P〈0.01）;在单纯与复杂增生子宫内膜、非典型增生子宫内膜中的表达与正常子宫内膜比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。而在子宫内膜癌中,两者的表达与组织学分级及手术病理分期均无关（P〉0.05）。COX-2和P450arom蛋白在子宫内膜癌及癌前病变中的表达密切相关（r=0.598,P〈0.01）。结论 COX-2与P450arom蛋白在子宫内膜癌及癌前病变中呈高表达,且两者的表达呈正相关,提示两者可能存在协同作用,共同促进子宫内膜癌的发生和发展。     

c-myc在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的研究癌基因c-myc在子宫内膜癌中的表达与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系.方法采用免疫组化(s-p)法检测10例增生子宫内膜、22例子宫内膜不典型增生、42例子宫内膜癌中c-myc基因表达.结果c-myc在子宫内膜癌中的阳性率为26.19%(11/42)显著高于增生子宫内膜(均显阴性)及子宫内膜不典型增生(4.55%,1/22)中的阳性率(P＜0.05,P＜0.05);c-myc在子宫内膜癌中的表达与组织学分级、临床分期显著相关(P＜0.01,P＜0.05),但与肌层浸润深度及淋巴结转移无关(P＞0.05,P＞0.05).结论癌基因c-myc在子宫内膜癌的发生、发展及转归中起着重要作用.     

肝细胞癌中RhoC mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨RhoC mRNA在人肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其与HCC复发转移的关系。方法：用荧光定量PCR技术检测82例HCC及其癌旁肝组织,16例正常肝组织中RhoC mRNA的表达情况。分析mRNA表达量与临床资料之间的关系。结果：RhoC mRNA在HCC、癌旁组织和正常组织中均可检测到表达,表达量分别为1.18±0.77、0.67±0.29和0.38±0.18,组间表达量比较差异有统计学意义（P〈0.05）,RhoC mRNA在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁肝组织中的表达水平,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;RhoC mRNA在HCC中的表达量与结节数目多,门静脉癌栓,术后复发转移相关（P〈0.05）,RhoC mRNA高表达的患者术后5年生存率明显低于RhoCmRNA低表达的患者（P〈0.05）。结论：RhoC mRNA的过表达可能与HCC的发生及复发转移有关,有可能做为HCC患者术后复发转移的预测指标。     

人原发性肝癌及癌周肝组织中C-myc基因的表达

①目的探讨癌周肝组织与肝癌组织发生之间的关系。②方法应用免疫组织化学方法对６０例原发性肝癌及其癌周组织中Ｃ－ｍｙｃ基因进行检测。③结果Ｃ－ｍｙｃ基因在肝癌和癌周增生结节及癌周肝硬变组织中的阳性率分别为３８．３％（２３／６０），４０．５％（１５／３７）和２６．７％（８／３０）。经统计学处理，肝癌与增生结节、肝硬变组织间差异均无显著性（χ２＝０．０５，１．２１，Ｐ均＞０．０５），增生结节与肝硬变组织间差异亦无显著性（χ２＝１．４１，Ｐ＞０．０５）。④结论Ｃ－ｍｙｃ癌基因过度表达是肝癌癌变过程中的重要因素；Ｃ－ｍｙｃ癌基因的过度表达可能与癌周增生结节的恶性转化有较密切的关系。癌周增生结节属癌前期病变，与肝癌的发生有关