恶性胸水中IL-2水平与TIL细胞体外扩增及活性的关系

目的　通过对恶性胸水中内源性白介素 2的水平进行检测及对胸水中肿瘤浸润淋巴细胞体外增殖能力及体外抗肿瘤活性的观察 ,了解内源性IL 2水平对胸水TIL细胞体外扩增及抗肿瘤活性的影响。方法　用MTT法检测TIL细胞体外杀瘤活性 ,用ELISA法检测IL 2的水平。将IL 2水平较高的2 4例患者分为一组 ,IL 2水平较低的 2 4例患者分为另一组。比较两组患者胸水TIL细胞体外增殖速度及杀瘤活性。结果　恶性胸水中内源性IL 2水平较低组 ,TIL细胞体外扩增倍数明显高于内源性IL 2水平较高组。IL 2水平较低组TIL细胞体外杀瘤率明显高于IL 2水平较高组。结论　恶性胸水中内源性IL 2水平高低与TIL细胞体外增殖的速度及其杀瘤活性明显相关 ,原有IL 2水平较低的患者胸水中TIL细胞体外增殖的速度较快 ,杀瘤活性较强。胸水中IL 2水平可望作为恶性胸水IL 2 /TIL治疗选择的指标。     

TIL细胞治疗恶性胸水的疗效观察

目的观察肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)治疗恶性胸水的疗效。方法从30例恶性肿瘤胸水中的肿瘤细胞分离得到TIL,并经10%人AB血清RPM I-1640液培养,经rIL-2体外激活培养,随后胸腔注射。结果完全缓解12例(40.0%),有效15例(50.0%),无效3例(10.0%),总有效率90.0%(27/30)。结论 TIL治疗恶性胸腔积液疗效好,毒副作用小,能改善患者的生活质量。     

乳腺癌术后胸膜转移性胸水TIL的细胞毒活性研究

目的：探讨乳腺癌术后胸膜转移引起的胸水中肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）毒活性。方法：采用生物技术，提纯乳腺癌胸膜转移所致胸水中的TIL和相应的肿瘤细胞，经过一定时间诱导培养后，在7天，14天，21天和28天分别检测TIL对自身肿瘤细胞和K562细胞的杀伤活性。结果：该TIL对自身肿瘤细胞和K562细胞的杀伤活性无显性差异，21天时细胞毒活性最强。结论：TIL诱导培养21天时具有较强的生物活性，此时进行临床应用可能取得最佳疗效。     

头颈部鳞癌TIL细胞制备的方法学研究

用直拉分离和酶消化分离两种方法分离头颈部鳞癌组织中淋巴细胞，经重组白细胞介素２培养，制备出具明显抗肿瘤活性的肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）。结果示直接法所得ＴＩＬ前体细胞数量少、活性较高，增殖快；酶消化法所得ＴＩＬ前体细胞数量多，但活性较低、增殖慢。培养后期两种方法制备的ＴＩＬ细胞抗肿瘤活性无差异。对某些质地坚硬的肿瘤组织用直接法得ＴＩＬ细胞较少，难以满足细胞数量要求，此时应并用直接分离与酶消化法。     

肿瘤抗原致敏的树突状细胞联合IL-2活化的淋巴细胞胸腹腔输注治疗晚期癌性胸腹水

目的：观察肿瘤抗原致敏的树突状细胞联合白细胞介素2活化的淋巴细胞胸膜腹腔内输液治疗晚期癌性胸腹水的效果,为肿瘤的生物治疗提供新的思路。方法：分离晚期癌症患者外周血中单个核细胞,制备单核细胞来源的DC（MoDC)和IL－2活性的淋巴细胞。用患者胸腹腔积液中分离的肿瘤细胞制备冻融抗原致敏MoDC后,联合IL－2活化的淋巴细胞给患者胸腹腔输注,X线或B超监测免疫治疗后胸腹腔积液的变化,FACS分析治疗前后胸腹水中淋巴细胞表面细胞因子受体的表达情况,结果：经肿瘤抗原MoDC联合IL－2活化的淋巴细胞胸瘤腔输液后,胸腹水中表达IL－2R的淋巴细胞数目明显增多,表达IL－10R的淋巴细胞数目明显减少,光镜下可见较多的DC对淋巴细胞黏附及淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤,免疫治疗组完全缓解率46．9％,部分结解率53．1％,有效率100．0％,明显高于DDP对照组（P＜0．05）,结论：肿瘤抗原致敏的MoDC联合IL－2活化的淋巴细胞胸腹腔内输注能显著地促进胸腹水中肿瘤浸润性淋巴细胞的增殖和活化。提高了癌症患者的免疫功能,有效地治疗癌性胸腹水,其机制与肿瘤抗原致敏的MoDC对肿瘤抗原的有效提呈和IL－2活化的淋巴细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用有关。     

肺癌TIL抗瘤活性、表型分析及临床应用的初步观察

目的 从肺癌患者手术切除的肿瘤组织中分离出肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）,经rIL-2体外激活培养,研究TIL对瘤细胞的杀伤活性及其表型变化,并对其回输后的毒副反应及患者免疫功能 变化进行了观察。方法 从51例肺癌患者手术切除的实体瘤中分离得到TIL,并经10％人AB血清RPMI－1640液培养。12例在培养前、后应用3H－TdR释放实验测定TIL对自体瘤细胞和801－D细胞的杀伤作用,13例用间接免疫荧光法测定了淋巴细胞表型CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 比例的变化。15例患者静脉输注了活化的自体TIL。结果 TIL在培养第25天左右对自体瘤细胞和801－D细胞的杀伤力比培养当天有显著性提高;淋巴细胞表型分析示CD3^ 、CD8^ 比例在培养过程中有明显提高,而CD4^ 比例和CD4^ /CD8^ 比例变化不大;自体回输的15例患者一般状况好, 无明显毒副反应,辅助检查无异常改变,免疫功能增强,复查血尿常规、生化、心肺功能等均无异常改变,远期疗效正在观察中。结论 大部分病例短期即可回输TIL,且毒副反应小,因此肺癌TIIL过继免疫治疗是一种值得在临床进一步研究的免疫治疗方法。     

肿瘤浸润淋巴细胞的体外培养及临床应用研究

目的：研究肺癌患者胸腔积液中肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes，TIL)对瘤细胞的杀伤活性及其表型变化，并对其回输后毒副反应及患者免疫功能进行观察。方法：应用贴壁法分离恶性胸腔积液中TIL，并经rIL-2诱导培养；用间接免疫荧光法测定CD3^ 、CD4^ 和CD8^ 比例；应用^2H-TdR释放法测定TIL对自体瘤细胞和801-D细胞的杀伤作用；用活化的自体TIL注入患者胸腔内，观察胸腔积液变化。结果：第21天时CD3^ 和CD8^ 比例明显提高，而CD4^ 比例和CD4^ ／CD8^ 比值变化不大；对自体瘤细胞和801-D细胞的杀伤力明显提高；40例自体回输治疗胸腔积液的患者，有效率为72．5％，且一般状况好，毒副反应小，辅助检查无异常改变，免疫功能增强。结论：肺癌TIL过继免疫治疗对恶性胸腔积液患者是一种安全、有效的免疫治疗方法。     

人胃癌肿瘤浸润淋巴细胞的体外抗肿瘤活性研究

 根据11例胃癌手术标本的研究,肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)经重组白细胞介素2(rIL-2)诱导能在体外长期生长、扩增,长期培养的6例平均扩增15.1倍。细胞毒活性试验对多种瘤靶细胞有杀伤活性,并对自体瘤细胞和胃癌细胞系显示靶细胞特异性,其杀伤高峰在培养的第三、四周。冻存对TIL的扩增和杀伤活性均无明显影响。提示胃癌TIL临床应用的可能性。     

血清IL-2水平与恶性胸/腹水IL-2治疗疗效的关系

目的：对恶性胸/腹水患者血清白细胞介素2（interleukin-2,IL-2)水平进行测定，了解血清IL-2水平与胸/腹腔灌注IL-2治疗恶性胸/腹水的疗效之间的关系。以期获得判定恶性胸/腹水治疗疗效的指标。方法：88例恶性非肝癌性胸/腹水患者，均接受IL-2胸/腹腔灌注治疗，治疗前应用ELISA法检测血清IL-2水平，将IL-2测定值较高的44例患者分为一组，IL-2测定值较低的44例患者分为另一组，比较两组患者的治疗效果。结果：血清IL-2测定值较低组IL-2胸/腹腔灌注治疗的有效率为72.7%(32/44)。明显高于IL-2测定较高组的52.3%(23/44)。结论：恶性胸/腹水患者IL-2胸/腹腔灌注治疗前血清IL-2水平高低与IL-2治疗的疗效明显相关。原有IL-2水平较低的患者IL-2胸/腹腔灌注治疗的疗效较好。血清IL-2水平可作为判定IL-2胸/腹腔灌注治疗疗效的指标。     

可弯曲内科胸腔镜在恶性胸腔积液中的诊断价值

目的:评估可弯曲内科胸腔镜在恶性胸腔积液诊断中的应用价值。方法:对2007年10月-2010年6月的32例恶性胸腔积液患者行可弯曲内科胸腔镜检查的结果进行回顾性分析。所有患者在行内科胸腔镜检查前,其胸腔积液常规、生化、微生物学及细胞学等实验室检查均未能明确病因。结果:32例恶性胸腔积液患者中肺癌28例(腺癌22例、低分化癌6例),淋巴瘤2例,恶性胸膜间皮瘤2例。术后发热1例,未发生其他严重不良事件。结论:可弯曲内科胸腔镜是一种操作简便、安全而有效的诊断方法。对经其他常规检查无法明确诊断,且临床不能排除恶性胸腔积液时,应及时行内科胸腔镜检查以明确诊断。     

博莱霉素联合白介素2治疗肺癌恶性胸腔积液疗效观察

目的观察博莱霉素联合白介素2(IL-2)治疗肺癌恶性胸腔积液的疗效和不良反应。方法将经病理或细胞学确诊的68例肺癌恶性胸腔积液患者随机分为两组,A组38例,胸腔内注入博莱霉素60 mg+IL-2 100万单位+生理盐水50 ml+地塞米松5 mg。B组30例,注入顺铂60 mg+生理盐水50 ml+地塞米松5 mg。每周1次,连续治疗2～3周后观察疗效、生活质量和不良反应。结果 A组的总有效率为84.0%,B组为53.0%(P<0.05);A组的病变进展率明显低于B组(P<0.05);A组Karnofsky评分≥70分的患者显著高于B组(P<0.05),而A组Karnofsky<50分的患者显著低于B组(P<0.05)。不良反应方面,两组患者在恶心、呕吐及白细胞减低的发生率上,A组明显低于B组(P<0.05)。结论博莱霉素联合IL-2胸腔注入治疗肺癌恶性胸腔积液的疗效确切且不良反应轻微,值得临床推广。     

卡铂、金喜素及IL-2联合胸腔内化疗治疗恶性胸腔积液疗效观察

目的 观察卡铂、金喜素IL—2联合胸腔内化疗治疗恶性胸腔积液的疗效。方法 胸腔穿刺引流胸水排尽后，卡铂400—600mg、金喜素4mg、IL——2 50～80万单位各溶于生理盐水20ml依次注入胸膜腔内。结果 胸腔内灌注卡铂、金喜素及IL—2治疗恶性胸腔积液37例，完全缓解46．0％(33／37)，总有效率89．2％(33／37)，胸水缓解期2—14个月，中位缓解期6．7月，毒副反应主要有胃肠道反应，骨髓抑制及暂时性畏寒、发热，少量毛发脱落。结论 胸膜腔内灌注卡铂、金喜素及IL—2治疗恶性胸腔积液疗效肯定，毒副反应低，明显延长胸腔积液缓解期及生存期，值得推广。     

胸腔内灌注紫杉醇与顺铂治疗乳腺癌恶性胸腔积液的疗效比较

目的观察比较胸腔灌注紫杉醇和顺铂治疗乳腺癌恶性胸腔积液的疗效、生活质量及不良反应。方法52例确诊为乳腺癌伴恶性胸腔积液患者,经胸膜腔置管引流术排尽积液后,随机分为紫杉醇组和顺铂组,每组26例。紫杉醇组：胸腔内注射生理盐水50ml＋紫杉醇120mg＋地塞米松10mg;顺铂组：胸腔内注射生理盐水50ml＋顺铂60mg＋地塞米松10mg。均为每周1次,连用2周,观察疗效及不良反应。结果紫杉醇组有效率为80．8％,顺铂组有效率61．5％（P〈0．05）。治疗后不良反应,胸痛以紫杉醇组明显（P〈0．05）,消化道反应以顺铂组明显（P〈0．05）。结论紫杉醇胸腔内注射治疗恶性胸腔积液疗效满意,不良反应可耐受。     

癌性胸水细胞端粒酶活性研究

目的：研究癌性胸水细胞中的端粒酶活性。方法：采用PCR－TRAP方法检测癌性胸水细胞标本中的端粒酶活性,并将检测结果与细胞学诊断结果进行比较。结果：57例诊断明确的癌性胸水细胞标本经细胞学检查和端粒酶活性检测发现：在43例肺癌胸水标本中,29例细胞学阳性胸水有27例端粒酶阳性,3例细胞学可疑胸水有2例端粒酶阳性,11例细胞学阴性胸水有4例端粒酶阳性。在14例其它肿瘤胸水标本中,8例细胞学阳性及1例细胞学可疑胸水标本端粒酶检测均为阳性,5例细胞学阴性胸水有1例端粒酶阳性。细胞学诊断和端粒酶检测总阳性率分别为64．91％（37／57）和75．44％（43／57）。结论：结果提示端粒酶活性检测可能在癌性胸水诊断和鉴别诊断方面有重要辅助诊断价值。     

胸腔灌注奈达铂与顺铂治疗非小细胞肺癌恶性胸腔积液的疗效比较

目的 观察胸腔灌注奈达铂(NDP)与顺铂(DDP)治疗非小细胞肺癌(NSCLC)恶性胸腔积液的疗效、患者的牛活质量及毒副反应.方法 68例确诊为NSCLC(湿性Ⅲb期)的患者,经胸腔置管引流术排尽积液后,随机分为NDP组和DDP组,每组34例.NDP组采用NDP 40 mg/m2和氟美松10 mg溶于40 ml生理盐水,胸腔内灌注;DDP组采用DDP 40 mg/m2和氟美松10 mg溶于40 ml生理盐水,胸腔内灌注.每周1次,连续2～4周.两组患者均给予相同常规支持对症治疗,观察并比较各组的疗效、毒副反应及患者的生活质量.结果 NDP组有效率为88.2%,DDP组有效率为61.7%(P<0.01).NDP组消化道不良反应发生率为5.0%,DDP组消化道不良反应发生率为12.9%,差异有统计学意义(P<0.05).NDP组的Karnofsky评分较DDP组有显著提高(P<0.05),NDP组的患者生存期较DDP组显著延长.结论 NDP胸腔灌注治疗NSCLC引起的恶性胸腔积液是一种有效且毒副反应轻的方法 .     

顺铂联合甘露聚糖肽胸腔灌注治疗鼻咽癌恶性胸腔积液47例

目的 观察顺铂联合甘露聚糖肽胸腔灌注治疗鼻咽癌恶性胸腔积液的疗效及患者不良反应.方法 鼻咽癌伴恶性胸腔积液患者47例,年龄41 ～ 70岁,中位年龄50岁;单侧发生胸腔积液45例(95.7％),双侧2例(4.3％).胸腔穿刺外周静脉置人中心静脉导管引流后胸腔灌注顺铂(30 mg/次)和甘露聚糖肽(15 mg/次),观察疗效及不良反应,记录生存期.结果 全组患者完全缓解(CR)17例(36.2％),部分缓解(PR)21例(44.7％),总有效(CR+PR)率80.9％.全组中位生存时间10.5个月.胸腔积液pH值≥7.2、葡萄糖≥60 mg/L、乳酸脱氢酶(LDH)＜600U/L的患者应用本方案治疗的有效率分别为85.0％(34/40)、86.5％(32/37)、89.5％(34/38),中位生存期分别为11.5、12.0、12.5个月,与胸腔积液pH值＜7.2、葡萄糖＜60mg/L、LDH≥600 U/L者[有效率分别为42.8％(3/7)、50.0％(5/10)、44.4％(4/9),中位生存期分别为6.5、6.5、6.0个月]比较,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);伴骨转移和(或)肺转移而无肝转移者和有肝转移者有效率分别为47.0％(16/34)、57.1％(4/7),差异无统计学意义(x2=0.01,P=0.29),二者中位生存期分别为11.0、6.0个月,差异有统计学意义(P=0.02).Cox多因素分析证实,积液LDH值可作为判断其预后的独立因素.常见不良反应较轻,包括发热、胸痛、恶心、呕吐.结论 顺铂联合甘露聚糖肽胸腔灌注治疗鼻咽癌恶性胸腔积液疗效满意,不良反应轻;积液LDH值是判断预后的一个独立影响因素,伴有肝转移患者的中位生存期短.