愈痫灵对红藻氨酸致痫大鼠行为的影响

为观察愈痫灵颗粒剂对致痫大鼠行为的影响,探讨该方的癫痫作用。采用红藻氨酸造模,随机将40只SD大鼠分为模型组、中药汤剂 、中药颗粒剂组、西药组,按Schultz-Krohn标准观察行为表现。结果显示愈痫灵汤剂组、颗粒剂组可延长癫痫发作潜伏时间（P＜0．05）,减少湿狗样抖动次数（P＜0．05）。提示愈痫灵颗粒剂有显著的抗痫作用。     

宁痫汤对戊四唑致痫大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

【目的】探讨以升清降浊法组成的中药复方宁痫汤对实验性癫痫大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响。【方法】以戊四哇(PTZ)诱导SD大鼠癫痫模型,观察中药复方宁痫汤(由升降散合温胆汤化裁组成)的抗痫效应,采用氨基酸分析法测定大鼠海马、皮层组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)的含量,并与正常组、模型组以及西药(苯巴比妥)组相对照。【结果】低剂量宁痫汤和西药苯巴比妥均能改善癫痫模型大鼠的惊厥行为(P<0.05),均能升高癫痫模型海马和皮层中GABA含量、同时降低其Glu含量(与模型组比较,P<0.05或P<0.01),并且两组的作用基本相仿(P>0.05),而高剂量宁痫汤的作用则比西药组差(P<0.05)。【结论】宁痫汤对癫痫发作有拮抗作用,其作用机制可能与调节脑内GABA、Glu水平,从而改善脑神经元兴奋--抑制平衡失调有关。     

针刺对急性癫痫大鼠脑电功率及海马氨基酸类递质的影响

【目的】探讨针刺对急性实验性癫痫模型大鼠脑电功率和海马内氨基酸类神经递质含量的影响。【方法】SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、针刺组和西药组;针刺组针刺大鼠大椎、丰隆、肝俞透胆俞,西药组以丙戊酸钠灌胃给药,均连续治疗3 d;除正常组外,其他3组均采用腹腔注射青霉素钠法复制急性癫痫大鼠模型,观察造模后70~85 min内顶中线Pz区脑电地形图各频段功率及大脑海马区中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(ASP),抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、牛磺酸(Tau)含量的变化。【结果】模型组δ、θ、α1、α2、β1、β2各频段的功率均高于正常组(P<0.01),而针刺和丙戊酸钠均可显著性降低δ、θ、α1、α2、β1频段的功率(P<0.05或P<0.01);模型组海马区内兴奋性氨基酸Glu、ASP,抑制性氨基酸GABA、Ala、Gly、Tau的含量均高于正常组(P<0.01),而针刺和西药可降低模型大鼠异常升高的兴奋性氨基酸Glu、ASP及抑制性氨基酸Tau的含量(均P<0.05或P<0.01),针刺可升高抑制性氨基酸Ala的含量(P<0.01),但针刺对抑制性氨基酸GABA、Gly的含量及bGABA/bGlu比值无显著性影响。【结论】针刺可通过抑制痫性放电,调节海马内抑制性氨基酸与兴奋性氨基酸的水平而发挥抗癫痫作用。     

愈痫灵方对难治性癫痫大鼠多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达的作用

目的：探讨“愈痫灵”方对红藻氨酸（KA）致痫难治性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白1（MRP1）、P糖蛋白（P-gp）、层黏连蛋白（LAP）以及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法（1）造模：在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入KA1.0μL（即1.0μg）点燃发作,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d后,再次以亚惊厥剂量KA0.5μL复燃,筛选再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波放电者为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。（2）分组与处理：造模成功鼠随机分为愈痫灵方干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共5组,分别给予“愈痫灵”汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水(2 mL/d)灌胃30 d。（3）标本处置与检测：采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1在海马与颞叶皮层的表达。结果与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区及颞叶皮质区MRP1、P-gp、LAP、MCP-1的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预处理后能显著降低模型鼠海马区MRP1、P-gp表达水平（P<0.05）,海马区及颞叶皮质区LAP、MCP-1的表达差异均无统计学意义(P>0.05);愈痫灵方组与拉莫三嗪组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各组间颞叶皮质区LAP、MCP-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论耐药性癫痫大鼠模型海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达均明显升高,逆转与降低海马区MRP1、P-gp的表达可能是“愈痫灵”方抗耐药性癫痫作用机制之一。     

愈痫灵颗粒对戊四氮致痫大鼠海马CA3区超微结构及认知功能障碍的影响

目的探讨愈痫灵颗粒（YXL）对痫性大鼠海马CA3区超微结构及认知功能障碍的影响。方法采用腹腔注射戊四氮点燃癫痫大鼠模型,随机分为癫痫模型组、愈痫灵颗粒干预组、丙戊酸钠干预组、拉莫三嗪干预组、正常对照组共5组：跳台实验测试大鼠的学习记忆能力,透射电镜观察海马CA3区超微结构。结果造模后反应期和学习成绩比较。正常组与其它各组差异有统计学意义（P〈0．01）,潜伏期和记忆成绩比较,正常组与其它各组差异无统计学意义（P〉0．05）;抗痫药物干预后各组反应期和潜伏期及学习、记忆成绩比较差异有显著统计学意义（P〈0．001）,愈痫灵组与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,愈痫灵组、拉莫三嗪组优于丙戊酸钠组与模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）;抗痫药物干预前后反应期、潜伏期、学习、记忆成绩比较,愈痫灵组、拉莫三嗪组差异有统计学意义（P〈0．01）,丙戊酸钠组、模型组差异无统计学意义（P〉0.05）,正常组反应期、潜伏期、记忆成绩差异无统计学意义（P〉0．05）,学习成绩差异有统计学意义（P〈0．01）。电镜观察模型组大鼠海马CA3区神经元可见明显损伤。愈痈灵组多数神经元结构正常。少数粗面内质网有轻度脱颗粒。结论愈痫灵颗粒减少戊四氮致痫大鼠海马组织神经元坏死可能是其改善癜痫大鼠认知功能障碍的作用机制之一。     

愈痫灵对致痫大鼠海马神经元CaM和CaMKⅡα表达的影响

目的研究愈痫灵颗粒对致痫大鼠海马组织钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)表达的影响。方法采用腹腔注射戊四氮(PTZ)造成慢性癫痫大鼠模型,以半定量RT-PCR技术检测不同药物干预后大鼠海马组织CaM和CaMKⅡα的mRNA表达水平;图像自动分析系统进行其吸光度扫描。结果愈痫灵颗粒可降低海马神经元CaMmRNA的表达,升高CaMKⅡαmRNA的表达。结论通过调控Ca2 信号转导途径中的某些靶位点,影响Ca2 -CaM-CaMKⅡα信息链是愈痫灵颗粒抗癫痫的重要途径之一。     

愈痫灵方对PTZ致痫大鼠脑组织海马CA3区TLR4、NF-kB P65、TNF-α表达的影响

目的 探讨愈痫灵方对痫性大鼠脑组织海马区炎性反应因子表达的影响.方法 取健康雄性SD大鼠120只,从中随机选取10只作为正常对照组,10只作为假手术组,腹腔注射生理盐水;其余大鼠用戊四氮造模,将符合模型标准的大鼠随机分为愈痫灵组、丙戊酸钠组和模型组,每组10只.灌胃后采用免疫组织化学方法检测TLR4、NF-kB P65和TNF-α在海马CA3区的表达变化.结果 与正常组、假手术组比,模型组、愈痫灵方组、丙戊酸钠组均上调TLR4、NF-kB P65和TNF-α在脑组织海马CA3区的表达(P<0.01),但后两组表达均低于模型组(P<0.05),且愈痫灵方组抑制TLR4和NF-kB P65在脑组织海马CA3区表达的作用优于丙戊酸钠组(P<0.05),而TNF-α在脑组织海马CA3区的表达两组间无明显差异(P>0.05);结论 愈痫灵方可抑制PTZ致痫大鼠脑组织海马CA3区TLR4、NF-kB P65和TNF-α的表达,对癫痫反应中炎性因子的表达有一定的抑制作用.     

谷氨酸NMDA受体在马桑内酯致痫中的作用

采用马桑内酯大鼠癫痫模型和大鼠高体海马脑片CA1区锥体细胞癌样放电模型，观瘵了非竞争性NMDA受体结抗剂氯胶团对马桑内酯致癌作用的影响．结果发现：实验组大鼠的癫痫发作推迟，程度减轻；痫样脑电图出现的潜伏期延长，波幅下降（P＜0．05）；马桑内酯所致高体海马脑片CA1；区锥体细胞的痫样PS波被抑制：EPSPs幅度下降（P＜0．05）．结果提示：马桑内酯致痫的作用之一可能通过激活交触后膜上NMDA受体，使神经元兴奋性突触传递增强而产生痫样放电．     

癫痫大鼠海马细胞外液中γ-氨基丁酸、谷氨酸、牛磺酸及甘氨酸的动态变化

目的了解癫痫大鼠海马细胞外液氨基酸的变化及与癫痫的关系。方法制作戊四氮致痫模型,采用脑内微透析技术采集大鼠海马细胞外液,用反相高效液相色谱技术测定氨基酸类神经递质。结果在发作期,细胞外液γ-氨基丁酸(GABA)的浓度为38119.7±912.7nmol/L,较发作前明显下降,在发作后3d升高,发作后14d仍有升高;而谷氨酸(Glu)的浓度在发作期为4742.0±201.2nmol/L,较发作前升高,在发作后3d下降,在发作后14d仍低于发作期。结论兴奋性和抑制性氨基酸失衡可能是癫痫发生的重要机制之一。     

川芎嗪对癫痫模型海马内信号分子的影响

目的：研究戊四氮（pentylenetetrazol，PTZ）点燃癫痫模型大鼠海马内环磷腺苷（Cyclic Adenosine monophosphate，cAMP）、环-磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）的变化及川芎嗪（Tetrarnethylpyrazine，TMP）对其的影响。方法：将实验动物随机分为3组，正常对照组、癫痫模型组、TMP治疗组。采用放射免疫法测定海马内cAMP、cGMP的含量。结果：模型组与正常对照组比，cAMP．cGMP含量明显增加，cAMP／cGMP比值明显减小，差异均具有显著性意义（P〈0.01），TMP治疗组与癫痫模型组比，cAMP含量明显增加，cGMP含量则明显减少，caMP／cGMP比值明显增加，差异均具有显著性意义（P〈0．01）。结论：川芎嗪抑制癫痫放电作用与其调节海马内cAMP、cGMP含量变化有关。     

蓝斑核损伤对迷走神经刺激抗癫癎效应的影响

目的：探讨刺激迷走神经（ＶＮＳ）的抗癫癎作用与蓝斑核（ＬＣ）的相互关系。　方法：立体定向下注射６－羟多巴胺（６－ＯＨＤＡ）毁损大鼠双侧ＬＣ,２ 周后腹腔注射戊四氮（ＰＴＺ）,８０ ｍ ｇ／ｋｇ 体重致癎,然后观察刺激迷走神经的抗癫癎效应,同时测定大鼠大脑皮质及海马中去甲肾上腺素（ＮＡ）水平。　结果：ＶＮＳ明显减轻ＰＴＺ致癎大鼠癫癎发作的严重程度,但对蓝斑核毁损的大鼠抗癫癎作用明显减弱,同时蓝斑核毁损后皮质及海马内ＮＡ含量较对照组明显下降。　结论：实验证明蓝斑核参与ＶＮＳ的抗癫癎作用,ＶＮＳ可能通过增加脑内ＮＡ 的释放而发挥抗癫癎效应。这一结论提示,拟去甲肾上腺素类药物可能有增强ＶＮＳ的抗癫癎作用。     

Acupuncture Effects on Levels of Excitatory Amino Acids in Brain of SAM-P/8

Atpresentthepathogenesisofseniledementiaisindefinite.Besidesthecholinergictheorymoreandmoreevidenceindicatedthatexcitatoryneurotoxicityinducedbyexcitatoryaminoacids(EAAs),especiallybyglutamicacid,playedanimportantroleinitsprocessofoccurrenceanddevelopment(').SenescenceacceleratemouseP/8(SAM--P/8)isakindofagingdementiamodelwhichtakesthedisturbanceofmemoryandstudyasitsmaincharcteristicsinbehaviourdisorderandtheatrophyofcerebralcortex,decreaseofhippocampuspyramidcellsandspongioiddegenerationof…     

慢性铅暴露大鼠海马脑区自噬相关蛋白表达的研究

目的:观察慢性铅暴露后子代大鼠海马脑区铅含量变化,采用自噬/溶酶体途径关联蛋白标记物探讨慢性铅暴露对海马脑区自噬/溶酶体途径关联信号蛋白表达的影响。方法:以慢性铅暴露子代大鼠为研究对象,随机编号分组为对照组、低剂量铅暴露组(0.5 g/L)和高剂量铅暴露组(2.0 g/L)。断乳期仔鼠分笼饲养,仔鼠饮用低、高含量的醋酸铅饮用水直至60天成熟期。分别取血样与海马脑组织样本使用石墨炉原子吸收分光光度法进行铅含量测定,免疫印迹及免疫荧光组化方法分别检测慢性铅暴露后海马脑区自噬相关蛋白Beclin 1、LC3、LAMP2及cathepsin B的表达变化情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠血铅含量显著升高(P<0.01)。同时,低剂量与高剂量铅暴露模型组大鼠海马脑铅含量显著升高,分别为(1.26±0.31)μg/g(低剂量组)与(1.83±0.18)μg/g(高剂量组)vs对照组(0.52±0.13)μg/g。此外,免疫印迹结果显示,高剂量铅暴露组大鼠海马脑区的早期自噬标志物Beclin 1及LC3-Ⅱ/LC3-I比值较对照组显著增加(P<0.05或P<0.001)。激光共聚焦显微镜结果显示,慢性铅暴露高剂量组较正常对照组的自噬相关蛋白cathepsin B在海马锥体神经元的阳性表达明显增加。结论:慢性铅暴露诱导大鼠海马脑区发生自噬/溶酶体途径关联信号蛋白表达变化,可能与海马脑区铅含量的增加存在内在关联性。     

兴奋性氨基酸和特异性受体对大鼠百日咳杆菌脑损伤的作用

目的 :探讨兴奋性氨基酸、N 甲基 D 天冬氨酸受体 (NMDAR)在大鼠百日咳杆菌脑损伤中的变化及作用机制。方法 :用高效液相色谱法、[3 H]MK 80 1放射配体结合分析法及Fura 2 /Am分别检测大鼠百日咳杆菌脑损伤时大脑皮质内谷氨酸 (Glu)和谷氨酰胺 (Gln)含量、NMDAR钙通道的结合位点 (最大结合位点Bmax)及活性 (平衡解离常数Kd)、大脑皮质突触细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的变化。结果 :与盐水组比较 ,注菌组Gln显著增高 (P <0 .0 5 ) ,Kd值减小 (P <0 .0 5 )、Bmax值差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,[Ca2 + ]i 较盐水组增高 (P <0 .0 1) ,并随注菌时间延长而显著增高 (2 4hvs 4h ,P <0 .0 1) ;MK 80 1预处理组 [Ca2 + ]i、脑含水量、伊文思蓝含量、Glu和Gln含量均较注菌组减少 (F值分别为 5 4 .2 4 36、15 .6 2 8、14 .4 2 5、10 .2 4 5 8、14 .0 2 34,P <0 .0 1) ,2 4h组 [Ca2 + ]i 减少最为显著 (P <0 .0 1)。结论 :EAAs介导的NMDAR激活及相应的钙内流增加在大鼠百日咳杆菌脑损伤中 ,尤其在百日咳杆菌致大鼠迟发性脑损伤的发病机制中可能起着重要作用。     

Inhibitory effects of recombinant neurotoxin BmK IM on seizures induced by pentylenetetrazol in Rats

Askeyelementsofsignaltransmission ,voltage gatedsodiumchannelsplayacriticalrolebothinactionpotentialpropagationinexcitabletissuesandinneurotransmitterreleasefromnerveterminals Atthesametime ,thesechannelsarealsothetargetsofneurotoxinsfromvariousscorpionspecies Theeffectsofthesetoxinsonsodiumchannelsinvolvemodificationstochannelgatingandmembranepermeability 1,2Ithasbeendemonstratedthatmostscorpionneurotoxinsarelong chainproteinswith 60 -80aminoacids,cross linkedbyfourdisulfidebridges Generally …     

解郁安神中药对抑郁模型大鼠神经递质及脑源性神经营养因子的影响

目的：观察解郁安神中药对慢性不可预见性应激（ CUS）抑郁大鼠模型神经递质及脑源性神经营养因子（ BDNF）的影响,探讨其抗抑郁的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,解郁安神中药小、中、大剂量组（8.2、16.3、32.7 g／kg）,盐酸氟西汀组（10 mg／kg）。应激刺激开始的同时连续灌胃药物35 d。通过敞箱实验、新奇抑制摄食实验观察药物对大鼠行为学的影响;采用HPLC法测定药物对大鼠海马、皮层的多巴胺（ DA）、5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、去甲肾上腺素（NE）含量的影响;利用Western blot观察药物对大鼠海马BNDF的表达。结果模型组大鼠体重增长缓慢,在行为学测试中表现出自主活动减少;皮层的5-HT和NE的含量明显降低（ P＜0.05）,海马5-HT及5-HIAA、NE的水平亦显著降低（ P＜0.05）, BDNF的表达显著下降（P＜0.05）。与模型组比较,解郁安神中药各剂量均可不同程度改善CUS抑郁大鼠自发活动的减少;中药中、大剂量及盐酸氟西汀可显著提高皮层5-HT、NE的含量（ P＜0.05）,中药小、大剂量组可显著提高海马NE的含量（ P＜0.05）,中药各剂量可显著提高海马5-HT、5-HIAA的含量（P＜0.05）;中药大剂量及盐酸氟西汀可上调海马BDNF的表达（P＜0.05）。结论解郁安神中药抗抑郁的作用机制可能与其对神经递质的影响及上调脑源性神经营养因子有关。     

Antisense GAD67 ODN对戊四氮所致慢性癫痫大鼠作用的研究

目的　探讨谷氨酸脱羧酶(GAD)的抗癫痫作用。方法　采用戊四氮制备大鼠慢性癫痫模型，利用反义寡脱氧核苷酸技术，通过选择性地抑制海马GAD基因的表达来观察其对慢性癫痫大鼠行为、发作阈值及脑电图的影响；同时，采用高效液相色谱法检测其对海马组织内γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响。结果　给予Antisense GAD67 ODN处理后，GAD67 mRNA表达下降、GABA浓度下降、痫性发作潜伏期缩短、发作程度加重及脑电图痫波频率增加。结论　从反面进一步说明GAD基因可能是抗痫基因，为GAD基因治疗癫痫提供实验依据。     

慢性马兜铃酸肾病动物模型的建立及其意义

目的探讨建立马兜铃酸引起的大鼠慢性肾间质纤维化动物模型.方法将雌性wistar大鼠分为马兜铃酸组与对照组.马兜铃酸组大鼠腹膜内注射马兜铃酸5mg@kg-1@d-1共16周,开始用药后8、12、16、20、24周分别处死6只大鼠.对照组大鼠(5只)腹膜内注射生理盐水2ml/d,共16周,24周时处死.两组动物处死时分别留取血、尿、肾组织标本,分别作生化、病理(光镜,免疫荧光,电镜)等方面的检查及应用电脑软件测定肾小管-间质面积.结果马兜铃酸组大鼠用药后16、20、24周体重明显低于对照组;用药后16周血尿素氮、血清肌酐明显高于对照组,24周时肾功能损伤进一步加重.光镜检查可见马兜铃酸组大鼠有明显肾小管-间质损伤,16周时肾小管面积明显增加,管腔面积明显小于对照组;24周时出现明显肾小管萎缩,肾小管面积明显缩小,而肾间质面积明显增加,肾间质呈多灶性纤维化.电镜检查16周时肾小管上皮细胞胞质内初级溶酶体、次级溶酶体明显增加,部分肾小管上皮细胞刷状缘消失;20、24周时可见胞质内次级溶酶体和髓样小体堆积.结论建立了慢性马兜铃酸肾病动物模型.马兜铃酸具有慢性肾毒性作用,可引起大鼠慢性肾间质纤维化.     

Effects of cigarette smoking on the function of metabolizing arachidonic acid and angiotensin I in the isolated perfused rat lungs

Summary The effects of acute and chronic cigarette smoking on the metabolism of exogenous arachidonic acid (AA) and angiotensin I (AI) in perfused isolated rat lungs were studied. The results showed that acute cigarette smoking did not alter the contents of 6-keto-PGF_1α (the stable metabolite of PGI₂) and TXB₂ (the stable metabolite of TXA₂) in the effluent and the increment of pulmonary artery pressure (†P_pa) caused by AA. The conversion of A I into A II was significantly increased (P<0.01), while the †P_{p a}, induced by A I injection was obviously decreased as compared with controls (P<0.05). After cigarette smoke exposure for 30 days, the †P_{p a} caused by AA or A I did, not differ from that of controls, but the contents of 6-ketoPGF_1α and A II increased more markedly than those in non-smoking rats,(P< 0.05). It is suggested that acute and chronic cigarette smoking in rats can promote the lung function of converting A I into A II, chronic smoking can increase the lung function of metabolizing AA into PGI₂.