人骨形态发生蛋白-2基因腺病毒载体异位成骨

目的：评价人骨形态发生蛋白2(hBMP-2)基因腺病毒表达载体(recombinant adenoviral vector carrying the human BMP-2 gene, AdBMP-2)成骨能力并探讨其成骨机制。方法：应用 AdBMP-2体外感染兔骨髓间质干细胞（BMSC），7 d后观察hBMP-2和碱性磷酸酶(ALP)的表达,21 d后观察感染细胞钙结节形成能力。同时将AdBMP-2行裸鼠腓 肠肌组织内注射，术后20 d取材，观察hBMP-2的表达及肌组织内异位成骨情况。结果：AdBMP-2可高效感 染BMSC并获得hBMP-2的有效表达，ALP表达增高并形成钙结节。AdBMP-2在体内同样表达hBMP-2， 并且以软骨化骨的方式启动成骨。结论：感染AdBMP-2的BMSC向成骨细胞分化，AdBMP-2在体内有着良好的成骨能力。     

正常及去势大鼠骨组织形态的比较研究

目的 :比较正常大鼠骨组织形态与去势大鼠的差别 ,探讨绝经后骨质疏松的发生机制。方法 :切除成年雌性大鼠双侧卵巢制成实验性骨质疏松动物模型 ,将股骨远端骨组织经甲基丙烯酸甲酯等包埋切片后观察骨组织形态、测量各项参数。结果 :去势大鼠骨组织皮质及骨小梁变薄 ,骨矿化率增高 ,矿化缘长度增加 ,小梁表面破骨细胞数明显增多。结论 :卵巢功能下降 ,骨吸收 形成失衡是早期骨丢失的主要机制。     

正常及去势大鼠骨组织形态的比较研究

目的：比较正常大鼠骨组织形态与去势大鼠的差别，探讨绝经后骨质疏松的发生机制。方法：切除成年雌性大鼠双侧卵巢成实验性骨质疏松动物模型，将股骨远端骨组织经甲基丙烯酸甲酯等包埋切片后观察骨组织形态，测量各项参数。结果：去势大鼠骨组织皮质及骨小梁变薄，骨矿化率增高，矿化缘长度增加，小梁表面破骨细胞数明显增多。结论：卵巢功能下降，骨吸收－形成失衡是早期骨丢失的主要机制。     

雌性去势大鼠骨细胞内间隙连接蛋白43阳性表达率的动态变化及意义

目的研究雌性去势大鼠骨细胞内间隙连接蛋白43(Cx43)阳性表达率的动态变化及其意义。方法56只4月龄SD大鼠随机分为4个实验组,每个实验组又分为去势组和对照组。在术后4周、10周、16周22周处死大鼠,用骨组织形态计量学方法检查实验动物右胫骨上端骨小梁体积比(TBV,%)、骨小梁平均厚度(MTT,μm)的动态变化。用免疫组化的方法观察去势组与对照组内Cx43阳性表达率的动态变化。结果术后4周后去势组TBV、MTT较对照组明显减少(p<0.05)。免疫组化发现:术后4周、10周、16周、22周,去势组成骨细胞内Cx43阳性表达率低于对照组(p<0.05),且呈逐渐降低的趋势,破骨细胞内Cx43阳性表达率高于于对照组(p<0.05),且成逐渐增高趋势。术后4周、10周、16周、22周,去势组成骨细胞内Cx43阳性表达率均低于破骨细胞内Cx43阳性表达率(p<0.05)。结论切除大鼠双侧卵巢后4周即可制备大鼠的骨质疏松动物模型。Cx43在去势大鼠成骨细胞中的表达下降,而破骨细胞内Cx43的增加,破坏了成骨细胞的骨形成与破骨细胞的骨吸收功能之间的偶联动态平衡,使破骨细胞的骨吸收大于成骨细胞的骨形成,是去势大鼠骨质疏松发生机制中的重要因素。     

去势后骨质疏松大鼠与氨基胍的防治研究

目的以去势大鼠建立绝经后骨质疏松模型,探讨氨基胍溶液对绝经后骨质疏松症骨形成的刺激作用和药理机理。方法54只SD大鼠随机分为3组去势后给药实验组(groups1,G1),单纯去势组(G2)和对照组(G3),并将术后第4、10和16周定为实验周。观测骨形成指标骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(骨AKP)和总碱性磷酸酶(总AKP)和骨吸收指标尿吡啶醚(PYD)和脱氧吡啶醚(DPD),同步用IBAS计算机全自动图像分析系统对不脱钙骨组织动态观测骨形态计量学参数。结果给药实验组在去势后4~16周BGP和骨AKP明显高于单纯去势组。而骨吸收指标尿PYD和DPD两组之间无显著差异。骨形成表面(FS)和骨小梁体积(TBV),骨小梁平均厚度(MTT)较单纯去势组明显升高,尤其是TBV和FS,这种差异在第10周最为显著。随着给药时间的延长(第16周)MAR逐渐增加。骨吸收表面(RS)与单纯去势组比较在所有实验周均无差异。结论氨基胍可刺激骨质疏松大鼠成骨细胞活跃增生,促进骨转换速率,并可使骨质疏松症骨组织形态改善。     

轻度承重活动对卵巢切除大鼠骨密度组织计量和生物力学的影响

【目的】探讨轻度承重活动对绝经后骨质疏松的防治作用。【方法】4月龄36只雌性大鼠分组①假去势组,②去势组,③去势加制动组。②、③组行双侧卵巢切除术,③组还用胶布带将其右后肢制动于腹部（使右后肢不能进行承重活动）。各组大鼠分笼喂养,保持日常活动,术后12周分别检测和分析大鼠右侧股骨骨密度、组织计量学和生物力学的变化。【结果】与假去势组比较,去势组大鼠股骨骨密度下降,骨小梁体积比下降,骨小梁平均厚度和骨皮质平均厚度减少,骨吸收表面和类骨质表面明显增加,同时其生物力学性能变差,但骨密度、骨皮质平均厚度及骨强度指标在统计学上与假去势组无显著性差异;而去势加制动组大鼠其股骨骨密度下降、骨小梁体积比下降及骨小梁平均厚度和骨皮质平均厚度减少更加明显,生物力学性能更差,骨密度、骨皮质平均厚度及股骨强度指标在统计学上与假去势组有显著性差异。【结论】去势雌性大鼠若保持轻度承重运动,则能保持相对较好的骨质量,缺乏承重运动则骨质量显著变差,提示轻度承重活动对防治绝经后骨质疏松具有显著性作用。     

他莫昔芬对去势大鼠松质骨及皮质骨骨密度的影响

目的：选择性雌激素受体调节剂对去势大鼠松质骨,皮质骨骨密度的影响,方法：将21只SD大鼠随机分为3组,每组7只,A组为对照组,B组为去势组,C组为去势＋他莫昔芬组,在去势后5wk给药,术后16wk处死各组大鼠,进行离体骨密度（bone mineral demsity,BMD)测量及组织形态学测量,结果：（1）与对照组相比,去势组去势后16wk股骨头,股骨颈,股骨干,肱骨头,肱骨干,腰椎BND显降低（P＜0．01）,骨小梁体积,骨小梁碍度,椎体皮质骨厚度,结连结密度,结密度亦明显降低（P＜0．05）而游离端密度和结连游离瑞密度增高（P＜0．01）,（2）他莫昔芬治疗后11wk,各部位BMD增加（P＜0．01）,但没有恢复到正常水平（P＜0．05）,腰椎骨小梁连接参数恢复到对照组水平（P＞0．05）,结论：（1）去势后16wk大鼠松质骨,皮质骨骨量均明显下降,腰椎骨小梁三维结构破坏,骨小梁连结程度降低。（2）他莫昔芬治疗后,松质骨,皮质骨骨量均明显增加,但没有恢复到去势前水平,（3）他莫昔芬能增加腰椎椎体皮质骨厚度,增加腰椎骨小染厚度,增加皮质骨,松质骨骨量,还可提高腰椎微构筑的质量,使骨小染连程度增加。     

轻度承重活动对卵巢切除大鼠骨密度组织计量和生物力学的影响

[目的]探讨轻度承重活动对以后骨质疏松的防治作用。[方法]4月龄36只雌性大鼠分组：①假去势组,②去势组,③去势加制动组。②、③组行双侧卵巢切除术,③组不用胶布带将其右后肢制动于腹部（使右后肢不能进行承重活动）。各组大鼠人笼喂养,保持日常活动,术后12周分别检测和分析大鼠右侧股骨骨密度、组织计量学和生物力学的变化。[结果]与假去势组比较,去势组大鼠股骨骨密度下降,骨小梁体积比下降,骨小梁平均厚度和骨皮质平均厚度减少,骨吸收表面和类骨质表面明显增加,同时其生物力学性能变差,但骨密度、骨皮质平均厚度及骨强度指标在统计学上与假去势组无显性差异;而去势加制动组大鼠其股骨骨密度下降、骨小梁体积比下降及骨小梁平均厚度和骨皮质平均厚度减少更加明显,生物力学性能更差,骨密度、骨皮质平均厚度及股骨强度指标在统计学上与假去势组有显性差异。[结论]去势雌性大鼠若保持轻度承重运动,则能保持相对较好的骨质量,缺乏承重运动则骨质量显变差,提示轻度承重活动对防治绝经后骨质疏松具有显性作用。     

去卵巢大鼠骨质疏松病理学观察及NOS荧光素原位杂交研究

目的观察去卵巢大鼠骨质疏松病理形态和计量学改变以及NO与骨代谢的关系,探讨NO在骨质疏松发病机制中的作用和意义。方法通过图像分析仪对骨组织进行形态计量学分析及荧光素原位杂交方法观察eNOS在成骨细胞和破骨细胞中的表达。结果在去势模型组相对骨小梁体积、骨小梁平均厚度及eNOS在成骨细胞与破骨细胞中的表达较假手术组减少(<0.05),尼尔雌醇/左炔诺孕酮治疗组相对骨小梁体积、骨小梁平均厚度及成骨细胞与破骨细胞内eNOS的表达均较去势模型组明显升高(<0.01)。结论去势后雌性大鼠骨丢失为骨转换加快和重建负平衡(骨吸收超过骨形成)所致;成骨细胞与破骨细胞代谢与NOS表达有关,破骨细胞功能与NO呈负相关关系。尼尔雌醇和左炔诺孕酮能降低这种骨转换的负平衡并且提高成骨细胞与破骨细胞内NO水平,从而影响其功能,达到抑制骨吸收,降低骨转换的目的。     

骨质疏松大鼠晚期糖化终末产物含量及胍乙酸的防治效果

目的:以去势大鼠建立的绝经后骨质疏松模型,检测骨组织中晚期糖化终末产物(AGEs)含量,探讨其特异性抑制剂胍乙酸的防治效果。方法:54只SD大鼠随机分为三组:去势后给药(胍乙酸)实验组(groups1,G1),单纯去势组(G2)和假去势组(G3),并将术后第4,10和16周定为实验周。检测骨胶原组织中AGEs和骨形成指标:骨钙素(BGP),骨特异性碱性磷酸酶(骨AKP),骨吸收指标:尿吡啶醚(PYD)和脱氧吡啶醚(DPD),同步用IBAS计算机全自动图像分析系统对不脱钙骨组织动态观测骨形态计量学参数。结果:单纯去势后4～16周骨胶原AGEs含量明显高于假去势组;给予胍乙酸组明显低于去势组,而BGP和骨AKP胍乙酸组明显高于去势组。骨吸收指标:尿PYD和DPD两组之间无显著差异。骨形成表面(FS)和骨小梁体积(TBV),骨小梁平均厚度(MTT)较去势组明显升高,尤其TBV和FS,这种差异在第10周最为显著。随着给药时间的延长(第16周)MAR逐渐增加。骨吸收表面(RS)与单纯去势组比较在所有实验周均无差异。结论:去势后雌激素降低可致骨中AGEs增多,引发骨质疏松,而胍乙酸可通过降低AGEs刺激成骨细胞活跃增生,促进骨形成,改善骨组织形态。     

大鼠切除卵巢骨质疏松模型的实验研究

目的 研究雌性大鼠在生长期、成年期及切除卵巢后早、中、晚期的骨骼变化，探讨骨质疏松模型形成的最佳条件及评价方法。方法 SD雌性大鼠随机分为正常组、去卵巢(OVX)后1，2，3月和相应的假手术组(SHAM)。用双能X线吸收法(DEXA)测定骨密度(BMD)和骨矿含量(BMC)，处死后取胫骨近端进行骨组织计量学测量，即骨小梁面积百分率(Tb．Ar％)、骨小梁数目(Tb．N)、骨小梁厚度(Tb．Th)和骨小梁分离度(Tb．Sp)。结果 正常组BMC和Tb．Th随月龄持续增加，BMD和Tb．Ar％、Tb．N在成年期达到峰值，以后逐渐下降；OVX组下降显著，BMD和Tb．Ar％在手术1月后差异有显著性，Tb．N在术后2月差异有显著性；正常组Tb．Sp在生长期逐渐下降，成年后增加，OVX组术后增加显著，术后2月差异有显著性。BMD和Tb.Ar%存在正相关关系。结论 正常雌性大鼠在成年期6月龄达到峰值骨量，为建造骨质疏松模型的最佳时间，去卵巢后短时间(1月)模型即成功。骨组织计量学与BMD均为评价骨胳状况的较好方法。     

基因修饰的骨髓间充质干细胞复合脱细胞软骨基质促进疏松骨质修复的实验研究

目的探讨经基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)与脱细胞软骨基质(ECM)混悬物对骨质疏松模型大鼠的疗效。方法以去卵巢法将30只3月龄SD大鼠制成骨质疏松模型。实验组18只,将SD大鼠MSC分离培养和siRNA(RNA干扰)修饰,与ECM制成混悬物后注入SD大鼠骨质疏松模型椎体骨质中;对照组12只注入生理盐水。观察2组动物不同时间的椎体骨质X线表现差异和力学性能改变。结果 4～12周时,随着周次的增加,实验组动物X线摄片见椎体骨质圆点状密度增高影扩大增加趋势,力学测试最大载荷、弹性模量和最大应变力均较对照组增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用经基因修饰的MSC与ECM混悬物注射对骨质疏松实验动物骨质改善效果良好,为探索骨质疏松症的治疗新途径提供一定依据。     

去卵巢大鼠骨小梁的纳米力学性能

目的探讨雌激素缺乏对骨组织结构和纳米力学材料特性的影响。方法将20只10月龄SD雌性大鼠随机分为去卵巢组和假手术组,每组10只。手术后15周处死,处死前用双能X线吸收仪测量活体全身骨密度和第6腰椎骨密度。处死后测量离体的第6腰椎骨密度,取右侧胫骨近干骺端进行骨组织形态计量学检测;每组随机选取3个椎体,甲基丙烯酸甲酯包埋后,将椎体沿长轴中点垂直长轴锯开,暴露横断面骨小梁,取下半段表面打磨,随机选取4处骨小梁,每处骨小梁选取5个点进行纳米压痕实验。结果大鼠去卵巢后15周,第6腰椎骨密度显著降低;胫骨骨小梁间隔明显增宽,骨小梁体积分数显著下降(P<0·05)。全身骨密度、骨小梁数量及骨小梁厚度呈下降趋势。纳米压痕实验测得的去卵巢组和假手术组椎体骨小梁硬度分别为0·91GPa±0·13GPa和0·90GPa±0·09GPa,弹性模量分别为21·01GPa±2·48GPa和22·04GPa±2·44GPa,两组间差异无统计学意义。结论纳米压痕技术是一项可用于直接测量骨组织纳米力学特性的新技术。去卵巢雌激素缺乏虽引起骨质疏松,但对骨小梁的纳米力学性能无明显影响。     

葛根异黄酮对去卵巢大鼠骨矿密度和骨强度的影响

目的：研究葛根总异黄酮（TIP）对雌激素缺乏引起的骨质疏松症的防治作用。方法：10月龄SD大鼠,手术切除双侧卵巢后7d,每天igTIP100和20mg/kg,并设假手术组（Sham)、模型对照组（OVX）和尼理论联系实际是性组（E3）,在给药4和7个月时,测定大鼠全身骨矿总量（BMC）和骨矿密度（BMD）及骨生物力学强度等。结果（1）和OVX组相比,TIP大剂量组在给药4个月时BMC和BMD分别提高14．6％和12．1％,7个月时分离提高6．8％和14．2％;小剂量组4个月时分别提高7．8％和6．9％,7个月时分离提高8．65和14．95。（2）TIP大、小剂量组股骨相对体积质量分别提高3．8％和3．4％;胫骨相对休整质量提高6．8％和6．3％,股骨Ca盐密度均提高15％以上。（3）TIP大、小剂量组股骨最大负荷分别提高16．1％和9．1％;结构强度分别提高19．4％和12．5％,（4）TIP使大鼠子宫重量明显增加。结论TIP对去卵巢引起的大鼠骨质疏松症具有明显的防治作用,这种作用可能和它的弱雌激素样活性有关。     

淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨密度的影响

目的:探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨密度的影响。方法:取10月龄雌性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、雌激素组和淫羊藿低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均行双侧卵巢切除术,术后1周分别给予生理盐水、淫羊藿总黄酮和雌激素进行干预,共90天,观察各组大鼠全身、股骨及腰椎骨密度的变化。结果:正常组和雌激素组大鼠全身骨密度均显著高于其他各组(P均0.05);淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组大鼠全身骨密度与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05);淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组大鼠股骨骨密度显著高于模型组(P0.05),淫羊藿总黄酮中、高剂量组大鼠腰椎骨密度显著高于模型组(P0.05)。结论:淫羊藿总黄酮能明显抑制去势大鼠股骨及腰椎骨密度的降低,对去势大鼠全身骨密度无明显影响。     

绝经后骨质疏松大鼠模型的综合评价

利用双能X线骨密度仪、扫描电镜和骨生物力学试验综合评价大鼠去卵巢后的骨骼状况。结果显示 :①大鼠卵巢切除后 ,活体、离体腰椎以及股骨 (除R3区 )、胫骨近端干骺端 (R1区 )的离体骨密度显著下降 (P <0 .0 1) ,离体L5和L6的骨丢失率最大 ,达 13% ;②骨小梁减少、变细 ,连接中断 ,骨小梁表面有吸收陷窝 ;③腰椎压缩强度和股骨力学性能均下降 ,前者更明显 ,腰椎最大压缩力下降率达 33.32 %。提示 :①类似于绝经后妇女 ,6月龄大鼠在卵巢切除 4个月后骨量和骨质量均下降 ,特别在富含松质骨的部位 ,如腰椎、股骨远端等 ;②利用绝经后骨质疏松大鼠模型评价骨质疏松新药的有效性 ,应包括该新药对骨量、骨结构和骨强度的作用。     

绝经后骨质疏松大鼠模型的综合评价

利用双能X线骨密度仪、扫描电镜和骨生物力学试验综合评价大鼠去卵巢后的骨骼状况。结果显示：①大鼠卵巢切除后,活体、离体腰椎以及股骨（除R3区）、胫骨近端干骺端（R1区）的离体骨密度显著下降（P＜0.01),离体L5和L6的骨丢失率最大,达13%;②骨小梁减少、变细,连接中断,骨小梁表面有吸收陷窝;③腰椎压缩强度和股骨力学性均下降,前者更明显,腰椎最大压缩力下降率达33.32%。提示：①类似于绝经后妇女,6月龄大鼠在卵巢切除4个月后骨量和骨质量均下降,特别在富含松质骨的部位,如腰椎、股骨远端等;②利用绝经后骨质疏松大鼠模型评价骨质疏松新药的有效性,应包括该新药对骨量、骨结构和骨强度的作用。     

辛伐他汀预防激素性骨质疏松实验研究的初步报告

目的 :观察辛伐他汀对糖皮质激素性骨质疏松的预防作用。方法 :取健康 6月龄SD雄性大鼠 3 6只 ,体重 0 .45± 0 .0 2kg ,随机分为对照组 (A组 )、模型组 (B组 )和实验组 (C组 ) ,每组 12只。对照组灌胃法给予生理盐水 2ml/(kg·d) ,每周 2次肌肉注射生理盐水 ,每次 0 .5ml/kg ;模型组灌胃法给予生理盐水 2ml/(kg·d) ,每周 2次肌肉注射地塞米松 ,每次 2 .5mg/kg ;实验组灌胃法给予辛伐他汀 10mg/(kg·d) ,每周 2次肌肉注射地塞米松 ,每次 2 .5mg/kg。 8周后对各组大鼠的第 3腰椎行骨密度测量和组织形态显微结构观察以及血清钙、磷和碱性磷酸酶 (ALP)含量测定。结果 :实验组第 3腰椎骨密度值明显高于模型组 (P <0 .0 1)。对照组的骨密度值与实验组比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。实验组第 3腰椎骨小梁形态结构与对照组相似 ,模型组呈骨质疏松特征。模型组ALP较对照组及实验组均明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :辛伐他汀可有效预防糖皮质激素性骨质疏松。     

核心结合因子α_1基因修饰MSCs对骨质疏松大鼠骨形成作用研究

目的:以去势大鼠建立绝经后骨质疏松模型,探讨以核心结合因子α1(Cbfα1)基因修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)作为种子细胞,对绝经后骨质疏松症骨形成的刺激作用和基因治疗机制。方法:54只SD雌性大鼠随机分为三组:去势后给药实验组(Cbfα1基因修饰MSCs植入组:(G1),去势组(G2)和对照组(G3),并将术后第4、10和16定为实验周。观测骨形成指标:骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(骨AKP)和总碱性磷酸酶(总AKP)和骨吸收指标:尿吡啶醚(PYD)和脱氧吡啶醚(DPD)以及骨生物力学检测(BMT)。同步用IBAS计算机全自动图像分析系统对不脱钙骨组织动态观测骨形态计量学参数。结果:G1在去势后4～16周BGP和骨AKP明显高于G2。而骨吸收指标:尿PYD和DPD两组间无显著差异。骨形成表面(FS)和骨小梁体积比(TBV),骨小梁平均厚度(MTT)较G2明显升高,尤其是TBV和FS,这种差异在第10周最为显著。随着给药时间的延长(第16周)骨矿化沉积速率(MAR)逐渐增加。骨吸收表面(RS)与G2比较在所有实验周均无差异。BMT值4～16周明显高于G2。结论:Cbfα1基因修饰MSCs可刺激骨质疏松大鼠成骨细胞活跃增生,促进骨形成与骨转换速率代谢平衡。并可使骨质疏松大鼠骨组织微观结构改善。     

补肾壮骨颗粒对雌性骨质疏松大鼠体重及骨组织计量学的影响

目的 观察补肾壮骨颗粒对骨质疏松症雌性大鼠的体重和骨组织计量学的影响,探讨去势后雌性大鼠体重变化与骨质疏松症的关系.方法 58只雌性大鼠被分为5组:假手术组、模型组、阳性药组、补肾壮骨颗粒高剂量组和补肾壮骨颗粒低剂量组,采用去势方法造成雌性大鼠骨质疏松模型,连续给药13周,观察各组大鼠体重及骨组织计量学指标的变化.结果...