管碟法比较盐酸小檗碱和黄连药材对金色葡萄球菌的抑菌效力

目的建立比较盐酸小檗碱和黄连药材对金色葡萄球菌抑菌效力的方法。方法以盐酸小檗碱为参照物、抑菌圈直径(D)为反应值,按2010年版《中国药典(二部)》附录ⅪA抗生素生物检定法管碟法的三剂量法设计试验,对盐酸小檗碱和黄连药材样品的抑菌效力进行比较。结果盐酸小檗碱质量浓度在4.00～12.5μg/mL范围内,黄连样品溶液质量浓度在66.0～200μg/mL范围内,其剂量的对数值与抑菌圈直径呈良好的线性关系(r均大于0.99)。三剂量法剂间变异分析及可靠性测验结果表明,回归非常显著(P<0.01),偏离平行、二次曲线、反二次曲线均不显著(P>0.05),实验结果成立;组内(碟间)差异非常显著(P<0.01);平均可信限为1.8845%。结论该方法能用于比较盐酸小檗碱和黄连药材的抑菌效力。     

黄连抑菌效力生物检定方法的研究

目的探讨管碟法用于测定黄连抑菌效力的可行性。方法以盐酸小檗碱为工作参照物、抑菌圈直径(D)为反应值,按《中国药典》2010年版二部(附录Ⅺ)抗生素生物检定法(管碟法)的三剂量法设计试验,对黄连样品的抑菌效力进行测定。结果盐酸小檗碱在4.00～12.50μg/mL、黄连样品溶液在66.0～200.0μg/mL时,其相应浓度的对数值与抑菌圈D呈现良好的线性关系(r=0.998 9、0.999 0)。三剂量法实验剂间变异分析及可靠性测验结果表明回归非常显著(P<0.01),偏离平行、二次曲线、反二次曲线均不显著(P>0.05),组内(碟间)差异有统计学意义(P<0.01);可信限为1.884 5%。1 mg盐酸小檗碱抑菌效力相当于15.98 mg的黄连。结论管碟法能用于黄连抑菌效力的检测,可作为黄连品质评价的一种新方法。     

黄连-左氧氟沙星联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抗菌活性研究

目的： 研究左氧氟沙星与黄连中成分联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抑制作用。方法： 选择从临床标本中检出的多重耐药大肠埃希菌,分别测定黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀及左氧氟沙星对多重耐药大肠埃希菌最小抑菌浓度（MIC）,采用微量肉汤棋盘稀释法分别测定黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与左氧氟沙星的体外联合抑菌作用。结果： 实验结果表明黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与左氧氟沙星联合用药后对大部分耐药菌（90.9%）均表现为协同或相加作用,其中盐酸巴马汀与左氧氟沙星的联合应用最有效。结论： 盐酸巴马汀、盐酸小檗碱或黄连提取物分别与左氧氟沙星联合对多重耐药大肠埃希菌都有较好的体外抗菌作用,临床应用价值高,值得进一步研究。     

9-位引入亲脂性芳基对小檗碱抗菌活性的影响

目的 研究小檗碱9位引入亲脂性芳基后,其抗菌活性的变化。方法在小檗碱9位引入苯氧丁基,提高小檗碱的脂溶性,并采用体外抑菌实验,与小檗碱的抗菌活性进行对比。结果体外抑菌实验表明,在小檗碱9位引入亲脂性苯氧丁基后,其对¨种常见细菌的的最低抑菌浓度比小檗碱分别降低了4～16倍。结论9位引入亲脂性芳基增强了小檗碱的抗菌活性。     

9-位引入亲脂性芳基对小檗碱抗菌活性的影响

目的研究小檗碱9位引入亲脂性芳基后,其抗菌活性的变化。方法在小檗碱9位引入苯氧丁基,提高小檗碱的脂溶性,并采用体外抑菌实验,与小檗碱的抗菌活性进行对比。结果体外抑菌实验表明,在小檗碱9位引入亲脂性苯氧丁基后,其对11种常见细菌的的最低抑菌浓度比小檗碱分别降低了4～16倍。结论 9位引入亲脂性芳基增强了小檗碱的抗菌活性。     

HPLC法测定黄连解毒汤传统汤剂与配方颗粒中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的研究

目的建立HPLC法测定黄连解毒汤传统汤剂与配方颗粒中盐酸小檗碱与黄芩苷含量的方法。方法色谱柱：C18ODS反相色谱柱;流动相：甲醇-乙腈-0.4%磷酸（50：45：5）;流速：1.0 ml/min;检测波长：314nm;柱温：25℃。结果盐酸小檗碱、黄芩苷分别在0.05～1.1 mg/ml（r=0.9997）,0.06～1.3 mg/ml（r=0.9998）范围内呈良好的线性关系。所测6组黄连解毒汤传统汤剂中盐酸小檗碱、黄芩苷的含量平均值分别为0.789 mg和1.79 mg,6组黄连解毒汤配方颗粒中盐酸小檗碱与黄芩苷的含量平均值分别为1.16 mg和2.10 mg。结论结果表明黄连解毒汤传统汤剂与配方颗粒中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量均以后者较高。     

左金方及其组方成分对人胃癌细胞SGC-7901凋亡及膜电位的影响

目的比较左金方及其组方成分(黄连、吴茱萸及巴马汀、小檗碱、药根碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱)对人胃癌细胞SGC-7901生长的活性抑制、凋亡诱导和膜电位的影响。方法采用MTT比色法观察受试药物对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;以及JC-1试剂盒测定细胞膜电位。结果左金方、黄连、巴马汀和小檗碱分别作用SGC-7901细胞后,均能抑制细胞活性,且呈时间依赖性;1.0 mg·m L-1左金方和对应浓度的黄连(0.857 mg·m L-1)、巴马汀(9.19μg·m L-1)、小檗碱(39.85μg·m L-1)作用于SGC-7901细胞48 h,细胞凋亡率分别为(36.40±1.59)%,(21.90±0.27)%,(9.32±2.58)%和(13.89±3.56)%,与对照组(1.69±1.91)%比较差异均有统计学意义(P<0.01),左金方与黄连、巴马汀、小檗碱组间比较差异亦具有统计学意义(P<0.01)。对应浓度的吴茱萸(0.143mg·m L-1)、药根碱(4.86μg·m L-1)、吴茱萸碱(0.17μg·m L-1)与吴茱萸次碱(0.19μg·m L-1)几乎无作用。JC-1染色检测结果显示,左金方及相应浓度的黄连、巴马汀和小檗碱作用SGC-790l细胞4 h后,可以明显引起细胞线粒体膜电位的下降,实验结果与凋亡检测结果相一致。结论左金方、黄连、巴马汀和小檗碱均能通过降低细胞线粒体膜电位,诱导胃癌细胞的凋亡,且左金方的作用优于黄连、小檗碱和巴马汀,但吴茱萸及其有效成分几乎无作用。     

黄连等中药水煎剂对粪肠球菌的体外抑制作用

目的 比较黄连等6种中药水煎剂对粪肠球菌的体外抑菌效果.方法 采用M-H琼脂稀释法检测6种中药水煎剂对32 株粪肠球菌的体外抑菌作用,测定最小抑菌浓度(MIC)、MIC50、MIC90及累积抑菌百分率.结果 浓度为1∶320(3.125 mg/ml)时,六种中药差异有统计学意义(P<0.05),黄连抑菌率明显高于其他组(χ2=56.74P=0.000).浓度为1∶40(25 mg/ml)时,6种中药差异有统计学意义(P<0.05),五味子、大黄、黄连、连翘抑菌率高于乌梅、黄芩(χ2=8.381,P=0.004),乌梅、黄芩二者差异无统计学意义(χ2=3.471,P=0.062).浓度为1∶20(50 mg/ml)时,6种中药有统计学意义(P<0.05),乌梅抑菌率最低(χ2=33.52,P=0.000).浓度为1∶10(100 mg/ml)时,6种中药差异无统计学意义(P>0.05),抑菌率均为100%.结论 6种中药中黄连抑菌效果最好,乌梅、黄芩作用较弱.     

黄连成分与阿米卡星联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外活性研究

目的 研究硫酸阿米卡星与黄连中成分黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抑制作用。 方法 选择 2013—2014 年间对头孢噻肟耐药的 100 株大肠埃希菌, 筛选多重耐药大肠埃希菌, 并采用纸片扩散确证法进行超广谱 β-内酰胺酶（ESBLs）检测。 采用微量肉汤稀释法分别检测黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、硫酸阿米卡星对产 ESBLs 耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度（MIC）值, 再以 ATCC 25922 为质控菌株, 以棋盘式微量稀释法检测黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与硫酸阿米卡星联合用药对耐药大肠埃希菌的抑菌效果, 并计算联合用药的部分抑菌浓度（FIC）值。 结果 共筛选出 10 株产 ESBLs 耐药大肠埃希菌, 黄连提取物、盐酸小檗碱与硫酸阿米卡星联合用药后对 9 株耐药菌均表现为协同或相加作用, 而盐酸巴马汀与硫酸阿米卡星联合用药后对全部耐药菌均表现为协同或相加作用。 结论 盐酸巴马汀或盐酸小檗碱或黄连提取物与硫酸阿米卡星联合用于多重耐药大肠埃希菌感染, 具有较好的应用价值, 值得进一步研究。     

黄连小檗碱对人肠癌Caco-2细胞凋亡和细胞周期的影响

目的探讨黄连小檗碱对人肠癌细胞株Caco-2细胞周期和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法,检测不同时间点不同浓度黄连小檗碱对Caco-2细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染法),检测不同浓度黄连小檗碱对Caco-2细胞周期和凋亡的影响。结果不同浓度的黄连小檗碱干预肠癌细胞Caco-2不同时间后,均具有一定的增殖抑制作用,在一定浓度范围内,可以剂量和时间依赖性的抑制Caco-2细胞增殖。黄连小檗碱干预细胞24 h后,可使Caco-2细胞停滞在G2/M期,诱导细胞凋亡(P<0.05)。结论黄连小檗碱可以显著抑制Caco-2细胞增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期从而诱导细胞凋亡有关。     

一清胶囊对痤疮丙酸杆菌及表皮葡萄球菌的体外抑菌作用研究

目的:研究一清胶囊对痤疮丙酸杆菌及表皮葡萄球菌的体外抑菌作用。方法:采用微量板、常规平皿法分别对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌进行培养并观察不同浓度一清胶囊及其主要成分的抑菌效果,分别求出其最小抑菌浓度(MIC)。结果:一清胶囊对痤疮丙酸杆菌及表皮葡萄球菌的MIC分别为0.98、1mg.mL-1,黄芩浸膏的MIC分别为0.98、1mg.mL-1,而大黄黄连浸膏的MIC分别为1.96、1mg.mL-1。结论:一清胶囊对痤疮主要致病菌有较好的体外抑菌效果。     

Reassessment of the cefaclor breakpoint for Streptococcus pneumoniae

Discrepancies between proven clinical success of cefaclor and its relatively poor activity in vitro were investigated against eight pneumococcal isolates. The bacteriostatic minimum inhibitory concentration (MIC) (the concentration resulting in no growth/kill relative to the starting inoculum) was derived from time kill studies. Bioassay results demonstrated an in vitro half-life of >24 and 9 h for cefuroxime and cefaclor, respectively. The mean NCCLS MIC for cefaclor was 1.4 and 0.3 mg/l for cefuroxime. The corresponding mean bacteriostatic MICs were 0.24 and 0.16 mg/l. Whilst cefaclor NCCLS MICs were significantly higher compared with cefuroxime MICs (P = 0.00058) there was no statistical differences between the bacteriostatic MICs (P = 0.259). Bacteriostatic MIC determination established that cefaclor and cefuroxime are equally active against pneumococci.     

Chronic effects of berberine on blood, liver glucolipid metabolism and liver PPARs expression in diabetic hyperlipidemic rats

Berberine is one of the main alkaloids of Rhizoma coptidis which has been used as a folk medicine to treat diabetes mellitus for more than 1400 years in China. To investigate the chronic effect of berberine on diabetic hyperlipidemic rats, fasted rats were intraperitoneally injected 35 mg/kg streptozotocin. Diabetic rats were admitted after 2 weeks and given a high-carbohydrate/high-fat diet to induce hyperlipidemia. The rats were divided into 7 groups at the end of week 16: normal and diabetic rats received no drug, 5 treatment groups were administered with either 75, 150, 300 mg/kg berberine, 100 mg/kg fenofibrate or 4 mg/kg rosiglitazone per day for 16 weeks, respectively. The blood glucose, hemoglobin A1c, lipid metabolic parameters and hepatic glycogen and triglyceride were measured, and histopathology and peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) alpha/delta/gamma expression of liver were determined by hematoxylin eosin and immunohistochemical staining. Berberine reduced diabetic rats' body weight, liver weight and liver to body weight ratio. Berberine restored the increased blood glucose, hemoglobin A1c, total cholesterol, triglyceride, low density lipoprotein-cholesterol, apolipoprotein B and the decreased high density lipoprotein-cholesterol, apolipoprotein AI levels in diabetic rats to near the control ones. Berberine alleviated the pathological progression of liver and reverted the increased hepatic glycogen and triglyceride to near the control levels. Berberine increased PPARalpha/delta expression and reduced PPARgamma expression in liver of diabetic rat to near the control ones. Berberine improved glucolipid metabolism both in blood and liver in diabetic rats possibly through modulating the metabolic related PPARalpha/delta/gamma protein expression in liver.     

保肝消石胶囊的体外溶石、抑菌、解痉作用研究

目的:研究保肝消石胶囊的体外溶石、抑菌、解痉作用。方法:采用体外试验方法,观察保肝消石胶囊等药物对人胆色素结石、胆固醇结石、细菌和兔十二指肠平滑肌的影响。结果:浓度分别为7.568、15.135、30.270g(生药)/ml的保肝消石胶囊对人胆色素结石的溶石重量依次为5.4、8.3、14.7mg,对胆固醇结石的溶石重量依次为2.9、5.1、7.1mg,均有明显的体外溶解作用;对金黄色葡萄球菌、肠球菌、类白喉杆菌和溶血性链球菌有较强的抑制和杀灭作用,相应的最低抑菌浓度(MIC)依次为23.65、23.65、23.65、47.297mg(生药)/ml,最低杀菌浓度(MBC)均为47.297mg(生药)/ml;对大肠埃希菌、伤寒沙门菌及肺炎克雷伯菌均有一定的抑制和杀灭作用,MIC、MBC分别为378.375、756.75mg(生药)/ml;浓度为5.3414mg(生药)/ml的保肝消石胶囊能明显抑制乙酰胆碱所致肠肌收缩的平均张力增强、频率加快和活动度增加(P<0.01);浓度为3.5610、5.3414、7.1219mg(生药)/ml的保肝消石胶囊均能明显抑制氯化钡所致肠肌收缩的平均张力增强、频率加快和活动度增加(P<0.05或P<0.01)。结论:保肝消石胶囊具有一定的体外溶石、抑菌及解痉作用。     

虎射利咽方体外抑菌作用的实验研究

目的：研究虎射利咽方的体外抑菌作用。方法：采用管碟法和标准试管二倍稀释法测定虎射利咽方对供试菌的抑菌活性、最低抑菌浓度（MIC）、最低杀菌浓度（MBC）。结果：虎射利咽方对金黄色葡萄球菌和乙型链球菌的最大抑菌圈直径分别为15、22mm;最低抑菌浓度（MIC）分别为200、25mg/ml;最低杀菌浓度（MBC）分别为500、50mg/ml,对大肠埃希菌和白色念珠菌抑菌效果不明显。结论：虎射利咽方有抑菌作用。     

黄连中小檗碱的提取方法研究进展

黄连是一种具有广泛生物活性的传统中药,主要含有小檗碱等成分。常用的方法有酸水法,醇提法,超声波法,微波法。本文对近年来黄连中小檗碱的提取工艺进行了综述和研究,为更好地开发和利用黄连提供了理论依据。     

五倍子、黄芩和黄连联合应用对MRSA的体外抗菌活性研究

目的:研究五倍子、黄芩和黄连联合应用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性。方法:采用肉汤稀释法测定其对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)值,推算出半数抑菌浓度(MIC50)和抑菌90%浓度(MIC90)值,并作比较。结果:五倍子、黄芩和黄连单药及相互配伍后对MRSA的抑菌效果从高至低依次为:黄芩-五倍子、五倍子、黄连-五倍子、黄连、黄连-黄芩、黄芩。结论:黄芩与五倍子配伍对MRSA有协同作用,与黄芩呈拮抗作用。     

余甘子醇提物不同萃取部位对人消化道常见菌的抑制作用研究

目的:研究余甘子醇提物4种不同萃取部位对人消化道常见菌的抑制作用。方法:采用管碟法进行余甘子醇提物及醇提物中石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、水部位对大肠杆菌的抑菌试验,测量其抑菌圈直径以确定最佳抑菌部位,二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)。采用宏量肉汤稀释法(试管法)进行余甘子醇提物最佳抑菌部位对消化道菌群的抑菌试验,测定其MIC。结果:余甘子醇提物对大肠杆菌的MIC为0.625 mg/ml。余甘子醇提物乙酸乙酯部位为最佳抑菌部位,其对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、变形杆菌、沙门氏菌的MIC均为2.5 mg/ml,对肺炎链球菌的MIC为0.625 mg/ml,对大肠杆菌和产气荚膜杆菌的MIC均为1.25 mg/ml,对破伤风杆菌的MIC为0.156 mg/ml。结论:余甘子醇提物乙酸乙酯部位对消化道常见菌群有较强的抑制作用。     

Antiurolithic effect of berberine is mediated through multiple pathways

Berberine is an isoquinoline alkaloid, occurring in nature as the main constituent of several plants with medicinal use in kidney stone disease. This work was undertaken to evaluate its antiurolithic potential and explore the possible underlying mechanism(s). Berberine was tested in vitro for the antioxidant effect and in vivo for diuretic and antiurolithic effects on an animal model of calcium oxalate urolithiasis. Berberine exhibited concentration-dependent (50-150μg/ml) antioxidant effect against ferrous-ascorbate induced lipid peroxidation in rat kidney homogenate with potency slightly higher than the reference antioxidant, butylated hydroxytoluene. In Wistar rats, berberine (5-20mg/kg) increased urine output accompanied by increased pH and Na(+) and K(+) excretion and decreased Ca(2+) excretion, similar to hydrochlorothiazide. In an animal model of calcium oxalate urolithiasis developed in male Wistar rats by adding 0.75% ethylene glycol in drinking water, berberine (10mg/kg) prevented as well as eliminated calcium oxalate crystal deposition in renal tubules and protected against deleterious effects of lithogenic treatment including weight loss, impaired renal function and oxidative stress, manifested as increased malondialdehyde and protein carbonyl contents, depleted GSH and decreased antioxidant enzyme activities of the kidneys. In na?ve rats, berberine (10mg/kg) increased urine volume and pH and decreased Ca(2+) excretion. Results of this study suggest the presence of antiurolithic effects in berberine against calcium oxalate stones mediated through a combination of antioxidant, diuretic, urinary alkalinizing and hypocalciuric effects. These data invite future studies on berberine to establish its efficacy for clinical use.     

马齿苋及鱼腥草水提取液体外抑菌实验

目的:观察马齿苋与鱼腥草水提取液对痢疾杆菌、大肠杆菌、肺炎双球菌的体外抑菌作用。方法:采用试管内连续稀释法(几何级稀释法)测定鱼腥草与马齿苋提取液体外最低抑菌浓度(MIC)。结果:马齿苋与鱼腥草水提取液(按生药质量浓度)对肺炎双球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌抑菌作用分别为500.00mg/mL,62.50mg/mL;15.625mg/mL,250.00mg/mL;31.25mg/mL,125.00mg/mL。结论:马齿苋水提取液对痢疾杆菌、大肠杆菌的抗抑作用最佳;鱼腥草水提取液对肺炎双球菌较好。