聚合酶链式反应用于急性淋巴细胞白血病基因诊断的研究

采用ＰＣＲ方法分析２０例急性淋巴细胞白血病患者ＩｇＨ基因重排和ＴＣＲγ基因重排。结果１５例Ｂ淋巴细胞白血病均发生ＩｇＨ基因重排，并有２例出现两种基因扩增产物，大小７０－１４０ｂｐ。另５例Ｔ淋细胞白血病中２例发生ＴＣＲγ基因重排，扩增产物大小１７０－２３０ｂｐ。     

急性淋巴细胞白血病IgH超基因家族及T细胞受体δ、γ基因的研究

急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）是一组血液系统的恶性克隆性疾病。目前，尽管应用强效化疗方案及骨髓移植等有效手段，使ＡＬＬ的疗效有较大改观。然而，诱导缓解后的复发问题仍是临床实践中的当务之急，而复发的根源是白血病克隆增殖的结果［１］。本研究以ＩｇＨ、Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）γ和ＴＣＲδ基因重排为标志分子，用ＰＣＲ方法检测缓解后微小残留病（ＭＲＤ），并探讨ＩｇＨ、ＴＣＲδ、γ基因重排在白血病免疫分型中的价值。 一、资料与方法 １．病例：３８例ＡＬＬ患者为初治的住院及门诊患者。全部患者均经临床、细胞形态学以及细…     

高龄慢性淋巴细胞白血病伴多发性骨髓瘤细胞的克隆来源

为进一步研究，慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）伴多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞的克隆来源。报告１例高龄ＣＬＬ合并ＭＭ的病例，结合临床形态学特征，用单克隆抗体，免疫球蛋白（Ｉｇ）基因和Ｔ－细胞受体（ＴＣＲ）γ做标志，分析其恶性细胞的克隆来源。经过骨髓和外周血ＩｇＨ重排基因的单链构象多态性（ＳＳＣＰ）指纹图谱以及异源双链形成法（ＨＤＦ）分析发现，尽管ＣＬＬ细胞和ＭＭ细胞的形态学特征不同，分泌ＩｇＭ和ＩｇＡ两种不同的免疫球蛋白，但是外周血和骨髓都能够用聚合酶链反应获得同样长度的Ｉｇ重链基因的Ｖ－Ｄ－Ｊ基因重排片段，都没有ＴＣＲγ基因的重排。ＳＳＣＰ指纹图谱和ＨＤＦ法分析Ｉｇ基因序列特征显示ＣＬＬ和ＭＭ细胞的Ｖ－Ｄ－Ｊ重排片段序列是一致的。说明其ＣＬＬ和ＭＭ来源于同一个Ｂ－淋巴系统的祖细胞。     

聚合酶链反应IgH及TCRγ基因重排分析对肿大淋巴结病因的诊断意义

聚合酶链反应ＩｇＨ及ＴＣＲγ基因重排分析对肿大淋巴结病因的诊断意义盛瑞兰夏薇朱广荣自１９９２年以来，我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）ＩｇＨ及ＴＣＲγ基因重排分析（简称ＰＣＲ法）对淋巴增殖性疾病进行检测。分别对淋巴结穿刺液标本，ＦＡＢ分类慢性淋巴细胞白血...     

急性白血病受体基因重排的研究

目的：探讨急性白血病微小残留病（ＭＲＤ）与化疗效应差异及受体基因重排,在急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中序列交叉现象及意义。方法：应用聚合酶链反应技术对免疫球蛋白（ＩｇＨ）及Ｔ细胞受体（ＴＣＲγ）基因重排进行定量测量。结果：４５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中阳性率８４．４％（３８／４５）,完全缓解（ＣＲ）后１８０ｄ检测,阳性率仍５５．６％（２５／４５）,２０例ＡＮＬＬ中５例检测到ＩｇＨ受体基因     

骨髓增生异常综合征患者T细胞受体基因重排的检测价值

目的 为了解骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排情况。方法 应用聚合酶链反应检测３６例ＭＤＳ患者ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排。结果 ８例（２２．２％）ＭＤＳ患者检测出克隆性ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排;难治性贫血伴有原始细胞增多（ＲＡＥＢ）,慢性粒－单细胞白血病（ＣＭＭＬ）和转化中的ＲＡＥＢ（ＲＡＥＢ－Ｔ）组ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排阳性ＭＤＳ转化为急性白血病时间显著短于重排阴     

急性非淋巴细胞性白血病免疫球蛋白和T细胞受体基因重排的研…

采用ＰＣＲ法对２５例不同时期急性非淋巴细胞性白血病患者免疫球蛋白重链和Ｔ细胞受体γ链基因重排进行了研究。结果显示，３例发生ＩｇＨ基因重排，３例出现ＴｃＲｒ基因重排，其中１例同时出现ＩｇＨ和ＴｃＲｒ基因重排，对这种ＡＮＬＬ中序列失真现象的机制及其在白血病基因分型豚检测微小残留疾病中的意义进行讨论。     

应用PCR检测急性淋巴细胞性白血病患者脑脊液中白血病细胞

应用ＰＣＲ检测急性淋巴细胞性白血病患者脑脊液中白血病细胞徐兵周淑芸张剑免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排可作为淋巴系肿瘤特异性基因标志。我们采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测急性淋巴细胞性白血病（急淋）患者脑脊液（ＣＳＦ）标本Ｉｇ...     

聚合酶链反应联合Southern杂交检测急性非淋巴细胞白血病IgH重…

免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）重排，可作为Ｂ淋巴细胞白血病的基因标志，为进一步了解急性非淋巴细胞白血病（急非淋）ＩｇＨ重排情况，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）联合地高辛标记ＪＨ探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测４１例急性非淋病人ＩｇＨＣＤＲ－Ⅲ区域，７例（１７．１％）ＰＣＲ扩增阳性，此７例阳性病例均经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实，本实验的灵敏度为１０＾－４～１０＾－５水平。１２例完全缓解病例中３例（２５．０％）重排阳     

急性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链及T细胞受体γ基因重排的临床观察

免疫球蛋白重链 (ＩｇＨ )基因和Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ)ｒ基因的重排可作为淋巴细胞白血病的特异性基因标志。应用敏感、特异的多聚酶链反应 (ＰＣＲ)技术检测ＩｇＨ及ＴＣＲγ基因重排 ,对急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ)的基因分型、微小残留病变 (ＭＲＤ)的检测、判断疗效、预测复发等均具有重要意义。我们于 1997年～ 1998年应用ＰＣＲ技术对 42例成人ＡＬＬ病人的ＩｇＨ及ＴＣＲγ的基因重排进行研究。对象与方法1.对象 :ＡＬＬ患者 42例 ,男性 2 5例 ,女性 17例。年龄 15～ 70岁 ,中位年龄 3 5岁。分型 :Ｌ16例 ,Ｌ2 2 8例 ,Ｌ3 8例。其中…     

聚合酶链反应联合Southern杂交检测急性非淋巴细胞白血病IgH重排基因

免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）重排，可作为Ｂ淋巴细胞白血病的基因标志，为进一步了解急性非淋巴细胞白血病（急非淋）ＩｇＨ重排情况，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）联合地高辛标记ＪＨ探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测４１例急非淋病人ＩｇＨＣＤＲ－Ⅲ区域。７例（１７．１％）ＰＣＲ扩增阳性，此７例阳性病例均经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实，本实验的灵敏度为１０－４～１０－５水平。１２例完全缓解病例中３例（２５．０％）重排阳性，此３例均于半年内临床复发。结果表明，ＩｇＨ重排并不局限于Ｂ淋巴系白血病，也可发生于急非淋病人，其机制可能是，部分急非淋起源于较原始的多向造血祖细胞或除髓系白血病克隆外，尚存在亚克隆     

多发性骨髓瘤外周血克隆性B细胞检测的临床意义

多发性骨髓瘤外周血克隆性Ｂ细胞检测的临床意义吕鸣余润泉孔宪涛黄隆安多发性骨髓瘤（ＭＭ）系起源于Ｂ细胞的单克隆浆细胞增殖恶性肿瘤。至今其克隆起源及发病机制尚不清楚。我们用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＩｇＨ基因重排技术分析了ＭＭ患者骨髓与外周血克隆性ＩｇＨ...     

免疫学无法分型的急性白血病细胞表面标记动态分析

为探讨缺乏系限抗原表达急性白血病的细胞起源，采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫酶法（ＡＰＡＡＰ），分析了２５例免疫学无法分型的急性白血病化疗后或复发后细胞表面标记的动态变化。结果：７例单纯表达ＣＤ３８抗原者，其中２例化疗后、３例复发后表达了Ｔ细胞标记；４例单纯表达ＣＤ９抗原者，化疗后或复发后均表达了Ｂ细胞标记；６例单纯表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原者，化疗或复发后各有２例表达了Ｂ细胞标记；４例表达ＣＤ３８和ＨＬＡ－ＤＲ抗原者，各有１例化疗或复发后分别表达了Ｂ或Ｔ细胞标记；其余４例无任何分化抗原表达者，化疗后各有１例分别表达了Ｔ和Ｂ细胞标记。细胞表面标记的变异反映了白血病细胞克隆的演化和进展，动态研究有助于白血病细胞起源的判断     

HBV X基因／C基因启动子变异在重型肝炎病人的发生率

目的：了解重型乙型肝为病人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因／Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）变异性发生情况，方法；用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）限制性片长度多态性分析（ＲＦＬＰ）检测中国不同地区５８例重型乙型肝炎病人ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区变异，并与前Ｃ区变异情况比较，部分病例经测序证实，结果：５８列中可见ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区和／或前Ｃ区变异者４３例（７４％），ＢＣＰ区第２个ＡＴ丰富区有一对点突变核苷酸（ｎｔ）１７６２碱     

巢式逆转录／聚合酶链反应检测慢性粒细胞白血病BCR／ABL融合基因

巢式逆转录／聚合酶链反应检测慢性粒细胞白血病ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因袁有忠，刘本，孟沛霖，毛裕民慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）具有特征性的Ｐｈ染色体，即ｔ（９；２２）（ｑ３４；ｑ１１）。位于９ｑ３４的原癌基因ＡＢＬ与２２ｑ１１的ＢＣＲ基因发生重组，形成ＢＣ...     

PCR技术在儿童ALL微小残留病中的检测及临床意义

目的：探讨ＰＣＲ检测ＡＬＬ－ＭＲＤ的重要性及临床意义。方法：运用ＰＣＲ技术，以ＩｇＨ和ＴｅＲγ基因重排作为标志，检测了４０例急性淋巴细胞白血病（ＡＡＬ）微小残留病（ＭＲＤ）。结果：７例初治未缓，１２例部分缓解（ＰＲ），１３例完全缓解（ＣＲ）的ＡＬＬ患儿ＭＲＤ检测阳性为另８例（１例ＰＲ、７例ＣＲ）ＭＲＤ阴性。发现ＣＲ时间赵长，ＭＲＤ阳性率越低，反之，ＣＲ时间越短，ＭＲＤ阳性率越高，结论：ＭＲＤ何作为     

B淋巴细胞恶性肿瘤病人骨髓微小残存病变检测的临床意义

以克隆性免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排为肿瘤细胞基因标志，在聚合酶链反应基础上结合应用ＤＮＡ单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术对病人骨髓标本进行微小残存病变（ＭＲＤ）检测。３８例形态学检查正常的Ｂ细胞非何杰金淋巴瘤（Ｒ－ＮＨＬ）病人治疗前骨髓标本，ＭＲＤ检出率为６８．４％（２６／３８），骨髓ＭＲＤ阳性的Ｂ－ＮＨＬ病人生存期明显短于ＭＲＤ阴性病人（Ｐ＜０．０５）。２１例８细胞急性淋巴细胞白血病（Ｂ－ＡＬＬ）完全缓解期采集的骨髓标本，ＭＲＤ检出率为７１．４％（１５／２１）。骨髓中ＭＲＤ阴性的Ｒ－ＡＬＬ病人无病存活期明显长于ＭＲＤ持续阳性病人（Ｐ＜０．０５）。骨髓中ＭＲＤ检测可以协助估价Ｂ淋巴细胞恶性肿瘤病人预后、判断疗效及监测复发。     

免疫球蛋白重链基因重排在浆细胞增殖性疾病中的应用

免疫球蛋白重链基因重排在浆细胞增殖性疾病中的应用陈文明朱嘉芷张鹏朱平孙卫红李淑兰周艳我们用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术探讨Ｂ细胞恶性肿瘤基因标志的克隆性免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排对多发性骨髓瘤（ＭＭ）的诊断、鉴别诊断的价值及其与临床分期的关系。一...     

胃恶性淋巴瘤的单克隆性检测及其与Hp感染的关系探讨

目的探讨胃粘膜相关淋巴组织（ＭＡＬＴ）淋巴瘤与幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染的关系和各种不同层次检测方法的诊断价值。方法对３１例ＭＡＬＴ淋巴瘤作Ｇｉｅｍｓａ染色查Ｈｐ、免疫组化染色、半巢式ＰＣＲ扩增进行ＩｇＨ基因重排,检测其单克隆性。以同期胃淋巴细胞性胃炎（ＬＧ）、无关疾病胃粘膜作对照。结果胃ＭＡＬＴ淋巴瘤中Ｈｐ感染率８３．９％,单克隆性重排８７．１％,远高于对照组。但免疫组化染色显示的轻链限制性仅５５．６％。结论ＰＣＲ法检测ＩｇＨ基因重排优于免疫组化染色检测轻链限制性。在ＬＧ中发现２６．９％有单克隆性Ｂ细胞增生,提示ＰＣＲ法敏感性高,可能具有早期诊断价值。     

淋巴细胞恶性增殖病基因重排及其意义

目的：对淋巴细胞恶性增殖病进行研究。方法：应用多聚酶链反应－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＣＲ－ＰＡＧＥ）和银染色法,对３０７ 例淋巴细胞恶性增殖病进行了免疫球蛋白重链基因（ＩＧＨ）,Ｔ细胞受体ｒ链基因（ＴＣＲｒ）的克隆性重排进行检测。结果：ＩＧＨ １６０ 例（５２．１％ ）,ＴＣＲｒ ５８ 例（１８８％ ）,双阳性２２ 例（７．１％ ）,阴性６７ 例（２１．８％ ）。非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）与ＮＨＬ白血病的基因重排分布相似;霍奇金淋巴瘤（ＨＤ）明显较低;急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）及多发性骨髓瘤（ＭＭ）进展期基因重排高达９５％ ,９０％ ;缓解期６０％ ,４５％ ;慢性淋巴细胞性白血病（ＣＬＬ）重排率低;急性粒细胞性白血病（ＡＭＬ）及慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）为对照,它们也有少量淋巴细胞基因重排。病理学型别以不能分型者,原发灶以鼻及咽淋巴环者之ＴＣＲｒ 重排明显增高,且与恶性程度呈正相关。并可以此重排来检测微小病灶（ＭＲＤ）之存在。结论：可用此指导化疗。