扶正抗癌方对人肝癌细胞增殖作用影响的实验研究

通过大鼠灌胃给药后,分离药物血清,作用于体外培养细胞的方法,观察扶正抗癌方对人肝癌细胞SMMC7721对增殖的影响;用两个循环聚合——解聚的方法,提取大鼠脑组织中微管蛋白,利用微管蛋白随温度变化而出现的聚合——解聚特点,观察扶正抗癌方对微管蛋白活性的影响,研究扶正抗癌方抑制肿瘤细胞增殖作用的机理。结果表明扶正抗癌方药物血清具有明显抑制人肝癌细胞3~H-TdR掺入和MTT还原作用;扶正抗癌方显著抑制微管蛋白聚合。说明扶正抗癌方具有较好的抑制人肝癌细胞增殖作用。其机理可能在于影响微管构建,破坏纺缍丝形成,使有丝分裂中止,从而抑制肿瘤细胞增殖。     

扶正助脉方治疗缓慢性心律失常117例临床观察

缓慢性心律失常是临床常见的心血管病症,以心率缓慢、心室率低于60次／min为特征,包括窦性心动过缓、心脏传导阻滞、病态窦房结综合征、室上性和室性逸搏等,属中医学“心悸”、“迟脉证”、“胸痹”、“昏厥”范畴。2007—06—2010—06,笔者采用扶正助脉方治疗阳虚瘀阻型缓慢性心律失常117例,取得显著疗效,总结报道如下。     

乌牛膝方对去卵巢大鼠骨密度的影响

目的:研究乌牛膝方对去势SD大鼠骨密度影响的机理。方法:将雌性SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组和阳性对照组;手术摘除卵巢,建立绝经后骨质疏松动物模型。连续灌胃90d,测定骨密度。结果:乌牛膝各剂量组BMD值均高于模型组,差异具有显著性(P<0.05),其中大剂量组明显高于模型组(P<0.01);肱骨和腰椎各组大鼠组间差异不明显,不具有统计学意义。股骨组的大、中剂量组与其模型组相比具有显著的统计学意义,P<0.01,说明大、中剂量组对股骨部位的骨密度有显著的改善作用。髂骨的大剂量组与模型组相比,同样表现出了显著的差异性,P<0.01。结论:乌牛膝各剂量组可显著提高去势大鼠的BMD水平,可有效改善骨质疏松症,其作用并不均等,因部位的不同具有显著的差异性。     

扶正抗癌方对小鼠肝癌细胞转移影响的实验研究

目的:通过扶正抗癌方对H22腹水型瘤株移植瘤小鼠模型VEGF和nm23水平的影响,观察该药对肿瘤的抑制作用。方法:取15只健康小鼠作为A:空白对照组;再将造模成功的60只,分别分为B:荷瘤对照组;C:替加氟组;D:扶正抗癌方组;E组:扶正抗癌方组加替加氟组。各组小鼠分别给予相应实验药物灌胃,灌胃1d1次,连用14天药。第15天处死,测出抑瘤率,胸腺、脾脏指数,同时免疫组化法检测VEGF和nm23表达情况。结果:用药组小鼠瘤体重量明显小于荷瘤对照组(P<0.01),扶正抗癌方组及联合用药组免疫器官(胸腺、脾脏)指数高于替加氟组(P<0.01),联合用药组肝组织中VEGF的表达降低、癌旁组织中nm23表达升高均优于西药组(P<0.05)。结论:扶正抗癌方能抑制移植性H22荷瘤小鼠瘤体的生长及转移,提高小鼠免疫功能,改善小鼠的生存质量,其抗肿瘤生长可能与抑制肿瘤血管形成和增强抑癌基因的表达有关。     

加减地黄饮子对阿尔茨海默病大鼠模型的实验研究

目的:探讨大鼠海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)后血清TNF-α和IL-1β含量的变化及加减地黄饮子对其影响。方法:100只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐对照组、加减地黄饮子组共5组,采用海马立体定向注射Aβ1-40诱导Alzheimer's病动物模型后,药物干预4周,第5周应用双抗夹心酶联免疫吸附测定法检测TNF-α和IL-1β含量。结果:模型组TNF-α和IL-1β含量显著高于假手术组(p<0.05)。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和加减地黄饮子组TNF-α和IL-1β含量显著降低(p<0.05)。结论:大鼠海马注射Aβ1-40后大鼠血清TNF-α和IL-1β含量明显增高,加减地黄饮子通过降低血清TNF-α和IL-1β的含量,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。     

益肾方对IgA肾病细胞因子表达的实验研究

目的:观察益肾方对IgA肾病模型大鼠细胞因子表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为正常对照组10只,造模组30只两组,采用口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B法造模。将IgA肾病模型大鼠分成3组:益肾方组、造模组、强的松治疗组各10只。分别灌胃给药,4周后取血,酶联免疫法(ELISA)测定IL-6、Leptin和PDGF水平。结果:与模型组比较,各药物治疗组均有IL-6、Leptin和PDGF表达降低作用;与正常对照组比较,各组IL-6、Leptin和PDGF表达均增强(P0.05);与模型组比较,益肾方能显著降低IL-6、Leptin和PDGF的表达。结论:益肾方可能是通过降低IL-6、Leptin和PDGF的表达治疗IgA肾病。     

气虚血瘀证MCAO大鼠子代的同种疾病趋势诱导形成实验研究

目的:获取气虚血瘀证MCAO(大脑中动脉栓塞)大鼠的子代,探讨该子代大鼠较正常同龄大鼠是否更具形成缺血性卒中前病理生理状态的趋势。方法:对SD大鼠进行气虚血瘀证候造模及MCAO造模后,雌雄交配,获取其子代大鼠,再次进行证候造模(证候子代组),与同样进行证候造模的正常同龄SD大鼠(证候对照组)及无干预因素作用的正常同龄SD大鼠(空白对照组)比较,观察其血液流变学、血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa、P-选择素水平及颈内动脉起始处血管内皮病理学变化。结果:证候子代组与另两组相比,血流变指标、血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及P-选择素水平均有统计学差异(P<0.05),其血液流变学呈明显高黏状态,血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa和P-选择素水平也明显高于其他两组;证候对照组与空白对照组相比,血液流变学结果有统计学差异(P<0.05),血黏度呈轻度增高,但血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa和P-选择素水平与空白对照组对比无统计学差异(P>0.05)。证候子代组颈内动脉起始处HE染色可见明显内皮细胞水肿及损伤,证候对照组可见内皮细胞水肿,但程度轻微,不如证候子代组变化明显,空白对照组未见异常病理表现。结论:气虚血瘀证MCAO大鼠子代与正常同龄大鼠相比,在气虚血瘀证候造模的诱导下,能够产生更为明显的血液高粘滞综合征及颈内动脉内皮细胞水肿、损伤等病理改变,并且具有肯定的更易形成血栓的趋势。     

参仙升脉口服液对自发性高血压大鼠左室重构和肌浆网钙泵的影响

目的:探讨参仙升脉口服液对自发性高血压大鼠左室重构和肌浆网钙泵的影响。方法:雄性SHR大鼠24只,Wistar大鼠(WKY)8只,随机分为正常对照组(WKY)、高血压对照组(SHR)、参仙升脉大剂量组(SXSMh)、参仙升脉小剂量组(SXSMl)、氯沙坦组(Los)。喂药12周后测定左心室质量/体质量(LVW/BW)比值(mg/g),苦味酸-天狼猩红(VG)染色后,计算心肌胶原容积分数(CVF),并采用RT-PCR法及免疫组化法测定各组心肌肌浆网Ca2+-ATPasemRnA及蛋白含量。结果:Los组和SXSMh及SXSMl组的LVW/BW、心肌胶原容积分数(CVF)显著低于SHR组(P均<0.05),Ca2+-ATPase在Los组和SXSMh及SXSMl组中的转录较SHR组明显增强(P均<0.05);Ca2+-ATPase蛋白水平在Los组和SXSMh及SXSMl组中较SHR组明显增强(P均<0.05);Los和大小剂量参仙升脉口服液对Ca2+-ATPase mRnA及蛋白含量的作用无统计学差异(P>0.05)。结论:参仙升脉口服液对自发性高血压大鼠左室重构有改善作用,并增强心肌肌浆网钙泵Ca2+-ATPase的表达。     

扶正抗癌方对H_(22)移植瘤小鼠凋亡和端粒酶表达影响的实验研究

目的:通过扶正抗癌方对H22腹水型瘤株移植瘤小鼠模型TGF-α和端粒酶水平的影响,观察该药抗肝癌作用的机理。方法:随机选取85只健康昆明小鼠,取15只作为空白对照组,其余70只造膜,选取造膜成功的小鼠60只,随机分为4组,分别为替加氟组,荷瘤对照组,扶正抗癌方组,扶正抗癌方+替加氟组。各组小鼠分别给予相应实验药物灌胃,1次/d,连用14d药。第15天处死,测出抑瘤率,胸腺、脾脏指数,同时免疫组化法检测TGF-α和端粒酶表达情况。结果:①用药组小鼠瘤体重量明显小于荷瘤对照组(P<0.01),说明药物组都有抗肿瘤生长的作用;②扶正抗癌方组及联合用药组免疫器官(胸腺、脾脏)指数高于替加氟组(P<0.01),说明中药组对小鼠免疫功能有明显提升作用;③联合用药组小鼠肝癌中TGF-α和端粒酶表达阳性率均低于单纯西药组(P<0.01),说明联合用药具有减毒增效的作用。结论:扶正抗癌方能抑制移植性H22荷瘤小鼠瘤体的生长及转移,提高小鼠免疫功能,改善小鼠的生存质量,其抗肿瘤生长可能与下调TGF-α与端粒酶的表达有关。     

软脉降脂方(Ⅰ号)的临床及实验研究

本文报道了软脉降脂方(Ⅰ号)在降脂、改善血液流变学和抗动脉粥样硬化方面的作用。结果表明,在临床观察50例中,该方有明显的降血脂效果,疗效近似安妥明;在42只免实验中,除有明显的降血脂、降低全血粘度、减少血球压积和极显著地缩短红细胞电泳时间的作用外,并具有抑制高脂餐造型兔主动脉粥样斑块形成的作用。     

乌鸡白凤丸抗肝纤维化作用的实验研究

目的:观察乌鸡白凤丸在大鼠肝纤维化形成过程中对大鼠TGF-β、TNF-α及肝纤维化指标透明质酸、层粘连蛋白、III型胶原及α-SMA的影响。方法:采用放免法观察肝纤维化形成过程中血清TGF-β、TNF-α及HA、LN、PCIII的水平变化;采用免疫组化的方法观察α-SMA的变化。结果:模型组血清中TGF-β、TNF-α及HA、LN、PCIII的水平均显著升高,但通过乌鸡白凤丸处理后各项指标均较模型组明显减低,乌鸡白凤丸对以上各项指标有明显的下调作用;乌鸡白凤丸处理组肝硬化程度明显减轻,α-SMA的表达显著减低。结论:乌鸡白凤丸可能通过抑制多种促肝纤维化因子及减低肝星状细胞活性等多种机制抗大鼠肝纤维化,从而在一定程度上延缓了肝纤维化的进程。     

扶正化瘀方对博莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化的干预作用

目的：探讨扶正化瘀方对肺纤维化的干预作用.方法：采用博莱霉素诱导肺间质纤维化模型,分别观察各组大鼠的死亡率、肺系数、肺组织羟脯氨酸（Hyp）含量以及肺组织形态学变化.结果：与模型对照组比较,扶正化瘀方能显著降低大鼠肺系数和肺组织Hyp含量,改善肺组织纤维化程度.结论：扶正化瘀方具有明显的抗博莱霉素所致的大鼠肺纤维化的作用.     

活血化瘀小复方对大鼠佐剂性关节炎影响的实验研究

目的:探讨活血化瘀小复方对佐剂关节炎(AA)大鼠炎性反应的抑制情况。方法:以SD大鼠为研究对象,共72只,随机选取10只为空白对照组,其余用弗氏完全佐剂造RA模型,造模后8d随机分出10只为预防组开始灌服活血化瘀小复方;造模成功后,随机分为中药组、雷公藤组、雷公藤加中药组、模型对照组,分别灌服相应药物干预。以排水法测量大鼠足体积;造模第54d,处死动物,取血检测血流变,纤维蛋白原等指标。结果:预防组抑制大鼠左后足(造模致炎侧)肿胀优于其它治疗组(P<0.05),其它各治疗组之间无差异;对大鼠右后足(对侧)肿胀的抑制,各治疗组组间无差异;使用活血化瘀小复方的三组在降低大鼠血清纤维蛋白原,改善血流变水平方面优于雷公藤组(P<0.05)。结论:活血化瘀小复方能抑制模型大鼠足肿胀;抑制局部炎性反应。     

乙肝扶正排毒胶囊体外抗乙肝病毒及对NF-kb活化干预的实验研究

目的：以HepG2．2．15细胞株为实验模型,研究乙肝扶正排毒胶囊对乙肝病毒e抗原（HBeAg）、表面抗原（HBsAg）、脱氧核糖核酸（HBV—DNA）的抑制作用及机理探讨和对NF—kb活化效应研究。方法：通过细胞毒性实验以确定对细胞无毒性作用的最高药物浓度,加药物和含药血清到细胞培养液中,分别采取第4天、第8天的细胞培养上清液,用ELISA法测定其HBsAg、HBeAg、HBV—DNA含量,用免疫组化检测方法比较各组细胞模型之间NF—kb活化阳性细胞率。结果：乙肝扶正排毒胶囊最大无毒浓度TD0〈2．81mg／ml,乙肝扶正排毒胶囊以及其含药血清有明显抑制HBsAg、HBeAg、HBV—DNA的作用,各浓度间存在量效关系,且NF—kb活化阳性细胞率也大于其他对照各组。结论：乙肝扶正排毒胶囊对HepG2．2．15细胞株HBV标志物有显著的抑制作用;其抑制作用机理和效果与NF—kb活化程度相关。     

扶正抗癌方对H_(22)细胞STAT3通路的影响

目的:通过扶正抗癌方对H22腹水型瘤株移植瘤小鼠模型STAT3水平的影响,观察该药对肿瘤的抑制作用。方法:将100只健康I CR小鼠进行空白分组和造模分组。各组小鼠分别给予相应实验药物灌胃,1d1次,连用14d药。第15d处死,测出抑瘤率,胸腺、脾脏指数,同时免疫组化法检测STAT3表达情况。结果:用药组小鼠瘤体重量明显小于荷瘤对照组(P<0.01),说明药物组都有抗肿瘤生长的作用;扶正抗癌方组及联合用药组免疫器官(胸腺、脾脏)指数高于替加氟组(P<0.01),说明中药组对小鼠免疫功能有明显提升作用;用药组小鼠肝癌中STAT3阳性率均低于替加氟组(P<0.01),说明扶正抗癌方能下调STAT3的水平,抑制肿瘤的生长,也能够保护免疫器官,从而使得小鼠的一般状况和生活质量均得到提高,与化疗药物共同使用可以达到减毒增效的作用。结论:扶正抗癌方能抑制移植性H22荷瘤小鼠瘤体的生长及转移,提高小鼠免疫功能,改善小鼠的生存质量,其抗肿瘤生长可能与下调STAT3的表达有关。     

消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜VEGF的影响

目的:探讨消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜VEGF表达的影响。方法:60只SD大鼠造模成功后随机分为模型组、米非司酮组、散结镇痛胶囊组、消异方低、中、高剂量组。给药4W后,检测各组大鼠异位内膜组织中VEGF的表达。结果:模型组异位内膜中VEGF的表达水平明显高于米菲司酮组、散结镇痛胶囊组和中药消异方各剂量组(P<0.05)。结论:消异方能降低大鼠异位子宫内膜VEGF的含量,以达到治疗子宫内膜异位症的作用。     

通络益肾汤对链脲佐菌素DN大鼠血浆ET影响的实验研究

目的:观察通络益肾汤对链脲佐菌素(STZ)糖尿病肾病大鼠的疗效,探讨其可能的作用机理。方法:采用STZ糖尿病肾病大鼠模型,分为正常组、病理组、通络益肾汤治疗组、西药治疗组(糖适平+洛汀新)。观察各组大鼠血糖、全血黏度、血浆粘度、肾功(BUN、Scr)、血浆ET等指标的变化。结果:与病理组比较,通络益肾汤治疗组大鼠血糖明显下降(P<0.05),全血黏度、血浆粘度、血清BUN、Scr、血浆ET亦明显下降(P<0.01)。通络益肾汤治疗组与西药组比较,各项指标无明显差异。结论:通络益肾汤能延缓糖尿病肾病的病理进展,其疗效与西药洛汀新加糖适平治疗无明显差异,其作用机理可能与降低血浆ET水平有关。     

扶正助脉方对缓慢性心律失常大鼠一氧化氮、Na~+-K~+-ATP酶的影响

目的研究扶正助脉方对阳虚瘀阻证缓慢性心律失常大鼠一氧化氮(NO)、Na+-K+-ATP酶的影响,探讨其治疗缓慢性心律失常的作用机制。方法采用皮下注射氢化可的松造肾虚模型的基础上强迫大鼠游泳诱导劳倦过度并注射盐酸可乐定的方法,建立阳虚瘀阻证缓慢性心律失常大鼠模型。随机将大鼠分为高、中、低剂量组、模型对照组及空白对照组,测定大鼠心率及血清NO含量、Na+-K+-ATP酶活性。结果与模型对照组相比,高、中剂量组大鼠血清NO含量降低;低、中剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性升高,高剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性明显升高。结论扶正助脉方很可能是通过降低缓慢性心律失常大鼠血清NO含量,增高其Na+-K+-ATP酶活性达到抗心律失常作用。     

养心通脉方对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血的保护作用的实验研究

目的:探讨养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠急性心肌缺血保护的生化研究。方法:通过给大鼠腹腔注射异丙肾上腺素(4.8mmol/kg)制备心肌损伤模型并将大鼠随机分为正常对照组,异丙肾上腺素造模组,异丙肾上腺素及养心通脉方小剂量组,异丙肾上腺素及养心通脉方大剂量组。观察大鼠血浆ET(内皮素),SOD及血栓素B2的变化情况及养心通脉方对上述指标的影响。结果:异丙肾上腺素诱导的急性心肌缺血大鼠血浆ET及TXB2明显高于正常组(P<0.05或P<0.01),血浆SOD明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。而治疗组ET和TXB2均低于对照组(P<0.05或P<0.01),且治疗组SOD明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:养心通脉方具有降低异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血的ET和TXB2,升高其SOD,防治脂质过氧化物形成,有保护心肌的作用。     

风湿一号方抑制大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的:探讨补肾活血法治疗佐剂性关节炎的药理作用及其作用机制。方法:制备佐剂性关节炎大鼠模型,观察补肾活血法对病鼠后足跖厚度以及病鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-a),血皮质醇,前列腺素的影响。结果:补肾活血法能抑制佐剂性关节炎大鼠继发性、足跖肿胀,有极显著性差异(P<0.01);降低病鼠增高的TNF-a,前列腺素,提高其低下的血皮质醇,均有极显著性差异(P<0.01)。结论:补肾活血法具有对抗大鼠佐剂性、继发性关节炎的作用,其机制与抑制自身免疫的病理性反应提高机体应激性有关。