补肾活血通窍中药复方对庆大霉素耳中毒小鼠耳蜗NT-3表达的影响

目的观察补肾活血通窍中药复方对庆大霉素（gentamicin,GM）耳中毒小鼠听性脑干反应（ABR）反应阈及耳蜗神经营养因子-3（neurotrophic factor3,NT-3）表达的影响。方法健康昆明小鼠40只,随机分为5组,每组8只（16耳）。空白对照组正常喂养,GM＋中药组（补肾活血通窍中药复方分为高、中、低三个浓度组）及GM4-生理盐水组每天腹腔注射GM100mg／kg,连续15天,腹腔注射GM第一天起GM＋中药各组分别灌服高、中、低浓度中药复方汤剂,GM＋生理盐水组灌服等量生理盐水,连续20天,灌胃结束后测试ABR反应阈,采用蛋白免疫印迹（Western Blot）方法检测各组耳蜗组织中NT-3的表达。结果与空白对照组比较,GM＋生理盐水组及GM＋低浓度中药组ABR波Ⅲ反应阈显著升高（P〈0．01）,耳蜗NT-3蛋白含量下降（P〈0．01）;GM＋高、中浓度中药组ABR波Ⅲ反应阈升高,耳蜗NT-3蛋白含量下降,但差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论高、中浓度补肾活血通窍中药复方可显著减轻GM所致的小鼠耳蜗NT-3含量降低和ABR反应阈升高的程度（P〈0．01）,从而有效减轻GM对小鼠的耳毒性。     

一氧化氮对庆大霉素耳毒性的影响

目的研究耳蜗内不同水平的一氧化氮(NO)含量对庆大霉素(GM)耳毒性的影响.方法将实验动物豚鼠随机分为GM组;庆大霉素加左旋精氨酸(GM加L-Arg)组;庆大霉素加NG-单甲基-L-精氨酸(GM加L-NMMA)组和正常对照组.实验过程中观察动物体重变化,检测ABR反应阈;取标本检测血清和耳蜗组织NO含量,耳蜗铺片观察毛细胞损失程度.结果对照组动物体重增加明显,各实验组体重增加缓慢,其中GM加L-Arg组体重略有下降.实验第4周,GM加L-Arg组ABR反应阈升高明显,与GM组比较有统计学意义(P<0.05),GM加L-NMMA组ABR反应阈升高较少,与GM组比较有统计学意义(P<0.05).GM加L-Arg组血清和耳蜗NO含量明显升高,GM加L-NMM A组NO含量升高不明显,与GM组比较差异具有显著性(P<0.05).耳蜗铺片各组毛细胞损失程度与ABR变化相对应.结论增加耳蜗NO含量可增加GM耳毒性,减少耳蜗NO含量可减轻GM耳毒性.     

FK506拮抗庆大霉素耳毒性的实验观察

目的 初步探讨FK506拮抗庆大霉素耳毒性的效果。方法 通过分别检测庆大霉素损伤组与庆大霉素加不同剂量FK506（1mg、2mg）保护组实验动物听性脑干反应(ABR)阈值的变化,并结合耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶（SDH)染色方法观察动物耳蜗形态学变化,观察FK506拮抗庆大霉素耳毒性的作用。结果 实验动物的听觉生理检查显示FK506能够拮抗庆大霉素耳毒性,FK506保护组动物听阈明显低于庆大霉素损伤组(P<0.01),随剂量增加,保护作用越明显;同时形态结果显示FK506保护组外毛细胞缺失明显少于庆大霉素损伤组(P<0.01)。结论 FK506对庆大霉素引起的耳毒性有拮抗作用。     

丹参注射液对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮生成的影响

目的　研究丹参注射液对庆大霉素 (GM)耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮 (NO)生成的影响 ,探讨丹参注射液对GM耳蜗毒性的防护作用及其作用机制。方法　豚鼠随机分成正常对照组、GM组、GM +丹参组和丹参组 ,应用改良镀铜镉还原法测定豚鼠耳蜗组织中NO含量 ,同时结合听性脑干反应 (ABR)测试 ,观察用药前后听阈变化。结果　GM +丹参组豚鼠耳蜗NO含量和ABR阈值均明显低于GM组 (P <0 .0 1) ;且各组NO含量变化与ABR阈值高度相关 (r正常对照 =0 .96 5 ;rGM=0 .990 ;rGM +丹参 =0 .880 ;r丹参 =0 .980 ;P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　丹参注射液可通过抑制GM引起的NO过量生成 ,以减轻GM的耳毒性损伤 ,从而改善听功能。这可能也是丹参注射液拮抗GM耳蜗毒性的作用机制之一。     

甲磺酸去铁胺对抗庆大霉素耳毒性的实验研究

目的观察铁螯合剂———甲磺酸去铁胺（ｄｅｆｅｒｏｘａｍｉｎｅｍｅｓｙｌａｔｅ,ＤＦＯ）对抗庆大霉素（ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ,ＧＭ）耳毒性的作用。方法将豚鼠随机分为ＧＭ组、ＤＦＯ组、ＧＭ＋ＤＦＯ组及对照组,采用听性脑干反应（ＡＢＲ）、耳蜗铺片及透射电镜技术,观察用药前后听阈及形态学改变,并检测ＤＦＯ对庆大霉素血药浓度的影响。结果ＧＭ组８ｋＨｚＡＢＲ阈值逐渐升高４０～６０ｄＢ;ＧＭ＋ＤＦＯ组阈移为１５～２５ｄＢ,差异显著（Ｐ＜０．０５）。高频听阈损伤明显比低频更重（Ｐ＜０．０１）。形态学变化与听力变化平行。ＤＦＯ对庆大霉素血药浓度没有影响。结论证实ＤＦＯ能有效减轻ＧＭ的耳毒性作用,ＤＦＯ可能成为预防庆大霉素耳毒性的有效药物。     

甲磺酸去铁胺抗庆大霉素耳毒性作用及机理研究

目的探讨铁螯合剂甲磺酸去铁胺（ｄｅｆｅｒｏｘａｍｉｎｅｍｅｓｙｌａｔｅ,ＤＦＯ）对抗庆大霉素（ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ,ＧＭ）耳毒性作用及其机理。方法豚鼠随机分为ＧＭ组（１７只）、ＤＦＯ组（８只）、ＧＭ＋ＤＦＯ组（１７只）及对照组（８只）,采用听性脑干反应（ａｃｏｕｓｔｉｃｂｒａｉｎｓｔｅｍｒｅｓｐｏｎｓｅ,ＡＢＲ）、耳蜗铺片及透射电镜技术,观察用药前后听反应阈及形态学变化,检测血清尿素氮、肌苷以及ＧＭ浓度,同时测定耳蜗和肾皮质组织中丙二醛、超氧化物歧化酶和铁离子含量。结果ＧＭ组８ｋＨｚＡＢＲ阈移为４０～６０ｄＢ;ＧＭ＋ＤＦＯ组阈移为１５～２５ｄＢ,差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。形态学改变与听力变化一致。ＤＦＯ对ＧＭ血药浓度没有影响。ＧＭ组肾功明显损伤,但肾皮质丙二醛、超氧化物歧化酶和铁离子变化差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,ＧＭ＋ＤＦＯ组耳蜗组织丙二醛和铁离子含量较ＧＭ组明显减少（Ｐ＜０．０５）,超氧化物歧化酶含量明显高于ＧＭ组（Ｐ＜０．０５）。结论自由基和铁离子在ＧＭ的耳毒性中起重要作用,ＤＦＯ能有效减轻ＧＭ的耳毒性作用,可能成为有希望的预防药物。     

卡那霉素对三种小鼠耳毒性比较及对血管纹Na-K-2Cl联合转运子1表达的影响

目的建立小鼠氨基糖甙类抗生素（aminoglycoside antibiotics，AmAn）耳毒性模型，探讨在不同种小鼠中的AmAn耳毒易感性及其对耳蜗血管纹Na—K-2Cl联合转运子-1（Na-K-2Cl cotransporter-1，NKCC1）表达的影响。方法将72只C57BE／6J、CBA／CaJ、NKCC1＋／-小鼠各自随机分为A、B、C、D4组。A组：卡那霉素组；B组：卡那霉素＋2，3-二羟基苯甲酸组；C组：2，3-二羟基苯甲酸组；D组：生理盐水组。各组连续用药14d。各组动物在用药前、用药后第14天及用药后第35天行脑干诱发电位（auditory brainstem response，ABR）检测听功能；耳蜗琥珀酸脱氢酶组织化学染色观察耳蜗形态学变化；免疫组化法观察血管纹NKCC1表达的变化。结果①A组小鼠ABR闽值明显提高（P〈0．01）并伴随外毛细胞的减少；②B组小鼠ABR阈值变化明显小于A组（P〈0．01），外毛细胞的损害也明显减轻；③A组小鼠耳蜗血管纹NKCCl表达减弱，与D组比较有明显差异（P〈0．01），而B组小鼠血管纹NKCC1表达较A组增强（P〈0．01）；④3种小鼠中CBA／CaJ小鼠对AmAn最敏感，C57BE／6J和NKCC1＋／-小鼠对AmAn的易感性无明显差异。结论应用卡那霉素可建立小鼠AmAn耳毒性模型；卡那霉素可抑制血管纹NKCC1的表达；2，3-二羟基苯甲酸拮抗AmAn耳毒性的途径之-可能是通过减轻AmAn对血管纹NKCC1的抑制作用；具有年龄相关性听力损失特性的小鼠对AmAn耳毒作用并不易感。     

水杨酸钠中耳灌注对庆大霉素耳毒性的防护作用

目的 观察水杨酸钠经中耳局部灌注给药对庆大霉素耳毒性的防护作用。方法 24只健康杂色豚鼠均接受圆窗置管术，然后随机分成3组：Ⅰ组为生理盐水对照组；Ⅱ组为庆大霉素组，腹腔注射庆大霉素，经听泡灌注生理盐水；Ⅲ组为庆大霉素加水杨酸钠组，腹腔注射庆大霉素，经听泡灌注水杨酸钠。观察各组给药前后听性脑干反应阈的变化和给药后4周毛细胞损失情况。结果 听泡置管术后ABR反应阈无明显改变；给药后2周和4周，庆大霉素组ABR反应阈较庆大霉素加水杨酸组显著增高（P〈0．01），对照组ABR反应阈无显著变化。耳蜗铺片、毛细胞计数显示庆大霉素组外毛细胞严重缺失，以底回最明显，庆大霉素加水杨酸钠组外毛细胞损失较庆大霉素组轻（P〈0．05）。对照组无明显外毛细胞缺失。结论 水杨酸钠经中耳局部给药途径可减轻庆大霉素所致听功能损害和毛细胞缺失，可在一定程度上有效预防庆大霉素的耳毒性。     

甲磺酸去铁胺抗丁胺卡那霉素耳毒性作用及机理研究

目的验证铁离子螯合剂甲磺酸去铁胺（deferoxamine mesylate，DFO）抗丁胺卡那霉素耳毒性作用及其机理研究。方法豚鼠随机分为丁胺卡那霉素组（卡那组）、DFO＋丁胺卡那霉素组（卡那＋DFO组）、对照组，每组8只动物，采用畸变产物耳声发射（DPOAE）、耳蜗铺片及透射电镜、扫描电镜技术，观察用药前后功能和形态学的改变。检测血清中总超氧化物歧化酶（T—SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）以及丙二醛（MDA）的活力。结果卡那组与卡那＋DFO组的DPOAE的幅值有显著性差异（P〈0．01），形态学改变与听力改变相平行。DFO组血清中的T—SOD和GSH～PX的活力明显高于卡那组（P〈0．05），卡那＋DFO组血清中MDA的活力明显低于卡那组（P〈0．05）。结论DFO能有效的保护耳蜗免受丁胺卡那霉素的耳毒性侵害，保护作用与自由基相关。     

川芎嗪拮抗链霉素耳毒性作用及其离子通道机制

目的 研究川芎嗪（tetraethylplyrazine，TMP）拮抗链霉素耳毒性作用及其对耳蜗外毛细胞外向K^＋通道的影响，寻求两者的相关性，旨在探讨川芎嗪拮抗耳中毒作用的离子通道机制。方法 选取豚鼠60只，随机分为6组，即对照组、链霉素组、川芎嗪低浓度组、川芎嗪高浓度组、川芎嗪低浓度＋链霉素组和川芎嗪高浓度＋链霉素组，分别注射生理盐水（2．5ml/kg）、链霉素（450mg／kg）、川芎嗪（12mg／kg）、川芎嗪（60ms／ks）、川芎嗪（12mg／kg）＋链霉素（450mg／kg）、川芎嗪（60mg／kg）＋链霉素（450mg／kg），用药10天后检测各组豚鼠ABR反应阈，并采用全细胞膜片钳技术观察川芎嗪对耳蜗外毛细胞Ca^2＋敏感K^＋电流和延迟外向K^＋电流的影响。结果 结果表明川芎嗪明显降低链霉素所致的豚鼠ABR反应阈升高，提示川芎嗪具有明显的拮抗链霉素耳毒性作用；川芎嗪能明显增大豚鼠耳蜗外毛细胞Ca^2＋敏感K^＋电流和延迟外向K^＋电流，并呈浓度依赖关系。结论 川芎嗪可能通过增大K^＋通道电流而发挥其降低链霉素耳毒性作用，推测这是其抗耳毒性作用机制之一。     

庆大霉素对豚鼠耳肾毒性的相关性实验研究

目的 探讨豚鼠庆大霉素耳性与肾毒性的关系。方法 通过ＡＢＲ测试,耳蜗铺片毛细胞片数,血液庆大霉素药代动力学分析,血ＢＵＮ、Ｃｒ值测定,肾标光镜下观察等方法,观察肌注庆大霉互后豚鼠的耳蜗功能及肾功能变化。结果 肌注庆大霉素二周组ＡＢＲ的ＩＶ波反应阈阈移明显高于肌注庆大霉素一周组及其生理盐水对照组。光镜下耳蜗铺片毛细胞计数二周组毛细胞缺失数明显多于一周组对于对照组。肌注纱二周组的血清庆大霉素清除率明显     

聚DL—天冬氨酸对庆大霉素耳毒性拮抗作用的实验研究

目的 研究聚ＤＬ－天冬氨酸（ＰＡＡ）对Ｆ－３４４大鼠庆大霉素（ＧＭ）耳毒性的拮抗作用。方法 选用健康Ｆ－３４４大鼠５０只,随机分４组：Ｉ为ＧＭ、Ⅱ为ＰＡＡ＋ＧＭ、Ⅲ为ＰＡＡ、Ⅳ为生理盐水对照组;通过观测４组大鼠不同时期、不同频率听性脑干反应（ＡＢＲ）阈值的改变;计数耳蜗毛细胞死亡率,以观察ＰＡＡ对Ｆ－３４４大鼠ＧＭ耳蜗毒性的拮抗作用;用双向扩散血清培养基检测法观察ＰＡＡ对ＧＭ抗菌活性的影响。结果     

Calpain and caspase inhibitors protect vestibular sensory cells from gentamicin ototoxicity

OBJECTIVE: Apoptosis may play an important role in the mechanism of aminoglycoside ototoxicity. Caspases and calpains are regarded to be important factors in the regulation of cell death in the inner ear. We hypothesized that caspase or calpain inhibitors would protect hair cells from aminoglycoside ototoxicity. MATERIAL AND METHODS: In order to test this hypothesis we carried out a pilot study to determine if gentamicin (GM) would induce caspase and calpain immunolabeling in guinea pig hair cells Having confirmed this we carried out the main experiment using guinea pig vestibular organ culture to determine if caspase and calpain would protect the hair cells from GM ototoxicity. RESULTS: Immunoreactivity for caspase-3 and m-calpain was detected in the vestibular sensory cells and ganglia after GM treatment. Both caspase and calpain inhibitors protected hair cells against gentamicin ototoxicity. CONCLUSION: It is suggested that inhibition of apoptosis is essential in order to block aminoglycoside ototoxicity.     

甲磺酸去铁胺抗庆大霉素耳毒性作用及机理研究

目的 探讨铁螯合剂甲磺酸去铁胺对抗庆大霉素耳毒性作用及其机理。方法 豚发为ＧＭ组（１７只）、ＤＦＯ组（８只）、ＧＭ＋ＤＦＯ组（１７只）及对照组（８只）,采用听性脑干反应,耳蜗铺片及透射电镜技术,观察用药前后听反应阈及形态学变化,检测血清尿素氮、革以及ＧＭ浓度,同时测定耳蜗和肾皮质组织中丙二醛、超氧化物歧化酶和铁离子含量。结果 ＧＭ组８ｋＨｚＡＢＲ阈移为４－６０ｄＢ;ＧＭ＋ＤＦＯ组阈移为１５－２５ｄ     

丹参对庆大霉素耳毒性的减毒作用

目的　为探讨丹参对庆大霉素耳毒性的减毒作用。方法　将 2 4只沙鼠分为 4组 ,每组 6只 ,①生理盐水对照组。②丹参组 (SA)。③庆大霉素加丹参组 (GM SA)。④庆大霉素组 (GM)。所有药物均经肌肉注射 ,GM组和GM SA组每天注射庆大霉素 15 0mg/kg ,共 10d ;GM SA组和SA组同时注射丹参 2 g/kg ,共 10d ;生理盐水组每天注射生理盐水 2ml/kg ,共 10d。在注射前和注射后 4周和 8周进行CAP检测 ,第 8周听力测定后处死动物行扫描电镜检查。结果　 4周和 8周GM组高频CAP阈明显上升 ,而GM SA组听阈明显低 ,统计学处理有显著差异 (P <0 .0 1,t检验 ) ;GM组毛细胞损伤率底圈和第二圈分别为 35 %和 30 % ,GM SA组分别为 9%和 7% ,差异非常显著 (P <0 .0 1,χ2 检验 )。结论　丹参能明显降低庆大霉素对沙鼠的耳毒性作用 ,且不降低血液中庆大霉素的浓度。电生理检测结果与形态学变化一致。     

Kinetics of Gentamicin in Cochlear Hair Cells After Chronic Treatment

Presence of gentamicin (GM) in cochlear hair cells was detected by immunohistochemistry in guinea pigs (GPs) cochlea 1, 9 and 41 days after a 6-day treatment with GM at 60 mg/kg/day (s.c.). The number of GPs in each group was respectively 7, 12 and 6. Twelve other non-treated GPs served as controls. Cochlear function was measured, just before sacrifice, by VIIIth nerve compound action potential (CAP) audiograms. Functional and immunohistological evaluations were performed by two independent naive observers respectively. Functional changes were minimal: only one out of the 25 treated GPs, from the 41-day group, showed significant threshold elevations on high frequencies. Meanwhile GM labelling was observed in most outer hair cells (OHCs) from the three rows of all the treated GPs, with radial and longitudinal gradients, and found similar in the 3 groups. These results 1) confirm that GM is significantly present in OHCs before the development of ototoxicity and 2) indicate that GM accumulates and is maintained inside the OHCs for very long periods of time, i.e. that its clearance from the hair cells, if any, would be very slow.