整合素α4和α5在子宫内膜异位症中的表达

目的检测整合素在子宫内膜异位症(EM)中的表达,探讨整合素在EM发生发展过程中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对23例EM患者和27例非EM患者行整合素α4和α5的检测。结果EM患者内膜组织的整合素α4和α5mRNA表达量均明显高于对照组同期内膜组织的表达量。而EM在位内膜组织整合素的表达较对照组明显降低,差异有显著性意义。结论EM异位内膜组织中整合素α4、α5高表达可能与EM发生、发展和不孕有关。     

整合素β3在小鼠植入期子宫内膜中的表达

整合素是一类糖蛋白．广泛存在于细胞表面,可介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞之间的粘连．并参与细胞内外信息传递,胚胎植入是哺乳动物生殖过程的重要环节．在此期间,子宫内膜与胚胎彼此相容．发生一系列生化及形态改变。有关植入的分子机制目前仍不清楚。近年研究表明,雌孕激素、     

控制性超排卵对胚胎植入前小鼠子宫内膜蛋白质表达的影响

目的研究控制性超排卵（COH）对胚胎植入前小鼠子宫内膜蛋白质表达的影响,探讨体外受精-胚胎移植时子宫内膜容受性的生物学标志物。方法将12只ICR雌性小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只。实验组采取促排卵措施,对照组未作任何处理。通过双向电泳和质谱分析技术研究COH对小鼠子宫内膜蛋白表达的影响。结果实验组蛋白电泳图谱与对照组有明显差异,2倍以上差异表达蛋白总数为89个。截取其中16个蛋白质点进行了质谱分析,检测出9种有意义的差异表达蛋白。结论COH可导致子宫内膜多种蛋白质表达改变,通过筛选子宫内膜容受性的生物学标志物,可以为提高COH周期的胚胎种植率和妊娠率提供理论依据。     

激活素A在围植入期小鼠子宫内膜的表达

目的 探讨激活素A(activin-A)在围植入期小鼠子宫内膜中表达的分布及生物学意义.方法 应用免疫组化SP法和图像分析方法检测分析孕2～6 d小鼠子宫内膜activin-A的表达情况,并以未孕动情期及假孕2～6 d小鼠子宫内膜作对照.结果 activin-A主要表达于小鼠子宫内膜的腔上皮、腺上皮和基质细胞.acti...     

整合素α5及整合素β3在子宫内膜异位症中表达的研究

目的探讨整合素α5、β3在子宫内膜异位症(EM)患者在位和异位内膜中的表达. 方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对18例EM患者在位内膜、异位内膜(研究组)和18例非EM患者子宫内膜(对照组)行整合素α5、β3 mRNA检测.同期放射免疫法测定EM患者体内雌二醇(E2)、孕酮(P)、糖类抗原125(CA125)水平,对EM患者术中行美国生殖学会评分系统(AFS-r)评分. 结果整合素α5 mRNA在EM患者在位内膜、异位内膜及对照组子宫内膜中表达水平分别为0.773±0.113、1.077±0.032、0.924±0.120,各组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05);整合素β3 mRNA在EM患者在位内膜、异位内膜及对照组子宫内膜中表达水平分别为0.653±0.080、0.963±0.132和0.763±0.090,各组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05).EM组血清E2水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.793、0.917;而P水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均无相关(P>0.05).CA125水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.763、0.754,AFS-r评分与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.801、0.773. 结论EM异位内膜组织中整合素α5、β3高表达可能与EM黏附发生有关,整合素α5、β3表达受雌激素调控.     

胰岛素样生长因子结合蛋白-4在围植入期小鼠子宫内膜的表达及意义

目的 检测胰岛素样生长因子结合蛋白-4(IGFBP-4)在围植入期小鼠子宫内膜的表达分布及其生物学作用.方法取未孕动情期、真孕及假孕3～6 d小鼠子宫做切片,采用免疫组化SP法检测IGFBP-4在小鼠子宫内膜的表达情况.结果 IGFBP-4在小鼠子宫内膜主要分布于腺上皮细胞、腔上皮细胞、基质细胞及蜕膜细胞.IGFBP-4在真孕组小鼠子宫内膜于孕3 d出现阳性表达;孕4～5 d中等强度表达;孕6 d表达最强,主要分布于整个蜕膜区细胞.未孕动情期小鼠子宫内膜IGFBP-4呈弱表达.假孕组小鼠子宫内膜IGFBP-4只在孕5～6 d有微弱表达.真孕组小鼠子宫内膜IGFBP-4表达明显强于同期假孕组.结论 IGFBP-4在围植入期小鼠子宫内膜持续表达,提示IGFBP-4可能在小鼠胚泡植入过程发挥重要生物学作用.     

血管内皮生长因子在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)在围植入期小鼠子宫内膜的表达分布状况和规律.方法 应用免疫组化SP法检测妊娠3～6 d昆明小鼠围植入期子宫内膜VEGF的表达情况,并以动情期未孕小鼠子宫做对照.结果 在小鼠子宫内膜中可检测到VEGF的表达,其表达具有时间特异性和细胞特异性.孕3 d,VEGF在子宫内膜的腔上皮和基质细胞中呈弱表达;孕4～5 d,VEGF在基质细胞和腔上皮上表达最强;孕6 d,VEGF表达较强,但主要表达于蜕膜细胞.结论 围植入期小鼠子宫内膜持续表达VEGF,且在植入前后表达最强,提示VEGF可能在小鼠胚胎的植入过程中发挥重要作用.     

益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响

目的:观察益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响,探讨益气血补肝肾方提高妊娠率的机制。方法:600只小鼠随机分为超促排卵组、促排卵组、自然排卵组各200只,每组小鼠中又分为中药干预组与对照组各100只,分别用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法检测整合素αvβ3的表达。结果:超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预组妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。但自然排卵组中药干预后妊娠率与对照组无统计学差异(P>0.05)。免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法均显示,超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预后整合素αvβ3的表达显著升高(P<0.05),而对自然排卵组则无明显影响(P>0.05)。结论:益气血补肝肾可能通过上调超促排卵及促排卵小鼠子宫内膜整合素αvβ3表达,改善子宫内膜容受性,从而提高妊娠率。     

巨噬细胞移动抑制因子在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在围植入期小鼠子宫内膜中的表达分布状况及其意义。方法应用免疫组化SP法检测妊娠1～8d小鼠子宫内膜MIF的表达情况,并以动情期非妊娠小鼠子宫做对照。结果在小鼠子宫内膜的所有组织均可检测到MIF的表达,主要表达于腺上皮、腔上皮及基质中的细胞团。MIF在妊娠1～3d表达较强,妊娠4～5d表达较弱,主要表达于子宫内膜的腔上皮和腺上皮;妊娠6～8d,MIF表达再次增强,但主要表达于基蜕膜和次级蜕膜区。结论妊娠1～8d小鼠子宫持续表达MIF,提示MIF可能参与小鼠胚泡植入及胚泡植入后的发育过程。     

整合素avβ3单克隆抗体对小鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用

OBJECTIVE: To explore the potential use of integrin av beta3 (Lm609) monoclonal antibody against ectopic lesion and microvessel angiogenesis of human endometriosis xenografts in SCID mice. METHODS: The endometrial tissues from endometriosis patients were inoculated subcutaneously into SCID mouse, which were treated with Lm609, an inhibitor of angiogenesis, twice a week, for 3 weeks. The mice were sacrificed and immunohistochemical staining was employed to determine the microvessel density (MVD) and expression of integrin av beta3 in the lesion tissues. RESULTS: Lm609 inhibited the growth of the ectopic lesion. The lesion weighted 0.82+/-0.09 g in the treated group versus 0.51+/-0.93 g in the control group (P<0.05). The MVDs of the treated and control groups were 31.2+/-4.4 and 14.4+/-1.8 respectively (P<0.05). CONCLUSION: Lm609 can inhibit the growth of ectopic lesion by reducing angiogenesis in SCID mouse.     

不同方案超排卵下小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达

目的 以超排卵下小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达为指标,比较不同超排卵方案对小鼠子宫内膜容受性的影响。方法 模拟人类超排卵长周期,对小鼠进行超促排卵。根据超排卵方案的不同,按随机表顺序将40只小鼠分为4组,分别为促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)组、促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)组、孕马血清促性腺激素(PMSG)组及对照组,每组10只小鼠。用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3蛋白和mRNA的表达。结果 免疫组织化学结果显示,与对照组相比GnRHa组小鼠整合素β3蛋白的表达明显下降(P=0．023),GnRHant组和PMSG组小鼠整合素β3蛋白的表达明显降低(P=0．001);与PMSG组小鼠相比,GnRHa组小鼠整合素β3的表达明显增高(P=0．001),而GnRHant组整合素β3的表达差异无显著意义(P=0．768);RT-PCR结果与免疫组化结果相符。结论 与小鼠自然周期相比,3种超排卵方案均使小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达明显下降,可能降低了子宫内膜容受性;与单一PMSG超排卵方案相比,GnRHa辅助超排卵方案能明显改善小鼠子宫内膜的容受性;而GnRHant辅助超排卵方案则对小鼠子宫内膜容受性的改善作用不明显。     

益气血补肝肾方对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜整合素β3和胞饮突表达的影响

【目的】观察中药益气血补肝肾方对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜整合素β3表达的影响,探讨其改善胚胎着床的分子基础。【方法】将90只雌鼠随机分为正常组、模型组和治疗组3组,每组30只,其中,治疗组小鼠予以中药益气血补肝肾方治疗(包括经后增殖方8 mg/kg和促黄体方8 mg/kg),在妊娠第4天(Pd4)上午8∶00采用米非司酮诱导模型组和治疗组小鼠胚胎着床障碍,12 h后处死小鼠(每组20只),剖腹取小鼠子宫,小心刮取子宫内膜,采用Real-time PCR和Western Blot的方法分别在m RNA和蛋白水平上检测整合素β3在各组小鼠子宫内膜中的表达情况。其余小鼠(每组10只)于Pd4剖腹取小鼠子宫,固定于体积分数2.5%戊二醛溶液中,行扫描电镜观察。【结果】Real-time RT-PCR和Western Blot结果显示:模型组整合素β3 m RNA与蛋白表达显著低于正常组(P0.05);治疗组可显著升高整合素β3 m RNA与蛋白表达水平,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。胞饮突在模型组中的表达少于治疗组和正常组,而胞饮突在治疗组和正常组的表达相似。【结论】中药益气血补肝肾方可上调子宫内膜中整合素β3的表达,对胞饮突在Pd4小鼠子宫内膜中的表达有正调节作用。     

小鼠围植入期子宫内膜组织中白血病抑制因子蛋白及mRNA的表达

目的：观察小鼠围植入期子宫内膜组织中白血病抑制因子（LIF）表达的变化规律并探讨其与胚胎种植的关系。方法：取真孕、假孕第3、4、5、6天小鼠（n=10）子宫内膜组织,采用免疫组织化学、RT-PCR法分别检测LIF蛋白和mRNA的表达情况,并设未孕小鼠作对照组。结果：小鼠子宫内膜组织中LIF蛋白的表达主要定位在腔上皮和腺上皮。真孕组第3、4、5、6天子宫内膜组织中LIF蛋白和mRNA的表达水平均高于假孕组和对照组（P均〈0.05）,且表达水平在孕4d达高峰（P〈0.05）。结论：LIF表达的峰值与胚胎种植时间一致,可能是子宫内膜容受性的标志;LIF的表达不仅受母体激素的影响,也和胚胎的刺激有关。     

整合素avβ3单克隆抗体对小鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用

目的 研究整合素avβ3单克隆抗体对SCID小鼠子宫内膜异位病灶生长和微血管形成的影响。方法 建立人子宫内膜异位症小鼠皮下移植病灶模型。治疗组尾静脉注射整合素avβ3单克隆抗体Lm609(250μg/只),对照组给予相应体积的PBS,1周2次。4周后处死动物,测量病灶,采用免疫组化法检测病灶微血管密度(MVD)及整合素avβ3的表达。结果 治疗组与对照组皮下移植病灶质量分别为(0.82±0.09)g和(0.51±0.93)g(P<0.05),病灶组织中MVD则分别为31.2±4.4和14.4±1.8(P<0.05),治疗组病灶受到显著抑制。结论 整合素avβ3单克隆抗体通过抑制微血管形成而抑制子宫内膜异位病灶的生长。     

降钙素在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的:探讨降钙素在胚泡植入过程中的生物学作用。方法:取未孕动情期、真孕及假孕3～8d的小鼠子宫作切片,用免疫组织化学方法和图像分析方法对降钙素在围植入期子宫内膜中的表达进行定性和定量分析。结果:降钙素仅分布于子宫内膜腺上皮。在真孕及假孕组小鼠,受精后第3～4d(植入前),子宫内膜腺上皮中降钙素的含量均明显高于未孕组(P<0.01);受精后第6～7d(植入后),真孕小鼠子宫内膜中降钙素的含量进一步增多,明显高于假孕及植入前各时间组(P<0.01)。结论:①降钙素参与胚泡植入过程,还可能间接参与植入后胚泡的滋养层扩展、分化及子宫内膜蜕膜化反应;②降钙素在子宫内膜中的表达不仅受母体因素调控,还与胚泡的刺激有关。     

异位子宫内膜细胞中整合素α5的表达及其性激素调控

目的:探讨异位子宫内膜细胞中整合素α5的表达及性激素对其的影响。方法:对18例卵巢子宫内膜异位症(EM)患者的异位子宫内膜组织行体外细胞培养并传代。传代培养中细胞分为非药物干预组(对照组)、雌二醇(E2)组、安宫黄体酮(P)组、米非司酮(RU486)组、三苯氧胺(TAM)组5组,细胞收获后用逆转录-聚合酶链反应技术检测各细胞组中整合素α5mRNA的表达。结果:整合素α5在E2组及P组的表达水平分别为1.415±0.286及1.304±0.170,与对照组的1.082±0.069相比,差异具有统计学意义(P<0.05),而TAM组及RU486组中整合素α5表达水平(分别为0.882±0.013及1.304±0.170)明显低于对照组(P<0.05)。结论:整合素α5表达受雌、孕激素调控,E2、P可能通过上调整合素α5的表达而促进EM粘附的发生,TAM、RU486可能通过拮抗E2、P或抑制异位内膜细胞分泌整合素5α分子而延缓EM的发展,从而起到治疗作用。     

整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的 检测整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确整合素β3表达规律.方法 将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼,用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织(孕D0,对照组),直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天.分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的整合素β3表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜整合素β3 mRNA表达特征.结果 小鼠整个围植入期子宫内膜中均有整合素β3表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5.孕D0(非孕)子宫内膜的整合素β3表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平.结论 整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示整合素β3在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供实验依据.     

控制性超排卵对小鼠着床期子宫内膜整合素αvβ1表达的影响

目的观察GnRHa长周期辅助超排卵对小鼠子宫内膜组织整合素αv、β1表达的影响,探讨提高IVF—ET妊娠率的方法。方法将36只小鼠随机分成3组。对照组：生理盐水（NS）组;单纯促排卵组：HMG加HCG：GnRHa加促排卵组：GnRHa加HMG加HCG。促排卵和排卵后24、48h,采用免疫组织化学技术检测子宫内膜整合素αv、β1的表达。结果子宫内膜整合素αv、β1表达对照组呈现强阳性。单纯促排卵组稍弱于对照组．2组比较无显著性差异（P〉0．05）;GnRHa加促排卵组弱于前2组,与前两组分别比较有显著性差异（P〈0．05）。结论控制性超排卵药物可以影响着床期子宫内膜整合素αv、β1的表达,从而影响子宫内膜容受性．导致临床妊娠率偏低。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达

目的检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法取小鼠早期胚胎、动情期未孕、真孕及假孕1～8d小鼠子宫,利用免疫组织化学染色及图像分析法,检测p38MAPK在不同发育阶段早胚及围植入期子宫内膜中的表达和变化规律。结果① p38MAPK在小鼠胚植入前各细胞期均呈阳性表达,随着妊娠进展,其表达逐渐加强;② 真孕组孕3d,小鼠子宫内膜腔上皮p38MAPK呈阳性表达,孕4d呈强阳性表达,此后腔上皮表达逐渐减弱;腺上皮p38MAPK的表达一直维持在阳性水平,而蜕膜细胞的表达从孕5d开始逐渐增强。假孕组只有孕4?d呈弱阳性表达。结论① p38MAPK可能参与了小鼠植入前胚的发育分化。② p38MAPK参与胚泡植入过程,并可能参与子宫内膜的蜕膜化反应。③ p38MAPK 在子宫内膜中的表达不仅受母体因素调控,还与胚泡的刺激有关。     

整合素α2和α3在小鼠肾脏发育过程中的表达

目的 了解整合素α2和α3在小鼠肾脏发生发育过程中的表达规律及其与肾脏发生、发育及成熟的关系.方法 应用免疫组化链霉菌素亲和生物素-过氧化物酶连接法（SP）测定不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织中整合素α2和α3的表达.结果 免疫组化结果显示整合素α2在生肾区及间充质表达;在未成熟肾小球有一过性的表达,在成熟肾小球没有表达;在发育各个时期的肾小管都有表达.整合素α3在肾小球、肾小管有表达,而在肾间质无表达.结论 整合素α2主要在发育各个时期的肾小管表达,提示整合素α2对胚胎肾发育的诱导主要在肾小管.整合素α3在胚胎时期和成熟肾组织的主要作用是与肾小球的发育和成熟有关,而与小管发育成熟的关系相对来说较弱.