川贝母新资源太白贝母中生物碱类成分含量测定

 目的 利用高效液相色谱法测定太白贝母中的生物碱成分。方法 采用Agilent Extend C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm,流动相为甲醇-0.02%三乙胺水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,漂移管温度90 ℃;载气体积流量2.3 L·min-1,增益值2,进样量10 μL;柱温25 ℃。结果 贝母辛在28.75～690.0 μg·mL-1,贝母素乙在27.37～560.6 μg·mL-1,贝母素甲在25.75～527.0 μg·mL-1与峰面积的对数值呈线性关系,平均回收率分别为99.4％（n=6,RSD为1.10％;99.7％（n=6,RSD为3.61％;100.3％（n=6,RSD为2.82%。结论 太白贝母中的生物碱成分与川贝母非常相似,为其作为川贝母来源的合理性奠定了基础。     

中药川贝母定量分析方法研究

目的:研究常用中药川贝母的定量分析方法。方法:应用高效液相色谱法。以4种川贝母共有的有效成分贝母辛为指标;采用AgilentHypersilBDS C₁₈(4. 0mm×2 5 0mm ,5 μm)色谱柱,以乙腈水 二乙胺(37∶6 3∶0 .0 3)为流动相,流速1 0mL·min^-1;Alltech 2 0 0 0蒸发光散射检测器检测,外标两点法定量。结果:贝母辛在0 . 0 3188～1. 0 2 0mg·mL^-1呈线性,回收率为10 2. 1% (n=5 ) ,RSD 3. 86 %。根据33批不同产地或来源的川贝母药材中贝母辛的含量结果,确定贝母辛的含量限度为0 . 0 0 70 %。结论:本法为良好的贝母辛的定量分析方法,可用于川贝母药材的质量控制。     

HPLC-ELSD测定猴枣牛黄散中乔松素、小豆寇明、西贝母碱和西贝母碱苷

目的: 采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定猴枣牛黄散(HZNHS)中乔松素、小豆寇明、西贝母碱和西贝母碱苷的含量。 方法: Hypersil C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流速0.9 mL·min^-1,流动相(乔松素和小豆寇明)A为甲醇,B为0.5% 磷酸溶液,检测波长300 nm;流动相(西贝母碱和西贝母碱苷)乙腈-水-二乙胺(65:35:0.5),ELSD漂移管温度80 ℃,载气(N₂)流速2.3 SLPM·min^-1。 结果: 乔松素和小豆寇明分别在0.052 7~1.054 μg(r=0.999 4),0.036 2~0.724 0 μg(r=0.999 8)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.14%,97.64%,RSD分别为1.10%,1.39%;西贝母碱和西贝母碱苷分别在0.057 1~1.142 μg(r=0.999 1),0.081 3~1.626 μg(r=0.999 5)进样量的自然对数值与峰面积的自然对数值呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.55%,98.09%,RSD分别为1.75%,1.80%。 结论: 方法测定结果准确、灵敏、重复性好,可用于猴枣牛黄散中乔松素、小豆寇明、西贝母碱和西贝母碱苷的测定。     

HPLC-ELSD法测定皖贝止咳胶囊中贝母素甲和贝母素乙的含量

目的:建立皖贝止咳胶囊中贝母素甲和贝母素乙的含量测定方法。方法:采用迪玛C₁₈柱,乙腈-0.1%三乙胺溶液(70∶30)为流动相;ELSD参数:漂移管温度:93℃,载气流量:2.2mL·min^-1。结果:贝母素甲的回收率为97.35%,RSD=1.24%(n=5);贝母素乙的回收率为97.46%,RSD=1.27%(n=5)。结论:本法简便、快速、重复性好,可作为制剂的定量分析方法。     

太白贝母出苗期与积温的相关关系

<正> 太白贝母Fritillaria taipaiensis P.Y.以为名贵中药川贝中四大主要品种之一,目前已成为川东盆边山区家种川贝母的大宗品种,发展种植     

HPLC测定不同产地平贝母中贝母甲素的含量

 目的建立平贝母中贝母甲素含量的反相离子对HPLC测定方法。方法采用Kromasil ODS C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(69∶31),内含7.5 mmol·L^-1 SDS,pH=4.5±0.1;体积流量:0.5 mL·min^-1;柱温:27℃;检测波长为208nm,并与TLC对照测定了10种不同产地平贝母中贝母甲素的含量。结果贝母甲素在0.515～3.09μg与峰面积线性关系良好(r=0.999 7),平均加样回收率为98.54%,RSD为2.12%(n=5)。不同产地平贝母中贝母甲素含量有一定的差异,其中黑龙江省的铁力和辽宁省的新宾平贝母中贝母甲素含量较高。而其他吉林省的8个产地贝母甲素含量均较低。结论本方法灵敏度高,而且简便、准确、重现性好,可用于平贝母的内在质量控制。     

川贝母及常见伪品鉴别

贝母属植物品种较多,名称近似,现将川贝母及常见伪品鉴别如下。 1正品川贝母 为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D.Don、暗紫贝母Fritillaria unibracteata Hsiao et K．C．Hsia、     

炉贝母不同提取物中贝母辛和贝母素乙含量的HPLC-ELSD测定

目的建立HPLC-ELSD测定炉贝母不同提取物中贝母辛和贝母素乙含量的方法,研究采用不同提取方法时贝母辛和贝母素乙两生物碱含量的差异。方法采用HPLC-ELSD法进行分析;色谱柱:Comatex C18(5μm,250 mm×4.6mm);流动相:初始比例为乙腈∶0.02%三乙胺水溶液(38∶62),梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1;柱温:35℃;SofTA Model 300S ELSD参数:漂移管温度90℃,雾化室温度35℃,载气压力46.2 psi。结果贝母辛的进样量在2.750~9.625μg范围内,其进样浓度的对数(X=lgC)与峰面积积分值的对数(Y=lgA)具有良好的线性关系(Y=2.218 98+1.401 53X,r=0.999 8);贝母素乙的进样量在1.5~9.0μg范围内,其进样浓度的对数(X=lgC)与峰面积积分值的对数(Y=lgA)具有良好的线性关系(Y=2.516 79+1.132 66X,r=0.999 7)。结论该方法操作简便,可靠稳定,结果准确;回流提取法中贝母辛和贝母素乙含量均高于超声提取法和渗漉法,为探索炉贝母中异甾体生物碱类有效成分的提取提供了重要参考依据。     

五种贝母的一阶导数光谱法鉴别

湖北贝母Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C.Hsia、浙贝母F.thunbergii Miq、平贝母F.ussuriensis Maxim、川贝母F.cirrhosa D.Don、东贝母F.thunbergii Miq·var.chekiangensis Hsiao et K.C.Hsia均为百合科贝母属植物的干燥鳞茎,性状较为相似,且商品价格不同,故误用、冒用现象时有发生。本文应用一阶导数光谱法对其进行鉴别,现将结果报道如下。     

太白贝母根际区土壤养分变化规律

目的：调查太白贝母根际区土壤养分、营养元素含量的变化规律,为其人工栽培过程中土壤改良和平衡施肥提供理论依据。方法：以14份不同产地、不同生长年限太白贝母根际区土壤为研究对象,采用土壤农化分析方法结合原子吸收分光光度法测定其全氮,速效氮,全磷,速效磷,全钾,速效钾,有机质,pH及钙（Ca）,镁（Mg）,钠（Na）,锰（Mn）,锌（Zn）,铜（Cu）,镍（Ni）7种营养元素含量,利用SPSS 22.0软件对数据进行多重比较和相关分析。结果：不同产地、不同生长年限太白贝母根际土壤养分、营养元素均具有显著性差异（P<0.05）,呈现一定的相关性。栽培品根际土壤全氮、全磷、速效氮、速效磷及有机质含量随生长年限增加而呈降低的趋势,而全钾、速效钾含量及pH随年限增加呈先降低后升高的趋势,但太白贝母野生品整体上随着生长年限而土壤理化性质无显著变化。栽培品根际土壤Ca,Mg,Na和Cu含量随年限增长呈降低的趋势,Mn含量随年限增长呈先降低后升高的趋势,Zn和Ni含量随年限增长无显著变化。野生品根际土壤Ca,Mg,Na,Mn和Cu含量随年限增长呈先升高后降低的趋势,Zn和Ni含量随年限增长无显著变化。整体上,太白贝母野生品根际土壤养分、营养元素优于栽培品。结论：3年是太白贝母生长的转折点,3年后根际土的土壤养分和营养元素有显著的迅速下降趋势,在太白贝母的经营管理中需注意平衡施肥,改善土壤质量,尽量避免连作。     

中药材川贝母DNA指纹鉴定研究

目的 建立川贝母DNA指纹鉴别方法.方法 采用CTAB法从川贝母等样品中提取基因组DNA,对其5s rDNA区序列进行扩增并在此基础上展开了分子鉴定研究.经Primer Primer 5.0引物设计软件设计川贝母的特异性引物,利用PCR技术对川贝母与其他品种的贝母进行鉴别比较.结果 川贝母能扩增出274 bp大小的片段...     

川西高原产生物碱暗紫贝母内生放线菌的筛选、鉴定及抑菌活性的测定

为挖掘野生暗紫贝母内生菌资源,缓解贝母资源的紧缺,采集生长于川西高原的野生暗紫贝母为试验材料,取其健康鳞茎,通过纯培养法、插片法、薄层色谱分析技术和牛津杯法观察内生放线菌菌丝形态,研究放线菌产生物碱的能力及其所产生物碱的抑菌活性。结果通过改良高氏一号培养基分离得到14株内生放线菌,基于颜色反应筛选出5株能产生生物碱的菌株,利用薄层色谱技术进行生物碱的测定,5种株菌都产生了2个明显的生物碱斑点。抑菌活性测定表明有2株菌对病原菌的抑制效果较为突出,抑菌直径最高达11 mm。16S rRNA基因比对分析显示,5株菌属于链霉菌属Streptomyces。筛选出的内生放线菌产生的生物碱与暗紫贝母均不相关,但其发酵液具有一定的抑菌效果,值得进一步研究。     

忍冬藤质量标准研究

 目的建立RP-HPLC测定忍冬藤中绿原酸、咖啡酸、当药苷和马钱子苷含量的方法,并以此对忍冬藤进行质量控制。方法色谱柱为Aglient Extend-C_{18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%醋酸水溶液(26∶74);流速1.0 mL·min^-1,检测波长240 nm。结果绿原酸、咖啡酸、当药苷和马钱子苷的线性范围和相关系数分别为23.5～470 mg·L^-1,r=0.999 9;12～240 mg·L^-1,r=0.999 7;10.5～210 mg·L^-1,r=0.999 9;13～260 mg·L^-1,r=0.999 8。平均回收率分别为97.7%(RSD=2.23%),96.6%(2.29%),95.0%(2.26%),103.3%(2.93%)。结论本方法简单、快速、可靠,可用于忍冬藤药材的质量控制。}     

杭白菊中黄酮类化合物及其抑制人源肿瘤细胞增殖活性的研究

 目的 分离和鉴定杭白菊中黄酮类化合物并对其进行抗肿瘤活性研究。方法 利用系统溶剂萃取法、聚酰胺柱色谱、半制备型高效液相色谱法分离。通过理化性质和IR、UV、MS、¹H-NMR、¹³C-NMR等光谱数据鉴定化合物。采用MTT法测定化合物对人肿瘤细胞增殖的影响, 并以氟尿嘧啶（5-FU）作为阳性对照,比较其对正常细胞的毒性作用。流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果 分离得到8个黄酮化合物单体,分别鉴定为木犀草素(Ⅰ),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ),木犀草素7-O-β-D (6″-O-丙二酸单酰) -葡萄糖苷(Ⅲ),芹菜素(Ⅳ),芹菜素 7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ),芹菜素 7-O-β-D-(6″-O-丙二酸单酰)-葡萄糖苷(Ⅵ),香叶木素(Ⅶ),香叶木素 7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)。MTT法测定木犀草素抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞 和肝癌SMMC-7721细胞的IC₅₀分别为56.67和72.92 μmol·L^-1。结论 化合物Ⅲ和Ⅵ首次从杭白菊中分离得到。木犀草素能抑制MDA-MB-231和SMMC-7721增殖,阻滞其细胞周期于G2/M期,且对正常细胞无毒性。     

HPLC-ELSD测定不同产地吉祥草中凯提皂苷元的含量

 目的 建立吉祥草中凯提皂苷元的含测定方法。方法 采用高效液相色谱（HPLC）-蒸发光散射检测器(ELSD ),Agilent Ecplise XDB-C₁₈ (4.6 mm×150 mm , 5 μm)柱,甲醇-水(50∶50)为流动相,流速为1.0 mL · min-1,柱温25 ℃,载气压力0.33 MPa,漂移管温度65 ℃。结果 凯提皂苷元质量浓度在0.1~1.5 mg·mL-1之间线性关系良好,r=0.999 5,平均回收率 98.4%, RSD=1.5% (n=3)。结论 该方法分离效果好,操作简便,稳定性好,重复性好,可用于吉祥草中凯提皂苷元的含测定,为吉祥草药材的开发利用奠定基础。     

长穗桑中的α-葡萄糖苷酶抑制剂成分研究

 目的 研究长穗桑中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的化学成分。方法 采用各种离子交换树脂对长穗桑水提取物进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱分析手段鉴定化合物结构。结果 从长穗桑水提取物中分离到11个化合物,其中7个多羟基生物碱类化合物,2个酰胺类化合物,1个氨基酸以及甜菜碱。分别鉴定为1-deoxynojirimycin (1),fagomine (2),3-epi-fagomine (3),1,4-dideoxy-1,4-imino-D-arabinitol (4),2-O-α-D-galactopyranosyl-1-deoxynojirimycin (5),4-O-β-D-glucopyranosyl-fagomine (6),1,4-dideoxy-1,4-imino-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-D-arabinitol (7),(2S)-citrullinamide (8),grateloupinamide (9),天冬氨酸(10),甜菜碱(11)。化合物1~10分别进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结论 化合物1~11均为首次从该植物中分离得到。4个多羟基生物碱(1,5~7)以及1个酰胺类化合物(9)有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中化合物1的IC₅₀为0.07 μmol·L^-1;化合物5的IC₅₀为0.39 μmol·L^-1,与阳性对照阿卡波糖(acarbose,IC₅₀=0.52 μmol·L^-1)相当;化合物6,7,9的IC₅₀值在1~5 μmol·L^-1。     

海洋甾体(25R)-胆甾-3β，5α，6β，26-四醇的合成及生物活性研究

 目的 设计合成天然产物(25R)-胆甾-3β,5α,6β,26-四醇,并评价其抗胶质瘤活性。方法 以薯蓣皂素为原料,经过Zn-Hg齐还原开环,叔丁基二甲基氯硅烷（TBDMSCl）保护C-3、C-26羟基,甲基磺酰氯（MsCl）磺酰酯化C-16羟基,LiAlH₄还原C-16甲基磺酸酯,间氯过氧苯甲酸（mCPBA）氧化5,6位双键,酸性条件下开环、脱保护反应得到(25R)-胆甾-3β,5α,6β,26-四醇;并通过MTT法对该化合物的抗胶质瘤活性进行了初步研究。 结果 各中间体和目标化合物通过1H-NMR、13C-NMR、IR、EI-MS、EA等现代波谱技术进行了结构表征;化合物在浓度为10~150 μg·mL-1时,胶质瘤细胞的生存率存在显著性差异,其IC₅₀为51.57 μg·mL-1。 结论 利用廉价易得的薯蓣皂素合成了一种天然海洋甾体,该目标化合物具有显著的抗胶质瘤活性,且具有浓度依赖性,值得进一步研究。     

山茱萸炮制前后的HPLC指纹图谱研究

 目的建立山茱萸炮制前后的高效液相(HPLC)指纹图谱。方法选择山茱萸生、制品各12批,以体积分数80%甲醇溶液超声提取制备溶液,应用Agilent Zorbax C₁₈(4.6mm×250mm,5μm)柱,二极管阵列检测器(DAD),以0.1%磷酸溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1mL·min^-1,柱温30℃,检测波长240nm。结果山茱萸生品样品中共检测到19个共有色谱峰,可以指认5个共有峰;山茱萸制品样品中共检测到23个共有色谱峰,可以指认6个共有峰。结论从整体上显示生、制品的特征,为山茱萸生、制品的质量控制提供有效手段。