5-Aza-CdR对人结肠癌Caco-2细胞系P16基因甲基化状态及其生物学表型的影响

目的 观察人结肠癌Caco-2细胞系P16基因启动子区甲基化状态,并探讨去甲基化制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)诱导高甲基化失活的P16基因重新表达的可能性及其对细胞生长的影响.方法 用不同浓度的5-Aza-CdR处理Caco-2细胞系,MSP法检测用药前后P16基因的甲基化状态,RT-PCR方法检测P16基因mRNA表达.MIT法观察细胞生长速度,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率.结果 P16基因在人结肠癌细胞系Caco-2中启动子区呈甲基化状态,经过5-Aza-CdR处理后,P16基因启动子区呈去甲基化状态,其mRNA重新表达.CpC岛去甲基化后能明显地抑制细胞的生长,诱导细胞凋亡,影响细胞周期分布,并具有良好的量效依赖关系.结论 5-Aza-CdR能够逆转P16基因甲基化状态,调控P16基因表达并有效地抑制肠癌细胞增殖.     

急性白血病细胞系中SFRP基因启动子甲基化及去甲基化诱导表达的研究

 目的：探讨分泌型卷曲相关蛋白（SFRP）基因家族启动子CpG岛异常甲基化状态与急性白血病（AL）发生发展的关系,以及DNA甲基转移酶（DNMT）抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷酸（5-Aza-CdR）去甲基化诱导SFRP基因表达作用的可能机制。方法：采用甲基化特异性PCR检测不同AL细胞系（Molt-4、Jurkat、HL-60和NB4）和不同浓度5-Aza-CdR作用下Jurkat细胞系中SFRP1、SFRP2、SFRP4和SFRP5基因启动子区的甲基化状态,采用实时荧光定量RT-PCR检测SFRP1、SFRP2、SFRP4和SFRP5 mRNA表达,采用半定量RT-PCR检测DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA表达。结果：在正常人细胞中不存在SFRP基因的甲基化。SFRP1、SFRP2和SFRP5基因在HL-60、NB4、Molt-4和Jurkat细胞系中均呈完全甲基化状态;SFRP4基因在NB4、Molt-4和Jurkat细胞系中完全甲基化,在HL-60细胞系中则部分甲基化。5-Aza-CdR可逆转SFRP1、SFRP2、SFRP4和SFRP5基因的高甲基化状态,并能够下调DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA水平,诱导SFRP基因恢复表达。结论：在AL细胞系中,SFRP1、SFRP2、SFRP4和SFRP5基因出现高甲基化,与AL的发生密切相关,可能成为AL新的基因标志物。5-Aza-CdR通过抑制DNMT表达,逆转SFRP基因的甲基化状态,恢复其表达。     

5-杂氮-2'脱氧胞苷对肝癌细胞SMMC-7721 miR-1247-5p基因表达及其启动子区甲基化的影响

目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10μmol/L)去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷处理SMMC-7721细胞,用甲基化特异性PCR法检测miR-1247-5p基因启动子区甲基化水平;用SYBR Green qReal Time PCR法检测miR-1247-5p的表达。结果与正常人肝细胞系LO_2相比,肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达降低(P0.05)且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平高;经去甲基化药物干预后miR-1247-5p的表达较对照组有明显上调(P0.01),且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平降低。结论 miR-1247-5p基因甲基化调控可能参与了肝癌的发生。     

脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究

目的探讨人脑胶质瘤SHG-44细胞O（6）-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2＇脱氧胞苷（5-Aza-CdR）培养6d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR（MSP）检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达。将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg／ml的尼莫司汀（ACNU）和50、25、15、10、5、2．5、1μg/ml的替莫唑胺（TMZ）以及等量的完全培养液（阴性对照）,采用噻唑蓝（MTT）法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50％时所对应的药物浓度（IC50值）作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次。结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg／ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5-Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2．5和3．1倍（均P〈0．05）,对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和5-Aza-CdR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药。结论MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。     

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对肝癌DNA甲基转移酶1及上皮钙黏附素表达的影响

目的:研究5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞中DNA甲基转移酶1(DNMT1)及上皮钙黏附素(E-cadherin)表达的影响.方法:免疫组织化学检测上皮钙黏附素在肝癌(26例)及癌旁组织(20例)中的表达.用终浓度10μmol/L的5-Aza-CdR处理培养的肝癌细胞株GQY-7703作为实验组,未处理细胞为对照组;DNMT1基因和上皮钙黏附素基因(CDH1)的转录产物及表达蛋白分别使用半定量RT-PCR和免疫印迹法检测;CDH1的甲基化状态使用甲基化特异性PCR(MSP)检测.结果:相比较癌旁组织,肝癌组织中上皮钙黏附素表达显著下调.5-Aza-CdR降低了GQY-7703细胞中DNMT1在转录水平和翻译水平的表达CDH1 CpG岛的甲基化水平降低;上皮钙黏附素mRNA和蛋白表达量明显增高,对电泳条带的半定量分析显示实验组和对照组之间的差异具有统计学意义.结论:5-Aza-CdR通过抑制DNMT1的表达,改变了CDH1基因的异常甲基化状态,进而恢复上皮钙黏附素的表达.     

5-Aza-CdR抑制HepG2细胞DLK1基因表达及细胞生长

目的 探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对DLK1基因及肝癌细胞系HepG2增殖、侵袭的影响.方法 不同浓度的5-Aza-CdR及PBS作用HepG2细胞后,RT-PCR、Western blot检测DLK1基因及蛋白的表达水平;MTT、Transwell和流式细胞术检测HepG2细胞的生长、侵袭力及细胞周期的变化.结果 HepG2细胞经5-Aza-CdR处理后,DLK1 mRNA、蛋白表达量降低;MTT试验显示细胞生长速度依5-Aza-CdR浓度出现不同程度减慢;流式结果表明G1期细胞减少,S期细胞增加,出现S期阻滞;Transwell证实侵袭能力显著降低(P＜0.05).结论 去甲基化药物5-Aza-CdR能有效地抑制DLK1基因的表达,从而抑制肿瘤细胞HepG2生长、增殖、侵袭能力.     

5-氮-2’-脱氧胞苷对人卵巢癌细胞SKOV3凋亡及HMLH1和HMSH2表达的影响

目的探讨5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、凋亡及错配修复基因HMLH1和HMSH2表达的影响。方法用0.5、5和50μmol/L特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理SKOV3细胞3d,继续常规培养7d后,采用四唑盐(MTT)比色法检测生长活性,流式细胞术分析细胞的凋亡,半定量RT-PCR检测细胞HMLH1和HMSH2 mRNA的表达水平。结果人卵巢癌细胞系SKOV3经0.5、5和50μmol/L5-Aza-CdR处理后,均能明显抑制肿瘤细胞生长。各组细胞的凋亡率分别为10.59%±1.57%、17.52%±1.72%、34.10%±1.45%,显著高于对照组的5.35%±0.86%(P<0.01);且凋亡率与5-Aza-CdR剂量成正相关(F=227.6,P<0.01)。在SKOV3中HMLH1和HMSH2呈弱表达,经5-Aza-CdR处理后mRNA表达量有不同程度的增加,且与药物存在剂量依赖性。结论5-Aza-CdR可逆转卵巢癌细胞系中存在的HMLH1和HMSH2甲基化,DNA错配修复基因甲基化与卵巢癌的发生、发展有关。     

5-氮-2''-脱氧胞苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖凋亡及hMLH1和hMSH2表达的影响

目的 探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、凋亡及错配修复基因HMLH1和HMSH2表达的影响.方法 用0.5、5和50μmol/L特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理SKOV3细胞3 d,继续常规培养7 d后,采用四唑盐(MTT)比色法检测生长活性,流式细胞术分析细胞的凋亡,半定量RT-PCR检测细胞HMLH1和HMSH2 mRNA的表达水平.结果 人卵巢癌细胞系SKOV3经0.5、5和50 μmol/L5-Aza-CdR处理后,均能明显抑制肿瘤细胞生长.各组细胞的凋亡率分别为10.59%±1.57%、17.52%±1.72%、34.10%±1.45%,显著高于对照组的5.35%±0.86%(P＜0.01);且凋亡率与5-Aza-CdR剂量成正相关(F=227.6,P＜0.01).在SKOV3中HMLH1和HMSH2呈弱表达,经5-Aza-CdR处理后mRNA表达量有不同程度的增加,且与药物存在剂量依赖性.结论 5-Aza-CdR可逆转卵巢癌细胞系中存在的HMLH1和HMSH2甲基化,DNA错配修复基因甲基化与卵巢癌的发生、发展有关.     

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对HepG2细胞RUNX3基因表达及细胞增殖的影响

目的探讨人肝癌细胞系HepG2经5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2-’deoxycytid ine,5-Aza-CdR)处理后诱导高甲基化失活的RUNX3基因重新表达的可能性及对细胞生长的影响,寻找抗癌治疗的新靶点。方法RT-PCR检测抑癌基因RUNX3 mRNA的表达;MTT、集落形成实验观察细胞的生长活性;流式细胞术和透射电镜分析细胞周期及细胞凋亡的变化。结果肝癌细胞经不同浓度之5-Aza-CdR处理后,原无RUNX3 mRNA表达的细胞均检出基因重新表达,细胞生长速度出现不同程度减慢及细胞克隆形成率显著降低(P<0.01)。用药后肝癌细胞发生明显的S期阻滞,电镜显示肝癌细胞形态学改变。结论去甲基化制剂5-Aza-CdR能有效地激活肝癌细胞系HepG2因高甲基化所致RUNX3基因沉默的再转录,诱导该基因的表达,从而抑制肿瘤细胞生长。     

脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究

目的 探讨人脑胶质瘤SHG.44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性.方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6 d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照.提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达.将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次.结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5一Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转.而正常培养和5-Aza-CAR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药.结论 MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT 蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记.     

启动子区5′CpG岛去甲基化对人结肠癌细胞生物学表型的影响

目的：探讨DNA启动子区5′CpG岛甲基化状态与人结肠癌RKO细胞增殖凋亡等生物学特征的关系。方法： 应用特异性DNA甲基转移酶（DNMTs）抑制剂-5-氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza-2′-deoxycytidine，5-Aza-CdR）处理肠癌RKO细胞72 h，甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP）及DNA测序法分析p16/CDKN2基因CpG岛甲基化状态；MTT、FCM、荧光染色及透射电镜检测启动子区去甲基化后细胞生长、形态和细胞周期凋亡的影响。 结果： DNMTs抑制剂能较好地逆转启动子区胞嘧啶甲基化状态；CpG岛去甲基化后能明显地抑制肠癌细胞的生长，增加细胞群体倍增时间（P<0.01），诱导肠癌细胞凋亡，影响肠癌细胞周期分布，并具有良好的量效依赖关系。 结论： 通过逆转CpG岛高甲基化能有效地抑制肠癌细胞增殖，为临床治疗大肠癌提供新的作用靶点。     

结直肠癌细胞中脾酪氨酸激酶基因甲基化状态和表达的关系

目的：探讨结直肠癌细胞中脾酪氨酸激酶基因甲基化和表达的关系。方法：应用亚硫酸盐修饰测序、甲基化特异性聚合酶链反应和蛋白印迹技术检测结直肠癌细胞脾酪氨酸激酶的甲基化状态以及表达情况；荧光素酶报告分析法研究启动子区域CpG岛的甲基化与启动子活性的关系；甲基化转移酶抑制剂处理脾酪氨酸激酶甲基化失表达的结直肠癌细胞株，观察处理前后细胞内脾酪氨酸激酶基因甲基化状态和表达情况。结果：（1）23个结直肠癌细胞中，9个细胞启动子发生甲基化而失去蛋白质表达；其余则正常表达，甲基化发生率为39.2％；（2）9个甲基化的细胞中，7个存在微卫星不稳定；而14个未发生甲基化的细胞中，仅有4个存在微卫星不稳定。二者之间的差异显著（P<0.05）；（3）脾酪氨酸激酶启动子全长和未甲基化启动子荧光素酶的活性分别是甲基化组的4.5和4.7倍；5-Aza-CdR可恢复甲基化启动子的活性；（4）5-Aza-CdR可去甲基化而使脾酪氨酸激酶基因重新表达，而且具有时间依从性。结论：结直肠癌细胞中，启动子区域的甲基化导致Syk基因丧失表达，5-Aza-CdR可以去甲基化而恢复脾酪氨酸激酶基因的表达。     

Semaphorin-3F functions as a tumor suppressor in colorectal cancer due to regulation by DNA methylation

Semaphorin-3F (SEMA3F) is a member of the class III semaphorin family, and is seen as a candidate tumor suppressor gene. The aims of this study were to evaluate the effect of SEMA3F in colorectal cancer (CRC) patients, and to explore the mechanism for that SEMA3F suppresses tumor progression and metastasis. The expression levels of SEMA3F in the colorectal cancer tissues and corresponding non-tumor colorectal tissues were determined by Western blotting and real-time quantitative PCR (qRT-PCR). In addition, we evaluate the effects of SEMA3F on CRC cell migration and colony formation in vitro. Subsequently, quantitative methylation-specific PCR (qMSP) was used to detect the DNA methylation status in the CpG islands of SEMA3F gene promoter in normal colon and colorectal cancer cell lines, colorectal cancer tissues and corresponding non-tumor colorectal tissues. We found that SEMA3F was downregulated in the protein (P < 0.01) and mRNA (P < 0.001) levels in CRC tissues as compared to matched adjacent non-tumor tissues. Moreover, MSP assay showed high levels of SEMA3F gene promoter methylation in the CpG islands in some CRC cell lines and tissue samples. Furthermore, SEMA3F expression was reactivated in CRC cell lines after treatment with 5-Aza-CdR, demethylation of SW620 cells resulted in cell colony formation and invasion inhibition. These findings suggest DNA methylation of promoter CpG island-mediated silencing of the tumor suppressor SEMA3F gene plays an important role in the carcinogenesis of CRC.     

4株乳腺癌细胞中内皮素受体B基因的甲基化状态及对MCF-7细胞增殖的影响

目的 探讨内皮素受体B（EDNRB）基因在4株乳腺癌细胞中的表达、甲基化状态以及恢复EDNRB表达对MCF-7细胞增殖的影响。 方法 采用甲基化特异性PCR（MS-PCR）和亚硫酸盐测序法（BSP）分析4株乳腺癌细胞中EDNRB的甲基化状态;反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测EDNRB mRNA的表达水平;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和集落形成实验检测EDNRB表达恢复对MCF-7细胞增殖的影响。 结果 EDNRB在乳腺癌细胞MCF-7和ZR-75-1中表达缺失,并呈高甲基化状态;而在EDNRB表达最高的MDA-MB-231细胞中其启动子呈低甲基化,表明乳腺癌细胞中EDNRB基因启动子甲基化状态与其表达成负相关。5-氮杂胞苷（5-Aza-CR）能够反转EDNRB基因的表达,EDNRB表达恢复后MCF-7细胞的增殖受到抑制。 结论 EDNRB基因启动子区CpG岛频繁甲基化可能在乳腺癌发生发展中发挥重要作用,EDNRB有望成为乳腺癌早期诊断的新的分子标志物。     

Methylation status of T-lymphoma invasion and metastasis 1 promoter and its overexpression in colorectal cancer

T-lymphoma invasion and metastasis 1 has been implicated in tumor invasion and metastasis. However, the regulatory mechanisms underlying aberrant T-lymphoma invasion and metastasis 1 expression in human colorectal cancer have not been well defined. To investigate the relationship between methylation status and expression levels of T-lymphoma invasion and metastasis 1 gene, methylation-specific polymerase chain reaction, and immunohistochemistry staining were performed in 232 matched samples of human colorectal cancer tissue and normal colorectal mucosa. Results showed that T-lymphoma invasion and metastasis 1 protein was overexpressed in colorectal cancer, especially in metastatic cases (P < .001). The degree of T-lymphoma invasion and metastasis 1 promoter methylation was a little lower in cancer tissues than in matched normal mucosa (P < .05), and the expression level of T-lymphoma invasion and metastasis 1 was inversely related to the methylation status in cancer tissues (P < .001). Colon cancer cell lines HT29 and LS174T were treated with demethylating agent 5-aza-2'-deoxycytidine, resulting in promoter hypomethylation accompanied by reexpression of T-lymphoma invasion and metastasis 1 mRNA and protein. In contrast, colon cancer cell lines SW620 and LoVo were treated with hypermethylation agent S-adenosylmethionine, resulting in T-lymphoma invasion and metastasis 1 promoter hypermethylation, accompanied by suppression of T-lymphoma invasion and metastasis 1 expression and inhibition of cell growth, plate colony formation, and migration. The present study demonstrates that overexpression of T-lymphoma invasion and metastasis 1 is associated with hypomethylation status of T-lymphoma invasion and metastasis 1 promoter region in colorectal cancer tissues. It suggests that promotor hypomethylation of T-lymphoma invasion and metastasis 1 may play a role in the progression and metastasis of colorectal cancer. Pharmacologic reversal of T-lymphoma invasion and metastasis 1 promoter hypomethylation may inhibit cell proliferation and migration.     

Expression of aquaporin-5 in and fluid secretion from immortalized human salivary gland ductal cells by treatment with 5-aza-2'-deoxycytidine: a possibility for improvement of xerostomia in patients with Sjögren's syndrome

The aim of the present study was to investigate the possibility that ductal cells, which preferentially survive and/or proliferate in Sj?gren's syndrome (SS) salivary glands of patients with SS, could acquire the functional expression of membrane water channel aquaporin-5 (AQP5). Thus, in this study, we demonstrate that an immortalized normal human salivary gland ductal cell (NS-SV-DC) line, lacking the expression of AQP5, acquires AQP5 gene expression in response to treatment with 5-aza-2'-deoxycytidine (5-Aza-CdR), a DNA demethylating agent. Confocal microscopic analysis revealed the localization of AQP5 expression mainly at the apical and lateral sides of the plasma membrane. The expressed AQP5 protein was functionally active because AQP5 expression resulted in a significant increase in the osmotically directed net fluid rate across monolayers of NS-SV-DC cells. By the analysis of bisulfite sequencing of CpG islands in the AQP5 promoter, hypermethylation within the consensus Sp1-binding sites was commonly observed in parental cell clones, whereas demethylation at the CGs, one in the second consensus Sp1 element and the other outside of the third consensus Sp1 element in the AQP5 promoter, was detected in NS-SV-DC cells after treatment with 5-Aza-CdR. By analyzing the luciferase activity of transfected AQP5 promoter vectors, it became evident that demethylation at the CGs cooperatively functions between these two sites to induce AQP5 expression. Our data, therefore, suggest that treatment of ductal cells with 5-Aza-CdR could result in the expression of the AQP5 gene, thereby leading to increased fluid secretion from ductal cells in SS salivary glands.     

食管鳞癌分泌素-3A1基因启动子甲基化异常

[目的]研究具有抗癌活性的细胞因子分泌素-3A1基因启动子超甲基化所至该基因表达抑制在我国食管鳞癌发生中的作用。[方法] 用RT-PCR 方法检测分泌素-3A1基因在12个食管鳞癌细胞系的表达,并用甲基化特异PCR技术（methylation specific PCR, MSP）检测上述细胞系及37例来自我国河南的原发性食管鳞癌标本分泌素-3A1基因启动子甲基化状态,通过5-aza-dc处理使培养细胞去甲基化,RT-PCR技术检测处理后该基因在Kyse30的重新表达。[结果] 该基因仅在Kyse410、Kyes520和TE8等3个细胞系有表达,5-aza-dc处理可使Kyse30重新表达分泌素-3A1。此外,在18/37（48%）例原发性食管鳞癌细胞有分泌素-3A1基因启动子区域的超甲基化。[结论] 启动子超甲基化造成分泌素-3A1基因在上述食管鳞癌细胞系表达抑制,原发性食管鳞癌细胞分泌素-3A1基因启动子超甲基化提示该基因表达抑制可能与食管鳞癌发生有关。