Cx26 在神经管周围间充质细胞的表达及意义

目的观察Cx26在神经管畸形发生中神经管周围间充质的表达,以探讨Cx26与NTDs发生的关系。方法用过量RA建立小鼠胚胎NTDs模型。用SABC免疫组化方法和图像处理系统,分析比较实验组和对照组神经管发育情况以及Cx26蛋白表达的位置和强度。结果Cx26蛋白表达于神经上皮细胞的细胞膜和细胞质内,而且实验组显著高于对照组(P<0.05);Cx26蛋白从E8 d到E11 d表达逐渐增多,E11 d达到高峰,然后逐渐下降。结论Cx26蛋白定位于神经管上皮细胞的胞膜和胞质内,其表达有一定的规律性。Cx26蛋白的过高表达可能与RA致NTDs密切相关。     

缝隙连接蛋白43的表达与神经管畸形的关系研究

目的观察缝隙连接蛋白43(Cx43)在神经管周围间充质细胞的表达,以探讨Cx43与神经管畸形(NTDs)发生的关系。方法用维甲酸(RA)建立昆明小鼠神经管畸形模型,用免疫组化方法分析比较实验组和对照组神经管发育情况以及Cx43蛋白表达的位置和强度。结果对照组神经管发育良好,实验组神经管不能按时闭合;Cx43蛋白表达于神经管周围间充质细胞的胞膜和胞质内,而且实验组明显高于对照组(P<0.05)。结论 Cx43蛋白的过高表达可能与RA致NTDs密切相关。     

Connexin 43在超排卵后子宫内膜中的表达及意义

目的观察Connexin43(Cx43)在超排卵后子宫内膜中的表达,探讨Cx43与子宫内膜容受性降低的关系,为进一步提高IVF-ET的临床妊娠率提供实验依据。方法建立超排卵小鼠模型,用SABC免疫组化方法和图像处理技术,分析比较实验组和对照组子宫内膜发育情况以及Cx43蛋白表达的位置和强度。结果Cx43蛋白主要表达于子宫内膜腺上皮细胞,定位于细胞膜和细胞浆中,Cx43的表达有如下规律:①3个实验组用药后24 h、48 h Cx43的表达明显高于对照组(P<0.05);②实验Ⅱ、Ⅲ组Cx43的表达明显低于实验Ⅰ组(P<0.05);实验Ⅲ组与实验Ⅱ组Cx43的表达无明显差别(P>0.05);③在动情周期中Cx43的表达有明显时间差异(P<0.05)。结论Cx43蛋白定位于子宫内膜腺上皮细胞的胞膜和胞质内,且在动情周期中有时间差异性。Cx43蛋白的过高表达可能与超排卵后子宫内膜容受性降低密切相关。     

Cx43、Smad1蛋白在胃癌中的表达及意义

目的：探讨Cx43、Smad1蛋白在胃癌中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学染色法检测Cx43和Smad1在胃癌和癌旁组织中的表达情况。结果：胃癌组织Cx43的阳性表达率明显低于正常胃组织,Smad1的阳性表达率明显高于正常胃组织（P＜0.05）。胃癌组织Smad1、Cx43蛋白的表达与年龄、性别无关,与分化程度、淋巴结转移和浸润深度有关（P＜0.01,P＜0.05）。胃癌组织Cx43与Smad1的表达呈显著负相关（P＜0.01）。结论：Cx43、Smad1蛋白的异常表达可能在胃癌的发生发展中具有重要作用。     

维甲酸致胚胎神经管畸形过程中RARα和RARβ表达水平变化的实验研究

目的：探讨过量维甲酸（RA）对金黄地鼠胚胎神经管维甲酸受体α（RARα）和维甲酸受体β（RARβ）蛋白表达的影响。方法：采用免疫组织化学方法及图像分析，半定量分析金黄地鼠神经管正常发生及RA致神经管畸形过程中RARα和RARβ表达水平的变化。结果：过量RA可使RARα和RARβ在金黄地鼠神经管中的表达水平呈现短时下降，而后又大幅上升的变化。结论：过量RA引起的RARα和RARβ表达水平的变化与RA致金黄地鼠神经管畸形相关。     

Cx43在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨细胞间隙连接蛋白43(Cx43)在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法收集2007年2月至2013年2月中国人民解放军第251医院收治的骨肉瘤患者70例,采用免疫组织化学(EnVisionTM)法分别检测70例骨肉瘤组织及30例骨肉瘤旁组织中Cx43的表达情况。结果Cx43在骨肉瘤组织、骨肉瘤旁组织中阳性表达率分别为14.28%、86.67%,比较差异有统计学意义(χ2=47.75,P<0.01)。在临床病理因素中,Cx43的表达与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05),但与肿瘤大小、临床分期、肺转移、Ki-67有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Cx43在骨肉瘤组织中呈现低表达,其低表达在一定程度上可反映骨肉瘤的生物学行为。     

胃癌和胃癌前病变Cx43、PCNA的表达及意义

目的　通过观察间隙连接蛋白 Cx4 3和增殖细胞核抗原 (PCNA )在正常胃粘膜、胃癌前病变和胃癌中的表达和分布情况 ,探讨 Cx基因表达与胃癌发生的关系。　方法　运用 SP免疫组织化学方法检测 Cx4 3、PCNA在 70例原发性胃癌 ,6 2例中、重度不典型增生和 16例正常胃粘膜中表达规律。　结果　 Cx4 3在正常胃粘膜 ,中、重度不典型增生和胃癌中表达的阳性率分别为 10 0 % ,83.9%和 17.1% ,三者比较差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 Cx4 3表达与胃癌的分化程度相关 (P<0 .0 1)。胃癌前病变、胃癌组中的 PCNA较正常胃粘膜组增高 (P<0 .0 1)。 Cx4 3表达与 PCNA呈负相关 (P<0 .0 1)。　结论　 Cx4 3表达降低在胃癌发生发展中起重要作用 ,Cx4 3可做为胃癌早期诊断的指标     

维甲酸诱导神经管畸形发生过程中神经干细胞的变化研究

目的：了解维甲酸（Retinoic acid,RA）诱导神经管缺陷（Neural tube defect,NTD）小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法：分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织，采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白（Nestin）间接免疫荧光抗体标记和DNA定量荧光染色，以流式细胞术检测。结果：①正常小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数目在E8．5d时呈高峰，此后逐步下降，新生期仍保持较高水平；NTD小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数在胚胎各期均低于正常小鼠，尤以E8．5d下降显著；出生后与正常组无显著差别。②NTD小鼠胚胎期神经组织G0／G1期细胞数百分比明显高于正常组，S期细胞数百分比则明显低于正常组。结论：胚胎早期神经干细胞的数目减少及神经细胞增殖受抑制与RA致NTD的发生有密切关系。     

Cx43、ILK蛋白的表达与卵巢上皮性肿瘤生物学行为的关系

目的 Cx43、ILK蛋白在不同类型、不同分期的卵巢上皮性肿瘤的表达情况。方法采用S-P法免疫组化染色观察Cx43、ILK蛋白在37例卵巢良性肿瘤、33例卵巢交界性肿瘤和69例卵巢上皮癌的表达情况。结果在卵巢癌中Cx43蛋白表达阳性率降低;ILK表达阳性率增高。Cx43蛋白表达与组织学类型无关;而ILK在粘液性癌表达阳性率与浆液性癌和子宫内膜样癌比较,差异显著。Cx43蛋白和ILK在不同分化程度卵巢癌中的表达无显著差异。Cx43蛋白在Ⅰ～Ⅱ期癌表达阳性率均高于Ⅲ～Ⅳ期癌,ILK在Ⅲ～Ⅳ期癌表达阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期癌。结论 Cx43表达缺失及ILK的过度在卵巢癌的发生和发展中可能都起重要作用。     

Skp2和Cx43在宫颈癌中的表达及其意义

目的 探讨Skp2和Cx43蛋白在正常宫颈上皮（NEC）、上皮内瘤样病变（CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ）及宫颈鳞癌（SCC）中的表达及其意义.方法 采用免疫组化（S-P）法检测20例NCE、28例CIN Ⅰ、24例CINⅡ、27例CINⅢ、58例SCC中Skp2和Cx43蛋白的表达情况,统计分析其表达的差异性及与宫颈癌临床病理因素的关系,探讨两者间的相关性.结果 Skp2在NCE、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和SCC中阳性表达率逐渐增高（分别为10.00％、46.43％、45.83％、70.37％和75.86％）,NCE组与其他各组比较,差异均有显著性（P＜0.05）;Cx43阳性表达率逐渐降低（分别为100％、100％、100％、74.07％和58.62％）,NEC与SCC比较,差异亦有显著性（均P＜0.05）.宫颈癌中Skp2表达与宫颈间质浸润深度、盆腔淋巴结转移有关;在不同宫颈组织中Skp2和Cx43表达呈负相关性（r=-0.894,P=0.041）.结论 Skp2表达随宫颈病变加重而逐步升高,Cx43表达逐渐降低.Skp2表达与宫颈癌预后有一定关系.     

缝隙连接蛋白43在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法随机选取子痫前期患者50例(轻度组20例,重度组30例)和正常妊娠孕妇50例(对照组),应用免疫组织化学法对3组胎盘Cx43的表达进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果 Cx43在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异均有显著性意义(P<0.05);轻度组与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。Cx43在胎盘组织的表达与妊娠期高血压疾病病情严重程度呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘组织中缝隙连接蛋白Cx43的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

间隙连接蛋白43与妇科疾病

间隙连接蛋白的正常和异常表达,可直接影响细胞及组织、器官的功能状态,其中间隙连接蛋白43是最重要的间隙连接蛋白。在子宫组织中,间隙连接蛋白43水平的升高,为子宫肌细胞间收缩控制提供了低电阻通道,使离子很容易通过间隙连接的通道,保证了子宫肌细胞群在代谢及行为上的协调性。其异常表达,与子宫肌瘤、子宫内膜异位症、宫颈癌等多种妇科疾病的发生、发展有着密切的联系。     

美托洛尔对大鼠心肌梗死周边区缝隙连接蛋白43的影响

目的:探讨美托洛尔对大鼠心肌梗死(心梗)后梗死周边区缝隙连接蛋白43(Cx43)的影响。方法:80只大鼠随机分为假手术组(20只)、心梗组(30只)和美托洛尔组(30只),用结扎冠状动脉左前降支的方法制备心梗模型,美托洛尔组给予美托洛尔5mg/(kg.d)灌胃,心梗组给予安慰剂。手术8周后,测量梗死周边区心室颤动阈值(室颤阈值)。用蛋白印记分析和RT-PCR分别观察心梗后梗死周边区缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化的蛋白质及总量表达和mRNA表达的变化;免疫荧光法观察梗死周边区Cx43的分布。结果:8周后,美托洛尔组室颤阈值高于心梗组[(11.0±2.65)V比(7.1±4.1)V,P<0.05],美托洛尔组Cx43磷酸化的蛋白质及总量均显著高于心梗组,Cx43mRNA的表达也明显高于心梗组。Cx43的密度和分布均显著高于心梗组。结论:美托洛尔能显著改善梗死周边区缝隙连接重构,这可能是美托洛尔能够抑制心梗后室性心律失常的一个机制。     

阴茎包埋对大鼠阴茎海绵体缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:探讨阴茎包埋对阴茎海绵体组织缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:通过建立隐匿阴茎大鼠模型获得实验标本,分2月组、4月组,每组25只大鼠,各阶段又分包埋组(15只),正常组(10只),光镜下观察海绵体形态结构的改变,免疫组化法观察海绵体平滑肌细胞Cx43的表达。结果:2月包埋组与2月正常组相比Cx43的表达无明显变化(吸光度值0.30±0.04比0.34±0.11,P>0.05),包埋4月组光镜下见大鼠阴茎海绵体大量间质组织增生,海绵窦狭窄,免疫组化观察包埋4月组大鼠阴茎海绵体平滑肌Cx43表达较正常组明显降低(正常4月组吸光度值0.38±0.06;包埋4月组0.18±0.03,P<0.05)。结论:随着包埋时间的延长,阴茎包埋导致海绵体形态结构上的病理改变、Cx43表达减少,可能引起阴茎勃起功能障碍。     

CX43蛋白磷酸化在大鼠逼尿肌过度活动症中的作用

目的 评价CX43蛋白磷酸化在大鼠逼尿肌过度活动症(detrusor overactivity,DO)中的作用,并初步探讨PP1和PP2A对CX43蛋白磷酸化修饰状态的影响.方法 建立大鼠DO模型作为实验组,假手术组作为对照组,Western blot检测CX43蛋白磷酸化水平、PP1及PP2A的表达变化,免疫荧光双染对CX43与PP1、PP2A的定位及表达变化进行检测,荧光漂白恢复实验(FRAP)比较正常组、DO组、DO+碱性磷酸酶(AP)组的细胞间通讯功能(gap junction intercellular communication,GJIC)的差异.结果 与正常组相比,DO组膀胱中的CX43蛋白的不同磷酸化修饰状态(P0、P1、P2)的表达水平均明显升高(P＜0.05),PP2A的表达明显降低(P＜0.05),PP1的表达未发现明显改变(P＞0.05).DO组的GJIC较正常组明显增加(P＜0.05),DO+ AP组的GJIC较正常组和DO组明显降低(P＜0.05).结论 CX43蛋白的磷酸化水平上调可能在DO的发病过程中发挥着重要的作用,这种磷酸化水平的上调可能与PP2A的表达减少相关.     

心脏缝隙连接通道连接蛋白43的蛋白质调控因子

缝隙连接通道是连接相邻心肌细胞的特殊通道,其主要功能是介导心肌细胞间化学信息的交换和心肌细胞间的电耦联,其表达和功能的正常是心脏整体正常电活动的重要保证。心脏缝隙连接通道由不同的连接蛋白组成,心室的缝隙连接通道主要由连接蛋白43组成。心脏缝隙连接通道的功能受胞内pH值、胞内Ca2+浓度、ATP浓度、连接蛋白的磷酸化状态、跨通道电压和一些神经体液因子等的调控。近年的研究发现,心肌细胞内存在一些能够与连接蛋白43存在相互作用的蛋白质,并且发现这些蛋白质能够通过这种相互作用改变连接蛋白43的结构状态或磷酸化状态,从而进一步发挥调控缝隙连接通道的功能。现仅就近年来发现的与Cx43存在相互作用的蛋白质及其调控作用综述如下。     

辛伐他丁减少Connexin43表达和兔粥样硬化斑块形成

目的:证明辛伐他丁可以通过减少缝隙连接蛋白43(Connexin43, Cx43)的表达影响粥样斑块的形成及稳定性. 方法:高脂饲料喂养建立粥样硬化模型,治疗组给予辛伐他丁口服,活体内的Cx43和巨嗜细胞检测使用免疫组织化学方法,培养平滑肌细胞的Cx43检测使用免疫印记方法,Cx43的半定量使用计算机图像处理. 结果:药物干预的培养细胞和模型治疗组中Cx43的表达均明显减少,斑块的组成中,炎症细胞减少50%,胶原纤维平滑肌细胞含量增加. 结论: Cx43介导的细胞间通讯在粥样硬化形成中起重要作用,同时辛伐他丁减少Cx43的表达可以增加斑块的稳定性,Cx43成为动脉粥样硬化治疗中一个新的治疗靶点.     

肾小管上皮细胞在高糖环境下其间隙连接蛋白与细胞通透性的关系

目的 观察肾小管上皮细胞在不同浓度葡萄糖干预下其间隙连接蛋白（connexin43）表达与细胞通透性的关系。方法 用不同浓度葡萄糖刺激肾小管上皮细胞,通过免疫荧光法检测connexin43蛋白的表达;用RT-PCR分析connexin43 mRNA的表达。使用Transwell小室法测定各组细胞对白蛋白的通透情况,并观察以上指标之间的变化有无相关性。结果 肾小管上皮细胞在高糖干预下间隙连接蛋白表达递减,单层肾小管上皮细胞通透性升高。结论 高糖环境下肾小管上皮细胞间隙连接蛋白的表达与细胞对白蛋白的通透性呈负相关。     

耳蜗螺旋动脉上连接蛋白43与老年性耳聋的关系研究

背景　老年性耳聋是指随着年龄的增长而缓慢出现听力阈值增加的疾病,耳蜗螺旋动脉（SMA）在维持耳蜗血供和听力方面发挥重要的作用。连接蛋白43（Cx43）在血管壁上广泛表达,对血管的舒缩功能有着重要的影响,但Cx43在SMA上的表达与老年性耳聋的关系尚不清楚。目的　以D-半乳糖（D-gal）诱导的老年性耳聋豚鼠为研究对象,研究SMA上Cx43与老年性耳聋的关系。方法　2018年5月,将无耳疾3月龄SPF级豚鼠36只随机分为Control组、NS组、D-gal组,各12只。D-gal组在正常饲养的基础上,颈背部皮下注射D-gal 500 mg•kg-1•d-1;NS组在正常饲养的基础上,颈背部皮下注射0.9%氯化钠溶液（体积等同D-gal组）;对照组正常饲养,不做任何处理;共6周。取Control组豚鼠交配产下的3只新生豚鼠,处死分离SMA,贴壁法培养原代SMA血管平滑肌细胞（VSMCs）,鉴定后取第3代SMA VSMCs制备细胞衰老模型：对照组为正常培养 48 h;衰老组为在正常培养基础上加入30 g/L D-gal培养48 h;AAP10组为在正常培养的基础上加入100 nmol/L AAP10预处理,而后加入30 g/L D-gal培养48 h。采用Morris水迷宫测试实验检测Control组、NS组、D-gal组豚鼠测试第1、2、3、4、5天逃避潜伏期及第6天穿越平台的次数;比较Control组、NS组、D-gal组豚鼠听性脑干反应（ABR）阈值,肝组织、脑组织、血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平,SMA上Cx43 mRNA及Cx43表达水平。比较对照组、衰老组、AAP10组VSMCs内SOD活性、MDA水平,VSMCs中Cx43表达水平。结果　组别与时间在豚鼠逃避潜伏期中存在交互作用（F交互=6.99,P交互<0.05）;组别与时间在豚鼠逃避潜伏期中主效应显著（F组间=53.43,F时间=38.15;P组间<0.05,P时间<0.05）。D-gal组豚鼠测试第3、4、5天逃避潜伏期长于Control组和NS组（P<0.05）;D-gal组豚鼠测试第6天穿越平台次数少于Control组和NS组（P<0.05）。D-gal组豚鼠ABR阈值高于Control组和NS组,肝组织、脑组织、血清SOD活性低于Control组和NS组,肝组织、脑组织、血清MDA水平高于Control组和NS组（P<0.01）。衰老组VSMCs内SOD活性低于对照组和AAP10组,MDA水平高于对照组和AAP10组（P<0.01）;AAP10组VSMCs内SOD活性低于对照组,MDA水平高于对照组（P<0.01）。D-gal组豚鼠SMA上Cx43 mRNA及Cx43表达水平低于Control组和NS组（P<0.01）。衰老组VSMCs中Cx43表达水平低于对照组和AAP10组（P<0.05）;AAP10组VSMCs中Cx43表达水平低于对照组（P<0.05）。结论　D-gal致衰老情况下豚鼠SMA上Cx43表达水平的变化可能与老年性耳聋有关,为临床后续的研究方向奠定了基础。