食品中黄曲霉毒素B_1的免疫检测系列研究

本研究根据化学免疫原理,对食品中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的免疫检测进行了系列研究,在国内首次合成AFB_1人工抗原AFB_1—oxime—BSA和包被抗原AFB_1—oxime—TTH。分别用自制抗原和国外抗原(sigma公司)免疫动物制备抗体,并进行了比较。结果表明自制抗原产生的抗AFB_1血清特异灵敏,效价达10~6以上,工作滴度为1∶30000,与国外抗原制得的抗血清相当。建立的间接双抗体     

卵黄抗体lgY用于诊断和治疗的研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulin)又称lgY或卵黄抗体,是用特异性抗原注射未经免疫的产蛋母鸡后,母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中,成为蛋黄中唯一存在的抗体[1].     

媒介对丝虫病的免疫力:疾病控制的新可能

研究媒介昆虫如何抗感染有助于制定更为成功的防制策略。本文报道了埃及伊蚊对彭亨丝虫感染免疫反应的实验结果。1.免疫血淋巴对微丝蚴的体外杀伤作用从经微丝蚴免疫的不易感的埃及伊蚊中取血淋巴,分别与抗已知昆虫免疫蛋白(Sar-cotoxin IA,ILA和Sarcolectin)的特异抗体一起孵育过夜。抗体来自提纯的麻蝇蛋白,抗体稀释为1:30,血淋巴在含HEPES的TC199缓冲液中稀释为1:3。将3μl抗体/抗原     

抗大肠杆菌O157鸡卵黄抗体的初步研究

目的以煮沸15min灭活后的大肠杆菌O157为抗原,分4次免疫产蛋鸡,获取高免卵黄。经水稀释法去脂、超滤、盐析等粗分离,DEAESephadexA-50离子交换层析纯化,得到产物IgY为电泳单点纯,且仍保持效价在1∶104以上。从分离纯化过程中的跟踪检测表明,其卵黄制备的IgY抗体产量多、效价高、特异性强,可进一步用于大肠杆菌感染的检测研究。     

卵黄抗体IgY用于诊断和治疗的研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白（eggyolk immunoglobulin）又称IgY或卵黄抗体，是用特异性抗原注射未经免疫的产蛋母鸡后．母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中，成为蛋黄中唯一存在的抗体。近年来卵黄抗体逐渐引起人们的注意，而且得到越来越广泛的应用．主要与其生物学的优势及其制备简单，保存方便等优点有关。     

Mi-2抗原的制备抗Mi-2抗体的检测及其意义

目的　制备Mi 2抗原 ,测定自身免疫性结缔组织疾病 (CTD)中的抗Mi 2抗体 ,并初步探讨其临床意义。方法　制备兔胸腺丙酮粉 ,提取粗Mi 2抗原 ,用离子交换层析法纯化抗原。应用免疫双扩散法检测 315份CTD和 4 0份正常对照血清中的抗Mi 2抗体。分析抗Mi 2抗体在CTD中的分布 ,并比较皮肌炎 (DM)患者中抗Mi 2抗体阳性组与阴性组的临床特点。结果　自制的Mi 2抗原与标准Mi 2抗血清免疫双扩散出现清晰的沉淀线。经DE5 2离子交换层析 ,Mi 2抗原在 0 1～0 2mmol LNaCl洗脱组分中被检出。抗Mi 2抗体在DM和多发性肌炎中的阳性率分别为 2 6 1%(12 4 6 )和 4 5 %(2 4 4 )。在其他CTD和正常人均未检测到抗Mi 2抗体。抗Mi 2抗体对DM的特异性为 99 4 %。对DM而言 ,阳性组多以皮肤损害为首发表现 ,病程中多出现V型或围巾型皮疹 ;而阴性组常以肌肉症状首发 ,病程中发热多见 ,两组间差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　兔胸腺丙酮粉中含有Mi 2抗原成分。抗Mi 2抗体是一种对DM诊断较为特异的自身抗体 ,该抗体阳性的DM可能是DM中的另一亚型。     

夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原的研究(英文)

目的建立以多抗为捕获抗体和单抗为检测抗体的夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原。方法利用杂交瘤技术制备抗旋毛虫单抗;旋毛虫抗原免疫家兔,分离纯化兔血清,制备兔抗旋毛虫多抗。多抗作为捕获抗体包被酶标板,单抗为检测抗体,选择适宜多抗和单抗浓度,建立夹心ELISA方法,再利用亲和素和生物素的高结合力连接起标记了生物素的抗体和DNA片段,将抗原抗体特异反应的免疫技术同无限扩增DNA片段的基因检测技术结合,利用PCR反应对DNA片段的扩增能力,提高检测灵敏度。结果制备了兔抗旋毛虫多抗,间接ELISA法筛选出与多种寄生虫抗原无交叉反应的单抗F4C6,夹心ELISA检测旋毛虫抗原最低浓度为0.05μg/ml,免疫PCR方法检测最低浓度为0.1ng/ml。结论首次建立夹心免疫-PCR检测旋毛虫抗原的方法,检测旋毛虫抗原的灵敏度高于传统ELISA方法104倍。     

人突触相关蛋白抗原表位分析及多克隆抗体的制备

目的　泡沫化细胞差异表达基因FRG4经生物信息学分析 ,与人突触相关蛋白基因有很高同源性 ,经联机检索 ,有关突触相关蛋白的研究很少 ,与脂蛋白代谢、泡沫细胞形成和凋亡的关系没有报道。本文在对泡沫化相关基因FRG4分析的基础上 ,利用计算机软件进行抗原表位分析 ,制备特异的抗人突触相关蛋白的多克隆抗体 ,为进一步深入研究其表达和功能提供条件。方法与结果　①选取抗原多肽 :利用ExPASy软件和BioEdit软件对FRG4cDNA序列进行亲水性分析 ,预测其二级结构 ;使用Lasergene99软件预测其抗原决定族 ;根据亲水性、二级结构、偶联难易及实验难度选取抗原 13肽PKLVKEEVFWRNY。②多肽合成及交联 :采用美国ABI公司的多肽自动合成仪 ,以固相合成法合成 ,合成产物经高效液相色谱纯化检测 ,纯度达到 90 %以上 ;抗原多肽与血兰蛋白用BDB法交联 ,与不完全弗氏佐剂等体积混合包被。③动物免疫 :多点皮下注射抗原免疫新西兰兔 ,每两周强化免疫一次 ,第三次免疫后 10天取耳血测抗体效价 (ELISA法 )。④抗血清收获及检测 :第四次免疫后第十至十四天经颈动脉放血 ,分离抗血清 ,冷冻抽干 ,- 2 0℃保存。高效液相色谱检测显示抗体纯度达 82 .79% ,抗体滴度为 1∶16 0 0 0 ,免疫印迹方法检测在 4 0kDa处有一条带 ,与软件分析     

抗猪带绦虫六钩蚴独特型抗体疫苗对猪体免疫保护作用的研究

目的本研究在证实猪带绦虫六钩蚴抗原具有很高的免疫保护性的基础上，探讨六钩蚴抗独特型抗体作为六钩蚴抗原替代物对猪体的保护作用，为研制猪体囊虫疫苗提供理论基础。方法用六钩蚴粗制抗原免疫家兔，制备兔抗六钩蚴抗体(Ab1)，再用Ab1免疫昆明小白鼠，制备抗独特型抗体(Ab2)，免疫猪体，以3节猪带绦虫孕卵节片攻击感染，90d后剖杀，观察感染情况。结果5头试验猪只有1头在膈肌发现1个囊虫，而2头阳性对照猪均被感染，各检查部位囊虫数平均为4．5个／100g和3．2个／100g。结论抗猪带绦虫六钩蚴独特性抗体Ab2对猪体有较强的免疫保护作用。     

抗乙肝免疫核糖核酸治疗慢性乙肝100例

抗乙肝免疫核糖核酸(IRNA)是从用乙肝抗原免疫羊的淋巴结、脾脏和肝脏中提取的核糖核酸,是一种免疫调节剂,可提高机体细胞免疫功能,诱导产生干扰素。用于治疗乙肝,可使乙肝抗原阴转,抗体产生,肝功能恢复正常。 一般资料:治疗组100例均符合1984年病毒性肝炎学术会议修订的诊断分型标准,