药物治疗的新靶点——细胞凋亡

细胞凋亡是一种由基因调控的细胞程序性死亡过程。多种蛋白质和信号分子参与细胞凋亡过程并进行精确地调控。细胞凋亡可分为caspase依赖性和非caspase依赖性两大途径。其中caspase依赖性途径又分为内源性(线粒体介导)和外源性(死亡受体介导)的凋亡途径。本文对其中一些关键性调控蛋白功能形成初步认识,并尝试把这些蛋白质作为药物治疗的新靶点,借此实现对细胞凋亡过程的干预,为肿瘤、神经退行性疾病、自身免疫性疾病治疗提供新的思路和策略。     

细胞凋亡相关基因与肿瘤多药耐药的关系

肿瘤多药耐药(Multi-drug resistance, MDR)系一种药物作用于肿瘤使之产生耐药性后,该肿瘤对未曾接触过、与结构无关、机制各异的多种抗肿瘤药也具有交叉耐药性的现象.细胞凋亡(Apoptosis)是化疗药物杀伤肿瘤细胞的共同通路,其受细胞凋亡相关基因调控.越来越多的研究表明,药物诱导肿瘤细胞发生凋亡依赖于完整且正常的凋亡途径,如肿瘤细胞的凋亡途径出现缺陷或抗凋亡机制增强,则可表现为对药物的耐药性.为此,本文就细胞凋亡相关基因及其蛋白与细胞凋亡及 MDR的关系作一简要综述.     

Par-4特异诱导肿瘤凋亡及其机制的研究新进展

前列腺凋亡反应基因-4(prostate apoptosis response gene-4,par-4)基因是最早在前列腺癌细胞中发现,这个基因在正常细胞和肿瘤细胞中均可表达,其编码产物前列腺凋亡蛋白-(prostate apoptosis response protein,Par-4)可通过内源性和外源性途径选择性的诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有影响。Par-4发挥作用可包括内源性Par-4裂解和磷酸化、内源性Par-4转运Fas/Fas L并激活Fas/Fas L促凋亡通路、及外源性的Par-4和细胞膜上的GPR78结合诱导细胞凋亡等过程。特别是Par-4的外源性途径在肿瘤的靶向治疗中有很重要的应用价值。本文就Par-4诱导凋亡机制及外源性Par-4在肿瘤治疗方面的最新研究进展进行综述。     

肝星状细胞凋亡信号途径及其药物治疗的研究进展

各种致病因素所致慢性肝损伤均可引起肝纤维化,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的激活是肝纤维化发生发展的中心环节,促进其凋亡被认为是肝纤维化逆转的始动因素。HSC的凋亡机制十分复杂,调控活化HSC凋亡的信号转导途径研究甚少。目前已知的HSC凋亡信号途径主要包括线粒体途径、死亡受体途径和非死亡受体途径。基于这些信号转导途径,研究出选择性诱导HSC凋亡的药物将成为抗肝纤维化治疗的重要手段。该文将对HSC凋亡信号转导通路的最新进展进行综述,并对目前已知的具有促HSC凋亡作用的药物进行总结分类。     

凋亡抑制蛋白的研究进展

凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins．IAPs），是一类高度保守的内源性抗凋亡基因家族表达产物．广泛存在于许多物种如病毒、真核生物、哺乳动物中，起着抑制细胞凋亡的作用。目前已报道该家族成员有十多种，如NAIP、XIAP、Survivin、BRUCE和Livin等。IAPs主要有三个结构域（BIR、RING与CARD结构域），共有单位BIR域能与其它基序连接，非BIR区能使IAPs的功能多样化或调节IAP家族蛋白的表达。IAPs主要通过caspase蛋白酶激活级联反应途径及肿瘤坏死因子受体（TNFR）介导的信号转导途径抑制细胞凋亡，     

人参皂甙对脐血细胞凋亡的影响及其与PKC传导途径的关系

目的：探讨人参皂甙对脐血细胞凋亡的抑制作用及其与细胞内蛋白激酶C(PKC)信号传导系统的关系。方法：采用流式细胞仪测定不同刺激条件下的脐血单个核细胞凋亡率。结果：人参皂甙对脐血单个核细胞的凋亡有抑制作用，且凋亡率与其浓度呈负相关，PKC激活剂佛波酯(PMA)单独作用也可抑制细胞凋亡作用，人参皂甙抑制脐血细胞凋亡的作用可被PKC抑制剂H7抑制，此作用随H7浓度增加而增大。结论：人参皂甙具有类似造血生长因子的作用，可以抑制脐血细胞的凋亡，此作用与PKC信号传导途径激活有关。     

P53促凋亡蛋白家族和p53的相互作用与细胞凋亡的研究进展

肿瘤的形成是原癌基因和抑癌基因遗传性变化如增加、丢失、突变，逐步积累的过程。同时，肿瘤又是遗传因素和后天因素共同作用的多因子疾病。p53是一个肿瘤抑制蛋白，它首先可通过影响编码细胞周期相关蛋白质的基因表达来调控细胞周期的G1停滞．同时它还会因为DNA的损伤增多．诱导细胞发生细胞凋亡。但p53诱导细胞凋亡的机制多年来一直不太清楚．而最近发现的ASPP(apoptosis stimulating protein of p53)蛋白家族对p53诱导细胞凋亡的机制的研究有了新的进展。本文就此作一综述。     

凋亡与肿瘤化疗药物

目前已发现，正常组织和肿瘤组织内部均会发生自发性细胞凋亡，而一旦细胞凋亡受抑就会导致肿瘤的发生、发展和恶化。肿瘤化疗药物诱导凋亡的可能机制是基础与临床工作者密切关注的问题，也是肿瘤治疗很有前途的治疗方向。１凋亡及其可能机制１．１凋亡的概念：凋亡是由于...     

参术胶囊对脾虚胃癌小鼠细胞凋亡线粒体途径下游基因的影响

<正>前期研究表明,具有健脾功效的中药五类新药参术胶囊对胃癌及癌前病变具有治疗和预防作用[1-3],但其机制尚未完全阐明。目前,用药物治疗肿瘤的重要机制之一就是诱导细胞凋亡[4]。为研究参术胶囊治疗胃癌与诱导细胞凋亡之间的关系,我们采用TUNEL-AP法和免疫组化法研究参术胶囊对脾虚胃癌小鼠细胞凋亡线粒体途径下游基因的影响。1材料与方法1.1主要试剂和仪器原位细胞死亡检测试剂盒(美国     

肺癌外周血中Survivin mRNA表达及其对预后的判断价值

<正>Survivin是新近发现的凋亡抑制蛋白(IAP)家族中新的一员,其抗凋亡作用的机制可通过Caspase途径和非Caspase途径实现,属于一种结构独特的哺乳类凋亡抑制蛋白(IAPs)家族成员,Survivin同时具有肿瘤组织特异性高表达的特性,研究已证实多种常见肿瘤如胃癌、大肠癌、     

内质网应激凋亡通路中的耐药节点

内质网应激 (endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的细胞凋亡是一种新的凋亡途径,ERS过长过强,可多途径诱导细胞凋亡.肿瘤化疗药物的作用机制是诱导肿瘤细胞发生凋亡,因此凋亡信号传导通路在肿瘤治疗中尤为关键.凋亡通路中任意环节缺陷都能导致肿瘤细胞对凋亡的耐受.该文就内质网中影响凋亡信号传导通路中发挥关键作用的一些重点耐药分子作一综述,包括P-gp分子、IAP家族、Bcl-2耐药家族中的关键蛋白以及内质网钙泵IP3R.     

α-维尼非林经线粒体凋亡途径诱导K562细胞凋亡

目的旨在研究α-维尼非林(α-viniferin)对人慢性髓系白血病细胞K562的作用与相关机制。方法 MTT法评价α-viniferin对K562细胞的细胞毒活性。采用细胞形态学和生物化学方法检测细胞凋亡。通过化学荧光法对细胞内线粒体膜电位、caspase-9、caspase-3活性分析。通过半定量RT-PCR表达分析来确定Bcl-2家族相关基因在α-viniferin诱导K562细胞凋亡中的作用。结果α-viniferin能抑制K562细胞增殖,呈剂量和时间依赖性,IC50为13.61 mg·L-1。α-viniferin引起K562细胞出现死亡并伴随有染色质聚集、核破碎、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征;此外还伴随有线粒体膜电位显著降低,caspase-9、caspase-3活性升高等现象;α-viniferin(2~32 mg·L-1)引起K562细胞caspase-3 mRNA表达持续升高,Bax、Bad、Bim、Bid促凋亡基因mRNA表达增加,而Bcl-2、Bcl-xL抗凋亡基因mRNA表达持续下降。结论α-viniferin通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。     

人卵巢癌细胞株3AO诱导凋亡的研究进展与评价

目的：细胞凋亡是各种抗癌药物诱导癌细胞正常死亡的主要方式，本文旨在对人卵巢癌细胞株3AO诱导凋亡进行评价。方法：采用国内外文献综述方法。结果及结论：通过对人卵巢癌细胞株3AO诱导及促进凋亡的因素及抑制凋亡的因素进行阐述，更多地了解诱导、促进及抑制3AO凋亡的作用机制，更好地指导抗癌药物的临床应用。     

细胞凋亡在白血病的发生和治疗学上的意义

近来细胞凋亡与肿瘤的发生越来越受到重视，本文就细胞凋亡与白血病的发生和治疗方面的关系综述如下。一、细胞凋亡的特征细胞凋亡（apoptosis）是细胞死亡的一种形式，以细胞核的变化为主，在核酸内切酶的作用下，核小体之间连接区的DNA断裂成规律的180－200hP的倍数的片断．最终形成核膜完整的凋亡小体（凝胶电泳呈梯形条带），细胞器完整，胞膜有小泡，皱缩而无破裂。凋亡受生物环境诸多因素的影响，以及受基因调控。二、细胞凋亡的分子生物学机制细胞凋亡可以是生理性的，也可因病理性刺激而诱发。射线、抗癌药物通过破坏DNA双链或抑…     

TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡与临床

TRAIL是最近发现的属肿瘤坏死因子家族新成员 ,它能选择性地杀伤多种肿瘤细胞而对正常细胞没有细胞毒性。它的作用机制主要通过细胞膜的表面死亡受体DR4和DR5介导细胞的凋亡信号 ,激活细胞内的多种诱导细胞凋亡蛋白的表达。主要的途径是通过TRAIL与死亡受体结合后促进DISC的形成和caspase8的激活 ,然后启动非依赖线粒体的凋亡途径和线粒体的凋亡途径。非线粒体凋亡途径通过激活的csapase8直接激活caspase3,从而启动细胞的凋亡。线粒体依赖途径通过激活的tBID导致细胞色素C的释放 ,与Apaf1和caspase9形成凋亡小体导致细胞的凋亡。通过以往的研究表明 ,非融合表达的TRAIL能明显诱导多种肿瘤细胞的凋亡 ,对正常人和猴的肝细胞没有细胞毒性 ,提示非融合表达的人TRAIL蛋白可能是未来最有发展前途的抗肿瘤药物     

谷胱甘肽的耗竭与肿瘤细胞凋亡

细胞凋亡是由一系列基因控制的细胞主动死亡过程，凋亡的通路受到抑制是肿瘤产生的重要原因。凋亡机制的最新研究发现细胞内谷胱甘肽(GSH)的水平与细胞凋亡密切相关。通过GSH的耗竭可以启动肿瘤细胞凋亡。本文综述了GSH的耗竭诱导肿瘤细胞凋亡的分子生物学机制、GSH耗竭剂——GSH合成抑制剂与GSH结合剂的研究进展以及GSH耗竭剂作为肿瘤细胞凋亡诱导剂的应用前景。     

Staurosporine诱导人乳腺癌MCF7/GFP-Bax非受体依赖途径的细胞凋亡对Bax自胞浆至线粒体转移定位的影响

以建立的人乳腺癌MCF7 细胞GFP-Bax稳定表达细胞株(MCF7/GFP-PBax)，观察staurosporine(STS)诱导的非受体途径的细胞凋亡对Bax自胞浆转移定位于线粒体的影响。荧光显微镜观察凋亡细胞Bax从细胞浆至线粒体转移和细胞核染色体断裂，检测STS诱导细胞凋亡的量效和时效关系。免疫荧光法观察GFP-Bax从细胞浆转移至线粒体与定位、细胞色素c(cytochrome c，Cyt-c)释放和Annexin V染色。MTT法测定STS的细胞毒作用，TMRE观测对细胞线粒体膜电位(ΔΨm)与功能的影响。Western blotting方法分析STS诱导的细胞凋亡的信号转导途径和作用机制。结果STS可明显促进Bax从细胞浆转移至线粒体与定位、细胞色素c释放，Western blotting显示JNK特异抑制剂SP600125可抑制STS诱导的细胞pJNK表达，表明STS作用机制与激活JNK信号通路相关。     

凋亡素—候选抗肿瘤制剂

凋亡素是来自于鸡贫血病毒的一个小分子蛋白,能选择性地诱导肿瘤或转化细胞凋亡,对正常的人和鼠二倍体细胞无影响,而且它诱导的凋亡不依赖肿瘤抑制基因p53,不受原癌基因bcl-2的抑制,相反过表达的bcl-2对其还有促进作用。对凋亡素及其选择性诱导细胞凋亡机制的深入研究,在肿瘤的预防和治疗中具有重要的理论和实践意义。凋亡素有望发展为一新的抗肿瘤制剂。     

葫芦素B通过激活线粒体途径诱导人肺癌NCI-H460细胞凋亡

目的探讨葫芦素B对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法体外培养NCI-H460细胞,MTT法观察葫芦素B对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。采用罗丹明123(Rhodamine 123)染色,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm),采用Western blot方法检测线粒体内和胞浆内的细胞色素C。结果葫芦素B对NCI-H460细胞的增殖有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性;葫芦素B处理组细胞形态发生显著改变,细胞皱缩、变圆,可见胞核染色质浓缩;流式细胞仪检测结果显示葫芦素B诱导NCI-H460细胞凋亡,呈剂量依赖性。葫芦素B处理后线粒体膜电位显著下降,细胞色素C由线粒体释放到胞浆中。结论葫芦素B可以抑制人肺癌NCI-H460细胞的增殖并诱导细胞凋亡,线粒体途径参与葫芦素B诱导的NCI-H460细胞凋亡。