产酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯茵的检测及耐药性分析

目的 研究某医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌耐药情况.方法 对2006年11月-2007年7月分离的139株大肠埃希菌和102株肺炎克雷伯菌分别采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验检测质粒AmpC酶;并用K-B纸片扩散法进行药敏试验,根据美国临床实验室标准化委员会2002年判断标准分析结果 .结果 139株大肠埃希菌产ESBLs、Ampc酶及ESBLs+ampC酶菌株的检出率分别为48.20%、9.35%、2.88%;102株肺炎克雷伯菌产ESBLs、AmpC酶及ESBLs+ampc酶菌株的检出率分别为55.88%、8.82%、2.94%.产ESBLs菌株对头孢菌素类、氨基糖苷类、单环酰胺类抗菌药物耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P<0.001～0.05).除碳青霉烯类及头孢他啶等抗生素外,产AmpC酶菌株对二、三代头孢菌素及喹诺酮类等药的耐药率均明显增高(P<0.001～0.05).结论 耐药酶的产生是导致细菌耐药的重要原因之一,合理使用抗菌药物对预防耐药菌的产生和控制医院感染非常重要.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解铜仁地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性,为临床用药提供依据。方法双纸片协同试验及纸片扩散确证试验检测ESBLs,根据NCCLS 2005年判断标准分析结果。结果从790株阳性标本中检出产ESBLs菌株275株,总检出率为34.8%,其中大肠埃希菌产ESBLs 177株,肺炎克雷伯菌98株,检出率分别为22.4%和12.4%;产酶菌株对头孢菌素耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs细菌对青霉素类和头孢类抗菌药物大多耐药,而对亚胺培南与美罗培南敏感性好。结论 ESBLs产酶株对多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南与美罗培南敏感,及时监测产ESBLs的发生率及其耐药趋势,指导临床用药至关重要。     

2003-2006年医院感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性分析

目的分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及其耐药性。方法细菌药敏试验采用纸片扩散法（K-B法）;双纸片协同试验及纸片扩散确诊试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;三维试验检测头孢菌素酶（AmpC酶）。结果ESBLs和AmpC酶的检出率分别为34.6%和5.0%;同时产ESBLs和AmpC酶的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的分离率为2.4%;呼吸内科及泌尿外科住院患者的痰和尿液中ESBLs检出率较高;产ESBLs菌对美罗培南、亚胺培南以外的其他15种抗菌药物表现为不同程度耐药。结论产酶菌检出率逐年上升,耐药性不断增强,实验室应加强监测。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌AmpC酶的检测

目的 了解医院大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产AmpC酶情况.方法 按NCCLS推荐的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验,对369株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs酶的检测,并用改良三维试验、三维试验抑制试验及AmpC酶诱导试验对表型可疑产AmpC酶的菌株进行检测.结果 73株表型可疑产AmpC酶的菌株中检出34株产AmpC酶,大肠埃希菌24株,肺炎克雷伯菌10株,其中有5株大肠埃希菌、2株肺炎克雷伯菌同时产ESBLs酶;2株肺炎克雷伯菌诱导产AmpC酶.结论 产生AmpC酶是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢类抗菌药物耐药的又一重要机制,实验室应对其检测与监测给予足够重视,以指导临床合理选用抗菌药物、减缓对细菌耐药的选择性压力、避免医院感染的发生和流行.     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶检测

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产质粒β-内酰胺酶的类型、检测方法及耐药性. 方法用NCCLS确证试验检测超广谱β-内酰胺酶,根据表型、纸片协同试验及头孢西丁三相试验检测AmpC酶. 结果 835株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,共检测出产超广谱β-内酰胺酶菌株220株,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌总ESBLs发生率为26%;根据头孢西丁三相试验结果,表现为产AmpC酶的菌株共有36株,检出率为4.31%,表型鉴别高产AmpC酶,表现为产AmpC酶的菌株共有37株,检出率为4.43%,与头孢西丁三相试验符合率为97.3%;纸片协同试验表现为产AmpC酶的为32株,检出率为3.83%,与头孢西丁三相试验符合率为88.9%. 结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶为主;表型筛选法检测AmpC酶结果可靠、方法简便,易于在临床实验室中推广应用.     

同产ESBLs及AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的分析儿童感染同产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌的情况及其耐药性,以指导临床合理用药。方法对2009年1月-2010年1月医院就医儿童分离肺炎克雷伯菌122株,采用PCR法检测ESBLs酶基因blaTEM,blaSHV、blaCTX-M-9群,AmpC酶基因blaDHA、blaACT/MIR;K-B纸片琼脂扩散法检测肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果 122株肺炎克雷伯菌中单纯AmpC酶基因阳性菌株7株,阳性率5.7%,单纯ESBLs基因阳性菌株37株,阳性率30.3%,ESBLs和AmpC酶基因同时阳性菌株检出率为9.0%,非产ESBLs和AmpC菌株67株,检出率55.0%;同产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌除了对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其余β-内酰胺类抗菌药物和头孢菌素类高度耐药,产酶菌株耐药率明显高于非产酶菌株。结论儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的情况已经出现,产酶菌株对常用β-内酰胺类抗菌药物耐药率较高,其主要原因是肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶;临床治疗应根据药敏指导合理使用抗菌药物。     

肺结核患者产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的感染及耐药性分析

目的调查本院肺结核病与非结核病患者大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的感染及耐药现状. 方法搜集肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌下呼吸道感染共575株,ESBLs的检测用纸片扩散表型确证. 结果肺结核患者的肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株为34.9%、大肠埃希菌为60.5%;而非结核患者的ESBLs株感染率明显低,后者ESBLs株感染率分别为20.8%和48.0%,上述产ESBLs菌株对头孢菌素第一、二代以及青霉素类、四环素类、磺胺类和喹诺酮类呈高度耐受性,有38%～59%的产ESBLs对氨曲南和第三代头孢菌素耐药,但对氨基糖苷类和碳青酶烯类的敏感性较高. 结论肺结核患者继发下呼吸道感染中ESBLs的总检出率为56.2%,以大肠埃希菌为主,ESBLs菌广泛耐药,应高度重视产ESBLs株的检测和药物敏感性试验.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

[目的]了解本院产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌分布及耐药特点。[方法]采用NCCLS推荐的纸片扩散法对我院从临床标本中分离的107株大肠埃希菌和95株肺炎克雷伯菌进行ESBL的确诊试验,并应用ATB G-5药敏卡对20种抗生素进行药敏试验。[结果]107株大肠埃希菌分离到产ESBLs菌株44株,检出率为41.12%,95株肺炎克雷伯菌分离到产ESBLs菌株35株,检出率为36.84%。ESBLs检出模式以单用头孢噻肟、头孢噻肟/棒酸一组为底物阳性率最高,分别占68.18%和62.85%;单用头孢他定,头孢他定/棒酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.18%和肺炎克雷伯菌62.85%的漏检。产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类的耐药率为55%～100%;但对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率大于77%,对亚胺培南,美洛培南的敏感率均大于91%。[结论]本院分出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重,且产ESBLs菌多呈多重耐药。建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况,采用多种底物检测ESBLs。碳青酶烯类应作为治疗产ESBLs菌株的首选药物。     

质粒介导产AmpC酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC基因型检测与分析

目的了解台州、温州两地临床分离的由质粒介导的产AmpC酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ampC耐药基因型。方法采用酶提取三维试验、头孢西丁三相试验、氯唑西林双纸片协同法等方法测定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC酶;采用PCR法测定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ampC耐药基因型。结果在20株产AmpC酶的大肠埃希菌中,检测到DHA基因有5株（25%）,检测到MIR基因有2株（10%）,检测到FOX基因有2株（10%）;在20株产AmpC酶的肺炎克雷伯菌中,检测到DHA基因有7株（35%）,检测到MIR基因有1株（5%）;在产AmpC酶的大肠埃希菌中,有1株ESBLs阳性的菌株,AmpC氯唑西林协同试验阳性,但AmpC三维试验与头孢西丁三维试验均阴性,在质粒中同时检测到DHA基因与MIR基因。结论两地临床分离的由质粒介导的大肠埃希菌以DHA基因为主,阳性率25%,MIR、FOX基因为辅,阳性率各10%;由质粒介导的肺炎克雷伯菌ampC耐药基因以DHA基因为主,阳性率35%,MIR基因为辅,阳性率为5%;未检到其他ampC耐药基因。     

产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析 FREE

目的了解某院大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）的分布及耐药特点。方法对该院2007年10月-2008年9月各科送检标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用双纸片扩散法进行ESBLs确证试验,K B纸片扩散法进行药敏试验。结果分离出大肠埃希菌766株,其中产ESBLs株443株（57.83%）;肺炎克雷伯菌632株,产ESBLs株355株（56.17%）。产酶菌株主要分离自痰（557株,69.80%）、尿（149株,18.67%）等标本。产ESBLs菌对亚胺培南/西司他丁、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦敏感性高,对第一～三代头孢菌素类几乎全部耐药,对喹诺酮类、氨基糖苷类等存在交叉耐药。结论产ESBLs菌感染严重,以下呼吸道感染最多,其次为泌尿道感染;耐药率较高,亚胺培南/西司他丁、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦对其保持较高的抗菌活性。     

呼吸重症监护室常见细菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶的检测及耐药性研究

目的了解呼吸重症监护室（RICU）分离的常见革兰阴性（G-）耐药菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药谱特征。方法采用酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株,以美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株,纸片扩散法及E test进行药物敏感性检测。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、同时产AmpC酶和ESBLs的细菌分别为28株(16.67%)、71株(42.26%)和12株(7.14%)。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高,为57.14%;ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,其次为大肠埃希菌,分别为71.70％和55.81%。单产AmpC酶菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性,耐药率分别为3.57％和28.57%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为2.82％、32.39％和25.35%;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。结论RICU常见G-耐药菌的AmpC酶和ESBLs检出率较高,该类菌对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。     

呼吸重症监护室产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及基因型

目的了解深圳地区2所三级综合医院呼吸重症监护室（RICU）分离的革兰阴性（G-）菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药性与基因型特征。方法选择分离自上述2所医院RICU的对第一、二代及1种以上第三代头孢菌素耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法及E test进行药敏试验,酶提取物三维试验检测单产AmpC酶,美国临床实验室标准化研究所 (CLSI)推荐的表型筛选和确证试验检测产ESBLs菌株,聚合酶链反应（PCR）通用引物扩增AmpC酶和ESBLs基因及其序列测定以确定基因亚型。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、合产AmpC酶和ESBLs的菌株分别为9株（9.38%）、52株（54.17%）和10株（10.42%）。单产AmpC酶菌株对头孢吡肟和亚胺培南具有较高的敏感性,耐药率分别为33.33％和0.00%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为0.00％、34.62％和19.23%;合产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。检出AmpC酶基因型为DHA 1和ACT 1,分别占76.92％和26.08%;ESBLs基因型为CTX M系列和SHV 5,分别占96.77％和3.23%。结论该2所综合医院RICU存在产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M、SHV型ESBLs的G-菌流行株,其对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感,值得临床关注。     

产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因的检测 FREE

目的了解某地区产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况及耐药情况。方法对临床分离的75株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs, K B纸片扩散法对6种氨基糖苷类抗生素做药敏试验,并采用聚合酶链反应（PCR）检测AMEs基因。结果75株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌37株（49.33％）。产ESBLs菌对氨基糖苷类抗生素耐药率(包括中介株)：庆大霉素78.38%,链霉素75.68%,卡那霉素67.57%,妥布霉素64.86%,奈替米星24.32%,阿米卡星13.51%;共检出5种基因,其中以aac(3) Ⅱ（64.86%）和aac(6′) Ⅰ（45.95%）为主,其次为ant(3＂) Ⅰ（29.73%）、ant(2＂) Ⅰ（10.81%）、aac(3) Ⅰ（5.41%）,未检出aac(6′) Ⅱ;除ant(2＂) Ⅰ和aac(3) Ⅰ外,其余3种基因检出率均高于非产ESBLs菌株,且2个基因携带率也明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.05)。结论该地区产ESBLs大肠埃希菌携带AMEs基因的比率较高,对氨基糖苷类抗生素的耐药率亦高,应加强监测与防控。     

社区及医院感染中产β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌细菌耐药性及质粒分析

目的探讨社区和医院感染中产ESBLs的大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)耐药性及细菌质粒谱特点. 方法药敏试验采用改良Kirby-Bauer法,细菌质粒DNA采用碱变性少量快速提取法,用χ2检测. 结果医院感染ECO耐药率明显高于社区感染(P＜0.001),ECO细菌质粒较KPN分子量大,表现多源性、多样性、分布较广,仅在ECO中发现3对同源基因质粒谱. 结论医院感染致病ECO有多源多样的细菌耐药质粒,为医院感染顽固的耐药菌,应加强医院感染易感因素控制,以防感染流行.     

耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶的检测及耐药性基因分析

目的对耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行检测及其耐药基因进行分析,探讨产AmpC酶基因对其耐药表型的影响。方法采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用双纸片确诊试验测定ESBLs,PCR扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定确定其基因型。结果 72株耐头孢西丁肺炎克雷伯菌中AmpC酶阳性有45株,阳性率为62.5%(45/72),3株为CMY-2型,43株为DHA-1型,其中在1株菌株中同时存在CMY-2和DHA-1两种基因;45株AmpC酶阳性肺炎克雷伯菌中33株检测出ESBLs,检出率为73.3%(33/45),23株携带CTX-M基因,15株携带SHV基因,19株携带TEM基因。结论 AmpC阳性肺炎克雷伯菌菌株中ESBLs检出率高,加强监测高产AmpC酶耐头孢西丁肺炎克雷伯菌,治疗相关菌感染以亚胺培南和美罗培南为首选,合并产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌比单产AmpC酶菌株对亚胺培南和美罗培南的耐药率低。     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶基因及其流行病学研究

目的分析医院2008-2010年临床分离阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶及其对抗菌药物的耐药性,并了解其耐药基因的传播机制。方法采用改良三维试验筛选AmpC酶,双纸片扩散法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测ESBLs和AmpC酶的基因,采用微量肉汤稀释法分析细菌耐药性,质粒接合试验分析耐药基因的传播特点。结果同时产ESBLs和AmpC酶菌株对三、四代头孢菌素及含酶抑制剂药物的耐药率均>50.0%;45株改良三维试验阳性,14株ESBLs确证试验阳性,ESBLs和AmpC酶的基因阳性者分别为25、38株,分别以TEM-1型、MIR-3型为主,其次为CTX-M-3、DHA-1型,SHV-11型广谱β-内酰胺酶2株,未检测到CIT、MOX、FOX、ACC型AmpC酶的基因,5株接合试验成功。结论阴沟肠杆菌主要携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶、CTX-M-3型ESBLs和MIR-3型AmpC酶,耐药现状严重,应采取积极有效的措施预防多药耐药菌株的播散与暴发流行。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药分析

目的 分析医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)及肺炎克雷伯菌(KPN)的临床分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法 收集医院2009年1月-2010年12月分离的非重复ECO及KPN,用全自动分析仪进行菌种鉴定及药物敏感性检测,并用头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸和头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸纸片试验确认是否产ESBLs;使用SPSS16.0软件对产与非产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药率进行统计分析.结果 2009、2010年医院分离出ECO分别为94、110株,其中产ESBLs大肠埃希菌检出率分别为41.5％及35.5％;分离出KPN 82、101株,其中产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率分别为14.6％及17.8％;产ESBLs菌株对常用抗菌药耐药率均＞50.0％,与菲产ESBLs菌株的耐药率差异有统计学意义(P＜0.05);2010年检出对碳青霉烯类药物均耐药的4株,ECO及KPN各2株.结论 医院产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌在2009-2010年检出率变化平稳,产ESBLs菌株多药耐药现象明显,碳青霉烯类耐药菌株虽然检出率较低,但已经出现,临床应加强细菌学检查并依照药敏结果合理用药,以控制ESBLs菌株在医院传播及流行.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶( ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率与耐药性,指导临床用药.方法 细菌鉴定、药物敏感试验(MIC法)和ESBLs的检测均采用法国生物梅里埃公司VITEK-2 Compact全自动细菌培养鉴定仪,统计方法采用Whonet 5.3软件.结果 大肠埃希菌的标本来源主要为尿液,占59.8％,肺炎克雷伯菌主要为痰液,占73.0％,产酸克雷伯菌主要为痰液,占75.0％; 714株病原菌中,产ESBLs细菌检出220株,检出率为30.8％,其中493株大肠埃希菌中产ESBLs 174株,检出率为35.3％,189株肺炎克雷伯菌中产ESBLs 36株,检出率为19.0％,32株产酸克雷伯菌中产ESBLs 10株,检出率为31.2％;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率为0,对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率＜4.2％,除亚胺培南外,产ESBLs菌株对其他抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLs菌株,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 产ESBLs细菌的检出率和耐药率呈上升趋势,应加强细菌耐药性的监测.     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药性监测

目的了解医院临床分离出的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要细菌,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的构成比和耐药特征,为临床抗感染治疗提供参考. 方法 2002年1～12月从本院住院患者的各类临床标本,采用Kirby-Bauer(K-B)琼脂扩散法和ESBLs确证试验进行ESBLs的检测. 结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株的检出率分别为43.7%和35.3%;产ESBLs菌株较不产ESBLs菌株表现为对抗菌药物明显高的耐药率,除个别抗菌药物外,两者差异具有显著性P值<0.05,以及高多重耐药率;产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率最低,分别是4.5%和2.1%,其次是阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦,对其他抗菌药物的耐药率均>70%. 结论产ESBLs菌株感染给临床治疗带来较大困难,遏制产ESBLs菌株的产生,要加强细菌耐药性监测、合理应用抗菌药物.