流行性出血热灭活疫苗人体试验的免疫反应观察

由流行性出血热病毒浙１０株感染沙鼠肾细胞，经０．０５％β－丙内酯灭活研制成的流行性出血热灭活疫苗，对８名志愿者免疫３针（０、７、２８天各注射１ｍｌ）。首针免疫后第２８天，血清用ＲＰＨＩＡ，ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ检测流行性出血热抗体，均全部阳转，空斑减少中和试验（ＰＲＮＴ）于第２８天有４人阳转，第４５天又有３人阳转，阳转率８７．５％，ＧＭＴ４０．０。于志愿免疫前及后７、１４、２８、４５天、３个月、０．５年、１年测定其３ＨＴｄＲ掺入法淋转试验显示：首针免疫后７天至３个月以内，其非特异性和（或）特异性Ｔ淋巴细胞转化程度低下，与免疫前相比有显著差异（Ｐ＜０．０５～０．００１）；特异性Ｂ淋巴细胞转化于免疫后１～１．５月明显增高，与免疫前相比Ｐ＜０．０５；非特异性的Ｔ、Ｂ淋巴细胞总的转化率亦以免后１～１．５月为高（Ｐ＜０．０５）。１年后，再加强免疫１针。加强免疫后１月测中和抗体、阳转率１００％、ＧＭＴ１１７．４，比初免高２倍，两者差异极为显著，特异与非特异性Ｔ淋巴细胞转化未再见抑制（Ｐ＞０．０５），而特异性Ｂ淋巴细胞转化极为明显增强（Ｐ＜０．００１）。     

丙肝核酸免疫效果初步观察

目的 观察丙肝核酸疫苗的免疫效果。方法 用丙肝病毒Ｃ＋Ｅ１区基因的真核表达重组质粒ｐＳＶＬ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１免疫蛇毒预处理的ＢＡＬＢ／Ｃ和Ｃ５７ＢＬ小鼠，两周后采用ＥＬＩＳＡ法开始检测抗体滴度。结果 真核表达重组质粒ｐＳＶＬ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１免疫能诱导习免疫应答，产生高水平的特异抗体。特别是Ｃ５７ＢＬ小鼠抗体反应最好，初次免疫就能产生高水平的特异抗体，加强后能持续数周，最高滴度ＯＤ值达１．４５。结     

两种糖脂抗原在结核病血清诊断中的应用

以结核杆菌主要的酚糖酯ＰＧＬＴｂ１和２，３－二酰基海藻糖－２－硫酸酯ＳＬⅣ为抗原，用ＥＬＩＳＡ法检测１２０例肺结核患者、１１２例健康人血清中抗ＰＧＬＴｂ１和ＳＬⅣ的ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体，并与ＰＰＤ抗原进行比较。结果表明：ＳＬⅣ－ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ、ＳＬⅣ－ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ、ＰＧＬＴｂ１－ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ、ＰＧＬＴｂ１－ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ和ＰＰＤ－ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ的特异性分别为９６．４３、９６．４３、９６．４３、９６．４３和９５．５３％；敏感性分别为５１．６７、３２．５０、１４．１７、１８．３３和３３．３３％，符合率分别为７３．２８、６３．３６、５３．８８、５６．０３和６２．９３％，阳性预测值分别为９６．８７、８６．６７、８０．９５、８４．６２和８８．６４％。３种抗原中以ＳＬⅣ最好。     

蛋白A—ABC ELISA用于结核病血清学诊断的效果

报道了蛋白Ａ－ＡＢＣＥＬＩＳＡ（ＳＡ－ＥＬＩＳＡ）检测血清结核抗体的方法和结果，ＳＡ－ＥＬＩＡ检测肺结核病血清６３例，肺外结核患者血清３８例，阳性率分别为８０．６％和８９．５％均显著高于常规ＥＬＩＳＡ（Ｐ〈０．０５）。ＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测正常人血清６５例，假阳性率为３．７％，与常规方法相同，ＳＡ－ＥＬＩＳＡ灵敏度高，重复性好，其所用试剂均很稳定，且来源可靠，故能初步实现酶联免疫试验检测结核抗体工作     

ELISA法和免疫印迹法检测抗ENA抗体的比较

目的：将目前国内新开展的两种检测ＥＮＡ技术,即免疫印迹法（ＩＢＴ）和酶免疫法（ＥＬＩＳＡ）进行对比、分析。方法：用 ＩＢＴ法及 ＥＬＩＳＡ法同时检测 １３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果：２０例健康人,两法均为阴性;８０例结缔组织病患者,两法检出抗 Ｓｍ抗体的符合率为 ９１．３％,检测抗 ＲＮＰ抗体的符合率为 ８２．５％,以上抗体两法的敏感性无显著差异（Ｐ＞０．０５）。检测抗ＳＳＡ抗体,ＩＢＴ法检出率低。抗ＳＳＢ抗体检出率两法亦无显著差异（Ｐ＞０．０５）,符合率为８７．５０％,在１２例ＳＳ的检测中符合率比较低,为５０％。结论：两种方法在检测抗Ｓｍ、ＲＮＰ、ＳＳＢ抗体时,敏感性无显著差异,ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。上述两种方法在临床应用于抗ＥＮＡ抗体的检测中于可互相验证和补充。     

蛋白A－ABC ELISA用于结核病血清学诊断的效果

报道了蛋白Ａ－ＡＢＣＥＬＩＳＡ（ＳＡ－ＥＬＩＳＡ）检测血清结核抗体的方法和结果。ＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测肺结核病血清６３例，肺外结核患者血清３８例，阳性率分别为８０．６％和８９．５％，均显著高于常规ＥＬＩＳＡ（Ｐ＜０．０５），ＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测正常人血清６５例，假阳性率为３．７％，与常规方法相同。ＳＡ－ＥＬＩＳＡ灵敏度高，重复性好，其所用试剂均很稳定，且来源可靠，故能初步实现酶联免疫试验检测结核抗体工作的标准化。     

应用生物素—亲和素系统检测类风湿因子

目的 研究准确定量检测ＩｇＭ，ＩｇＧ，ＩｇＡ型类风湿因子（ＲＦ）的方法。方法 应用生物素－亲和素结合ＥＬＩＳＡ法（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）对５７例类风湿关节炎患者及１００例正常人血清进行检测，并与胶乳凝集试验（ＬＡＴ）及常规ＥＬＩＳＡ法测定的ＲＦ作对比。结果 ５７例病人ＩｇＭＲＦ阳性率在ＡＢＣ，ＥＬＩＳＡ法及ＬＡＴ法分别为８９．５％，８０．７％和６３．２％（Ｐ〈０．０１）。在ＬＡＴ法ＩｇＭＲＦ阴性的１     

生物素——链霉亲和素系统在检测MHV抗体中的应用

采用生物素－链霉亲和素系统（ＢＳＡ）试剂建立测定ＭＨＶ抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ法，并与ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法比较。结果表明，前者本底极低，敏感性比后者提高４倍，阳性检出率提高１倍，且经阻断试验证明其特异性高。因此，该法在检测实验动物的特异性抗体方面，具有很大的应用潜力。     

生物素－链霉亲和素系统在检测MHV抗体中的应用

采用生物素－链霉亲和素系统（ＢＳＡ）试剂建立测定ＭＨＶ抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ法，并与ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法比较。结果表明，前者本底极低，敏感性比后者提高４倍，阳性检出率提高１倍，且经阻断试验证明其特异性高。因此，该法在检测实验动物的特异性抗体方面，具有很大的应用潜力。     

抗人载脂蛋白E多抗的制备与纯化

利用纯化的人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）作为抗原，常规免疫纯系大耳白家兔，获得高效价、高特异性的抗血清，抗体滴度经ＥＬＩＳＡ法检测达１：１２８００倍稀释度，抗体特异性检验证明抗体只与ａｐｏＥ反应。抗血清经ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ亲和层析纯化，分离为碱性洗脱峰Ⅰ和酸性洗脱峰Ⅱ，峰Ⅱ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测在分子量为２７ｋｄ和５４ｋｄ处呈现两条带，分别相当于抗体的重链和轻链的分子量，证明峰Ⅱ为纯化的抗体，这就为建立测定人血清ａｐｏＥ浓度的免疫学方法奠定了基础。     

EB病毒壳抗原在大肠杆菌中的表达与应用

获得足够的ＥＢ病毒壳抗原,建立ＥＬＩＳＡ方法用于鼻咽癌的诊断。方法：将 ＢＡＬＦ４基因克隆进入 载体ｐＵＲ２９１,在大肠杆菌中表达ＥＢ病毒壳抗原与β－半乳糖苷酶的融合蛋白,并通过ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　Ｆａｓｔ　Ｆｌｏｗ离子 交换柱层析对融合蛋白进行纯化,将纯化的蛋白用于 ＥＬＩＳＡ方法检测人血清中的ＩｇＧ／ＶＣＡ和 ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体,用带 有ｐＵＲ２９１质粒的宿主菌裂解液吸收待检血清中的抗β－半乳糖苷酶抗体。结果：ＥＬＩＳＡ方法与免疫荧光方法检测的 结果呈正相关（ｒ＝０．６２３６,Ｐ＜０．００１;ｒ＝０．９２２５,Ｐ＜０．００１）。免疫荧光方法检测为阳性的血清,ＥＬＩＳＡ检测均为 阳性;ＩｇＧ／ＶＣＡ和ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体的几何平均滴度（ＧＭＴ）分别是免疫荧光方法的１３倍和１５倍。在４０份免疫荧光检 测ＩｇＡ／ＶＣＡ阴性的血清中,ＥＬＩＳＡ检测有３例阳性,表明ＥＬＩＳＡ方法比免疫荧光方法更敏感。结论：在原核系统中 表达抗原,为ＥＬＩＳＡ方法在鼻咽癌的诊断和大规模血清学普查中的应用提供了一个有效手段。     

ELISA与PCR方法检测HBV结果对比

为探讨检测ＨＢＶ的有效方法，对１２８例乙型肝炎患者血清采用酶联免疫（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法进行二对半及ＨＢＶ－ＯＮＡ测定，其阳性检出率分别为５９．３８％、７１．８８％，经统计学处理，ｘ＾２＝４．４３，Ｐ〈０．０５，差别有显著性意义，ＰＣＲ法比ＥＬＩＳＡ法检测灵敏度高，特异性强，值得推广。     

流行性出血热灭活疫苗人体试验的免疫反应观察

由流行性出血热病毒浙１０株感染沙鼠肾细胞，经０．０５％β－丙内酯灭活研制成的流行性出血热灭活疫苗，对８名志愿者免疫３针。首针免疫后第２８天，血清用ＲＰＨＩＡ，ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ检测流行性出血热抗体，均全部阳转，空斑减少中和试验（ＰＲＮＴ）于第２８天有４人阳转，第４生又有３人阳转，阳转率８７．５％，ＧＭＴ４０．０。于志愿免疫前及后７、１４、２８、４５天、３个月、０．５年、１年测定其＾３ＨＴｄＲ掺入法     

甲状腺球蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与经人甲状腺球蛋白免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞进行融合，融合率９０．３％，抗体阳性率３．１％，经３～４次克隆化，筛出４株稳定分泌甲状腺球蛋白（ＴＧ）ＭｃＡｂ的细胞株，用放射免疫分析方法（ＲＩＡ）检测小鼠腹水，抗体效价在１０－４时，抗体结合率为４３．２％。用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法检测小鼠腹水，抗体效价达１０－５。琼脂糖免疫双扩试验，均显示为ＩｇＧ１亚型。染色体计数证明为杂交瘤细胞。     

TMB为ELISA底物检测血吸虫病的研究

ＴＭＢ为ＥＬＩＳＡ底物检测血吸虫病的研究戴晓斌张世雯吴子松黄启华四川省寄生虫病防治研究所在诊断血吸虫病中，我们参照张素娥报道的ＥＬＩＳＡ〔１〕，将底物改为３，３，５，５－四甲基联苯胺（ＴＭＢ），用于血吸虫病抗体检测，结果满意，现报道如下。１材料１．１...     

内皮素等指标检测与Ⅱ型糖尿病并发症

用放免分析（ＲＩＡ）法对３５例正常人和４７例Ⅱ型糖尿病人进行了内皮素（ＥＴ）水平检测；利用酶学终点法和免疫透射比浊法对ＴＧ，ＴＣ，ＨＤＬ－Ｃ，ＬＤＬ－Ｃ和ａｐｏＡＩ及ａｐｏＢ分别进行了测定。用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法测定ａｐｏＥ水平。结果Ⅱ期糖尿病对ａｐｏＡＩ及ＨＤＬ－Ｃ均明显低于正常人（Ｐ〈０．００１），其余指标均较正常人明显偏同（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．００１），糖尿病控制好坏血浆ＥＴ－１水     

糖尿病患者sIL-2R、IL-2水平及T淋巴细胞转化活性的检测

探讨糖尿病患者外周血可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）及白细胞介素２产生水平与ＰＨＡ刺激的人外周血Ｔ细胞转化活性的关系。实验采用ＰＨＡ刺激的人外周血微量全血法测Ｔ细胞转化活性，ＥＬＩＳＡ法测ｓＩＬ－２Ｒ，生物活性法测ＩＬ－２水平。结果显示，糖尿病患者外周血ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于健康对照组（Ｐ＜０．０５）；ＩＬ－２水平无明显改变；但ＰＨＡ刺激的Ｔ细胞转化活性明显受抑（Ｐ＜０．０１）。提示：糖尿病患者的Ｔ细胞活性受抑机理，可能是ｓＩＬ－２Ｒ水平升高，阻断了ＩＬ－２对Ｔ细胞促增殖的辅助效应所致。     

EBV-EAIgG抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用

目的：探讨ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）ＩｇＧ抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用。方法：对４５４例鼻咽癌和３００例健康人的血清分别用免疫酶法测定抗ＥＡ抗原的ＩｇＡ／ＥＡ抗体,用ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ抗体,以及用抗酶率法测定抗ＥＢＶＤＮＡ酶抗体。并用免疫酶法测定ＩｇＡ／ＶＣＡ和ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ的方法对鼻咽癌高发区人群的９５３６例血清进行鼻咽癌筛查。结果：３种方法中ＥＬＩＳＡ法检测ＩｇＧ／ＥＡ诊断鼻咽癌的效率最高（９２５％）。以双项检测阳性（ＩｇＧ／ＥＡＡ值≥０１８和ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度≥１∶８０）为标准,鼻咽癌筛查的阳性预示值（鼻咽癌数／阳性血清数）为１６５％（１３／７９）,高于单项阳性标准,Ｐ＜００５。结论：ＥＬＩＳＡ检测血清ＩｇＧ／ＥＡ的方法适用于鼻咽癌的血清学诊断,与检测ＩｇＡ／ＶＣＡ的免疫酶法联合应用的双阳性标准适合于在鼻咽癌筛查中采用。为了提高筛查的敏感性,建议将双项阳性标准中的ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度定为≥１∶５。ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度从≥１∶８升高到≥１∶５。     

生物素—亲和素系统检测弓形虫病的研究

目的 建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）和免疫酶染色试验（ＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法。以检测弓形虫病的微量抗体。方法 以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基因上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。结果 ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。结论ＡＢＣ法可应用于微量本及     

生物素-亲和素系统检测弓形虫病的研究

①目的建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）的免疫酶染色试验（ＡＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法，以检测弓形虫病的微量抗体。②方法以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基础上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。③结果ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。④结论ＡＢＣ法可应用于微量抗体及早期感染的检测。