黄连HPLC Maxplot指纹图谱的建立

[目的]以高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)MaxPlot色谱图为基础,建立黄连指纹图谱分析方法。[方法]采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Agilent SB-C18(4.6 mm×150 mm,3.5μm);流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液,线性梯度洗脱;210~400 nm波长下提取Maxplot色谱图。以黄连对照药材随行测定所得MaxPlot色谱图作为黄连的标准对照指纹图谱,通过相似度评价黄连药材质量。[结果]结果显示,PDA MaxPlot模式下黄连指纹图谱共获得11个共有峰,较单一波长345 nm下多1个微量成分峰。12批样品指纹图谱与对照药材随行对照标准指纹图谱相似度达0.994以上。[结论]MaxPlot指纹图谱显著提高了黄连中各类成分检测的灵敏度,有效增加了黄连药材共有峰数量,为该药材多成分的质量控制提供了借鉴。     

知母甾体总皂苷的HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的 建立知母甾体总皂苷的HPLC指纹图谱,用以评价和监控提取工艺的稳定性.方法 采用Agilent HC -C18(5μm,4.6 mm ×250 mm)色谱柱,ELSD检测器,流动相:甲醇-水梯度洗脱,流速:1 ml·min-1,漂移管温度40℃,载气压力3.5 bar.采用直观分析和相似度软件评价知母甾体总皂苷指纹图谱的相似度.结果 建立了知母甾体总皂苷的HPLC -ELSD指纹图谱,检测了10个批次的知母甾体总皂苷,标定了15个共有峰,各色谱峰分离度较好,相似度较高,达到了中药指纹图谱研究的技术要求.结论 该法准确可靠,建立的HPLC -ELSD指纹图谱可为知母甾体总皂苷的质量控制提供科学准确的依据.     

灵芝孢子油HPLC–ELSD指纹图谱建立及与植物油谱比较研究

摘要：目的 建立赤芝孢子油软胶囊中植物脂肪酸甘油酯的HPLC–ELSD指纹图谱,并与植物油HPLC色谱图进行比较,为全面、科学评价赤芝孢子油软胶囊的质量提供依据。方法 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC–ELSD)测定14批赤芝孢子油软胶囊与7种植物油样品。色谱柱为Diamonsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-异丙醇（体积比为51:49）,流速：1.0 mL/min,ELSD漂移管温度：47 ℃,载气流速：3.2 L/min。结果 建立了赤芝孢子油软胶囊中植物脂肪酸甘油酯的HPLC–ELSD指纹图谱,标定了10个共有色谱峰,采用对照品指认了其中4个峰。赤芝孢子油软胶囊HPLC–ELSD指纹图谱与植物油的液相色谱图存在明显的差异。结论 该方法简便、特异、重现性好,为赤芝孢子油软胶囊的质量控制提供参考。     

银杏叶药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立银杏叶药材HPLC指纹图谱研究方法,为其质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸线性梯度洗脱,流速为0.8 m L/min;检测波长为258 nm;柱温30℃。结果:建立了银杏叶药材HPLC指纹图谱共有模式,并标定了30个共有峰,12批样品与对照指纹图谱相似度均在0.9以上。结论:所建立的指纹图谱方法简单、准确可靠、重复性好,可用于银杏叶药材的质量进行控制。     

蒙药肋柱花HPLC指纹图谱的研究

目的采用HPLC对15批不同采集地的蒙药肋柱花药材进行指纹图谱研究,并采用相似度评价蒙药肋柱花药材的质量。方法采用HPLC进行测定,色谱柱为YMC C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸水-甲醇,梯度洗脱,体积流量0.8 m L/min,检测波长254 nm,柱温30℃。运用色谱软件对指纹图谱进行相似度评价。结果建立了蒙药肋柱花药材的HPLC指纹图谱,确定了15个共有峰,指认了5个共有峰,15批次肋柱花药材与生成对照指纹图谱的相似度在0.881~0.997。结论首次建立肋柱花药材的HPLC特征指纹图谱,所建立的指纹图谱测定方法精密度、稳定性和重复性良好。     

中药百合总皂苷元成分指纹图谱的研究

目的:建立百合药材的HPLC指纹图谱研究方法.方法:Phenomenex C18色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm);流速:0.7 mL/min;柱温:30℃;检测波长:203 nm;流动相:乙腈-水梯度洗脱.结果:该方法具有良好的稳定性和重复性,26个百合样品共标定了14个共有色谱峰.结论:本试验建立了中药百合中总皂苷元成分的HPLC指纹图谱,为百合药材的真伪鉴别提供了科学依据.     

苦丁茶冬青HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器(HPLC-DAD-ELSD)联用技术,建立苦丁茶冬青叶的指纹图谱。方法岛津C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长210 nm,柱温35℃。结果通过10批苦丁茶冬青药材的指纹图谱,建立了共有模式,其中HPLC-DAD指纹图谱共有峰18个,相似度为0.911~0.970,HPLC-ELSD指纹图谱共有峰11个,相似度为0.914~0.962。结论方法精密度、重现性、稳定性好,为客观评价苦丁茶冬青药材的质量提供了科学依据。     

伏毛铁棒锤药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立伏毛铁棒锤药材HPLC指纹图谱。方法:色谱条件:美国Thermo ODS-2HYPERSIL(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;甲醇-乙腈-醋酸-醋酸钠(pH=4.5)缓冲液为流动相进行梯度洗脱;240～280nm整合波长检测,流速0.8mL/min,柱温30℃。结果:建立了伏毛铁棒锤药材HPLC-DAD指纹图谱,标定出25个共有峰,各批药材均具有上述特征峰,但特征峰的相对含量存在差异,即各批药材指纹图谱相似度大小与其来源相关。结论:本方法重现性好,所建立的指纹图谱可作为伏毛铁棒锤药材的鉴定依据。     

桔梗的HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:建立桔梗高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)指纹图谱的分析方法,研究不同产地桔梗药材的质量。方法:采用HPLC-ELSD,Welch Materials XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,ELSD检测器漂移管温度50℃,氮气流速1.2 L.min-1。结果:建立了12批桔梗的HPLC-ELSD指纹图谱,共找到16个共有峰,并确定了桔梗皂苷E,桔梗皂苷D3和桔梗皂苷D。结论:该方法具有良好的重复性和稳定性,为有效控制桔梗药材的质量提供了依据。     

金钱草药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立金钱草药材的HPLC指纹图谱,为金钱草药材的质控提供依据。方法:用水煎-正丁醇萃取-甲醇溶解制备样品溶液,采用RP-HPLC分析,色谱条件为Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以含0.5%冰醋酸的乙腈(A)-0.5%冰醋酸水(B)梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长255 nm,进样量20μL。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对不同批次金钱草药材的HPLC图进行比较分析。结果:建立了金钱草药材的HPLC指纹图谱,以芦丁为参照峰,确立了金钱草药材指纹图谱中的13个共有峰。结论:所建立的指纹图谱稳定性和重现性均好,可用于金钱草药材的常规质量控制。     

清开灵注射液HPLC/UV/MS/MS指纹图谱研究

目的:建立一种HPLC/UV/MS/MS清开灵注射液(板蓝根,栀子,金银花等)指纹图谱研究方法,为其质量控制提供新思路。方法:采用Phenom enex Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相分别为0.1%甲酸水溶液和乙腈梯度洗脱,流速0.5 mL/m in;采用电喷雾离子阱质谱(ESI-ITMS)分析,正、负离子二级扫描。结果:得到分离度和重现性良好的HPLC/UV/MS/MS指纹图谱,对其指纹图上13个色谱峰进行了初步定性,成功鉴别了新绿原酸、绿原酸和异绿原酸3个异构体。结论:本方法建立了清开灵注射液HPLC/UV/MS/MS指纹图谱,为中药复杂体系的分析及其质量控制提供了一种有效、可靠的模式。     

LC/MS/MS测定龙胆苦苷的尿药浓度

目的建立龙胆苦苷尿药浓度的液质联用测定方法(LC/MS/MS).方法以咖啡因作内标,固相萃取法处理尿样.色谱柱:RESCEK C8柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH=6.5)-乙腈(50:40:10),流速为0.2 mL·min-1.样品经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子监测方式测定龙胆苦苷(m/z 374.1→195.2)和咖啡因(m/z 195.2→138.2)浓度.结果尿液中龙胆苦苷在30～9000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9980),方法回收率为91.10%～96.21%,提取回收率为100.52%～103.83%,日内、日间精密度均＜10%.结论该方法灵敏、准确、快速、特异性强.     

HPLC/MS/MS法分离鉴定罗通定在大鼠胆汁中的代谢产物

目的:研究罗通定在大鼠胆汁中的主要代谢产物。方法:灌胃给药后,收集大鼠胆汁,液液萃取,采用HPLC/MS/MS法分析鉴定罗通定的代谢产物。色谱柱Lichrospher-C18(5μm,4.6mm×250mm),流动相:甲醇-水-三乙胺(37630.063,V/V/V),冰醋酸调pH至6.3,检测波长281nm。结果:在大鼠胆汁中发现2个罗通定代谢产物,初步推测其结构为罗通定单羟基化后再与葡萄糖醛酸结合的产物。结论:罗通定在大鼠胆汁中主要以羟基化后的葡萄糖醛酸结合物形式排泄。     

LC/MS/MS法鉴别神速宁胶囊中添加的盐酸氯丙嗪成分

目的:建立神速宁胶囊中非法添加盐酸氯丙嗪成分的鉴别方法。方法:采用色谱柱C18(250mm×2.0mm);乙腈-10mmol.L-1醋酸铵-三乙胺(65∶35∶0.5)(用醋酸调pH6.2)为流动相;流速:0.2mL.min-1;电喷雾离子化(ESI)扫描方式;二级质谱母离子m/z319,碰撞能量15V。结果:在高效液相色谱、紫外光谱、质谱中,样品出现与盐酸氯丙嗪成分一致的色谱峰、光谱图、质谱峰。结论:本方法简单可行,结果准确可靠,可用于神速宁胶囊中添加盐酸氯丙嗪成分的定性鉴别。     

LC/MS/MS法同时测定大鼠血浆中芒果苷和小檗碱浓度

目的 建立液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法同时测定芒果苷和小檗碱在大鼠血浆中的浓度.方法 以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品采用沉淀蛋白法处理.用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测(MRM)方式检测芒果苷和小檗碱.结果 该方法 芒果苷和小檗碱的线性范围分别为3.01～300.60 ng·mL-1和2.66～266.20 ng·mL-1;定量下限(LLOQ)分别为3.01 ng·mL-1和2.66 ng·mL-1;方法 回收率分别在97.0%～103.2%和94.0%～101.1%;批内、批间变异系数均<12%.结论 该方法 准确、灵敏、特异、简便,适用于鼠血浆芒果苷和小檗碱浓度的同时测定.     

RANK/RANKL/OPG系统的临床研究进展

核因子-κB(RANK)和其配体RANKL的,属于肿瘤坏死因子受体激活剂(TNF)受体配体的家庭的一员,二者结合后,破骨细胞活性增强,引起的骨吸收。而骨保护素(OPG)能与RANK竞争RANKL,抑制破骨细胞的过度表达,或者能干扰骨髓基质细胞与破骨细胞之间相互作用而诱导破骨细胞的凋亡,RANK/RANKL/OPG系统参与了不同疾病的骨吸收导致一系列溶骨性病变。骨代谢疾病中RANKL和OPG的问题,为治疗方案提供了新的靶标,正成为临床相关研究的热点之一。     

LC／MS／MS法测定大鼠血浆中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯及药动学研究

目的：建立测定血浆中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的LC／MS／MS法,研究单体穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的药代动力学。方法：测定大鼠血浆中的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯时,血浆样品经沉淀蛋白处理后,以甲醇-水（85：15）为流动相,采用Lichrospher C18柱分离。选用电喷雾离子源,选择反应监测方式扫描,负离子方式检测。结果：穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在该条件下分离良好,保留时间分别为3．57min和4．51min。穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的线性范围均为0．02～10μg·mL^-1。定量下限均为0．02μg·mL^-1,最低检出量为0．003ng。结论：该方法简便、灵敏、专属性强,适合于穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在大鼠体内的药代动力学研究。     

LC/MS/MS分析人血浆中利培酮和9-OH-利培酮的浓度

目的:建立高效液相—质谱联用法测定人血浆中利培酮和9-OH-利培酮的浓度。方法:液相:色谱柱为Hypu-rity C18柱(Thermo Hypersil-Keystone 2.1mm×150mm,5μm);流动相为乙腈:1‰甲酸=85:15;流速为0.2m l.m in-1;柱温为40℃,自动进样瓶温10℃。质谱:离子源为ESI源,源电压5.0 KV;加热毛细管温度275℃;鞘气(N2)流速30m l.m in-1;辅助气流速5m l.m in-1;正离子方式检测;扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子分别为219(内标左羟丙哌嗪)、191(利培酮)和207(9-羟基-利培酮)。结果:利培酮(R IS)线性范围为0.1~50ng.m l-1,最小检出浓度为0.05ng.m l-1。9-羟基-利培酮线性范围为0.1~50ng.m l-1,最低检出浓度为0.05ng.m l-1。提取回收率均大于50%。日内、日间RSD均小于10%。结论:本方法简便、灵敏,准确,可用于利培酮和9-OH-利培酮血药浓度检测和药代动力学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定中药制剂中西地那非的含量

 目的建立一种简单、快速、灵敏、准确地鉴定中药制剂中是否添加西地那非的高效液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)的分析方法。方法样品经C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流速200μL·min^-1,乙腈-0.05mol·L^-1乙酸铵(1:1)流动相进行分离。在ESI正离子采集模式下,采用LC/MS/MS的多反应监测(MRM)对西地那非进行定量监测,采用外标法定量。结果本方法满足分析要求,并对12种市场上中药中西地那非进行定量测定。结论目前市场中药制剂中存在添加西地那非的现象。     

LC-MS/MS 测定患者全血中百草枯的浓度

 目的 建立测定人全血中百草枯浓度的高效液相串联质谱电喷雾检测法 (LC/MS/MS) 。 方法 以 Waters 公司 C₁₈ 反相柱（ Symmetry C₁₈ column , 4.6 mm × 50 mm , 5 μ m ）为色谱柱,流动相为乙腈 - 水（含 0.3% 三氟醋酸） =5 ∶ 95 ,流速为 0.3 mL·min^-1 ,以乙腈沉淀蛋白法提取百草枯。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（ SRM ）对百草枯（ <> m/z 185.2 → 169.1 ）进行测定,并将此法应用于临床监测患者血中百草枯浓度。 结果 百草枯的高（ 5 mg·L^-1 ）、中（ 1.25 mg·L^-1 ）、低（ 0.08 mg·L^-1 ） 3 个质量浓度的平均回收率分别为 71.80% , 70.77% 和 77.84% ,日内（ <> n =5 ）、日间（ <> n =3 ） RSD 均小于 15% ;分析方法的最低定量限为 0.04 mg·L^-1 。线性范围为： 0.04 ～ 10 mg·L^-1, 回归方程为 <> y =10 200<>x+309 , <> r =0.998 8 （ <> n =8 ）。 结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床检测患者血中百草枯浓度。