直接酶标法检测肝组织中丙型肝炎病毒抗原（HCAg—NS3）的研究

以单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３直接酶标法对石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＡｇ－ＮＳ３）进行测定，该抗体系应用基因重组表达丙肝抗原（ＨＣＶ－ＮＳ３区－Ｃ３３－Ｃ）免疫小鼠并通过细胞融合术后获得，４９例病毒性肝炎患者肝组织测定结果，抗－ＨＣＶ阳性组的ＨＣＡｇ－ＮＳ３检出率５１．９％（１４／２７），抗－ＨＣＶ阴性组为１３．６％（３／２２），两组有显著性差异（Ｐ〈０．０１），以慢性重症肝炎和肝硬化患者     

直接酶标法检测肝组织中丙型肝炎病毒抗原（HCAg－NS_3）的研究

以单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３直接酶标法对石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＡｇ－ＮＳ３）进行测定，该抗体系应用基因重组表达丙肝抗原（ＨＣＶ－ＮＳ３区－Ｃ３３－Ｃ）免疫小鼠并通过细胞融合术后获得。４９例病毒性肝炎患者肝组织测定结果，抗－ＨＣＶ阳性组的ＨＣＡｓ－ＮＳ３检出率为５１．９％（１４／２７），抗－ＨＣＶ阴性组为１３．６％（３／２２），两组有显著性差异（Ｐ＜０．０１），以慢性重症肝炎和肝硬化患者检出率最高，ＨＣＡｇ－ＮＳ３阳性物在肝细胞的胞核或胞浆中均可见，呈棕黄色细小颗粒状，以核型居多。直接酶标法测定ＨＣＡｇ与原位杂交法测定ＨＣＶＲＮＡ的比较，其符合率为８１．６％（４０／４９）。本项技术具有简便、快捷、特异性、敏感性佳、图象清晰等优点，易于推广应用，为ＨＣＶ感染的临床和发病机理研究提供重要检测手段。     

丙型肝炎病毒感染者肝组织中病毒抗原表达的免疫组化研究

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在肝组织中的表达状况，应用免疫组化方法以多克隆人抗－ＨＣＶ和单克隆鼠抗－ＨＣＶ－ＮＳ＿３检测一组ＨＣＶ感染者石蜡包埋肝组织中ＨＣＶ抗原（Ａｇ）和ＨＣＶ－ＮＳ＿３，并对抗原检出与血清ＨＣＶ标志的关系进行分析。结果：ＨＣＶＡｇ和ＨＣＶ－ＮＳ＿３检出率分别为３８．３％（２３／６０）和３０．０％（１８／６０）；所有ＨＣＶ－ＮＳ＿２，阳性者均同时表现ＨＣＶＡｇ阳性；阳性颗粒定位于肝细胞胞浆；阳性细胞分布呈散在、弥漫状和簇状，周围多天坏死及炎性细胞浸润；不同血清ＨＣＶ标志模式间抗原检出率存在明显差别。研究结果对认识ＨＣＶ致病机理有一定意义。     

66例慢性非甲非乙型肝炎患者的丙型肝炎病毒感染研究

以ＨＣＶ－Ｔ３序列为引物，结合ＲＴ－ＰＣＲ和寡聚核甘酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测６６例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者的血浆ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性４２例（６３．６％）。同样病例以相当于ＨＣＶＣ区基因编码和ＮＳ３区编码的人工合成肽抗原检测抗ＨＣＶ，阳性４９例（７４．２％）。这６６例慢性ＮＡＮＢＨ病例，抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ双阳性者３８例（５７．６％）；抗ＨＣＶ阴性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者４例（６．１％）；抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者１１例（１６．７％）。其中诊断为散发型ＮＡＮＢＨ者３５例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者１７例（４８．６％），为输血后ＮＡＮＢＨ者３１例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者２５例（８０．７％）。     

庚型肝炎病毒在慢性肝炎肝硬化中致病性及病理特征

探讨ＨＢＶ在慢性肝炎肼硬化当中感染率、临床脑病理特征,应用ＥＬＩＳＡ法检测血清抗－ＨＧＶ,用ＨＧＶＮＳ５抗原制备ＭＣＡｂ,检测５４例慢笥肝炎硬化患者肝组织中ＨＧＶ抗原,同时应用ＳＰ法分别对肝组织进行ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＣＶ ＮＳ３Ａｇ肝脏免疫组化检测。结果提示５４例肝病患者肝组织检出２７．７８％ＨＧＶ抗原阳性。其中２４例慢性肝炎轻度中５例;１６例慢性肝炎中度中５２称;１５例肝硬中５例。ＨＧＶ     

丙型肝炎肝组织中HCV RNA和HCV NS5抗原表达及意义

目的研究丙型肝炎肝组织中ＨＣＶＲＮＡ与ＨＣＶＮＳ５抗原分布及其与肝组织损伤的关系．方法应用原位杂交和免疫组化方法检测３４例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者肝组织中ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ５抗原表达状况,采用Ｋｎｏｄｅｌ方法评价肝组织病理损伤程度．结果分别有２１例（６１８％）和２４例（７０６％）患者肝组织中检出ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ５抗原．ＨＣＶＲＮＡ阳性信号主要位于肝细胞浆中,在胆管上皮细胞和炎性浸润细胞中也可检出,其分布与肝组织炎症坏死无固定解剖学关系．ＨＣＶＲＮＡ与肝组织中ＨＣＶＮＳ５抗原表达正相关,但二者在肝组织中的分布存在一定差异．多因素分析显示ＨＣＶＮＳ５抗原的表达与肝组织损伤相关．结论丙型肝炎肝组织中ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ５抗原表达相关,病毒在肝组织中的活跃程度与肝损伤有关     

血清抗—HCV与HCVRNA及肝内HCV Ag检测结果对比分析

对２２８例肝炎患者同时检测血清抗－ＨＣＶ与ＨＣＶＲＮＡ，阳性率分别为１９．３％和２７．６％，二者联检是性率为３２．０２％，对１３１例肝检者检测肝内ＨＣＶ Ａｇ，阳性率为１４．５，其中１５例血清抗－ＨＣＶ同时阳性，提示联栓抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ可提高ＨＣＶ感染的检出率，肝内ＨＣＶＡｇ的检出率，检出ＨＣＶ Ａｇ的检出亦是ＨＣＶ现症感染最直接的依据。     

丙型肝炎患者胃粘膜中病毒抗原的检测

了解肝炎患者胃粘膜组织中忆型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染状况。采用免疫组化Ｓ－Ｐ法以抗－ＨＣＶＮＳ３单克隆抗体及抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ多克隆抗体对３３例慢性丙型肝炎患者胃粘膜组织中ＨＢＶ和ＨＣＶ进行了检测。同时还用双标记技术对二种抗原进行了双重染色以了解其在胃粘膜组织中的分布。ＨＣＶＮＳ３、ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ的检出率分别为３３．３３％（１１／３３）、４８．４８％（１６／３３     

地高辛标记探针原位杂交检测肝组织中丙型肝炎病毒RNA

用地高辛标记ＨＣＶ５′－ＮＣ区ｃＤＮＡ探针原位杂交检测了２４例ＨＣＶ感染的慢性肝病患者肝组织中ＨＣＶＲＮＡ。结果：１７例同时血清抗ＨＣＶ（ⅡＥＬＩＳＡ法）和ＨＶＣＲＮＡ（套式ＰＣＲ法）均阳性病人中，１４例（８２．３％），肝组织检出了ＨＣＶＲＮＡ。７例仅有抗ＨＣＶ阳性病人，肝组织中没有检出ＨＣＶＲＮＡ。ＨＣＶＲＮＡ特异性信号主要位于肝细胞浆。感染ＨＣＶ的肝细胞呈散在，灶状或弥漫形式分布，与ＡＬＴ水平     

联检C100—3抗体,第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶ ＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶ ＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组     

肝病患者肝组织HCV抗原的检测及意义

目的 探讨肝病患者肝组织丙型肝炎病毒（HCV）抗原的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法对252例肝病患者石蜡包埋肝组织中HVC抗原进行了检测。结果 多克隆抗HCV检出HcAg阳性25例（9．92％），单克隆抗HCV-NS3检出HCV—NS3蛋白阳性19例（7．54％）。19例HCV—NS3阳性肝组织均同时表现HcAg阳性，二者在肝细胞分布状况相似，不同病理类型肝炎患者肝组织中HCV抗原检出率无统计学意义。252例血清检出HCV标志物阳性71例，单独抗HCV阳性者无1例肝组织中检出抗原。结论 肝组织中抗原的检出和血清HCV标志具有良好对应性，但不同血清HCV标志模式抗原检出率有统计学意义。     

肝组织内丙型肝炎病毒不同抗原的定位及比较

目的研究ＨＣＶ不同抗原的组织内定位以及与病变和血ＨＣＶＲＮＡ的关系。方法５１份慢性丙型肝炎肝穿刺组织,免疫组化检测ＨＣＶＣＰ１０、ＮＳ３和ＮＳ４,其中３２份还检测ＮＳ５,同时观察组织学病变和血ＨＣＶＲＮＡ（ＲＴＰＣＲ法）。结果ＨＣＡｇ总阳性率＞６０％。不同抗原阳性率不一,以ＣＰ１０和ＮＳ５为高（各＞５０％）。阳性细胞数一般较少,散在分布;灶性集聚时,多与碎屑坏死及炎症反应相伴。几种抗原全阳性者组织病变活动度较高。血ＨＣＶＲＮＡ阳性率８０．３９％,但血与组织检测结果的重合性仅占５０．９８％;血阴性者,８／１０份组织内检出１或多种抗原。结论组织内同时检测多种抗原能提高ＨＣＡｇ检出率。     

丙型肝炎病毒感染者肝组织中病毒相关抗原的表达

为研究丙型肝炎病毒结构和非结构抗原在肝组织中的分布状况及其相互关系，应用免疫组织化学方法，以多克隆抗－ＨＣＶ和单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３，ＮＳ５及ＣＰ１０，对一组ＨＣＶ感染者石蜡包埋组织ＨＣＶ抗原进行检测。     

Hepatitis C virus infection in patients with clinically diagnosed alcoholic liver diseases

Summary To determine the incidence of hepatitis C virus (HCV) infection in patients with alcoholic liver disease (AID), serum samples from 252 patients with AID were tested for anti-HCV and HCV RNA. Serial sera of these patients were collected and stored under optimal conditions to allow exact quantification of HCV RNA. Fifteen patients who visited our hospital during the same period of time with chronic HCV infections served as controls. In those with AID, anti-HCV and HCV RNA were positive in 55.5% and 41.2%, respectively. Patients with histologically diagnosed chronic hepatitis and hepatocellular carcinoma had much higher prevalence rates of HCV RNA (84% and 100%, respectively) compared to those with fatty liver (4.3%), hepatic fibrosis (10.1%) and alcoholic hepatitis (22.2%) ( P < 0.01). Although no difference in serum HCV RNA levels was observed between the patients with both AID and chronic HCV infection and those with chronic HCV infection alone, HCV RNA levels significantly (10-fold) dropped after abstinence in nearly half of the patients ( P < 0.01). These data indicate that HCV infection in patients with AID promotes progression of liver disease, and abstinence from alcohol is associated with a reduction in serum HCV RNA levels.     

FAS抗原与慢性丙型肝炎关系的研究

目的　通过观察慢性丙型肝炎 (CHC)患者肝组织及外周血单核细胞 (PBMC)FAS抗原表达对CHC病情的影响 ,进而探讨FAS系统及HCVRNA水平与CHC的关系及临床意义。方法　采用肝活检组织病理、免疫组织化学、PCR及血液生化等方法检测 41例CHC患者的肝组织和PBMC中FAS抗原、血清HCVRNA及肝功能 ,观察肝组织和PBMC中FAS抗原表达情况与血清HCVRNA水平及肝损伤的关系。结果　 ( 1)CHC患者PBMC的FAS阳性率为41.5 % ( 17/ 41) ,肝组织FAS阳性率为 65 .6% ( 2 1/ 3 2 )。 ( 2 )CHC患者PBMCFAS阳性组血清HCVRNA和ALT水平均显著高于FAS阴性组 (P <0 .0 5 )。结论　 ( 1)CHC患者肝组织和PBMC中FAS表达与肝组织炎症及血清病毒载量有关 ;( 2 )FAS系统可作为观察CHC病情的新指标 ,协助诊断与治疗。     

HCV RNA及其编码蛋白在肝癌和癌旁肝组织中的表达

本文采用光敏生物素标记的ＨＣＶｃＤＮＡ探针和免疫金银显色法对４２例肝癌和癌旁肝组织中的ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＡｇ进行了检测，发现ＨＣＶＲＮＡ可以感染肝癌细胞，其分布状态及其抗原表达亦与肝组织一致。这些阳性细胞在组织中的感染状态多呈区域性，在此区域又可呈片状、簇状或散在分布。     

丙型肝炎病毒母婴传播的研究

目的研究丙型肝炎病毒母婴传播的可能性与机率。方法采用前瞻性研究方法，使用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ，用二代ＥＩＡ试剂检测抗－ＨＣＶ。结果１３例输血后丙型肝炎母亲和她们所生的１５例婴儿，婴儿ＨＣＶ感染率为８６．７％，其中临床型１例（７．７％），亚临床型ＨＣ３例（２３．１％），ＨＣＶ隐性感染９例（６９．２％）。抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性率均随年龄增长而降低，至３岁时分别为７．７％和１５．４％。结论感染ＨＣＶ母亲所生婴儿，ＨＣＶ感染率高，但转归较好。观察引产胎儿肝脏和血液发现，孕妇抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性所引产的胎儿血清和／或肝脏中抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＨＣＶ的母婴传播，主要发生于子宫内。     

Sero-epidemiologic study of hepatitis C virus infection in Fukuoka, Japan

We conducted an epidemiological study of 509 residents of H town, Fukuoka, Japan, to investigate the high mortality rate from liver disease. Antibodies to hepatitis C virus (HCV) (anti-HCV) were detected in 120 residents (23.6%); HCV RNA in 91 (17.9%), and hepatitis B surface antigen (HBsAg) in 13 (2.6%). Multivariate logistic regression analyses showed that presence of anti-HCV, male gender, and history of liver disease were associated with the presence of liver dysfunction, and that age of more than 40 years and a particular district were associated with the presence of anti-HCV. HCV RNA was more frequently detected in anti-HCV-positive men than women (41, or 85.4% versus 50, or 69.4%) (P < 0.05). The incidence of liver dysfunction was significantly higher in HCV RNA-positive men than women (32, or 66.7% versus 22, or 30.6%) (P < 0.05). These findings suggest that: (1) HCV was correlated with the high mortality rate from liver diseases, (2) there were district-related differences in the incidence of HCV, and (3) the lower frequency of elimination of HCV from men may explain why they showed a high mortality from liver disease. (Received Mar. 4, 1997; accepted Aug. 22, 1997)