乙肝病毒宫内感染及阻断母婴垂直传播的研究进展

乙肝病毒垂直传播是指ＨＢＶ在亲子代之间的传播方式，包括母婴传播和遗传传递。１.乙肝病毒母婴传播 母婴传播是指患乙肝或者携带ＨＢｓＡｇ的母亲于产前（宫内)、产程中（产道内)或产后不久将ＨＢＶ传给婴儿，并引起婴儿ＨＢＶ感染的过程。母婴传播发生率高低可能与两种因素有关：母体血液中ＨＢｓＡｇ滴度的高低和母体血液中是否含有ＨＢｅ抗原（ＨＢｅＡｇ)。唐氏［１］采用血清学、免疫组织化学和核酸分子杂交方法研究３５例ＨＢｓＡｇ阳性孕妇引产胎儿，结果从胎心血中检测到ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢcIｇM，从胎肝组织查出ＨＢcＡｇ和Ｈ…     

HDV感染与HBV血清标志物的关系

目的分析ＨＤＶ感染与ＨＢＶ血清标志物的关系方法选ＨＢＶ血清标志物阳性患者，同时进行ＨＤＶ感染的检测．供血员做正常对照．ＨＤＶ感染和ＨＢＶ血清标志物皆用相应酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）．结果２８９例ＨＢＶ血清标志物阳性患者中，有４０例ＨＤＶ感染阳性，阳性率为１３８％．在ＨＢＳＡｂ（＋）组，无ＨＤＶ感染阳性者检出；在ＨＢＳＡｇ（＋）或ＨＢＣＡｂ（＋）或ＨＢｅＡｂ（＋）组患者中，ＨＤＶ感染阳性率分别达１７６％，１８８％、２５２％，明显高于ＨＢｅＡｇ（＋）组（１０９％）；并且ＨＤＶ感染阳性率在ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｂ（＋）患者中，高达２６２％，明显高于ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｇ（＋）者（１０９％）．结论①ＨＤＶ感染性率在ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｂ（＋）患者中高于ＨＢＳＡｇ·ＨＢＣＡｂ·ＨＢｅＡｇ（＋）患者．②ＨＤＶ感染阳性率与ＨＢＶ复制的速度和数量不全相关．     

肝炎病毒核酸定量的临床应用

１　肝炎病毒核酸定量检测的临床价值及应用体会判断抗病毒疗效和用药剂量必须有一种更准确的、特异性高、灵敏度强、具有科学量化的比较方法。多年来一直采用乙肝病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）和乙肝病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ）阴转率（定性）来判断病毒复制情况,但该方法有一定局限性。因为ＨＢｅＡｇ是ＨＢＶ基因前Ｃ区的表达产物,一旦该区变异,使ＨＢｅＡｇ不表达造成ＨＢｅＡｇ阴转的假象,而乙肝病毒依然在繁殖。再如,ＨＢＶ－ＤＮＡ仅以阴、阳性定性来判断病毒的量,显然是粗糙的和欠准确的,阴性的范围有多大？是没有ＨＢＶ…     

慢性乙型肝炎干扰素疗法的适应证选择

目前用于慢性乙型肝炎抗病毒治疗的干扰素主要是ＩＦＮ α，其适应证基本只有一个，即ＨＢＶ复制活跃的活动性慢性乙型肝炎。 慢性乙型肝炎有经典型（ｃｌａｓｓｉｃａｌ）和异型（ａｔｙｐｉｃａｌ）之分。经典型的血清病毒学标志特征是血清Ｈ ＢｓＡ ｇ ＋、ＨＢｅＡｇ＋和抗－ＨＢｃ＋、血清ＨＢＶＤＮＡ十，由野生株ＨＢＶ感染所致，也称ＨＢｅＡｇ阳性慢性乙型肝炎；异型的血清病毒学标志特征是血清ＨＢＳＡｇ＋、抗ＨＢｅ＋和抗ＨＢｃ＋，血清ＨＢＶ ＤＮＡ＋，主要由前Ｃ基因变异株或Ｘ区Ｃ基因启动子变异株ＨＢＶ感染所致，也称抗－…     

抗HBe(+)慢性乙型肝炎的重组干扰素治疗应答及其影响因素

目的探讨抗ＨＢｅ／ＨＢＶＤＮＡ（＋）慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）的干扰素治疗效果及其影响因素。方法对１５例ＨＢｅ（＋）和２５例ＨＢｅＡｇ（＋）ＣＨＢ患者用重组干扰素α－１ｂ治疗，治疗前、后和随访半年后检测ＨＢＶ及前Ｃ区Ａ１８９６终止变异。结果抗ＨＢｅ（＋）慢性乙型肝炎干扰素治疗近期应答率为７３％（１１／１５），与ＨＢｅＡｇ（＋）组比较差异无显著性（Ｐ＞００５）；治疗前抗ＨＢｅ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ含量明显低于ＨＢｅＡｇ（＋）组（Ｐ＜０００５）；但前Ｃ区Ａ１８９６变异检出率４７％（７／１５）显著高于ＨＢｅＡｇ（＋）组的１６％（４／２５），Ｐ＜００５；４例复发者都是Ａ１８９６变异感染。结论血清ＨＢＶＤＮＡ水平可能是影响其应答的重要因素，前Ｃ区Ａ１８９６变异并不影响干扰素的近期应答率，但可能是其复发的一个重要因素。     

乙型肝炎病毒前C区突变株感染的临床和病理

探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区突变株（１８９６位点Ｇ→Ａ点突变）慢性感染患者的临床特点、病理特征及与干扰素疗效的关系。方法采用突变特异性ＰＣＲ检测１０８份慢性ＨＢＶ感染患者血清和／或肝组织中ＨＢＶ前Ｃ区突变株，按Ｋｎｏｄｅｌｌ方法评价肝组织病理损伤。结累ＨＢＶ前Ｃ区突变株在不同ｅ系统均存在，但ＨＢｅＡｂ（＋）组中单纯突变株感染或突变株感染占优势的混台感染（１４．２９％，４６．２３％）显著地高于ＨＢｅＡｇ（＋）组（０％，６．４５％）；突变株感染与肝脏疾病严重程度相关，慢性肝炎重度组检出率（１３．６４％，４０．９１％）极显著地高于慢性无症状携带者（０％，１０．２６％）。５例前Ｃ区突变株感染者应用干扰素治疗可产生应答和无应答２种结果。临床症状较轻的ＨＢＶ前Ｃ区突变株感染者的肝脏病理损伤程度无明显加重。结论前Ｃ区突变株感染普遍存在，但更常见于ＨＢｅＡｂ阳性者。【关键词】##4乙型肝炎病毒;;突变;;病理学;;治疗     

反义乙肝病毒S基因真核载体构建及体外抗乙肝病毒作用

目的：探讨反义ＲＮＡ抗乙肝病毒（ＨＢＶ）作用。方法：构建了正，反义ＨＢＶＳ基因重组ＥＢ病毒载体ｐＭＥＰ４ｓ，ｐＭＥＰ４Ｓａｓ，ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法将重组载体ＤＮＡ转染２．２．１５细胞，潮霉素筛选１个月得到抗性细胞克隆，ＥＬＩＳＡ，斑点杂交法分别检测抗性细胞上清ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇＨＢＶＤＮＡ水平，结果：转染后１，２月，反义载体ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ的抑制率分别达７５％，５１．６％，７０％，４６     

小儿乙型肝炎血清,病理及免疫病理分析

本文通过检测１５例小儿病毒性肝炎患者血清ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ标志及肝组织内ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ发现ＨＡＶ和ＨＣＶ标志全部阴性，ＨＢＶ标志全部阳性。１５例ＨＢＶ感染中，血清ＨＢＶＤＮＡ阳性１１例。其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）９例，ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｂ（＋）２例。综合血清其它的感染指标与肝脏病理及免疫病理的变化对１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病例作了重要分析。进一步证实ＨＢｅＡｇ为临     

354例原发性肝癌血清HBV标志物检测结果分析

为了解原发性肝癌（ＰＨＣ）与乙肝病毒（ＨＢＶ）感染的关系,我们检测了３５４例ＰＨＣ患者的血清ＨＢ－ｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ等指标,现将结果报告如下。资料与方法：ＰＨＣ组男３０９例,女４５例,年龄２５～７８岁。诊断均符合１...     

聚合酶链反应评价原位杂交检测慢性HBV感染者肝内HBVDNA的结果

用地高辛素探针原位杂交检测慢性ＨＢＶ感染者肝内ＨＢＶＤＮＡ，聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清ＨＢＶＤＮＡ评价病毒复制状态。发现肝内ＨＢＶＤＮＡ阳性肝细胞，在１４例肝组织病变不活动的ＨＢｅＡｇ阳性慢性无症状ＨＢＶ携带者（ＡｓＣ）呈弥漫性分布；而在ＨＢｅＡｇ阳性或阴性活动性肝病病人均聚合分布于肝细胞坏死区。上述慢性感染者９８％血清ＨＢＶＤＮＡ阳性。说明ＨＢＶ复制与肝组织病变有关但非肝损伤直接原因。１６例ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＣ中，９例肝内仅见局灶性ＨＢＶＤＮＡ阳性肝细胞，其中４例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性，说明部分ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＣ也存在极低水平病毒复制。     

免疫学与肝脏（二）

免疫学与肝脏（二）徐玉芳（河南医科大学郑州４５００５２）乙肝病毒抗原ＭｉｃｈａｅｌＧｅｒｂｅｒ就急、慢性肝炎的ＨＢＶ抗原及其分布提出看法，认为伴随ＨＢＶ感染有三种不同抗原：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ及ＨＢｅＡｇ。ＨＢｓＡｇ是乙肝病毒含有糖脂的表面抗原，在...     

52例慢性乙型肝炎 HBV 前C区基因突变研究

本文采用多聚酶链反应－－单链构象多态分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测了５２例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎口才的ＨＢＶ前Ｃ区基因突变。结果有前Ｃ区突变株感染３２例，突变株检出率为６１．５％；突变株的检出以慢性下肝炎最高，其次是慢性乙肝重度、中度口才慢性乙肝轻度患者量低；抗－ＨＢｅ阳性２１前Ｃ区突变株检出率高于ＨＢｅＡｇ阳性患者。表明ＨＢＶ前Ｃ区突变与病情轻重及ｅ系统血清标志有关。     

人白细胞介素－2基因表达载体的构建及抗乙肝病毒作用

构建了人白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因重组逆转录病毒表达载体ｐＺＩＰｈｕｌＬ－，以ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀技术转染包装细胞系ＰＡ３１７，以Ｇ４１８筛选，得到分泌假病毒颗粒滴度达到１０６ＣＦＵ／ｍｌ的细胞克隆。以８为感染倍数感染２．２．１５细胞系，ＩＬ－２分泌表达水平为６Ｉ／ｍ１，可显著抑制ＨＢｓＡｇ的分泌表达，对ＨＢｅＡｇ也有一定的抑制作用。但不含ＩＬ－２基因的逆转录病毒载体ｐＺＩＰＳＶ（Ｘ）的假病毒颗粒感染２．２．１５细胞以后对乙肝病毒无显著影响。以６ＩＵ／ｍｌ的重组人ＩＬ－２也不能抑制ＨＢｓＡｇ及ＨＢｅＡｇ的表达。在细胞水平上，实现了人ＩＬ－２转基因表达及抗乙肝病毒的基因治疗。     

新生儿与儿童乙肝,丙肝病毒感染的临床观察

对３３９例住院分娩新生儿及其父母和１６５６例非肝病患儿进行了血清乙肝五项（ＨＢＶＭ）和抗－ＨＣＶ测定。发现产妇感染乙肝病毒（ＨＢＶ）进行ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｇ阳性才胎儿宫内感染的危险性最大，其中５例“大三阳”产发所生婴儿中有４例（８０％）ＨＢｓＡｇ阳性；３例父亲和２例婴儿ＨＢｓＡｇ阳性者中，有２例父亲和１例婴儿ＨＶＢ－ＤＮＡ阳性。非肝病患者ＨＢＶ感染率达２４．１％，其中ＨＢｓＡｇ阳性率随年龄增长而     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞对HBV不同区抗原的增殖反应

目的进一步明确外周血细胞免疫在ＨＢＶ感染过程中的作用。方法对２０例急性乙型肝炎（乙肝）患者、２３例慢性乙肝患者、２０例正常献血员进行了研究,用氮蓝四唑实验（ＭＴＴ）测定乙肝患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对ＨＢＶ不同区抗原的增殖反应。结果在急性乙肝患者ＰＢＭＣ对抗原的增殖反应大于慢性乙肝患者及正常对照,ＰＢＭＣ对ＨＢｃＡｇ的增殖反应最高,ＨＢｅＡｇ次之,而对ＨＢｓＡｇ的反应均较弱。另外,无论在急性、慢性患者,其ＰＢＭＣ对抗原的增殖反应水平与血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的变化无明显相关性。血清ＨＢＶＤＮＡ阴性、ＨＢｅＡｇ阴性的慢性肝炎或慢性肝炎急性发作患者,其ＰＢＭＣ对ＨＢＶ抗原的增殖反应较弱,在血清ＨＢＶＤＮＡ或ＨＢｅＡｇ阳性患者,增殖反应较强,而当血清ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ均阳性时,增殖反应最强,表明外周细胞免疫与ＨＢＶ的复制及清除相关。结论ＨＢＶ感染后,外周血中存在对ＨＢＶ抗原的细胞免疫,这种细胞免疫可能与乙肝的发病及ＨＢＶ的清除有关。     

乙肝病毒感染者血清中sIL-2R水平的研究

目的：研究血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平在检查乙肝病毒不同类型感染中的意义。方法：应用ＥＬＩＳＡ方法检测４２例正常人及２２８例乙肝病毒感染血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平,并从感染中筛选出３组进行比较,Ａ组（大三阳,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,ＨＢｅＡｇ（＋））,Ｂ组（小三阳,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,ＨｂｅＡｂ（＋））,Ｃ组（ＨＢｓＡｇ（＋））。ｘｆｊｓ：２２８例感染血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平     

乙肝病毒标记物的胃腔释放

为探讨乙肝病毒粪－口途径传播的可能，用ＥＬＩＳＡ法检测１６０例胃病患者胃液ＨＢｓＡｇ和抗ＨＢｃ，发现各型患者之胃液均可检出－－“腔释放。因ＨＢｓＡｇ为乙肝病毒囊膜，不受胃液和肠液破坏，经口而入的ＨＢＶ既可使人受染，又可随粪－口途径传染他人。胃癌（Ｇａ）、慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）合并十二肠肠球部溃疡（ＤＵＡ）和慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）、ＣＳＧ／ＣＡＧ、ＣＳＧ／ＤＵＡ和ＣＳＧ之ＨＢｓＡｇ检出率分别为３     

血清HBeAg阴性与HBeAg/IC及A1896变异的关系

目的探讨血清ＨＢｅＡｇ阴性（双抗体夹心法）与ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形成及ＨＢＶ变异株Ａ１８９６的关系，评价ＨＢｅＡｇ／ＩＣ检测的临床意义．方法单克隆抗ＨＢｅ固相ＥＬＩＳＡ检测血清中ＨＢｅＡｇ／ＩＣ；套式多聚酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ；３＇碱基特异多聚酶链反应判断Ａ１８９６变异；ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ，研究对象为１１７例慢性ＨＢＶ感染者，２０例健康对照统计处理采用卡方检验．结果ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ检出率明显高于ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性血清，Ｐ＜０００１（９１３％ｖｓ３６２％）；２９份ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中仅５例（１７２％）检出Ａ１８９６，而且其中２例与野毒株（Ｇ１８９６）混合感染并伴ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性．２９份中１７份（５８７％）为ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性的Ｇ１８９６感染；血清抗ＨＢｅ阳性组Ａ１８９６检出率高于抗ＨＢｅ阴性组，Ｐ＜００５（２５％ｖｓ３２％）．结论ＨＢｅＡｇ／ＩＣ为ＨＢＶ活跃复制指标；临床ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性患者仍多数为Ｇ１８９６感染，ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形致双抗体夹心法不能检出ＨＢｅＡｇ；抗ＨＢｅ应答可能为促使前Ｃ变异的重要因素     

慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前C区基因突变与干扰素的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ前Ｃ和部分Ｃ区基因，快速检测ＨＢＶ前Ｃ终止密码突变方法，对慢性乙型肝炎患者干扰素治疗与ＨＢＶ前Ｃ突变关系作了初步研究。６例干扰素治疗后４例ＨＢＶＤＮＡ转阴，２例阳性者均检出突变株。１１例非干扰素治疗者中，检出突变株３例。１例干扰素治疗１个月后ＨＢＶｅ抗累（ＨＢｅＡｇ）转阴，优势病毒株已由突变株与野生株共存状态替代原有野生株，提示干扰素治疗后ＨＢｅＡｇ转阴并不意味着ＨＢＶ被清除，而有潜在ＨＢＶ前Ｃ突变的可能。     

快速简便筛检乙型肝炎病毒C基因启动子变异的方法及应用

目的明确中国乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区段变异特点及其可能的临床意义。方法应用错配聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，结合核苷酸序列分析，检测１４３例ＨＢｓＡｇ阳性的ＨＢＶ慢性感染者中Ｘ基因／ＢＣＰ区的核苷酸（ｎｔ）１７６２碱基由Ａ→Ｔ和１７６４碱基由Ｇ→Ａ变异。结果在１１４份ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中，３７例感染ＢＣＰ变异株，其中３１例为慢性肝炎病例，６例为慢性ＨＢＶ无症状感染者（ＡｓＩ）；其中４１例ＨＢｅＡｇ阳性ＡｓＩ中仅２例检出，１８例ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＩ中也有４例检出。ＨＢｅＡｇ阳性的６５例中，１３例有ＢＣＰ区变异，而ＨＢｅＡｇ阴性的４９例中，２４例有ＢＣＰ区变异（Ｐ＜０．０１）。结论错配ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测这一对点突变，具有快速、简便、适用的优点；ＨＢＶ毒株ＢＣＰ变异可能与肝病变活动有一定关系。