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聚合酶链反应研究丙型肝炎病毒与肝癌的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
聚合酶链反应研究丙型肝炎病毒与肝癌的关系谢小明,苏先狮,张铮,郑宣鹤,陈一德丙型肝炎病毒(HCV)是输血后肝炎和散发非甲非乙肝炎的主要致病因子。近年来国内外已报道,在肝细胞癌(HCC)患者特别是乙型肝炎病毒标志阴性者中,抗-HCV有高检出率。作者为进... 相似文献
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原发性肝癌患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒基因的PCR检测 总被引:2,自引:0,他引:2
用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测了原发性肝癌(PLC)患者血清及肝癌和癌旁肝组织中的庚型肝炎病毒(HGV)RNA,以PCR-双脱氧末端终止法测定了PCR产物的核苷酸序列。结果显示,血清和肝组织中HGVRNA的检出率分别为19.4%(13/67)和25.7%(9/35),且HGVRNA在肝癌组织呼吕旁肝组织中同时存在,血清和肝组织中HGV RNA检测结果的符合率为85%;5′非编码区(5 相似文献
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本文应用PCR法检测26例肝癌组织中的HBVC及X基因。结果显示,26例中C区基因全部阳性。X基因20例阳性;C区基因呈单一条带,X基因除5例为单一条带外,另有8例为三条带,7例为二条带,呈多态分布,提示X基因区有基因缺失、变异或插入状态存在,而两种基因的阳性对照均在预期位置出现单一条带,阴性对照未出现扩增条带,本文还对X基因致癌机制以及对其反式激活作用与其产物对细胞代谢的影响。对HCC的形成、发 相似文献
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丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠模型的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立丙型肝炎病毒(HCV)转基因小鼠模型,探讨丙型肝炎发病机制,研究HCV结构蛋白编码基因的功能与致病作用。方法采用长片段聚合酶链反应技术扩增HCV结构基因,构建稳定表达与诱导表达两种真核细胞表达重组体,经体外细胞转染后,将具有表达功能的线性化表达元件采用显微注射法,直接导入1736枚小鼠受精卵,先后移入69只假孕母鼠输卵管。结果妊娠受体25只,产仔105只,成活57只。注射卵成仔率仅3.28%。经聚合酶链反应扩增、测序、酶切及Southern杂交鉴定,获阳性首建鼠26只,注射卵首建鼠成功率仅1.50%。其中稳定表达型10只,诱导表达型16只。经与正常鼠交配,获F1阳性杂合鼠分别38只、20只。一个纯合子品系。结论研究建立了稳定表达与诱导表达两类HCV结构基因转基因小鼠,为进一步研究HCV致病机制,HCV基因功能奠定了基础。 相似文献
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肝细胞癌患者乙、丙和丁型肝炎病毒感染状况 总被引:17,自引:0,他引:17
为探讨乙型、丙型和丁型肝炎病毒(HBV,HCV和HDV)感染对肝细胞癌(肝癌)发生的意义,本文作者采用ELISA和聚合酶链反应法对72例广东籍肝癌患者HBV、HCV和HDV血清标志以及血浆HBVDNA和HCVRNA进行了检测。HBsAg和抗-HCV阳性率分别为84.7%和18.1%,显著高于128名健康对照者。HBsAg和/或HBVDNA总阳性率为93.1%,抗-HCV和/或HCVRNA阳性率为27.8%,HBV和HCV重叠感染率为22.2%。其中61例HBsAg阳性肝癌的HDV血清标志检出率为14.8%,明显高于61例HBsAg阳性的肝炎对照者。结果表明,广州地区肝癌的发生,主要与HBV和HCV感染密切相关外,且可能与HDV感染有关。 相似文献
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肝细胞癌组织中HCV复制中间体的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道在逆转录反应时仅加入与负链(复制中间体)HCVRNA互补的有义外引物,待将逆转录酶变性灭活后,再加入反义外引物,然后进行两轮聚合酶链反应(PCR)扩增。用这种逆转录反应和套式PCR方法,检测了HCC组织和对照血清中负链HCVRNA的存在状况。结果负链HCVRNA在10例(其中3例为已测血清总HCVRNA阳性,余7例为随机选择)HCC组织中检出5例,而在5例(其中3例与组织配对)总HCVRNA的HCC阳性病人血清则均阴性。表明HCC组织中确有HCV复制,从而进一步提示HCV感染与我国HCC的发生密切相关。 相似文献
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原位聚合酶链技术检测肝细胞癌组织内丙型肝炎病毒核酸及其意义 总被引:3,自引:0,他引:3
应用一步反转录。聚合酶链原位扩增法(ORT-PCRIS)检测肝细胞癌(HCC)及癌周组织内丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA),同时以一步反转录-PCR(ORT-PCR)法检测血清及肝组织匀浆内HCVRNA。发现癌和癌周组织经原位扩增后HCVRNA检出率为77.8%(2/27)及81.5%(22/27),而血清及组织匀浆内仅为29.6%及37.O%,两者与癌及癌周组织相比差异均有显著性(P<0.01)。ORT-PCRIS示在癌组织中HCVRNA以核型为主(12/21),阳性细胞点样分布,细胞内信号强度多为+(57.1%);而癌周组织以核浆型为主(14/22),阳性细胞弥漫分布,信号强度多为+++(50.0%)。无论在癌还是在癌周组织均未发现HCVcDNA存在。结果提示ORT-PCRIS优于RT-PCR,HCV对本地区HCC发生、发展起着极为重要的作用。癌周HCV复制较癌组织内活跃,癌和癌周细胞核阳性表明HCVRNA在核内整合或复制,这种整合或复制对肝细胞基因组DNA产生的影响可能与乙型肝炎病毒(HBV)相类似。 相似文献
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聚合酶链反应检测乙型肝炎患者心肌组织中HBV DNA 总被引:4,自引:0,他引:4
应用巢式聚合酶链反应(PCR)技术检测了18例乙型肝炎(乙肝)患者石蜡包埋心、肝组织中的HBV DNA,并与其免疫组化及原位杂交结果作了比较。二组引物检测的结果表明:在肝组织中均有HBV感染,其中5例有HBV复制。心肌组织中HBV DNA的检出率为55.6%,不存在HBV的复制。心脏病理检查可见一些非特异性改变,如脂变、水肿和纤维素样坏死等。病理变化与心电图、临床症状、体征及PCR检测结果无相关性 相似文献
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聚合酶链反应检测乙型肝炎患者肝外组织中的乙型肝炎病毒DNA 总被引:21,自引:0,他引:21
应用巢式聚合酶链(PCR)技术对18例石蜡包埋的胆囊、肾、脾、肾上腺、心、睾丸、胰腺及肝脏组织的乙型肝炎病毒(HBV)DNA进行了检测,并与其免疫组化及原位杂交方法作比较。二组引物检测的结果表明:肝组织中均有HBV感染,其中5例有HBV的复制。肝外组织中HBV检出率分别为胆囊85.7%、75.0%、肾72.7%、肾上腺66.7%、心脏55.6%、睾丸55.6%和胰腺54.5%,但均未检测出HBV的复制,PCR检测发现与免疫组化及原位杂交结果基本一致。HBV可以感染肝外组织但并不在这些组织中复制的发现可以解释受感染的肝外组织可以作为肝外感染源,但并不引起这些脏器出现明显的病理变化。 相似文献
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原发性肝细胞癌中乙型肝炎病毒X抗原表达的分析 总被引:2,自引:0,他引:2
我们前已报道用抗HBVx抗原(HBxAg)三种不同肽段的抗体检出肝癌细胞中HBxAg的存在。我们用PCR技术扩增肝癌肝组织中的x基因,用重组HBxAg及其抗体分别检测肝癌患者血清中的抗HBx和HBxAg并用免疫组织化学的方法分析肝组织中HBxAg的表达及其分布。我们发现HBxAg在肝癌肝组织中阳性率高达92.6%而且分布广泛,主要表达在细胞浆,但细胞核内亦有见到。癌旁组织检出率也很高,而且在小胆管上皮细胞内亦见有HBxAg的存在。研究结果表明HBxAg的表达与肝癌有密切关系 相似文献
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丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中HCVRNA存在情况及有其临床意义,方法 应用套式PCR检测46例急性丙型肝炎(丙型肝炎以下简称丙肝)和42例慢性丙型肝炎患者血清和PBMC中HCVRNA。结果 慢性丙型肝炎患者PBMC中HCVRNA检出率显著高于急性丙型患者(P〈0.001),急,慢性丙型肝患者血清和慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于ALT正常的抗-HCV阳性 相似文献
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目的 了解静脉毒瘾者乙型肝炎病毒(HBV),丙型肝炎病毒(HCV)及庚型肝炎病毒的感染状况。方法 对广东省江门市120例静脉毒瘾者血浆的HBV、HCV和HGV的标记物进行了检测,采用ELISA法检测HBsAg,HBeAg,抗-HBc,抗-HBe,抗-HBs,抗-HCV;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGV RNA。结果 120例静脉毒瘾者中HBsAg阳性有13例(10.83%),抗-HBs阳性41例(34.71%),单项抗-HBc阳性7例(5.83%),抗-HCV阳性89例(74.17%),HGV RNA阳性28例(23.33%)。13例HBsAg阳性中9例抗-HCV阳性,3例HGV RNA阳性;7例单项抗-HBc阳性中5例抗-HCV阳性,2例HGV RNA阳性;28例HGV RNA阳性中20例抗-HCV阳性;2例HBsAg、抗-HCV、HGV RNA同时阳性。结论 静脉毒瘾者是HCV和HGV的高危感染人群;HBV,HCV和HGV三种病毒的感染之间在静脉毒瘾者中无相关性。 相似文献
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本文采用光敏生物素标记的HCVcDNA探针和免疫金银显色法对42例肝癌和癌旁肝组织中的HCVRNA和HCAg进行了检测,发现HCVRNA可以感染肝癌细胞,其分布状态及其抗原表达亦与肝组织一致。这些阳性细胞在组织中的感染状态多呈区域性,在此区域又可呈片状、簇状或散在分布。 相似文献
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周围血白细胞的复制型丙型肝炎病毒RNA的检测及临床意义 总被引:6,自引:0,他引:6
用简并引物作套式反转录。聚合酶链反应检测正、负链丙型肝炎病毒(HCV)RNA。显示30例急、慢性丙型肝炎患者的血清及血浆中,7例无症状抗-HCV阳性者的血清、血浆及周围血白细胞(PBL/C)中,均未检出负链HCVRNA。慢性丙型肝炎者PBI(中正、负链HCVRNA的检出率高于急性丙型肝炎及无症状抗-HCV阳性者(P<0.05~0.001)。17例经肝组织学检查的患者中,急性肝炎(AH)者PBL/C的正、负链HCVRNA检出率低于慢性活动性肝炎(CAH)者(P<0.05)。1例AH及6例CAH患者肝组织内正、负链HCVRNA全部阳性。证实丙型肝炎患者的PBL/C确可被HCV感染,病程越长,被HCV感染的可能性越大;病情活动者,PBL/C中负链HCVRNA的检出率越高。提示HCV不仅可以感染PBLC,而且可在其中复制;负链HCVRNA的出现与病情活动有关。 相似文献