抗－HEV免疫吸印法的建立及应用

应用ＨＥＶ基因结构区的重组融合蛋白，建立了免疫吸印法（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ．ＷＢ）检测抗－ＨＥＶＩｇＧ，并与现行的酶联免疫试验（ＥＩＡ）进行了比较。结果表明，ＷＢ检出戊型肝炎暴发点急性肝炎病人血清抗－ＨＥＶＩｇＧ的阳性率（６８／７３，９３．２％）高于现行的ＥＩＡ（５１／７３，７００％），对实验感染猕猴抗－ＨＥＶＩｇＧ检出率前者也高于后者（分别为７／７和５／７），且检出抗－ＨＥＶＩｇＧ时间较长，滴度也较高。对多种对照血清检测结果表明，除５０％（３／５８）的丙型肝炎血清呈阳性外，甲型、乙型、ＥＢＶ、ＣＷＶ肝炎及健康人血清均为阴性，说明该法具有良好的灵敏度和特异性，可望用于流行病学调查和基础研究，也可用于疑是戊型肝炎病例的确诊     

抗戊型肝炎病毒IgG和IgM抗体对诊断急性戊型肝炎的意义

目的 探讨抗戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体对诊断急性戊型肝炎（ＨＥ）的意义。方法 应用酶联免疫法（ＥＩＡ）检测我国７个城市共计１４３例散发性ＨＥ病人急性期血清和其中５６例病人的３５９份系列血清,以及４只实验感染ＨＥＶ猕猴的６８份系列血清的抗－ＨＥＶＩｇＭ和ＩｇＧ。结果 ７个城市１４３例散发性ＨＥ病人急性期血清抗－ＨＥＶＩｇＧ阳性率为１００．０％,明显高于抗－ＨＥＶＩｇＭ（７３．４％）,９     

戊型肝炎IgM和IgG抗体的临床免疫诊断意义

采用标记第二抗体间接ＥＬＩＳＡ发现，ＩｇＧ－抗ＨＥＶ阳性率２３．５％（４６／１９６），其中ＩｇＭ－抗ＨＥＶ阳性１０例（５．１％）。于１９９３年２月～１９９４年１月继续观察ＩｇＭ－抗ＨＥＶ免疫检出率为６．７％（１０１／１５１５），ＩｇＭ－抗ＨＡＶ检出率为１４．２％（３０２／２１３３）。按月和月／年统计阳性率动态，表明戊型与甲型肝炎全年呈双峰型相伴流行。提示ＩｇＭ－抗ＨＥＶ是诊断现患戊型肝炎的主要免疫指标。     

“急性非甲非乙型”肝炎的病原学分析

对抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ、ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ均（一）、临床诊断为急性非甲非乙肝炎７２例进一步病原学鉴定。以聚合酶链反应检出乙型和丙型肝炎病毒；血清学包括酶免疫法检测抗－ＨＣＶ、抗－ＨＤＶ－ＩｇＭ、抗ＨＥｖ－ＩｇＧ（Ｇｅｎｅｌａｂｓ）、抗－ＣＭＶ－ＩｇＭ和抗－ＥＢＶ－ＩｇＭ。结果诊断丙型肝炎１７例（２３．６％），戊型肝炎１４例（１９．５％），最多的竟是慢性无症状ＨＢＶ感染的急性活动（３４例，４７．２％），其中合并ＨＣＶ例、ＨＤＶｌ例、ＨＥＶ１０例和自发性活动１７例。因而，我国“急性非甲非乙”肝炎的病原学可能相当复杂。     

乙型肝炎病毒核心区DNA疫苗接种后H-2d小鼠的特异性免疫应答

目的观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核心区ＤＮＡ疫苗接种后ＢＡＬＢ／ｃ（－２ｄ）小鼠的特异性免疫应答。方法构建ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗（ＰＪＷ４３０３／ＨＢｃ）;用基因枪法和肌肉注射祛将该ＤＮＡ疫苗接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢＣ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）;５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果该ＤＮＡ疫苗在体外转染细胞中可良好表达ＨＢｃＡｇ。血清抗－ＨＢｃ终点滴度在ＤＮＡ疫苗基因枪组和肌肉注射接种组小鼠分别为１：３２８０５０和１：１０９３５０．两组小鼠的抗－ＨＢｃＩｇＧ亚类均以ＩｇＧ２ａ略占优势。两组小鼠的ＨＢＣＡｔｈｅ异性ＣＴＬ杀伤活性分别达到５１．１％和５５．２％。结论ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗在小鼠实验中具有良好的细胞免疫和体液免疫原性。     

戊型肝炎系列血清抗－HEV61例检测分析

用酶联免疫吸附试验检测戊型肝炎病人的系列血清抗－ＨＥＶ。结果表明，病后２～８周和２～４个月ＩｇＭ抗－ＨＥＶ阳性率分别为６５．６３％（２１／３２）和３３．３３％（２／６），４个月后未检出。ＩｇＧ抗－ＨＥＶ于发病后４天即可阳转，至病后２～４周和５～８周ＩｇＧ抗－ＨＥＶ累积阳转率分别为８６．８９％（５３／６１）和９８．３６％（６０／６１）。多数病人ＩｇＧ抗－ＨＥＶ持续时间较短，病后６个月内和２年内分别为６７．２１％（４１／６１）和９１．８０％（５６／６１）阴转。多数病人ＩｇＧ抗－ＨＥＶ在急性期处于高水平，恢复期迅速下降。     

HBcAg DNA疫苗诱导小鼠（H—2^b）特异性细胞和体液免疫应答

目的 观察ＨＢｃＡｇ ＤＮＡ疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠（Ｈ－２＾ｂ）的特异性细胞和体液免疫应答。方法 基因枪和肌肉注射两种方法接种ＤＮＡ疫苗;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢｃ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）;＾５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果 该ＤＮＡ疫苗体外可表达ＨＢｃＡｇ;小鼠经基因枪或肌肉注射接种该疫苗后血清抗－ＨＢｃ滴度分     

血清HBeAg阴性与HBeAg/IC及A1896变异的关系

目的探讨血清ＨＢｅＡｇ阴性（双抗体夹心法）与ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形成及ＨＢＶ变异株Ａ１８９６的关系，评价ＨＢｅＡｇ／ＩＣ检测的临床意义．方法单克隆抗ＨＢｅ固相ＥＬＩＳＡ检测血清中ＨＢｅＡｇ／ＩＣ；套式多聚酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ；３＇碱基特异多聚酶链反应判断Ａ１８９６变异；ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ，研究对象为１１７例慢性ＨＢＶ感染者，２０例健康对照统计处理采用卡方检验．结果ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ检出率明显高于ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性血清，Ｐ＜０００１（９１３％ｖｓ３６２％）；２９份ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中仅５例（１７２％）检出Ａ１８９６，而且其中２例与野毒株（Ｇ１８９６）混合感染并伴ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性．２９份中１７份（５８７％）为ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性的Ｇ１８９６感染；血清抗ＨＢｅ阳性组Ａ１８９６检出率高于抗ＨＢｅ阴性组，Ｐ＜００５（２５％ｖｓ３２％）．结论ＨＢｅＡｇ／ＩＣ为ＨＢＶ活跃复制指标；临床ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性患者仍多数为Ｇ１８９６感染，ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形致双抗体夹心法不能检出ＨＢｅＡｇ；抗ＨＢｅ应答可能为促使前Ｃ变异的重要因素     

肝癌组织IGF－II、IGF－IIR、HBxAg的表达与细胞DNA倍体和S期的关系

为了探讨胰岛素样生长因子ＩＩ（ＩＧＦ－ＩＩ）在肝癌发生发展中的作用，采用免疫组织化学ＰＡＰ法检测了肝癌组织ＩＧＦ－ＩＩ及其受体（ＩＧＦ－ＩＩＲ）、乙型肝炎病毒Ｘ抗原（ＨＢｘＡｇ）的表达，并用流式细胞术分析了ＩＧＦ－ＩＩ表达与细胞ＤＮＡ倍体、Ｓ期的关系。结果显示：（１）ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＦ－ＩＩＲ、ＨＢｘＡｇ在血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）标记阳性的癌组织阳性率均为９３％（ｎ＝１５），高于ＨＢＶ标记阴性的癌组织（１／５）（Ｐ＜０．０５）；（２）ＩＧＦ－ＩＩ阳性的癌组织ＤＮＡ异倍体出现率为１００％、Ｓ期比例为２８．８±６．４％，高于ＩＧＦ－ＩＩ阴性的癌组织ＤＮＡ异倍体出现率（６０％）和Ｓ期比例（１２．８±２．４％）（Ｐ＜０．０５）；（３）肝癌组织ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＦ－ＩＩＲ的表达与ＨＢｘＡｇ表达一致。研究结果提示ＩＧＦ－ＩＩ可能在乙型肝炎病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ）阳性的肝细胞癌发生发展中有某种作用，ＨＢｘＡｇ可能是ＩＧＦ－ＩＩ基因的一种激活因子。     

维持性血液透析病人HCV感染标志的检测及临床意义

为了评价血液透析病人ＨＣＶ感染状况及对肝功能的影响,对６２例维持性血液透析病人应用第二代酶联免疫吸附试验和逆转录聚合酶链反应检查抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ。结果显示;６２例病人中,抗－ＨＣＶ阳性ＩｇＭ２７例（４３．６％）抗－ＨＣＶＩｇＧ阳性２９例（４６．８％）,ＨＣＶＲＮＡ阳性３４例（５４．８％）三项任一项阳性者３８例（５９．７％）阳性组与阴性组相比,两者在性别,年龄,肾功能,ＨＢＶ标志,ＥＰＯ应用     

抗-HGV在各型病毒性肝炎患者中的检出情况及意义

目的了解抗庚型肝炎病毒抗体（抗－ＨＧＶ）在各型病毒性肝炎患者中的检出情况及临床意义。方法对１９０例不同病原的病毒性肝炎患者进行抗－ＨＧＶ（ＥＬＩＳＡ）检测,对其中抗－ＨＧＶ阳性者进行ＨＧＶ－ＲＮＡ（ＲＴＰＣＲ）检测。结果①在各型病毒性肝炎患者中总的抗－ＨＧＶ阳性率为１２１％（２３／１９０）。②ＨＣＶ感染者中抗－ＨＧＶ的阳性率（２６９％）最高,其后依次为ＨＥＶ（１８２％）,ＨＢＶ（１１２％）,ＨＤＶ（８３％）。③２３例抗－ＨＧＶ阳性的患者中仅有５例（２１７％）ＨＧＶ－ＲＮＡ同时检测阳性。④抗－ＨＧＶ阳性组与抗－ＨＧＶ阴性组比较,两组肝功能指标无统计学差异（Ｐ＞００５）。结论①抗－ＨＧＶ阳性并不一定代表ＨＧＶ病毒复制或现症感染。②ＨＧＶ致病性可能较弱。③ＨＧＶ可能通过多途径传播。     

戊型肝炎抗体阳性与血清谷丙转氨酶的关系探讨

我们对３００例ＨＥＶ感染者血清ＡＬＴ的关系进行了观察和探讨，现报告如下。 １．资料与方法：来自本院门诊（１６０例），住院患者（１４０例），ＡＬＴ异常（５０—２ ０００ Ｕ／Ｌ），并且已排除甲、乙、丙、丁型肝炎病毒感染者，标本低温保存待测。抗ＨＥＶ－ＩｇＧ、ＩｇＭ检测试剂由上海华美公司提供，ＡＬＴ检测试剂由上海长征医院提供，抗ＨＥＶ抗体检测用ＥＬＩＳＡ法，仪器为ＵＶ－３５５０型酶标仪，ＡＬＴ用速率法（ＴＡＢ全自动生物化学分析仪）。 ２．结果：（１）以ＨＥＶ感染阳性ＡＬＴ活性分别为 ５０— １００ Ｕ／Ｌ…     

庚型肝炎病毒（GBV—C／HGV）与HBV和HCV联合或重叠感染的初步研究

目的 研究庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）与ＨＢＶ和ＨＣＶ联合或重叠感染的情况，方法 采用ＥＬＩＳＡ的方法检测血液制剂和血源乙肝疫苗原料血浆中的ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ；并用５′非编码区的引物，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ。结果 ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ均阴性血浆的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性率为１８．８％（１５／８０）；ＨＢｓＡｇ阳性而抗ＨＣＶ阴性血浆的ＧＢＶ－     

单一抗HBc阳性个例的血清传染性和随访

为阐明单一抗ＨＢｃ（＋）血清的传染滴度和抗ＨＢｃ（＋）病毒携带者的发展结果，以ＰＣＲ检测１５８个例的３３８份血清，６０例（３８．０％）检出ＨＢＶＤＮＡ。以ＥＩＡ检测抗体滴度：１、１０￣（－１）、２５￣（－１）、１００￣（－１）、２５０￣（－１）和１０００￣（－１）的ＨＢＶＤＮＡ检出率分别为０、５０．０％、４４．４％、６２．７％、８５．７％和１００％，表明滴度与传染性一致，但不存在界限值。经七年随访：病毒血症持续者５１．７％，间歇检出者３３．３％，消失者仅１５％，提示其传染状态相当稳定。     

甲型肝炎患者抗－HAV－IgM特异性循环免疫复合物的检测及其动态变化

甲型肝炎患者抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ特异性循环免疫复合物的检测及其动态变化郝春秋，阎荣，周永兴，陈龙邦，陈远鑫本文作者建立了检测抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ特异性循环免疫复合物（ＳＣＩＣ）的聚乙二醇酶联免疫吸附法（ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡ），对８３例急性黄疸型甲型病毒性肝...     

抗—HBe阳性慢性乙型肝炎病毒感染：病毒前C变异与病变活动

抗－ＨＢｅ（＋）的慢性活动性肝炎５１例，以聚合酶链反应检出ＨＢＶ ＤＮＡ４８例（９４．１％）。对６例以反应产物直接序列分析，发现前Ｃｎｔ８３发生Ｇ→Ａ（Ａ８３）点突变，使密码２８由于ＴＧＧ变异为终止密码ＴＡＧ而不能编码ＨＢｅＡｇ。以抗－ＨＢｅ（＋）的慢性无症状ＨＢＶ携带者３０例为对照，仅１２例（４０％）检出弱ＨＢＶ，ＤＮＡ带。５例序列分析未发现Ａ８３变异。结果提示：变异病毒逃避免疫清除而继续活跃复     

66例慢性非甲非乙型肝炎患者的丙型肝炎病毒感染研究

以ＨＣＶ－Ｔ３序列为引物，结合ＲＴ－ＰＣＲ和寡聚核甘酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测６６例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者的血浆ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性４２例（６３．６％）。同样病例以相当于ＨＣＶＣ区基因编码和ＮＳ３区编码的人工合成肽抗原检测抗ＨＣＶ，阳性４９例（７４．２％）。这６６例慢性ＮＡＮＢＨ病例，抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ双阳性者３８例（５７．６％）；抗ＨＣＶ阴性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者４例（６．１％）；抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者１１例（１６．７％）。其中诊断为散发型ＮＡＮＢＨ者３５例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者１７例（４８．６％），为输血后ＮＡＮＢＨ者３１例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者２５例（８０．７％）。     

抗－HBe阳性慢性乙型肝炎病毒感染：病毒前C变异与病变活动

抗－ＨＢｅ（＋）的慢性活动性肝炎５１例，以聚合酶链反应检出ＨＢＶＤＮＡ４８例（９４．１％）。对６例以反应产物直接序列分析，发现前Ｃｎｔ８３发生Ｇ→Ａ（Ａ８３）点突变，使密码２８由ＴＧＧ变异为终止密码ＴＡＧ而不能编码ＨＢｅＡｇ。以抗－ＨＢｅ（＋）的慢性无症状ＨＢＶ携带者３０例为对照，仅１２例（４０％）检出弱ＨＢＶＤＮＡ带。５例序列分析未发现Ａ８３变异。结果提示：变异病毒逃避免疫清除而继续活跃复制，与病变持续活动有关。     

新疆不同民族丙型肝炎患者并发HGV感染的研究

本文应用国产庚型肝炎病毒抗体（抗－ＨＧＶ）酶联免疫试剂,检测了新疆地区１５２例不同民族中ＨＣＶ感染者的抗－ＨＧＶ,并用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测ＨＧＶ病毒核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ）。结果显示：抗－ＨＧＶ阳性率２２．４％（３４／１５２）;ＨＧＶ－ＲＮＡ总阳性率４４．７％（６８／１５２）。各民是以回族最高,依次为维吾尔族、蒙古族、哈萨克族、汉族,但经统计学处理,尚无显著差异。本研究结果证实,     

甲,乙,丙型肝炎病毒重叠感染

４９３名健康献血员和１９２例ＨＢＶ感染者，用ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ和抗一ＨＣＶ，发现献血员之ＨＣＶ感染率为１．６２％。ＨＢＶ感染者的ＨＡＶ、ＨＢＶ二重感染率为１６．７％，ＨＢＶ、ＨＣＶ二重感染率为３．１３％，ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ三重感染率为０．５２％。重叠感染者，３２例ＨＡＶ和ＨＢＶ二重感染者，ＨＢｅＡｇ２８例转阴，与１５３例单纯ＨＢＶ感染者５７例转阴比较，有显著性差异（ｐ〈０．０５