他克莫司血药浓度检测方法的研究进展

他克莫司是一种大环内酯类免疫抑制剂,临床上广泛用于器官移植和自身免疫系统疾病的治疗,其疗效和不良反应与该药血药浓度密切相关,并且个体差异性较大。临床上常用液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）、微粒子酶免疫分析法（MEIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、酶放大免疫分析法（EMIT）、化学发光微粒子免疫法（CMIA）等检测技术对他克莫司血药浓度进行检测。对他克莫司血药浓度检测方法的研究进展进行综述,为临床合理用药和相关领域的研究提供借鉴。     

免疫抑制剂治疗药物监测在器官移植领域的应用进展

排斥反应是影响异体器官移植术后移植器官长期存活的独立危险因素，免疫抑制剂的应用可预防排斥反应发生，极大地提高了患者移植物的存活率，但临床上在使用免疫抑制剂过程中，需要对治疗药物进行浓度监测。目前常用的检测方法有免疫分析法及色谱法，其中液相色谱串联质谱法因具有专属性强、准确度高、分析快速、灵敏度高等优点，大多数临床实验室以该测定方法作为治疗药物监测的金标准。基于临床常用免疫抑制剂的药理及药动学特性，将免疫抑制剂的检测方法分为全血型免疫抑制剂的检测与血浆型免疫抑制剂的检测，并分别对两类药物的血药浓度监测方法进行综述，旨在为免疫抑制剂在器官移植领域的临床安全合理用药提供更直接的指导依据。     

辣根过氧化物酶标记JWA抗体及其免疫检测反应中应用

目的：运用辣根过氧化物酶标记JWA 单克隆抗体,并且将标记的抗体应用于ELISA法和western blot等免疫检测反应中。方法：运用高碘酸盐-四氢硼化钠氧化还原体系活化辣根过氧化物酶,活化的辣根过氧化物酶按1∶1标记JWA单克隆抗体;将HRP标记的抗体分别运用直接和双夹心ELISA测试;同时将标记单克隆抗体运用于western blot检测。结果：辣根过氧化物酶成功标记JWA单克隆抗体。其中HRP-JWA（4C9）抗体在直接法ELISA试验中和多肽的结合能力高于HRP-JWA（7C3）;其在450 nm处的最大吸光度值为0.96。双夹心ELISA实验中,预先包被JWA（4C9）单抗,检测抗体使用HRP-JWA（7C3）可以得到较好的实验结果,在450 nm处的最大吸光度值为1.30。在western blot实验HRP-JWA抗体浓度1.0μg·mL-1可以检测出SGC7901细胞中目的蛋白。结论：运用氧化还原方法成功标记JWA单克隆抗体,并可以初步应用于免疫反应的检测。     

生物制品中的残留宿主细胞蛋白及其检测方法

宿主细胞蛋白（host cell protein,HCP）是指生物制品中来自生产细胞系的宿主细胞的蛋白成分,主要包括宿主细胞分泌的蛋白以及细胞凋亡、代谢产生的部分结构蛋白。作为生物制品生产过程中的残留杂质,HCP具有潜在的安全风险,包括诱导免疫应答。建立合适的HCP残留量检测方法将有助于监测生产工艺,确保生物制品的质量和安全。此文主要对HCP的分类、质量控制标准、常见检测方法及其原理进行阐述。     

基于表面等离子共振技术检测免疫球蛋白G与Fc段受体结合活性

单克隆抗体因高特异性、低副作用等优点,被广泛应用于肿瘤、自身免疫性疾病和传染性疾病的治疗,是当下的研究热点。免疫球蛋白G(IgG)是目前单克隆抗体药物的主要类型,其与可结晶（Fc）段受体的相互作用与多种生物学功能相关,分析IgG与Fc段受体的相互作用是单克隆抗体药物质量控制的重要组成部分。表面等离子共振（SPR）技术是一种新型光学分析技术,可以实时、无标记检测分子间相互作用。近年来,SPR技术被广泛应用于IgG与Fc段受体结合活性的检测。本文综述了基于SPR技术检测IgG与Fcγ受体（FcγRs）、新生儿Fc受体（FcRn）和补体1q(C1q)结合活性的实验方法以及不同方法结果之间的差异和可能引起这些差异的原因。     

次黄苷三磷酸焦磷酸酶遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和不良反应影响的研究进展

硫嘌呤类药物作为一类常用的免疫抑制剂,广泛应用于临床.然而其治疗窗窄,药动学个体差异大一直是困扰该类药物临床应用的难题.尽管硫嘌呤甲基转移酶（thiopurine methyltransferase,TPMT）基因多态性被认为是影响硫嘌呤类药物药动学的主要遗传因素,但研究结论并不统一.而最近的一些研究将焦点集中到了次黄苷三磷酸焦磷酸酶（inosine triphosphate pyrophosphatase,ITPA）的遗传多态性上.因此,本文就ITPA遗传多态性对硫嘌呤类药物疗效和毒性影响的研究进展作一综述,以期为临床个体化应用硫嘌呤类药物提供理论指导.     

多肽类药物体内分析方法

多肽类药物是新药研究的新领域,也是当今新药研究最活跃和发展最迅速的领域之一。目前,建立测定生物基质中多肽类药物的方法学是世界范围存在的难题,面临着诸多挑战。酶联免疫法(ELISA)及放射同位素标记是定量多肽类药物最常用的方法,应用广泛。但液相色谱-质谱联用技术发展迅速,高专属性、高灵敏度、应用广泛、简便快速等特点势必使其成为多肽类药物体内定量分析的重要手段。本文就目前国际上几种检测方法的优劣、应用现状及发展趋势进行了综述。     

抗人钠碘转运体单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与初步鉴定

目的 制备抗人钠碘转运体(NIS)单克隆抗体。方法 以人NIS蛋白质的二个片段(第2膜外段和第14f段)为抗原免疫小鼠，运用杂交瘤技术，制备鼠抗人NIS单克隆抗体(rhNIS MAb)，采用小鼠Ig亚类测定试剂条测定单抗的亚类，并通过ELISA、Western-blot、免疫组化技术等鉴定其特异性。结果 运用杂交瘤技术成功地制备出能稳定分泌抗人NIS单克隆抗体的细胞系。Western-blot分析表明：此单抗所识别的靶分子的相对分子量主要在97KD，免疫组化染色显示：甲状腺滤泡细胞基底膜上有棕黄色着色。结论 成功地制备出抗人NIS单克隆抗体，为NIS抗原-抗体的研究提供了新的工具，NIS单克隆抗体不仅可以应用于甲状腺、乳腺等领域的基础研究，而且可以用于临床，为甲状腺疾病的诊断和治疗提供切实保障。     

抗美沙酮单克隆抗体制备、鉴定和在侧向免疫层析方法中的应用

目的:制备抗美沙酮(MTD)单克隆抗体(mAb),并将筛选到的抗体应用于侧向免疫层析方法检测尿液中MTD。方法:用美沙酮BSA偶联蛋白(MTD-BSA)免疫纯系Balb/c小鼠,采用直接及间接ELISA法进行药物交叉反应,筛选获得能稳定分泌抗MTD的单克隆杂交瘤细胞株。制备腹水,纯化后得到特异性抗MTD单克隆抗体(mAb),进行效价、特异性、纯度、亚类的鉴定分析,并用筛选到的抗体建立检测MTD的侧向免疫层析方法。结果:成功获得1株稳定分泌抗体的阳性细胞株,用建立的侧向免疫层析方法检测临床样品与对照方法比较总符合率为100%。结论:成功筛选出了能稳定分泌mAb的细胞株,抗体应用于侧向免疫层析检测方法中,能快速、特异、灵敏地检测出临床样品中的MTD,为临床应用快速检测MTD指标提供了方法。     

天然毒素的检测

天然毒素的检测董之海（防化研究院，北京１０２２０５）自然界中存在着许多剧毒物质，其毒性远超过现有的合成毒物，所以，对天然毒素的检测研究一直倍受关注．物理化学方法用于分析检测天然毒素是一个重要的技术领域．离子射流质谱法（ＩＳＭＳ），高压液相色谱（ＨＰＬ...     

乙肝五项指标两种常用检测方法的比较分析

目的比较分析乙肝五项指标两种检测方法（TRFIA和ELISA）的应用价值。方法对501份血清分别采用时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）和酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测乙肝五项指标，并统计分析两种方法的检测结果的阳性率和阳性符合率。结果两种方法检测血清中的乙肝五项的阳性率差异均无统计学意义（P〉0．05），乙肝五项指标的阳性符合率分别是HBsAg99．6％、HBsAb85．7％、HBeAg98．2％、HBeAb97．6％、HBcAb97．1％。结论TRFIA和ELISA两种方法对检测乙肝标志物乙肝五项均有较高的特异性和敏感性，ELISA法方便快捷，更适合基层医院使用，但易出现假阳性和假阴性，TRFIA法不仅特异性强、敏感性高，并且能够准确定量，与ELISA法相比，能更好地反映患者体内乙肝病毒复制状况、乙肝疫苗接种后免疫效果以及抗病毒药物的疗效。     

免疫层析法测定动物源性食品中磺胺嘧啶残留

建立了动物源性食品中磺胺嘧啶残留的免疫层析快速测定方法。用胶体金标记磺胺嘧啶单克隆抗体作为显色剂，磺胺嘧啶竞争物包被于硝酸纤维素层析膜上作为捕获试剂，采用竞争反应模式制成胶体金免疫层析试纸。该免疫层析试纸可以在15min内完成对磺胺嘧啶残留的半定量检测。读条系统判定灵敏度为5ng／ml，肉眼判定检测限灵敏度为10ng／ml，与其它磺胺类药物无交叉反应。该方法在不同动物源性食品（鸡肉、鸡蛋、鸡肝、猪肉、猪肝、牛奶、蜂蜜）中添加磺胺嘧啶的回收率在68．1％-118．8％范围内。动物试验样品检测结果表明，该方法与ELISA及HPLC具有好的符合率。该方法灵敏度高，检测准确、简便、快速，有良好的开发应用前景。     

氯胺酮单克隆抗体的研制及其免疫学特性研究

目的：制备氯胺酮单克隆抗体（McAb）,并对其特性进行分析。方法：采用丁二酸酐偶联法将氯胺酮（Ket）与BSA和OVA偶联合成人工完全抗原Ket—BSA和Ket—OVA,选择Ket—BSA免疫BALB／C小鼠,用Ket—OVA作包被抗原进行间接ELISA和竞争ELISA检测免疫小鼠血清效价,从而选择小鼠脾细胞为融合备用。应用杂交瘤技术制备氯胺酮单克隆抗体（Ket—McAb）,并对其效价、亲和性和特异性等进行鉴定。结果：成功地合成了氯胺酮人工完全抗原,用该抗原免疫小鼠产生高效价抗Ket抗体（1：12800）,并能被Ket单体抑制;建立了一株分泌稳定的单克隆抗体细胞株,细胞培养上清液的抗体效价为1：6400,腹水抗体效价为2×10^6;同种型为IgG2a,50％抑制浓度为80ng／ml,经鉴定能与Ket特异性结合与其它毒品类药物如冰毒、摇头丸,大麻、吗啡等无交叉反应。结论：抗氯胺酮McAb是一种特异的探针,对吸毒和戒毒病例的检测具有潜在的应用价值。     

喹诺类药物在临床评价

喹诺酮类药物是近年来迅速发展的一类抗菌药，自１９６２年研制了第一个喹诺酮类抗菌药萘定酸之后相继又研制出出氟喹诺类，如诺氟沙星（ｎｏｒｆｌｏｘａｉｃｉｎ）、氧氟沙星（ｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ＯＦＬＸ）和环丙沙星（ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎｅ）类。此类药物疗效肯定，毒副作用小，广泛应用于临床各科杂性疾病。本文就该类药物的作用机理，应用范围及其他药物的相互作用等问题综述如下。     

竞争性ELISA方法检测小鼠血清中的P53蛋白

目的建立动物组织内P53蛋白的免疫检测分析方法,为P53生物药物的代谢分布研究提供检测手段。方法辣根过氧化物酶（HRP）标记抗P53蛋白单克隆抗体3P40,应用标记后的抗体及重组P53蛋白的检测,建立竞争性ELISA检测方法;应用此方法建立血清样品中P53蛋白标准曲线,测定腹腔注射P53后不同时间小鼠血清中P53浓度。结果利用亲和层析纯化的3P40,进行HRP标记,ELISA检测3P40HRP滴度可达1∶200 000;建立的竞争性ELISA方法可以检测PBST中P53蛋白,灵敏度达30 ng/ml,日内精密度较高,相对标准偏差（RSD）小于5%,体现较好的重复性;分别应用正常小鼠血清、PBST稀释的重组P53蛋白样品进行竞争性ELISA检测,结果显示小鼠血清成分对P53蛋白检测有一定的影响;应用血清制备P53蛋白的标准曲线,检测了腹腔注射P53蛋白后不同时间点小鼠血清样品中的P53蛋白浓度。结论进行了抗P53单克隆抗体3P40的HRP标记,建立了竞争性ELISA方法,可用于P53蛋白药物血药浓度检测。     

手持拉曼光谱仪在抗体类药物鉴别中的应用研究

目的：基于主成分分析（PCA）算法的Trutools模式，利用手持拉曼光谱仪建立快速鉴别抗体类药物的方法。方法：通过选取抗PD-1抗体、抗VEGF抗体、抗Her-2抗体，采集拉曼光谱数据，建立数据模型，分别对3种抗体进行鉴别。选择其中一种抗PD-1抗体，采用加热和光照两种条件对其进行加速降解处理，利用手持拉曼光谱仪对加速降解的抗体进行检测，研究所建方法能否检出加速降解的抗体。并通过分子排阻色谱（SEC-HPLC）、离子交换色谱（IEC-HPLC）及竞争结合酶联免疫吸附测定（ELISA）法对加速降解的抗体进行检测，与拉曼光谱检测结果进行比较。结果：通过建立的拉曼光谱数据模型可以鉴别3种不同类型的抗体，且拉曼光谱可以鉴别加速降解后的抗PD-1抗体。结论：手持拉曼光谱仪可以用来快速鉴别抗体类药物。本研究首次将手持拉曼光谱仪引入到抗体药物大分子检测中，为抗体类药物的现场快速鉴别及打假工作提供了新的工具与方法。     

抗红花花粉蛋白单克隆抗体的研制

目的：研究红花中过敏原性物质的检测和评价方法,为筛查红花制剂过敏原残留、优化红花制剂工艺、预防红花制剂过敏反应的发生提供新的研究思路和方法。方法：以水煮醇沉法提取红花花粉蛋白,用花粉蛋白免疫小鼠,筛选特异性细胞克隆,扩增、纯化制备抗红花蛋白单克隆抗体。采用酶联免疫吸附剂测定（ELISA）方法检测单克隆抗体对红花抗原的特异性识别情况。结果：3株单克隆抗体均能特异性识别红花抗原。结论：抗红花蛋白单克隆抗体对研究红花过敏反应的发生机理、优化红花制剂工艺及降低过敏反应发生具有重要意义。     

磺脲类药物在治疗2型糖尿病中的安全性问题

磺脲类（SU）药物是应用于临床最早和品种较多的一大类药物。虽然各种SU类药物的降糖强度有所不同,但剂量经调整后,每种药的降糖效果基本相当,因此,SU类药物在治疗2型糖尿病中有着重要地位,其降糖机制主要是刺激胰岛素分泌,从而使血糖降低。目前临床应用较多的是第二代SU类药物,合理应用二代SU类药物,关注该类药物的安全性,可减少或避免严重的药物不良反应（ADR）的发生。     

电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析

目的：探讨电化学发光免疫分析及在临床检验中的应用效果。方法指定一名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检验人员分别利用ECLIA、ELISA等方法完成100例乙肝患者血样中乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）检验。记录两种方法检测抗-HBc阳性率，给予统计学分析后得出结论。结果ECLIA法检测100例乙肝患者血样中抗-HBc阳性率高达98.00％，显著高于ELISA法检测阳性率81.00％，对比结果具有统计学意义（P＜0.05）。结论电化学发光免疫分析方法可显著提高临床检验结果准确性，为临床医生提供真实可靠的诊断依据，使患者及时确诊病情并获得正确治疗，保障其临床疗效及预后。     

ICP-MS在工业领域金属元素检测中的应用研究进展

电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）是一种基于电感耦合等离子体发射光谱（ICP-OES）和质谱法（MS）的综合性分析检测技术,拥有较低检出限、高灵敏度、分析速度快、可同时检测多种金属元素等优势,在工业样品金属元素检测方面具有广阔的应用前景。文章对近年来ICP-MS在工业领域的金属元素分析检测相关文献进行梳理,报道了其在合金、半导体、矿石、水资源、食品、日化品以及药品等方面较为新颖的研究成果,为工业领域中金属元素杂质检测方法的开发提供借鉴。