~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合多肽在荷人卵巢癌裸鼠体内的分布和显像研究

目的 研究~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)在荷人卵巢癌裸鼠体内分布和放射免疫定位显像.方法 用NHS-MAG3为双功能鳌合剂,固相法合成多肽.~(99)Tc~m预亚锡直接标记法进行标记,纸层析法测定标记率.经尾静脉注射于荷瘤鼠体内,取不同时相进行SPECT显像,测定标记物在体内的分布情况并进行分析.结果 融合多肽的~(99)Tc~m标记率为95.27%,放射化学纯度为96%,放射性浓度24.6 MBq/ml.经鼠尾静脉注射后1 h,植瘤部位开始出现放射性浓集,肾脏、肝脏及膀胱组织也可见显像;注射后3 h肿瘤显像最清晰,每克组织注射百分剂量率(%ID/g)为(30.20±6.89).其余大部分脏器的T/NT值均达最高,最高为肌肉(13.13);注射后4 h肿瘤部位显像逐渐消退.对照组裸鼠的肿瘤部位始终未见显像.结论 筛选获得的VEGFR-3高亲和融合肽能够靶向荷瘤鼠体内肿瘤组织,实现肿瘤的靶向受体显像.     

新型核素分子探针18F-NT 靶向 前列腺癌的实验研究

目的 探讨新型核素分子探针18F-NT 在前列腺癌细胞及荷瘤小鼠的靶向性,为后续18F-NT 靶向前 列腺癌的在体显像提供实验依据。方法 制备18F-NT,并完成质量控制检测。选取高表达神经降压素受体1 （NTR1）的人前列腺癌细胞系PC3,分3 组进行细胞结合实验,分别为实验组、阻断组和对照组（游离18F 离 子）。对照组在细胞中加入游离18F 离子,实验组在细胞中加18F-NT,阻断组细胞中加入18F-NT 前30 min 加 入神经降压素（NT）进行阻断。复制荷PC3 前列腺癌裸鼠模型,分为实验组和阻断组,每组3 只。阻断组单次 尾静脉注射NT 0.2 ml（浓度为1 mg/ml）;实验组注射0.2 ml 生理盐水,30 min 后两组裸鼠尾静脉分别注射 37 MBq/ml 的18F-NT 0.2 ml,1 h 后处死裸鼠,分离主要脏器及肿瘤组织,γ 计数器测量各脏器组织的放射性计数。 分析两组肿瘤细胞的放射性计数及肿瘤组织的放射性摄取值（%ID/g）。结果 成功制备18F-NT,其理化性质 及各项质控指标均达标。细胞结合实验显示,PC3 细胞实验组计数值（5 825.00±1 074.52）/min,高于阻断组 （1 941.66±173.58）/min,两者比较,差异有统计学意义（t =7.227,P =0.003）,而对照组计数值仅为（170.33±56.59）/ min;两组荷瘤裸鼠体内生物学分布实验表明,18F-NT 血液清除较快,主要经肾脏代谢。实验组肿瘤摄取值最高, 为（1.02±0.49）%ID/g,阻断组肿瘤摄取值降低,为（0.21±0.03）%ID/g,两者比较,差异有统计学意义（t = 2.815,P =0.049）。结论 18F-NT 标记率和放化纯高,体外稳定性好,前列腺癌细胞系PC3 结合18F-NT 高,PC3 荷瘤裸鼠的肿瘤摄取18F-NT 高,细胞和荷瘤均能被NT 有效阻断,为后续18F-NT 靶向前列腺癌NTR1 在体显 像打下良好的实验基础。     

131I-rhTSH在荷人分化型甲状腺癌裸鼠模型的体内分布和放射免疫显像

目的：以重组人促甲状腺素（recombinant human thyrotropin,rhTSH）为靶向探针,测定131I标记rhTSH的标记率、放化纯度和比活度,并探讨其在荷人分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcinoma,DTC）裸鼠模型中的体内分布情况和放射免疫显像（radioimmunoimaging,RII）。方法：采用氯胺T法,利用131I标记rhTSH,Sephadex G25M 柱纯化放射性标记物,纸层析法测定其标记率、放化纯度、室温稳定性及血清稳定性,并计算其放射性比活度,进而研究该放射性标记药物在荷K1裸鼠模型中的生物分布及RII情况。结果：131I-rhTSH标记率为（93.04±1.13）%,放化纯度为（97.71±1.14）%,比活度为（4.92±0.06）MBq/μg;131I-rhTSH放于室温1、6、12、24 h后所测得的放射性化学纯度分别为（92.94±0.34）%、（91.81±0.64）%、（91.38±1.20）%、（90.43±0.74）%;而与血清孵育1、6、12、24 h后所测得的放射性化学纯度分别为（92.59±0.73）%、（91.33±0.98）%、（91.01±0.73）%、（89.58±1.33）%。荷K1裸鼠模型的体内分布及单光子发射型计算机断层成像（single photon emission computed tomography,SPECT）显示分子探针131I-rhTSH可以在肿瘤组织中靶向聚集,在24 h 时肿瘤/肌肉（T/NT）比达最高,且肿瘤显影最清晰。结论：成功制备了分子探针131I-rhTSH,在荷人DTC裸鼠模型中有较好的靶向作用,为DTC的进一步诊治奠定基础。     

CD45单抗介导的188Re-亲和素二步法预定位靶向淋巴瘤的实验研究

目的建立CD45单抗介导的188Re-亲和素二步法预定位方法,观察其在荷瘤小鼠体内的生物学分布特点,评价其在淋巴瘤
治疗应用中的可行性。方法CD45单抗及亲和素的188Re标记采用直接标记法,纸层析法测定标记率及放化纯度。取人Raji细
胞移植瘤Nod-Scid小鼠6只,随机分为2组,实验组为二步法预定位组,对照组为188Re-CD45单抗组。注药后0.5、1、6和23 h分
别进行SPECT显像;同时于注药后24 h分别处死2组荷瘤小鼠,取脏器组织及肿瘤,称重,测量放射性计数,经放射性衰变校正
后计算各脏器%ID/g和靶/非靶（T/NT）比值。结果188Re-CD45单抗的标记率（82.52±2.92）%,放化纯度>90%;188Re-亲和素标记
率平均为（80.83±3.48）%。荷瘤小鼠SPECT显像及体内生物分布结果示：在实验组整个显像期间血池内放射性均较低,肝脏和
脾脏内见较多放射性浓聚,注射后1 h移植肿瘤见显影,随着时间的延长瘤内放射性分布增多,1~6 h肿瘤显影渐清晰,并持续到
23 h;注射标记物后24 h,肿瘤摄取（%ID/g）为（1.34±0.52）%,肾脏和肝脏摄取（%ID/g）分别为（6.77±2.32）%和（2.81±1.25）%,其
他脏器内的%ID/g保持在较低水平,24 h肿瘤/血液比值为（4.28±0.82）,肿瘤/肌肉比值为（8.00±0.88）。而对照组则可见肝脏、脾
脏和肾脏内有明显放射性聚集,肿瘤部位显影模糊,20 h血池内仍见有较多放射性分布,肿瘤部位见少量放射性集聚;注射标记
物后24 h,肿瘤/血液比值为（0.58±0.06）,肿瘤/肌肉比值为（3.21±0.24）。结论与188Re-CD45单抗组相比较,CD45单抗介导的
188Re-亲和素二步法预定位组在淋巴瘤荷瘤小鼠体内具有较好的特异性和靶向性,明显提高肿瘤的T/NT比值,标记物注射后1 h
即可使肿瘤显影。
     

131I-VEGF siRNA/SPIO在人肝细胞癌移植瘤裸鼠体内的血液清除动力学及生物分布

目的研究在外加磁场作用下¹³¹I-VEGF siRNA/SPIO在人肝细胞癌移植瘤裸鼠体内的血液清除动力学及生物分布特性。方法以Bolton-Hunter法使VEGF siRNA标记上¹³¹I,以氧化铁超顺磁性纳米颗粒（superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIO）包裹¹³¹I-VEGF siRNA。以人肝细胞癌细胞株Hep G2细胞悬液臀部皮下注射建立人肝细胞癌移植瘤裸鼠模型。45只人肝细胞癌移植瘤裸鼠随机分成外加磁场组（尾静脉注射¹³¹I-VEGF siRNA/SPIO+肿瘤部位外加磁场）、非外加磁场组（尾静脉注射¹³¹I-VEGF siRNA/SPIO+肿瘤部位无外加磁场）及对照组（尾静脉注射¹³¹I-VEGF siRNA+肿瘤部位无外加磁场）。然后进行：（1）血液清除动力学研究：三组人肝细胞癌移植瘤裸鼠（每组5只）尾静脉给药后,分别于0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h、3.0 h、4.0 h、6.0 h、8.0 h、10.0 h、12.0 h时间点尾静脉采血20 μL,测量血样每分钟放射性计数(counts per minute,cpm)值并绘制放射性-时间曲线,计算血液半衰期;（2）体内生物分布研究：三组人肝细胞癌移植瘤裸鼠尾静脉给药1 h后进行SPECT显像（每组5只）及MRI显像（每组5只）,SPECT及MRI显像完毕,依次摘取移植瘤裸鼠肿瘤、皮肤、肌肉、骨、甲状腺、胃、小肠、大肠、肺、脾、性腺、肝、心、肾、膀胱等脏器称重并测量cpm值,然后计算各离体组织的%ID/g[即组织的放射性比活度 (cpm/g) / 注入标记物的放射性比活度 (cpm/g)]。结果本研究分别以薄层层析硅胶板为载体、1∶1丙酮-生理盐水为展开剂和以新华一号滤纸为载体、1∶1甲醇-5%醋酸铵为展开剂测定¹³¹I标记VEGF siRNA的放化纯分别为81.15%和84.05%。外加磁场组、非外加磁场组及对照组移植瘤裸鼠的血液半衰期分别约为（2.27±0.14） h、（2.93±0.20） h和（3.06±0.23） h,外加磁场组半衰期小于其它两组（差异有统计学意义,P<0.01）。SPECT显像显示外加磁场组肿瘤局部明显放射性增浓,非外加磁场组及对照组肿瘤局部未见明显放射性增浓;尾静脉给药前后MRI T1WI显示外加磁场组肿瘤局部信号明显强化,非外加磁场组及对照组肿瘤局部信号未见明显强化;外加磁场组肿瘤组织的%ID/g分布较非外加磁场组及对照组的均明显增高（P<0.01）。结论在外加磁场的作用下,以SPIO作为siRNA载体能够较成功地将¹³¹I-VEGF siRNA转导至人肝细胞癌移植瘤裸鼠臀部皮下的肿瘤部位,对进一步研究肝细胞癌的VEGF靶向治疗、基因治疗以及示踪体内基因转导均有重要的意义。     

99Tcm标记Gd-DTPA-DG及其在裸鼠体内的生物分布

目的 探讨锝(99Tcm)标记顺磁性脱氧葡萄糖类MRI对比剂二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖钆盐(Gd-DTPA-DG)的稳定性及在荷瘤裸鼠体内的生物分布,寻找一种核素与磁共振双模式影像探针.方法 对 Gd-DTPA-DG进行99Tcm标记,并对需要的Gd-DTPA-DG、氯化亚锡(SnCl2·2H2O)用量,pH,温度采用正交实验设计,确定最佳标记条件.采用薄层纸层析法(TLC)分析标记率,体外放置6 h,观察标记物的稳定性.将标记的99Tcm -Gd-DTPA-DG注入裸鼠体内,10、30 min及1、2、4、24 h后断头处死裸鼠,测定血液、心脏、脑、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、肌肉、肿瘤中的每克组织百分注射剂量率(%ID/g).结果 取10 mg Gd-DTPA-DG、0.6 mg SnCl2·2H2O,在pH值小于2时加入新淋洗的Na99TcmO4洗脱液(37 MBq),沸水反应30 min所得99Tcm -Gd-DTPA-DG放化纯度最高,可达98.5%,体外放置6 h,放化纯度仍大于96%.尾静脉注射99Tcm -Gd-DTPA-DG 2 h后,裸鼠肿瘤组织的摄取率约为(1.48±0.12)%ID/g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)达2.91.结论 采用放射性核素99Tcm标记顺磁性对比剂Gd-DTPA-DG 简单易行;荷瘤裸鼠模型显示其具有良好的肿瘤靶向性,有望成为一种极具发展潜力的新型单光子发射计算机断层显像(SPECT)-MRI双模式影像探针.     

短发夹RNA沉默hTERT基因抑制裸鼠皮下人脑胶质瘤生长的实验研究

目的研究靶向人端粒酶逆转录酶（hTERT）的短发夹RNA（shRNA）对裸鼠人脑胶质瘤中hTERT基因表达的抑制作用,以及影响肿瘤增殖并诱导细胞凋亡的作用,为脑胶质瘤的基因治疗探讨新的依据。方法体外培养人脑胶质瘤U251细胞株,建立人脑胶质瘤裸鼠皮下接种模型。将成功造模的36只裸鼠随机分为3组（每组12只）。hTERT shRNA组肿瘤体内原位注射hTERT质粒shRNA（pshRNA）20μg＋脂质体60μl＋PBS;PBS组肿瘤体内原位注射PBS 150μl;空质粒组肿瘤体内原位注射空质粒20μg＋脂质体60μl＋PBS。观察肿瘤生长情况。苏木精-伊红染色观察肿瘤组织的病理改变,Western blot检测hTERT蛋白的表达,钙依赖性磷脂结合蛋白V＋碘化丙啶双染流式细胞仪测凋亡率。结果成功建立稳定的裸鼠U251细胞皮下移植瘤模型。治疗5周后hTERT shRNA组肿瘤体积较PBS组和空质粒组明显缩小,抑瘤率为58.2%;病理学检查hTERT shRNA组肿瘤生长受到抑制,肿瘤细胞散在稀疏,可见大量肿瘤细胞坏死及凋亡;Western blot示hTERT shRNA组hTERT蛋白表达受抑制;流式细胞仪检测hTERT shRNA组肿瘤细胞凋亡率明显高于PBS组和空质粒组（P〈0.01）。结论hTERT shRNA可在裸鼠移植瘤体内有效发挥作用,抑制人端粒酶逆转录酶蛋白在体内表达,从而能有效抑制裸鼠胶质瘤增殖生长,促进肿瘤细胞凋亡。     

99mTC-5-FU免疫纳米粒在荷人胃癌SCID鼠模型体内的分布

目的 探索制备99mTc标记载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒(99mTc-5-FU-Ab-NPs)的方法,并观察99mTc-5-FU-Ab-NPs胃癌移植瘤模型体内的分布情况.方法 用改进的Schwarz方法对载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒进行99mTc标记,经SephadexG250柱分离纯化,用纸层析法测定标记率与放化纯度;ELISA法和免疫组化法测定标记物的免疫活性;经荷人胃癌鼠静脉注射99mTc-Ab-5-FU-NPs(实验组)及99mTc标记鼠源性多克隆IgG纳米粒(对照组),并于2、6 h行放射免疫ECT显像,用感兴趣区(ROI)技术获得实验组和对照组荷人胃癌鼠全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值;24 h显像后处死鼠,测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及T/NT比值.高效液相色谱法检测两组鼠肿瘤组织和血液中5-FU的浓度.结果 制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs标记率为90%～95%,抗体的活性在标记前后无明显下降;荷人胃癌鼠放射免疫显像结果提示静脉注射99mTc-5-FU-Ab-NPs 2 h后肿瘤已显影,随时间延长到6 h更清晰,2和6 h肿瘤组织ID%/g均显著高于对照组;6 h时实验组肿瘤组织ID%/g和肿瘤与血液的放射性比值较2 h时升高;同时,实验组肿瘤组织中5-FU浓度随着时间延长呈持续升高且与对照组5-FU浓度相比有显著性差别.结论 本研究制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs能较好地满足放射免疫显像的要求;抗VEGF单克隆抗体的免疫导向作用可靠,注射后6 h,99mTc-5-FU-Ab-NPs在肿瘤组织中有相对较高的特异性浓聚.     

99mTc标记的新型肺癌多肽分子探针及其生物学分布

目的探讨99mTc标记特异性靶向肺癌小分子多肽的标记方法,观察99mTc-多肽在正常动物体内的动力学特性及体内生物学
分布特点。方法采用NHS-MAG3双功能螯合法进行99mTc标记小分子多肽（cNGQGEQc）,纸层析法测定标记率,通过体外稳定
性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验评价99mTc-多肽的放化特性,测定标记物静脉注射后在新西兰大白兔不同时相
血液放射性清除曲线;分别测定经尾静脉注射7.4 MBq标记物后的小鼠体内各脏器质量数和放射性计数,计算各脏器每克组织
百分注射剂量率（%ID/g）;经耳缘静脉注射37 MBq标记物,应用SPECT显像法观察标记物在大白兔体内的放射性动态分布
变化。结果99mTc 标记多肽的标记率>90%,室温下和血清中37 ℃下放置12 h 放化纯度分别为91%和85%;半胱氨酸置换率
<7%;血清蛋白结合率<5%。99mTc标记多肽在兔体内血放射性清除迅速;在小鼠体内清除较快,主要通过肾脏排泄,其余脏器内
放射性均较低（P<0.05）。结论99mTc标记基于肺癌特异性靶向多肽的标记方法简单,标记率高,具有良好的体内外稳定性,具有
比较理想的体内分布动力学特性。
     

SPIO-shRNA分子探针注射不同时间点荷瘤裸鼠肿瘤区域组织信号变化及MRI最佳扫描时间

目的：探讨注射SPIO-shRNA分子探针不同时间点的荷瘤裸鼠肿瘤区域组织信号强度变化情况,阐明分子探针活体磁共振成像（MRI）机制和最佳扫描时间。方法：探针注射剂量为18mg·kg^-1;将30只BALB/c荷瘤裸鼠随机分为6组,每组5只,分别于探针注射前和注射后12、24、27、30和36 h等6个时间点行MRI检查,并测量裸鼠肿瘤组织及对侧肌肉组织在各时间点的信号强度变化;每次检查完成后立即处死裸鼠,取出肿瘤组织及肌肉组织行HE及普鲁士蓝染色,并在光学显微镜下观察裸鼠肿瘤组织的形态表现。结果：与注射前比较,探针注射后12、24和27 h裸鼠肿瘤组织T1WI信号强度均升高（P<0.05）,12、24、27、30和36 h肿瘤组织T2WI和T2*GRE信号强度均降低（P < 0.05或P < 0.01）;探针注射后27 h肿瘤组织T1WI信号强度最高;探针注射后27 h肿瘤组织T2WI和T2*GRE信号强度低于注射后12、24、30和36 h（P<0.01）。与注射前比较,注射后24 h时裸鼠对侧肌肉组织信号强度降低（P<0.05）。HE染色,裸鼠肿瘤组织结构紊乱,细胞核异型性较多;普鲁士蓝染色,在注射后各时间点上均存在蓝染的Fe颗粒,注射后27 h时蓝染Fe颗粒最多。结论：SPIO-shRNA分子探针能成功靶向裸鼠肿瘤组织,且MRI最佳的扫描时间为探针注射后27 h。     

~(188)Re标记VEGF多肽片段的荷瘤裸鼠体内分布及显像研究

目的 探讨188Re标记VEGF189外显子6编码的多肽(QKRKRKKSRYKS)的方法、标记物在荷瘤裸鼠体内的分布及显像.方法 以S-acetyl-MAG3为双功能螯合剂,正交设计法寻找188Re标记多肽QKRKRKKSRYKS的最佳条件;研究标记物在荷卵巢癌SKOV3裸鼠的体内分布,并在不同时间行SPECT平面显像.结果 采用SPSS 13.0进行分析.结果 188Re标记QKRKRKKSRYKS在最佳标记条件下的标记率为(73.1±5.5)%,HPLC纯化后放射化学纯度>95%,且受体结合活性良好;标记物室温下放置24 h,其放射化学纯度为(91.76±1.36)%;尾静脉注射标记物后,0.5 h荷瘤裸鼠肿瘤部位开始出现放射性浓聚,1 h浓聚更为明显,肿瘤放射性摄取为(1.846±0.511)%ID/g,肿瘤/对侧肌肉组织比值达(2.43±0.30).此外,肝脏、小肠、肾脏及膀胱等部位也可见明显的放射性浓聚,但3 h后肿瘤部位的放射性浓聚影基本消退.结论 188Re-MAG3-QKRKRKKSRYKS能明显聚集于肿瘤组织.     

抗Peroxiredoxin Ⅰ肺腺癌噬菌体抗体的筛选及其在荷瘤裸鼠体内的分布

目的：通过对已构建的肺腺癌相关人源单链抗体库进行筛选,得到抗过氧化物酶Peroxiredoxin Ⅰ (Prx Ⅰ）肺腺癌单链抗体,评价抗体在动物模型体内分布及靶向显像作用。方法：PCR法检测大肠杆菌TG1中单链抗体single-chain variable fragment (scFv) 基因插入率;凝胶电泳鉴定Sfi Ⅰ和Not Ⅰ双酶切质粒结果;以肺腺癌细胞株A549和在肺癌中高表达的抗氧化蛋白Prx Ⅰ为靶抗原,对抗体库进行富集筛选。阳性克隆用IPTG诱导表达并检测。放射性核素131I标记纯化抗体,进行荷瘤裸鼠体内分布及SPECT放射免疫显像研究。结果：scFv基因插入率为77%（23/30）,双酶切鉴定证实目的条带。通过亲和筛选,肺腺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮是第1轮的180倍。选取10个克隆经ELISA法检测,其中6个克隆与A549细胞呈阳性反应,阳性率60%（6/10）。SDS-PAGE及ELISA检测证实得到人源抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体。竞争ELISA显示抗〖JP3〗体能有效结合A549细胞。核素标记抗体的放射化学纯度为(95.6±3.7)%,比活度为(2.8±0.2) TBq/g体内分布研究显示抗体与肺腺癌组织有效结合。尾静脉注射48 h后,瘤/血和瘤/肌肉放射性比值均达最大值,分别为(4.06±0.13)和(5.17±0.97) %ID/g。SPECT示抗体与肿瘤有效结合。抗体注射后48 h的T/NT值（3.73±0.20）明显高于12 h（1.26±0.15）、24 h（2.18±0.16）和72 h（2.85±0.18）(均P<0.01）。结论：利用肺腺癌细胞A549和Prx Ⅰ为靶抗原,从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体。在体内抗体能与肺腺癌组织特异性结合。     

靶向人乳头瘤病毒16型-E6的siRNA对宫颈癌肿瘤生长的影响

目的 研究靶向HPV16-E6的小分子干扰RNA抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.方法 建立裸鼠宫颈癌模型,HPV16-E6 siRNA瘤体内多点注射观察肿瘤的生长情况,使用HE染色方法观察肿瘤组织细胞在pSiRNA或pCON治疗后的病理学改变;免疫组化采用SP法.结果 靶向HPV16-E6的小分子干扰RNA能显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.结论 利用宫颈癌裸鼠移植瘤模型,证明靶向HPV16-E6的siRNA能够显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.     

MicroRNA-155靶向的放射性标记探针对乳腺癌小鼠模型的活体显像

目的：microRNA-155（miR-155）显著高表达于乳腺癌、肺癌、肝癌等多种恶性肿瘤,本研究旨在构建靶向miR-155的放射性示踪探针对乳腺肿瘤的活体显像。方法：体外化学合成靶向miR-155的反义互补寡核苷酸探针（AMO-155）,并对其进行5′端乙酰基修饰及2′ 甲氧基修饰,进而与双功能螯合剂NHS MAG3偶联后,在氯化亚锡的还原作用下对其标记 99mTc,评价血清稳定性,并对乳腺癌荷瘤裸鼠进行活体显像,对比反义、无义及阻断组的显像差异,并通过实时定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）鉴定肿瘤的miR-155水平。结果：99mTc-AMO-155的制备标记率达97%（n=5）,放射化学纯度大于98%（n=5）,放射比活度约为3.75 GBq/μg。通过对比无义对照组及阻断组,99mTc-AMO-155能够在活体水平特异性地显示miR-155高表达的恶性肿瘤。此外,针对miR-155不同表达水平的肿瘤,99mTc-AMO-155亦可在活体水平反映其表达差异。结论：经化学修饰的99mTc标记的AMO-155探针具有良好的血清稳定性及活体肿瘤靶向识别作用,为肿瘤显像提供了潜在的新型探针。     

人乳腺癌MCF-7裸鼠模型的99mTc-DTPA-CGRRAGGSC显像研究

目的:探讨放射性核素99mTc标记环九肽CGRRAGGSC对荷人乳腺癌MCF-7裸鼠的显像研究?方法:环九肽CGRRAGGSC通过连接螯合剂DTPA与放射性核素99mTc螯合;纸层析法检测99mTc-DTPA-CGRRAGGSC的标记率和稳定性;免疫荧光检测DTPA-CGRRAGGSC和乳腺癌细胞MCF-7结合能力;经荷瘤鼠瘤体内分别注射剂量为1.85 MBq/0.05 mL的99mTc-DTPA-CGRRAGGSC?99mTcO-4和99mTcO-4+DTPA-CGRRAGGSC,分别于注药后0?0.5?1.0 ?2.0?3.0?4.0 h进行SPECT静态显像?免疫组织化学评估IL-11Rα表达?结果:成功制备99mTc-DTPA-CGRRAGGSC,其标记率达到95%以上,在PBS和血清中37℃下放置12 h时放化纯仍有90%以上;DTPA-CGRRAGGSC和乳腺癌细胞MCF-7显著结合;经荷瘤鼠瘤体间质内注射99mTc-DTPA-CGRRAGGSC后4 h,肿瘤组织的放射性仍未消退,而瘤体间质内注射99mTcO-4和99mTcO-4+DTPA-CGRRAGGSC在0.5 h时肿瘤间质内放射性明显消退?乳腺癌组织IL-11Rα有较高的表达?结论:99mTc-DTPA-CGRRAGGSC对荷人乳腺癌MCF-7裸鼠具有靶向特异性,为进一步利用治疗性核素标记CGRRAGGSC对高表达IL-11Rα的乳腺癌的靶向治疗奠定基础?     

抗人胰腺癌细胞单克隆抗体SZ-121的放射免疫显像实验研究

目的研究^99mTc标记抗人胰腺癌单克隆抗体SZ-121在荷人胰腺癌裸鼠体内的显像及生物分布,探讨其用于胰腺癌早期诊断的可行性。方法采用皮下种植法建立荷人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,以2-亚氨基噻吩盐酸盐（2-IT）修饰SZ-121,^99mTc-葡庚糖酸钠（GH）配体交换法标记SZ-121,经裸鼠尾静脉注入^99mTc-SZ-121后1、4h对裸鼠进行γ显像,于24h测定荷瘤小鼠体内组织的放射性分布。结果γ显像及生物分布显示,^99mTc-SZ-121被静脉注入荷瘤鼠后1h,肿瘤即清晰显影,随时间延长趋于增浓,且瘤组织与非瘤组织的放射性比值（T/NT）也逐渐增高,肿瘤每克组织百分注射剂量率（%IDPg）均高于注射^99mTc-IgG的对照组（P〈0.05）。结论^99mTc-SZ-121具有活体内定位导向能力,显像时间短,可能是一种有前途的胰腺癌显像剂。     

叶酸脂质体包裹的MYCN siRNA在裸鼠体内靶向治疗作用的初步研究

目的研究叶酸受体为靶向的脂质体包裹MYCN基因小干扰性RNA在神经母细胞瘤裸鼠骨髓、骨转移模型中的靶向性及治疗作用。方法 16只成功建立神经母细胞瘤骨髓、骨转移模型的裸鼠,将其随机分为靶向性研究组（4只）和疗效性研究组（12只）。靶向性研究组裸鼠静脉给予CY3荧光标记叶酸脂质体包裹的MYCN siRNA,荧光显微镜检测CY3在体内瘤组织及重要器官的荧光强度。疗效性研究组12只裸鼠随机分MYCN siRNA组和无关siRNA组,静脉分别给予叶酸脂质体包裹的MYCN siRNA与叶酸脂质体包裹的无关siRNA,采用荧光定量PCR检测肿瘤组织MYCN mRNA表达,原位细胞凋亡检测法（TUNEL）观察肿瘤细胞凋亡数。结果 CY3荧光标记的叶酸脂质体MYCN siRNA给药8 h后,荧光主要分布在肿瘤组织内,MYCN siRNA组瘤组织中MYCN mRNA的表达量明显较无关siRNA组降低（P〈0.05）,MYCN siRNA组凋亡细胞数量高于无关siRNA组（P〈0.05）。结论①叶酸脂质体MYCN siRNA经静脉给药后主要靶向瘤组织,叶酸脂质体是肿瘤基因治疗的有效载体;②叶酸脂质体MYCNsiRNA在体内显著下调肿瘤MYCN mRNA的表达,促进肿瘤细胞凋亡,有望成为神经母细胞瘤治疗的新药物。     

~(131)Ⅰ标记抗c-erbB-2单克隆抗体对卵巢癌动物模型的生长抑制作用

目的:用131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体,探讨其对荷人卵巢癌裸鼠的生长抑制作用。方法：将抗c-erbB-2单克隆抗体与131I偶联,制成免疫靶向药物,将已接种卵巢癌SKOV3细胞且肿瘤直径已达1.0 cm的裸鼠分为131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7 MBq低剂量组和11.1 MBq高剂量组,以131I标记的mIgG（非治疗性抗体）为对照组,对三组荷人卵巢癌裸鼠模型分别进行肿瘤局部注射,于用药当日后6周内每周测量肿瘤体积、质量,计算抑瘤率,并与对照组进行比较。结果：131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7 MBq低剂量组和11.1MBq高剂量组与对照组比较肿瘤体积减小（P<0.05）、肿瘤质量减轻（P<0.05）、抑瘤率增高（P<0.05）,同时131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1MBq高剂量组肿瘤体积和肿瘤质量低于3.7 MBq低剂量组（P<0.05）、抑瘤率高于3.7 MBq低剂量组（P<0.05）。结论：131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体对荷人卵巢癌裸鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,且以131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1 MBq剂量作用强于3.7 MBq剂量。     

~(99)Tc~m-EC-MN鼻咽癌乏氧显像的实验研究

目的 通过对99Tcm-EC-MN在鼻咽癌体外及体内模型中生物学分布的研究,探讨99Tcm-EC-MN肿瘤乏氧显像的临床意义.方法 利用99TcmO4标记EC-MN,纸层析法测定标记率.99Tcm-EC-MN分别加入正常条件和乏氧条件下培养的鼻咽癌细胞株内,在不同时间段检测99Tcm-EC-MN在细胞内的分布差别.建立鼻咽癌裸鼠肿瘤模型,自荷瘤鼠尾静脉注入99Tcm-EC-MN 3.7 MBq(0.1 ml)后0.5、1、2、4、6和8 h分别进行平面显像,观察99Tcm-EC-MN的体内分布情况.在各时相分别处死荷瘤裸鼠,取各脏器组织标本、称重并测量放射性计数,计算各标本每克组织百分注射剂量率(%ID/g).对分离出的瘤体,应用CD34单克隆抗体及血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体进行免疫组化染色.结果 正常条件和乏氧条件下培养的鼻咽癌细胞株对99Tcm-EC-MN的吸收差异有高度统计学意义(P<0.01).所有荷瘤裸鼠的肿瘤均呈阳性显像,静脉注射后0.5 h肿瘤灶即显影,4 h时显影最清晰.肿瘤/肌肉比值1、2、4 h分别达2.24倍、4.75倍、6.41倍.99Tcm-EC-MN在正常组织中清除快,主要经泌尿系统及肠道排出.免疫组化结果和放射性计数结果具有显著相关性(r>0.9,P<0.01).结论 99Tcm-EC-MN作为一种乏氧显像剂,具有良好的开发前景.