901例女性人乳头瘤病毒感染状况及基因型分布的调查

目的 探讨高低危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)在不同年龄段的感染情况,为防治宫颈癌、尖锐湿疣等HPV相关疾病提供理论依据.方法 收集有HPV感染临床检测指征(宫颈炎、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌)的女性标本901例,利用导流杂交基因芯片技术对阴道分泌物进行HPV分型检测.结果 901例标本HPV阳性率为41.73％,其中单纯高、低危型HPV和高低危型HPV混合感染率分别为60.90％ (229/376)、23.67％ (89/376)和15.43％(58/376);高危型HPV感染各个年龄段的感染率为26.39％～42.19％,低危型HPV感染各个年龄段的感染率为8.96％～39.19％,各型均呈现“U”型趋势.结论 各年龄段主要感染型别为HPV16.低年龄段以高低危型HPV混合感染为主,≥55岁以单纯高危型HPV感染为主,单纯高危型HPV感染率随年龄增长而上升.     

人乳头瘤病毒的致癌机理及其疫苗的临床试验研究

高危型人乳头瘤病毒（HPV）是引起宫颈癌的重要原因.诸多类型的HPV疫苗已经进入临床试验.在预防性疫苗中,嵌合型病毒样颗粒（cVLP）取得了不错的效果;在治疗性疫苗中,人们尝试了多肽疫苗,蛋白疫苗,DNA疫苗,病毒载体疫苗和联合免疫等方式,可以检测到所诱发的特异性免疫反应,但临床效果并不满意.无论预防性疫苗还是治疗性疫苗都面临着许多挑战.     

人乳头瘤病毒感染与人乳头瘤病毒疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌的发生密切相关,是宫颈癌发生的最主要诱发因素.预防性HPV疫苗是一种预防宫颈癌的新方法,其效果得到了多项临床试验的肯定.治疗性HPV疫苗的研发同样备受关注,目前治疗性疫苗的类型很多,但因其机制较复杂,大多仍处在实验阶段.     

人乳头瘤病毒黏膜疫苗的研究前景

人乳头瘤病毒( human papillomavirus,HPV)是环状双链DNA病毒,具有高度宿主细胞特异性,主要传播途径是性接触[1].根据感染后诱发病变的不同,嗜黏膜型HPV分为高危型和低危型.低危型HPV感染则与肛门生殖道良性病变和子宫颈鳞状上皮细胞低度病变等疾病有关,高危型HPV感染可引发宫颈癌和肛门癌等疾病.     

南京地区妊娠期妇女高危型人乳头瘤病毒感染率及其对妊娠结局的影响

目的 调查南京地区孕妇高危型人乳头瘤病毒及亚型感染率,并探讨其对于妊娠结局的影响.方法 选取2014年2月至2016年5月南京中医药大学附属中西医结合医院(江苏省中医药研究院)产科门诊建卡孕妇1557例,同时分别以2016年1月至6月健康体检人群85例、妇科门诊就诊的各类炎症疾病患者2062例为对照,比较各组人群HR-HPV及亚型感染率,以早产、胎膜早破两种常见不良妊娠为结局,探讨孕期HR-HPV感染对于妊娠结局的影响,并进一步分析HR-HPV不同基因型感染之间孕妇妊娠结局的差异.结果 ①妊娠组、疾病组及健康体检组HR-HPV感染率分别为12.91％、16.39％和11.76％,妊娠组HR-HPV感染率显著低于疾病组(P＜0.05),与健康体检组之间无差异(P＞0.05).妊娠组16、18亚型及其它12种HR-HPV亚型感染率分别为2.63％、0.64％和10.66％,18亚型及其它12种HR-HPV亚型感染率均显著低于疾病组(P＜0.05),而16亚型无显著性差异(P＞0.05).②HR-HPV感染孕妇不良妊娠结局发生率显著高于无HR-HPV感染孕妇(P＜0.05).③二元Logistic回归分析显示,HR-HPV感染是早产、胎膜早破两种常见不良妊娠结局的危险因素(OR:3.323,95％ CI:2.192～5.036,P＜0.001),而年龄、孕产次对妊娠结局没有影响(P＞0.05).④单一HR-HPV 16或18亚型、其它12种高危亚型及两种或两种以上高危亚型感染之间孕妇不良妊娠结局发生率无显著性差异(P＞0.05).结果 孕期HR-HPV感染是早产、胎膜早破两种常见不良妊娠结局的危险因子,因此做好孕前及妊娠期HR-HPV筛查和积极干预,有利于优生优育.     

治疗性人乳头瘤病毒疫苗研究进展

人乳头瘤病毒是以表皮细胞为感染对象的小型DNA病毒,HPV感染与子宫颈癌的发生、发展有着十分密切的关系.宫颈癌位居女性恶性肿瘤的第二位,且呈逐年上升的趋势.已上市的疫苗主要用于预防HPV的感染,对已感染HPV人群的治疗效果欠佳,治疗性疫苗可以通过诱导特异性的细胞免疫应答,阻止甚至清除HPV感染引起的病变及肿瘤.动物实验和临床试验结果显示,治疗性HPV疫苗在治疗HPV感染相关疾病有重要作用.因此,治疗性HPV疫苗的研制及应用已成为近年来研究热点.     

人乳头瘤病毒的致癌机理及其疫苗的临床试验研究

高危型人乳头瘤病毒(HPV)是引起宫颈癌的重要原因.诸多类型的HPV疫苗已经进入临床试验.在预防性疫苗中,嵌合型病毒样颗粒(cVLP)取得了不错的效果;在治疗性疫苗中,人们尝试了多肽疫苗,蛋白疫苗,DNA疫苗,病毒载体疫苗和联合免疫等方式,可以检测到所诱发的特异性免疫反应,但临床效果并不满意.无论预防性疫苗还是治疗性疫苗都面临着许多挑战.     

人乳头瘤病毒预防性疫苗病毒样颗粒的研究与应用

人乳头瘤病毒(HPV)感染与尖锐湿疣、宫颈上皮瘤样增生和宫颈癌的发生关系密切，由于该病毒尚不能在体外有效培养，所以限制了疫苗的研究进展。通过分子生物学方法在体外表达的HPV病毒样颗粒(VLP)成为疫苗研究的主要方向。本文对VLP作为预防HPV感染疫苗的研究进展、VLP来源的镶嵌样病毒颗粒的相关研究和树突细胞在VLP免疫过程中的作用进行了综述。     

人乳头瘤病毒16型E7核酸疫苗的构建及鉴定

人乳头瘤病毒16 型在引起宫颈上皮转化过程中, 持续表达E7 蛋白, 有可能成为肿瘤特异性移植抗原。本文将E7蛋白的编码基因定向克隆于真核表达载体构建了HPV16E7 HB核酸疫苗, 将该疫苗直接注射BALB/c 小鼠和Wistar 大鼠股四头肌, 动态观察, 28d 后仍能测出E7 DNA 的扩增。提取肌组织RNA, RT PCR检测老鼠特异性E7 的转录情况, 3/3 大鼠,1/10 小鼠为阳性; 用ELISA法在免疫小鼠血清中检出了特异性抗E7 抗体。证明, HPV16E7 HB 核酸疫苗构建正确且能够在哺乳动物体内和体外有效表达     

人乳头瘤病毒预防性疫苗病毒样颗粒的研究与应用

人乳头瘤病毒 (HPV)感染与尖锐湿疣、宫颈上皮瘤样增生和宫颈癌的发生关系密切 ,由于该病毒尚不能在体外有效培养 ,所以限制了疫苗的研究进展。通过分子生物学方法在体外表达的HPV病毒样颗粒 (VLP)成为疫苗研究的主要方向。本文对VLP作为预防HPV感染疫苗的研究进展、VLP来源的镶嵌样病毒颗粒的相关研究和树突细胞在VLP免疫过程中的作用进行了综述     

人乳头瘤病毒相关抗体的检测及意义

人乳头瘤病毒感染与多种恶性肿瘤关系密切。分了生物学的进展使人乳头瘤病毒血清学检查成为检测现存或既往人乳头瘤病毒感染，以及预警其相关恶性肿瘤的重要流行病学手段。本文就人乳头瘤病毒相关的抗体反应与病毒DNA携带的关系，与宫颈癌等疾病的相关性，以及影响抗体反应的因素等方面作一综述。     

重组人乳头瘤病毒6型病毒样颗粒的免疫原性分析

目的　研究重组人乳头瘤病毒 6型 (humanpapillomavirustype 6 ,HPV 6 )病毒样颗粒(virus likeparticle ,VLP)的免疫原性。方法　重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV 6L1VLP(L1 VLP)和HPV 6L1+L2VLP(L1+2 VLP)经鉴定后 ,用于免疫BALB/c小鼠 ,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测。结果　电镜观察显示L1 VLP和L1+2 VLP二者形态上无明显差异 ,为圆形颗粒 ,直径约 5 0nm ,SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,L1+2 VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为 4∶1。用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度 ,加佐剂L1 VLP免疫组和加佐剂L1+2 VLP免疫组血清针对HPV 6L1VLP的滴度在 1∶10 0 0 0以上 ,高于未加佐剂组免疫血清滴度 (1∶2 0 0 0 ) ,L1+2 VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体。血清抗体主要识别HPV 6构象依赖性抗原表位 ,与HPV 11抗原显示出一定的交叉反应 ,而与HPV 16无明显交叉反应。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV 6L1VLP再激活后出现了特异性增殖反应 ,3H TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,L1 VLP和L1+2 VLP两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,L1 VLP和L1+2 VLP免疫组刺激指数 (SI)分别为 6 .4和 6 .2 ,阴性对照组SI为 1.1。HPV 6L1VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL 2和IL 10分     

与宫颈癌相关的人乳头瘤病毒的持续感染与免疫逃逸

人乳头瘤病毒是宫颈癌的病原体。机体的免疫应答不能清除上皮细胞内整合感染的乳头瘤病毒，该病毒持续感染是宫颈癌发生的原因。免疫逃逸是病毒自身因素和机体免疫因素综合的结果。病毒隐匿、病毒癌蛋白、细胞因子、粘附分子等参与病毒的免疫逃逸。     

二代人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）是一种嗜黏膜和皮肤上皮的双链DNA病毒,与多种疾病的发生相关.根据致病性将其分为高危型和低危型2种,高危型感染与宫颈癌及癌前病变的发生密切相关,有：HPV-16、-18、-45、-31、-33、-52、-58等;其中70%的宫颈癌与HPV-16/18型有关.低危型感染与生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关,有：HPV-6、-11、-40、-42等,其中6和11型的感染与90%以上的生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关.     

人乳头瘤病毒58型治疗性复合DNA疫苗载体的构建

目的:构建和表达人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)58型相关宫颈癌治疗用PVAX1-HPV58mE6E7Fc-hIL12复合DNA疫苗载体。方法:将HPV58mE6E7融合基因片段插入真核表达载体pCI-Fc-GPI中,构建重组真核表达质粒pCI-sig-HPV58mE6E7-Fc-GPI。再将得到的sig-HPV58mE6E7-Fc-GPI片段插入新型疫苗载体PVAX1-IRES-hIL12中,构建PVAX1-HPV58mE6E7Fc-hIL12复合DNA疫苗载体,流式细胞术、免疫荧光及ELISA分别检测该疫苗载体的表达。结果:经限制性内切酶鉴定及测序分析证实PVAX1-HPV58mE6E7Fc-hIL12复合DNA疫苗载体构建成功。流式细胞术、免疫荧光及ELISA检测表明该疫苗载体中的融合抗原sig-HPV58mE6E7-Fc-GPI及分子佐剂人白介素12(hIL12)能够同时实现真核表达。结论:PVAX1-HPV58mE6E7Fc-hIL12复合DNA疫苗载体可作为治疗HPV58相关肿瘤及其癌前病变的候选疫苗载体。     

原核高效制备人乳头瘤病毒16型L1病毒样颗粒

目的通过原核表达系统高效制备人乳头瘤病毒(HPV)16晚期蛋白L1病毒样颗粒(VLPs)。方法构建HPV16L1基因序列优化前后的PET30aHPV16L1重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3);用IPTG诱导目的基因表达,两步层析方法纯化HPV16L1蛋白;电镜下观察纯化产物形成VLPs的情况。结果成功构建大肠杆菌工程菌,高效可溶表达(目的蛋白约占总蛋白的38%)并纯化HPV16L1蛋白,纯度达95%以上,电镜下观察,发现纯化后的目的蛋白为直径50 nm左右,形态与天然病毒颗粒高度相似。结论在大肠杆菌原核系统中高效、简易地制备了HPV16L1VLPs,为诊断试剂和疫苗的研制奠定基础。     

人乳头瘤病毒18型L1-E6、E7嵌合基因DNA疫苗的体内免疫效应

目的：检测HPV18 L1-E6、E7嵌合基因DNA疫苗在小鼠体内的体液和细胞免疫效应。方法：将实验动物BALB/c小鼠54只随机分为9组，按不同免疫方式(肌肉接种或鼻内滴注)分别给予不同的重组质粒(pVAX1-L1-E6M3或pVAX1-L1-E7M3)和免疫佐剂(pLXHDmB7-2或LTB)。用免疫原免疫3次，末次免疫后取眼球后血进行ELISA抗体检测。末次免疫后进行小鼠足垫迟发型超敏反应(DTH)试验。断足进行小鼠足垫HE染色。取小鼠脾脏制成单细胞悬液，进行脾细胞增殖试验，并进行CD4^ /CD8^ T细胞中IFN-γ^ 或IL-4^ 细胞的FACS分析。结果：与对照组相比，各实验组均获得明显的免疫效果。实验组免疫后血清抗体4值均高于相应组别免疫前；肌肉注射组每次免疫后抗体水平较前次明显升高。实验组小鼠注射VLP抗原的左后足垫局部有红肿硬结，镜下观察可见大量单核细胞侵润。肌肉接种组的DTH反应强度、脾细胞增碹刺激指数(SI)和CD8^ IFN-γ^ 细胞数均高于鼻内滴注组；而鼻内滴注组CD4^ IL-4^ 细胞数高于单纯质粒肌肉接种组；加入pLXHDmB7-2的联合免疫组各项指标均高于单纯质粒组。结论-证实了重组pVAX1-HPV18L1/E6、E7嵌和基因DNA疫苗能诱导小鼠的体液免疫和细胞免疫效应：同时，证实B7-2分子能显著提高该质粒在小鼠体内的免疫反应效果.     

人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗的计算机辅助设计及真核表达

目的:设计并表达预防16型人乳头瘤病毒感染的重组蛋白疫苗。方法:选取HPV16型病毒L1蛋白上的B表位和T表位,将其连接组合成多种方式,利用计算机预测蛋白质的三维结构,选取其中最优的结构进行基因克隆构建,并利用杆状昆虫系统进行表达。结果:利用计算机设计出了一种重组蛋白,成功构建了该重组蛋白的结构基因,并在杆状昆虫表达系统中得到表达。结论:成功构建并表达了人乳头瘤病毒的重组蛋白疫苗。