二苯乙烯苷对人乳腺癌T-47D细胞增殖及其雌激素受体表达的影响

目的:研究二苯乙烯苷(TSG)对人乳腺癌T-47D细胞增殖及其雌激素受体(ER)表达的影响,探讨其雌激素样作用及可能机制。方法:以ER阳性人乳腺癌T-47细胞为对象,以β-雌二醇(β-E_2,1×10^-8mol/L)为阳性对照,采用CKK-8法检测不同浓度TSG(1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5、1×10^-4mol/L)作用24、48、72 h后的细胞增殖情况,并计算增殖率;分别采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链式反应法检测经低、中、高浓度TSG(1×10^-8、1×10^-6、1×10^-4mol/L)作用48 h后细胞中ER-α、ER-β蛋白及其mRNA的表达情况。结果:经不同浓度TSG作用24、48、72 h后,各给药组各时间点(除β-E₂组48 h外)的细胞增殖率均较空白组显著升高,且TSG 1×10     

刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响

目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67)mRNA表达,Western blot法检测ERα、ERβ蛋白表达。结果刺槐素浓度为0.001~10μmol·L~(-1),能促进T47D细胞增殖,使S和G_2/M期的细胞比例明显增加,增殖指数升高,同时增加Ki67 mRNA的表达,此作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780所拮抗。刺槐素及17β-雌二醇(E2)均可上调ERα和ERβ的表达,刺槐素联合ERα受体拮抗剂(MPP)可逆转刺槐素的促增殖作用,使S和G_2/M期的细胞比例明显降低,减少Ki67mRNA的表达;但刺槐素联合ERβ受体拮抗剂(PHTPP)处理虽可抑制细胞增殖效应,使S和G_2/M期的细胞比例降低,减少Ki67 mRNA的表达,但作用不明显。结论刺槐素具有雌激素样作用,在0.001~10μmol·L~(-1)浓度范围内,可通过调节ERα受体表达来促进T47D细胞的增殖。     

制首乌含药血清对L02肝细胞增殖和凋亡的影响

目的: 研究制首乌含药血清对L02肝细胞增殖和凋亡的影响。方法: 采用皮下注射氢化可的松,建立大鼠肾阴虚模型,分为空白对照组、制首乌低、中、高剂量组(10.8,21.6,43.2 g·kg^-1)。连续给药7 d后处死大鼠,制备含药血清。分别采用MTT法测定L02肝细胞线粒体功能、流式细胞术检测肝细胞凋亡率及显微镜观察肝细胞形态结构。结果: 15%的肾阴虚高剂量组含药血清作用48 h后对L02肝细胞增殖具有明显抑制作用,抑制率为16.83%(P<0.05)。肾阴虚中、高剂量组的细胞凋亡率显著性升高,分别为19.6%(P<0.05)和27.8%(P<0.01)。结论: 制首乌对证治疗肾阴虚证侯,当给药剂量超过21.6 g·kg^-1时,对肝细胞的毒性明显增强。     

丹参酮ⅡA抗乳腺癌T47D细胞增殖的GPER途径研究

目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能。方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用GPER SiRNA转染构建GPER基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮ⅡA对T47D细胞增殖速率的影响及GPER的介导作用。利用Western blot方法检测丹参酮ⅡA对T47D细胞GPER表达情况的影响。结果 1×10-5mol·L-1~1×10-7mol·L-1丹参酮ⅡA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强。丹参酮ⅡA作用于GPER基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应。Western blot测定结果表明,1×10-5mol·L-1和1×10-6mol·L-1丹参酮ⅡA可使T47D细胞GPER蛋白表达明显降低。结论丹参酮ⅡA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导;且丹参酮ⅡA具有对靶细胞GPER表达的调节功能。     

莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制研究

目的 研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制.方法 采用MTT法检测不同剂量莪术醇(0、6.25、12.5、25、50、100 μg/mL)对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用.以莪术醇(12.5、25、50、100 μg/mL)干预T47D乳腺癌细胞后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态;采用流式细胞仪检测细胞周期及...     

透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖影响的研究

目的：探讨透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖的影响。方法：取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第3代软骨细胞随机分为5组,分别加入培养液、空白血清和中药血清低、中、高剂量继续培养24、48、72 h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。结果：流式细胞仪细胞周期检测显示中药血清中、高剂量能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,并呈现时间的依赖性,干预48 h后G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与低量组、空白组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。     

补肾方含药血清对大鼠成骨细胞雌激素受体mRNA及其蛋白表达的影响

已往研究表明[1],补肾方药治疗原发性骨质疏松症具有明显的疗效,为了进一步探讨其作用机制,本研究采用细胞培养技术和中药血清药理学的方法,观察补肾方含药血清对成骨细胞(osteoblast,OB)表达雌激素受体(ER) mRNA和蛋白的影响.     

大豆异黄酮和玉米赤酶烯酮对乳腺癌细胞株T47D细胞增殖的影响

环境中天然存在或污染的各类化学物质能够模拟或干扰人和动物内分泌功能 ,称为环境内分泌干扰物 ,环境雌激素是其中的一大类。外源性的天然或合成的雌激素一旦摄入体内 ,在达到一定浓度时 ,都能够与靶细胞上的ＥＲ结合 ,模拟Ｅ2 或拮抗Ｅ2 的生理作用 ,改变靶器官的生长、发育及生理功能[1 3 ] 。大豆异黄酮(ＧＳ)是豆类食品中的主要异黄酮类物质之一 ,流行病学调查表明ＧＳ有预防乳腺癌和前列腺癌作用[4] 。玉米赤霉烯酮 (ＺＥＡ)是一种真菌毒素 ,常见于霉变的玉米、小麦、燕麦等农作物中 ,1～ 10ｎｍｏｌ Ｌ浓度即可刺激雌激素受体转录激…     

槲皮素、补骨脂素对人乳腺癌T47D细胞两种受体亚型表达的影响

目的探讨槲皮素和补骨脂素的雌激素作用以及调控雌激素受体亚型表达的作用机制。方法10μmol.L-1槲皮素和10μmol.L-1补骨脂素分别处理T47D细胞48 h,采用RT-PCR和Western blot方法测定对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D雌激素受体亚型ERα和ERβ表达的影响,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价槲皮素和补骨脂素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系。结果槲皮素、补骨脂素在10μmol.L-1可明显诱导T47D细胞ERαmRNA和蛋白表达,而对ERβ表达没有影响。当与ICI182,780共孵育T47D细胞ERα表达被拮抗。结论槲皮素、补骨脂素产生的促进ER阳性细胞增殖的雌激素样作用是通过增加ERα表达实现的。     

补骨脂素对人类乳腺癌细胞增殖作用的影响

目的研究补骨脂素(psoralen,Pso)对人类乳腺癌细胞株增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定补骨脂素对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7和非雌激素依赖性乳腺癌细胞MDA-MB231的细胞增殖作用,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价补骨脂素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系,流式细胞术对MCF-7细胞的增殖情况进行分析。结果与溶剂对照组相比较,Pso(10～40μmol.L-1)能明显促进MCF-7细胞的增殖,而对雌激素受体阴性MDA-MB231细胞未见影响,并将MCF-7细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数,且Pso促进MCF-7细胞增殖作用被雌激素受体拮抗剂所拮抗。结论补骨脂素具有雌激素活性,此作用是通过雌激素受体(ER)介导的。     

人生长激素对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨人生长激素对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组和rhGH+5-FU组,各组腹腔注射给药,2周后观察各组药物对肿瘤生长的影响。分别采用MTT法和免疫组化检测肿瘤细胞增殖,TUNEI法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果:5-FU组和rhGH+5-FU组的肿瘤质量、PI及S期的人乳腺癌细胞数均明显小于对照组(P<0.01),AI、G0/G1期人乳腺癌细胞数均明显大于对照组(P<0.05或P<0.01);rhGH+5-FU组的PI及G2M期人乳腺癌细胞数均明显小于5-FU组(P<0.05)。结论:人生长激素在体内对人乳腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用,但与5-FU联用后能增强化疗对MCF-7乳腺癌细胞的效果,且具有协同作用。     

Jatamanvaltrate P对乳腺癌细胞T47D增殖的影响及机制研究

目的 考察蜘蛛香中环烯醚萜类化合物Jatamanvaltrate P对乳腺癌细胞T47D的增殖影响及作用机制。方法 MTT法检测Jatamanvaltrate P对乳腺癌细胞T47D和BT-20增殖的影响;DAPI染色和流式细胞术检测Jatamanvaltrate P对T47D细胞凋亡和周期的影响;Western blot检测与细胞周期、凋亡相关蛋白的变化。结果 Jatamanvaltrate P能明显抑制乳腺癌细胞增殖,并且呈时间-剂量依赖性;Jatamanvaltrate P能明显将T47D细胞阻滞于G₂/M期,下调周期相关蛋白cdc-2和Cyclin B1,上调p-cdc-2;Jatamanvaltrate P能诱导T47D细胞产生凋亡小体,显著性增加T47D细胞凋亡比例,呈现剂量依赖性;Jatamanvaltrate P处理后的蛋白PARP和Caspase 3/8/9出现了活化形式。结论 Jatamanvaltrate P通过阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡来抑制乳腺癌细胞T47D的增殖,有望成为一种潜在的治疗乳腺癌的药物。     

辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞增殖及凋亡作用研究

目的探讨辛基酚（octylphenols,OP）诱导乳腺癌细胞凋亡及抑制乳腺癌细胞增殖的可能机制。方法应用MTT法及流式细胞仪检测OP对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制及细胞周期的变化;Real Time PCR和Western blot法检测OP对MCF-7乳腺癌细胞中细胞周期相关蛋白p27Kip1和CyclinE的mRNA及蛋白表达的影响及对凋亡抑制蛋白PAK4表达的影响。结果 OP对MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,MCF-7细胞阻滞在G0/G1期,使S期的细胞减少;Real Time PCR和Western Blot检测发现培养的MCF-7细胞,随着OP的处理浓度增加,CyclinE蛋白在分子水平和蛋白水平均降低,p27Kip1的表达量升高。结论 OP可能通过调控细胞周期相关蛋白的表达,抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖。     

黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

摘 要 目的：探讨黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法: 人胰腺癌细胞株BxPC 3和PANC 1经不同浓度（0,50,75,100 μmol·L-1）的黄芩素处理后,通过CCK 8检测、划痕愈合实验、细胞迁移、侵袭实验、显微镜观察、Real time qPCR 检测增殖和凋亡相关基因的影响等方法,观察黄芩素在胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡、基因表达的影响。结果: 与空白对照组比较,黄芩素能够显著抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖,并且随着浓度的加大,对BxPC 3和PANC 1增殖的抑制作用在加强（P＜0.01）;且黄芩素对两种胰腺癌细胞系的作用效果与临床常用抗癌药吉西他滨（2 μmol·L-1）的作用效果相似。黄芩素能显著抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭,诱导癌细胞的凋亡,诱导胰腺癌细胞自噬;经过黄芩素处理的癌细胞,细胞周期相关基因和抗凋亡基因（cyclinD1、cyclinE、cyclinA和Bcl 2）表达水平下降,而细胞凋亡相关基因（caspase 3和Bax）的表达水平上调明显。结论: 黄芩素能有效抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖、迁移和侵袭,并且可以通过凋亡和自噬诱导细胞死亡。     

乳腺癌NKG2D表达及对NK细胞杀伤活性的影响

目的分析乳腺癌NKG2D表达及对NK细胞细胞毒的影响。方法应用免疫荧光技术和流式细胞术（FCM）分选25例乳腺癌、25例健康对照的外周血NK细胞,定量分析NKG2D蛋白表达。用MTT比色法检测抗NKG2DpAb加入前后NK细胞的细胞毒效应。结果乳腺癌患者NK细胞的NKG2D蛋白表达量均低于正常对照,差异有显著性（P〈0.05）。抗NKG2DpAb能显著抑制NK细胞对K562细胞的细胞毒效应。结论NK细胞NKG2D表达异常与乳腺癌的发生发展可能有关。     

Anti-Cancer Effect of IN-2001 in T47D Human Breast Cancer

Histone deacetylases (HDACs) are enzymes involved in the remodelling of chromatin, and have a key role in the epigenetic regulation of gene expression. Histone deacetylase (HDAC) inhibitors are emerging as an exciting new class of potential anti-cancer agents. In recent years, a number of structurally diverse HDAC inhibitors have been identified and these HDAC inhibitors induce growth arrest, differentiation and/or apoptosis of cancer cells in vitro and in vivo. However, the underlying molecular mechanisms remain unclear. This study aimed at investigating the anti-tumor activity of various HDAC inhibitors, IN-2001, using T47D human breast cancer cells. Moreover, the possible mechanism by which HDAC inhibitors exhibit anti-tumor activity was also explored. In estrogen receptor positive T47D cells, IN-2001, HDAC inhibitor showed anti-proliferative effects in dose-and time-dependent manner. In T47D human breast cancer cells showed anti-tumor activity of IN-2001 and the growth inhibitory effects of IN-2001 were related to the cell cycle arrest and induction of apoptosis. Flow cytometry studies revealed that IN-2001 showed accumulation of cells at G₂/M phase. At the same time, IN-2001 treatment time-dependently increased sub-G₁ population, representing apoptotic cells. IN-2001-mediated cell cycle arrest was associated with induction of cdk inhibitor expression. In T47D cells, IN-2001 as well as other HDAC inhibitors treatment significantly increased p21^WAF1 and p27^KIP1 expression. In addition, thymidylate synthase, an essential enzyme for DNA replication and repair, was down-regulated by IN-2001 and other HDAC inhibitors in the T47D human breast cancer cells. In summary, IN-2001 with a higher potency than other HDAC inhibitors induced growth inhibition, cell cycle arrest, and eventual apoptosis in human breast cancer possibly through modulation of cell cycle and apoptosis regulatory proteins, such as cdk inhibitors, cyclins, and thymidylate synthase.     

新辅助化疗对乳腺癌细胞自噬及增殖影响的研究

目的探讨接受乳腺癌新辅助化疗(NAC)前后,肿瘤组织中增殖性抗原67(Ki-67)和微管相关蛋白轻链3B(LC3B)的表达变化及临床意义。方法随机选取我院2012年1月至2014年1月进行NAC治疗的50例乳腺癌患者,采用免疫组化SP法分别检测乳腺癌组织中的Ki-67和LC3B在NAC前后的表达水平。结果 Ki-67表达水平在NAC后降低,差异有统计学意义(P<0.05);NAC后LC3B表达水平升高,具有统计学意义(P<0.05),同时在新辅助化疗后Ki-67和LC3B存在正相关性,具有统计学差异。结论新辅助化疗可影响Ki-67和LC3B的表达水平,反过来Ki-67和LC3B的表达状态或许可影响NAC的疗效,Ki-67和LC3B有可能成为NAC敏感性的预测指标。     

羽扇豆醇通过MAPKs信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用研究

目的:探讨羽扇豆醇对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法:以MCF-7细胞为对象,采用MTT法检测不同剂量羽扇豆醇(7.5、15、30、60、90 mg/L)作用24 h后的细胞增殖情况,并计算细胞存活率和半数抑制浓度(IC_(50));采用倒置显微镜和细胞克隆试验分别观察和检测不同剂量羽扇豆醇(15、30、60 mg/L)作用24 h后的细胞形态学特征以及克隆集落形成情况,并计算克隆形成率;分别采用MTT法和Western blotting法检测加用丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路相关调控蛋白抑制剂(PD98059、SP600125、SB203580)后细胞的增殖情况和相关调控蛋白[细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38MAPK)]的表达情况。结果:经15、30、60、90 mg/L羽扇豆醇作用后,细胞的存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01);该化合物的IC_(50)值为52.94 mg/L。经15、30、60 mg/L羽扇豆醇作用后,各组细胞形态均有所改变,并可见细胞脱落、漂浮、固缩、变圆、体积变小、坏死等现象,其克隆集落形成均有所减少,克隆形成率均显著降低(P<0.05或P<0.01)。单用羽扇豆醇时,细胞的存活率(60mg/L羽扇豆醇)均较对照组显著降低,p-ERK1/2(15、30、60 mg/L羽扇豆醇)、p-JNK(30、60 mg/L羽扇豆醇)、p-p38 MAPK(30、60mg/L羽扇豆醇)的相对表达量均较对照组显著升高(P<0.05或P<0.01);加用相应抑制剂后,联用组细胞的存活率均较60 mg/L羽扇豆醇组显著升高,p-ERK1/2、p-JNK、p-p38 MAPK的相对表达量均较60 mg/L羽扇豆醇组显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:羽扇豆醇对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与促进MAPKs信号通路相关调控蛋白的磷酸化有关。     

木香烃内酯对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移和凋亡的影响及机制研究

目的:研究木香烃内酯对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移和凋亡的影响及机制。方法:取对数生长期的SK-BR-3细胞,分别加入不同浓度(10、20、30、40、50μmol/L)的木香烃内酯作用24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制率。将细胞分为空白对照组和木香烃内酯10、20、30μmol/L浓度组,采用Hoechst 33258荧光染色法观察细胞形态及凋亡情况,并计算细胞凋亡率;采用细胞划痕试验检测细胞的迁移能力,并计算迁移率;采用Western blotting法检测细胞中B淋巴细胞瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和分裂型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白的相对表达水平。结果:木香烃内酯对SK-BR-3细胞具有显著的增殖抑制作用(P<0.05或P<0.01),且呈现浓度和时间依赖趋势。空白对照组细胞轮廓清晰、形态规则、贴壁较好;与空白对照组比较,木香烃内酯10、20、30μmol/L浓度组细胞数量明显减少,细胞结构松散、体积缩小、间隙变大,且多数细胞轮廓消失、变圆,...     

SMYD3调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖机制的研究

目的：通过转染技术抑制或增强SMYD3基因的表达,以探讨SMYD3对乳腺癌MCF-7细胞增殖的调控机制机制。方法：以MTY法和软琼脂克隆形成实验研究抑制或增强SMYD3基因表达对细胞增殖的影响,以RT-PCR法和Western印迹法检测MCF-7细胞经转染后,胞内SMYD3、ERK／MAPK通路相关蛋白及其磷酸化产物,以及凋亡和细胞周期调控相关蛋白表达水平的变化。结果：用针对SMYD3基因的shRNAs表达质粒转染MCF-7细胞后,其SMYD3基因mRNA和蛋白表达水平下调,细胞生长受到抑制,细胞中ERK1／2、CyclinD1和CDK4蛋白水平明显下调;软琼脂克隆形成实验显示,增强SMYD3基因表达能明显促进MCF-7细胞克隆形成。结论：SMYD3可通过激活ERK／MAPK信号转导通路和上调细胞周期相关蛋白CyclinD1和CDK4的水平提高肿瘤细胞的增殖能力。