单剂量顺铂对大鼠肾间质纤维化指标的影响

目的:探讨单剂量顺铂对大鼠肾间质纤维化指标的影响。方法:将72只SD大鼠随机分为正常组和顺铂组,每组36只。正常组与顺铂组大鼠于实验第1天分别单次腹腔注射等体积生理盐水、顺铂5 mg/kg,于实验第8、14、30、50、60、90天分别处死6只大鼠,测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,检测肾小管间质损伤程度、肾小管间质纤维化相对面积和肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达情况。结果:与正常组比较,顺铂组大鼠各时间点血清BUN和Cr水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积和肾组织中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_1表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。在顺铂组中,在第8~90天内,大鼠血清BUN水平无明显变化,血清Cr水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积和肾组织中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_1表达水平均呈先升高后降低趋势。结论:临床剂量的顺铂单次给药可诱导大鼠肾间质纤维化,其机制可能与其肾组织中TGF-β_1表达有关。     

虎杖苷对肾纤维化模型大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1蛋白表达的影响

目的:考察虎杖苷对肾纤维化模型大鼠肾组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)蛋白表达的影响,探讨其延缓大鼠肾纤维化的作用机制。方法:将40只大鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、虎杖苷组(100 mg/kg)和贝那普利组(阳性对照,5 mg/kg)。除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管梗阻法制备肾纤维化大鼠模型。术后1 h,各组大鼠灌胃相应药物,每天给药1次。连续给药4周后,检测各组大鼠尿液中β_2微球蛋白(β_2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量和血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量;苏木素-伊红染色观察大鼠肾组织病理改变,并进行评分;免疫组织化学法检测大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠尿液中β_2-MG、NAG含量和血清中BUN、Cr含量均显著升高(P<0.05),并且大鼠肾组织的病理评分和组织中MMP-9、TIMP-1蛋白的表达水平也显著升高(P<0.01)。与模型组比较,虎杖苷组和贝那普利组大鼠肾组织中MMP-9蛋白表达水平持续增高(P<0.01),其余各指标水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);且虎杖苷组与贝那普利组比较大鼠各指标水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:虎杖苷延缓大鼠肾纤维化进程的机制可能与上调大鼠肾组织中MMP-9蛋白表达和下调TIMP-1蛋白表达,升高MMP-9/TIMP-1的比值有关。     

氯沙坦对局灶节段性肾小球硬化大鼠转化生长因子-β1及结缔组织生长因子的影响

目的探讨局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1),结缔组织生长因子(CTGF)在肾组织中的表达,检测尿液中两者的水平.观察氯沙坦对肾组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达及尿液两者水平的影响.方法40只Wistat大鼠随机分为实验组和治疗组.采用单侧肾摘除后重复静脉注射多柔比星(ADR)制作加速FSGS大鼠动物模型.第1次注药后1周,治疗组大鼠给予氯沙坦50 mg·kg-1·d-1灌胃,实验时间12周.于第6,12周免疫组化观察肾组织TGF-β1、CTGF蛋白质的表达,EIISA检测尿液中两者水平.结果与治疗组相比,实验组12周时尿液TGF-β1、CTGF水平,肾组织内TGF-β1、CTGF蛋白质的表达明显升高(P＜0.01).肾组织内TGF-β1蛋白与CTGF蛋白的表达显著正相关(r=0.83,P＜0.01),尿液中两者排泄量亦明显正相关(r=0.74,P＜0.01).结论FSGS大鼠TGF-β1、CTGF蛋白在肾组织表达及尿液中的排泄明显升高.氯沙坦可减轻肾组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达,减少两者尿液中的排泄而有肾保护作用.     

蒙古山萝卜酸对实验性肝纤维化大鼠MMP-1、TIMP-1、TGF-β_1和PDGF表达的影响

目的探讨蒙古山萝卜酸(MSA)对肝纤维化大鼠血清MMP-1、TIMP-1与肝脏中TGF-β_1、PDGF表达水平的影响。方法将大鼠分为对照组、模型组、阳性对照组(秋水仙碱1.5mg·kg-1)和实验药物高剂量组、低剂量组(MSA 240和30mg·kg-1),每组10只,除对照组外,皮下注射含1mL·kg-1250mL·L~(-1)四氯化碳的花生油,每隔4d注射1次,共计30次。第4次注射后,阳性对照组和实验药物高、低剂量组开始ig给药,每日1次。实验结束后,麻醉,采血,分离血清,ELISA法测定血清MMP-1、TIMP-1,免疫组化法测定肝脏TGF-β_1、PDGF。结果对照组MMP-1、TIMP-1低活性表达,模型组MMP-1表达水平明显降低(与对照组比较P<0.05),TIMP-1表达水平显著升高(与对照组比较P<0.01);阳性药组MMP-1无明显改变(与模型组比较P>0.05),TIMP-1表达水平显著降低(与模型组比较P<0.05);实验药物高剂量组MMP-1表达水平明显上升(与模型组比较P<0.05),TIMP-1表达水平显著降低(与模型组比较P<0.05),MMP-1/TIMP-1比值提高;实验药物低剂量组对MMP-1、TIMP-1无明显变化(与模型组比较均P>0.05)。对照组TGF-β_1、PDGF表达低,模型组TGF-β_1、PDGF表达水平明显升高(与对照组比较均P<0.01);阳性药组TGF-β_1、PDGF表达水平显著降低(与模型组比较均P<0.05);实验药物高剂量组TGF-β_1、PDGF表达水平显著降低(与模型组比较分别P<0.01,P<0.05),实验药物低剂量组无明显作用(P>0.05)。结论蒙古山萝卜酸具有防治实验性大鼠肝损伤纤维化,与MMP-1、TIMP-1酶活性及TGF-β_1、PDGF表达水平失衡的调节作用有关。     

葫芦茶苷对四氯化碳致肝纤维化模型小鼠的保护作用及机制研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl_4)致肝纤维化模型小鼠的保护作用,并探讨其可能机制。方法:将昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(阳性对照,0.2 mg/kg)和葫芦茶苷低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg),每组10只。除正常组小鼠腹腔注射橄榄油外,其余各组小鼠均腹腔注射10%CCl4橄榄油溶液(5 m L/kg)以复制肝纤维化模型,每周2次,连续8周。自第3周起,各给药组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠均灌胃等体积2%羧甲基纤维素钠溶液,每日1次,连续6周。采用酶联免疫吸附测定法检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、白细胞介素6(IL-6)的含量;采用分光光度法、逆转录-聚合酶链反应法、Western blotting法分别检测其肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2 mRNA以及基质金属酶2(MMP-2)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠ALT、AST、HA、IL-6、MDA、Hyp含量,Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 m RNA以及MMP-2、TGF-β_1蛋白的表达水平均显著升高,SOD、GSH-Px含量均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠ALT、AST、HA、IL-6、MDA、Hyp含量,Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA以及MMP-2、TGF-β_1蛋白的表达水平均显著降低,SOD、GSH-Px含量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对肝纤维化模型小鼠具有肝保护和肝纤维化抑制的作用,其机制可能与抑制脂质过氧化和胶原蛋白合成,下调Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA以及MMP-2、TGF-β_1蛋白的表达等有关。     

人工虫草对间质纤维化大鼠转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的 探讨人工发酵虫草对肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分为3组(正常对照假手术组、造模组及造模灌胃组),每组10只.运用单侧输尿管结扎法(UUO)制造肾间质纤维化模型,于第5周处死大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达.结果 与对照组比较,5周时肾小管间质损伤指数升高(P＜0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF的蛋白质表达均显著上调(P＜0.05).虫草干预后,上述上调指标均被显著抑制(P＜0.05).结论 虫草可通过抑制TGF-β1和CTGF的过度表达,从而改善间质纤维化.     

人工虫草对间质纤维化大鼠转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨人工发酵虫草对肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法雄性SD大鼠30只随机分为3组(正常对照假手术组、造模组及造模灌胃组),每组10只。运用单侧输尿管结扎法(UUO)制造肾间质纤维化模型,于第5周处死大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达。结果与对照组比较,5周时肾小管间质损伤指数升高(P<0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF的蛋白质表达均显著上调(P<0.05)。虫草干预后,上述上调指标均被显著抑制(P<0.05)。结论虫草可通过抑制TGF-β1和CTGF的过度表达,从而改善间质纤维化。     

顺铂肾损伤中血管紧张素Ⅱ与转化生长因子-β1的作用及相关性研究

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与转化生长因子-β1(TGF-β1)在顺铂肾损伤中的作用及二者的相关性。方法取16只大鼠随机分为正常组和模型组,各8只。采用尾静脉注射的方法复制顺铂肾损伤模型,6周后以放射免疫法检测肾组织中AngⅡ水平,免疫组化法观察TGF-β1在肾组织中的表达。结果与正常组比较,模型组肾组织中AngⅡ含量明显增加,TGF-β1在肾小管上皮细胞的表达明显增强(P<0.01),且二者之间有一定相关性(Y=0.138 X+0.062 8,r=0.98)。结论肾脏局部AngⅡ的水平与TGF-β1的表达可能在顺铂肾损伤的发生、发展中起一定作用,且二者呈正相关。     

吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏TIMP-1、TGF-β1和PDGF-β表达的影响

目的研究吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制。方法建立链脲佐菌素诱导的糖尿病SD大鼠模型,将造模成功的糖尿病大鼠随机抽样分成以下4个组:吡格列酮组、模型组、厄贝沙坦组、吡格列酮组+厄贝沙坦组,并另设正常组以作对照。对每一组大鼠给予相应的措施干预处理12周。光镜观察肾组织病理结构改变;免疫组织化学法检测肾组织TIMP-1和TGF-β1表达;免疫蛋白印迹检测肾组织PDGF-β的表达。结果模型组肾组织病理结构改变明显,肾皮质TIMP-1、TGF-β1和PDGF-β表达显著升高;吡格列酮组、厄贝沙坦组和吡格列酮+厄贝沙坦组肾组织TIMP-1和TGF-β1和PDGF-β等指标显著低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论吡格列酮对DM大鼠的肾脏具有保护作用,保护机制与TIMP-1、TGF-β1和PDGF-β的在肾组织的表达减少有关。     

鱼腥草合剂对糖尿病大鼠肾脏CTGF和TGF-β_1表达的影响

目的:观察鱼腥草合剂醇提液和水提液对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子和转化生长因子表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的发病机制以及与炎症因子的相关性。方法:采用左侧肾切除手术+高糖高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg.kg-1)腹腔注射三联法造成2型糖尿病肾病大鼠模型。雄性Wistar大鼠被随机分为正常组、模型组、西药对照组(氯沙坦组和罗格列酮组)、鱼腥草合剂醇提组(高剂量组和低剂量组)、鱼腥草合剂水提组(高剂量组和低剂量组)。采用放免法测定尿白蛋白(UAlb);采用免疫蛋白印迹(Western-blot)法观察肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达量。结果:治疗8周后,各给药组糖尿病大鼠多饮、多食和体重降低状况均明显改善。合剂醇提组在改善糖尿病大鼠肾损伤、减少24 h尿蛋白、UAlb,抑制肾组织CTGF和TGF-β1表达量方面均优于西药对照组。结论:鱼腥草合剂可减少糖尿病大鼠尿蛋白、UAlb和内生肌酐清除率,降低肾脏CTGF和TGF-β1的表达。     

阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的研究阿魏酸钠（SF）对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用,探讨其抗纤维化作用的可能机制。方法采用单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）作为阳性对照,将大鼠随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（UUO组）、阿魏酸钠组（SF组）、洛汀新组（ACEI组）。术后第9天处死大鼠,肾组织用Masson染色后进行图像分析以评定各组肾小管间质损害程度,免疫组化半定量法检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、肝细胞生长因子（HGF）的表达。结果在肾小管间质损伤指数、α—SMA及HGF的表达方面,UUO组明显高于SHAM组,SF组、ACEI组均明显低于UUO组,且两治疗组间差异无显著性;肾小管间质损伤指数与肾间质的α—SMA、HGF的表达均呈正相关。HGF的表达在SF组和ACEI组较高,与UUO组比较有显著差异。结论在单侧输尿管梗阻诱导的肾间质纤维化大鼠模型中,SF的防治作用与ACEI相似,可能是通过减少肾间质肌成纤维细胞（MyoF）的数量、上调HGF的表达,进而减少细胞外基质合成,从而减轻肾间质纤维化。     

Toll样受体4在褐藻多糖硫酸酯干预治疗大鼠肾间质纤维化中的作用

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在大鼠肾间质纤维化(RIF)中的表达情况及褐藻多糖硫酸酯(FPS)干预治疗对其调节作用。方法:将54只大鼠随机分为假手术组、模型组和药物组,每组18只,模型组和药物组制作单侧输尿管梗阻(UUO)模型,分别于术后2、4、6周处死大鼠,观察大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织TLR4及核因子(NF)-κB的表达。结果:假手术组大鼠肾组织TLR4及NF-κB无表达或仅有轻度表达;与假手术组相比,模型组肾组织表现为纤维化病理改变,同时TLR4及NF-κB强阳性表达(P<0.05),并随病程延长及纤维化的进展表达呈上升趋势;与模型组相比,药物组TLR4及NF-κB的表达减少(P<0.05),有效降低了Scr、BUN,减轻了肾间质纤维化程度。结论:褐藻多糖硫酸酯可能通过调节TLR4的表达而减缓肾纤维化病程进展。     

In Vitro and In Vivo Antifibrotic Effects of Fraxetin on Renal Interstitial Fibrosis via the ERK Signaling Pathway

Fraxetin, a natural derivative of coumarin, is known to have anti-inflammatory, anti-oxidant, and hepatoprotective effects in multiple diseases and in liver fibrosis. Whether fraxetin exerts similar effects against renal fibrosis is unknown. In a Unilateral Ureteral Obstruction (UUO) mouse model of renal fibrosis, fraxetin decreased UUO-induced renal dysfunction with a marked reduction in renal interstitial collagen fibers as detected by Masson’s Trichrome staining. Fraxetin treatment also inhibited the expression of α-SMA, Collagen I, Collagen IV, fibronectin, N-cadherin, vimentin, phosphorylated-ERK, and increased the expression of E-cadherin in UUO mice, as shown by immunohistochemical staining and western blot analysis. In vitro studies showed that fraxetin and indoxyl sulfate had no cytotoxic effects on MES13 kidney cells, but that fraxetin significantly decreased IS-induced cell motility and decreased protein expression of α-SMA, N-cadherin, vimentin, and Collagen IV via the ERK-mediated signaling pathway. These findings provide insight into the mechanism underlying fraxetin-induced inhibition of fibrogenesis in renal tissue and suggest that fraxetin treatment may be beneficial for slowing CKD progression.     

补肾活血法组方中药防治肾间质纤维化的实验研究

目的探讨依据补肾活血法组方对进展性肾间质纤维化的防治作用。方法制作大鼠肾间质纤维化模型，将大鼠分为假手术组，高、低剂量治疗组和模型组。观察肾间质病变的程度及角蛋白、波形蛋白和α- 平滑肌肌动蛋白在肾间质的表达情况。结果治疗组肾间质损害程度明显轻于模型组（P〈O．01）；波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞表达明显少于模型组，角蛋白的表达明显多于模型组（P〈O，01）。结论补肾活血法中药使肌成纤维细胞的表达减少，上皮细胞的表达增强，说明抑制并逆转了肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化，阻止了肾间质纤维化的进程。     

甲磺酸伊马替尼缓解小鼠肾组织纤维化作用研究

目的 研究甲磺酸伊马替尼（STI571）对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾间质纤维化的防治作用.方法 40只雄性清洁级昆明种小鼠随机分为4组：假手术组、模型组、小剂量治疗组（80 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、大剂量治疗组（160 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）.治疗组在手术后分别以STI571 80,160 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1灌胃.各组小鼠均于术后第8天处死.观察肾间质病理学改变;用酸水解-比色法测定肾组织胶原的含量,免疫组化技术检测α-SMA、PCNA、FN的表达.结果 与模型组相比, 治疗组肾间质纤维化程度明显减轻,肾间质α-SMA、PCNA、FN的表达也明显减少.结论 STI571能够下调肾组织α-SMA表达水平,抑制肾间质细胞增殖活化,减少肾间质细胞外基质的沉积,对UUO小鼠早期肾间质纤维化有一定防治作用.     

姜黄素对糖尿病性肾纤维化的防治机制

目的:研究姜黄素对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用。方法:24只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、DM大鼠组和姜黄素治疗组,观察治疗后血糖、体重、尿白蛋白排泄量及病理的变化,6周后用Western blot的方法检测各组肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)表达水平。结果:DM大鼠组较正常对照组尿白蛋白排泄率、肌酐清除率明显增高(P<0.01),CTGF在肾组织中的表达显著增加(P<0.01),肾脏病理变化显著;而姜黄素治疗组上述指标较DM大鼠组显著减少(P<0.01),CTGF在肾组织中的表达显著减少(P<0.01),肾脏病理变化明显改善。结论:早期应用姜黄素对DM大鼠的肾脏有保护作用,可能与其抑制CTGF在肾组织中的表达有关。     

Notch通路及维甲酸与肾纤维化研究进展

摘要：维甲酸（retinoic acid,RA）对肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)存在着重要的影响,Notch信号途径在肾纤维化中发挥了关键作用,本文就维甲酸对肾纤维化与Notch通路的影响做综述,探索维甲酸干预Notch途径能否成为新的抗肾纤维化策略。