咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓GFAP及mRNA表达的影响

目的探讨咪唑克生（Ida）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）Lewis大鼠脊髓内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）蛋白及其mRNA表达的影响。方法将30只雌性Lewis大鼠分为三组：正常对照组、EAE组和Ida组。以豚鼠脊髓匀浆（GPSCH）诱发制备大鼠EAE模型,并于给予GPSCH当日开始分别腹腔注射10mg/kgIda（Ida组）和生理盐水（EAE组和对照组）连续10d,观察EAE症状并评分。用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测GFAP蛋白及mRNA在脊髓中的表达。结果10d后Ida组大鼠的临床症状和病理学改变减轻（〈0.05）。脊髓组织中GFAP蛋白及其mRNA的表达,EAE模型组显著高于对照组,Ida组较EAE组显著增高,差异有统计学意义（〈0.05）。结论Ida可促进GFAP在EAE大鼠脊髓中的表达,可能是其保护EAE大鼠的部分作用机制。     

左旋咪唑激发大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的初步观察

目的：观察左旋咪唑(LMS)激发大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的作用。方法：将Wistar大鼠分为5组：Control组、GPSCH(琢鼠全脊髓匀浆) CEA(完全福氏佐剂)组、LMS组、LMS CFA组和CFA组，采用动物行为学、常规HE和LFB染色法观察动物的发病情况与中枢神经系统(CNS)的病理变化情况。结果：①LMS CFA组2/10和GPSCH CFA组5／10大鼠出现典型的EAE行为学改变、CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失。②CFA组8／10大鼠出现住剂性关节炎症状，未见CNS炎性细胞浸洞和髓鞘脱失。③LMS组和Control组都未见动物行为学和CNS病理学改变。结论：LMS CFA可直接激发EAE，而不需要全脊髓匀浆的诱导。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎脑内咪唑啉受体密度变化初步观察

目的:探讨咪唑啉2受体(I2R)和实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病的关系.方法:采用放射性受体-配体饱和实验,以[3H]idazoxan标记I2R,检测EAE大鼠脑内I2R受体密度和亲和力变化.结果:EAE大鼠脑组织的I2R受体密度上调74.5%(n=3,P＜0.05),I2R亲和力与对照组相比无统计学差异.结论:I2R在EAE大鼠脑组织中受体密度上调,可能与EAE发病有联系.     

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠视神经的病理学改变

目的:动态观察实验性变态反应性脑脊髓炎(Experimental allergic encephalomyelitis,EAE)大鼠视神经的病理学变化.方法:建立EAE大鼠模型,采用光镜及透射电镜分别观察第8,12,18及30天大鼠视神经形态学改变.结果:各个时间段视神经发生了不同程度的改变,光镜下表现为不同程度的神经纤维空泡样变性,轴束不规则肿胀,炎细胞浸润,大量胶质细胞和胶原组织形成增生组织成网状.电镜下主要表现为轴突内空泡样变性、髓鞘松解、脱落、微丝微管消失等.结论:EAE大鼠的视神经发生了较为严重的病理学改变.     

左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎星形细胞反应的影响

目的：观察左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中枢神经系统星形胶质细胞的影响。方法：用豚鼠全脊髓匀浆免疫Wistar大鼠建立EAE动物模型，应用免疫组化法观察左旋咪唑在不同给药方式（1次给药或3次给药）和不同剂量（分别为5、10、30mg/kg）的情况下对EAE大鼠炎性脱髓鞘病灶内或周围星形胶质细胞数量和形态影响的变化。结果：左旋咪唑可提高Wistar大鼠EAE的发病率，加重其临床症状，在免疫后16d，炎性脱髓鞘病灶内和周围星形胶质细胞数量增多，胞体肥大，其中3次给药的作用强于1次给药，在3次给药时剂量为10mg/kg时最重。结论：左旋咪唑可加重EAE星形胶质细胞反应。     

大鼠室周器官内小胶质细胞在实验性变态反应性脑脊髓炎不同时期的形态学观察

室周器官(circumvent ricular organs,CVOs)是指由室管膜特化形成的位于第三、四脑室壁上的一些微小器官,包括穹窿下器、正中隆起等.小胶质细胞是中枢神经系统中主要的宿主免疫细胞,关于CVOs处小胶质细胞的分布尚缺乏形态学报道.     

不同剂量2-BFI对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响

目的 观察不同剂量的2-BFI对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的影响.方法 将60只SD大鼠分为对照组、EAE组和2-BFI(0.75、1.5、3及6mg/kg)组,采用动物行为学、常规HE染色和LFB髓鞘染色观察大鼠的发病情况与中枢神经系统(CNS)的病理变化.结果 EAE组9只大鼠出现典型的EAE行为学改变,CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失.经2-BFI干预后,大鼠EAE发病率下降,临床症状减轻,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润减少和髓鞘脱失减轻.但与EAE组比较,仅3 mg/kg 2-BFI在EAE临床症状和CNS内炎性细胞浸润方面差异有统计学意义(P＜0.05).结论 3 mg/kg 2-BFI对EAE大鼠有神经保护作用.     

他克莫司对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的实验性治疗

目的:研究新型免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus,FK506)对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用和作用机制,并与已论证的传统治疗方法甲基泼尼松龙对EAE实验治疗做临床对比其疗效.方法:豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂制成的混合液诱导SD大鼠建立EAE模型,免疫10 d后将FK506分别以1 mg/kg,0.5 mg/kg剂量给予每日腹腔注射EAE大鼠,连续给药10 d,观察其发病情况,外周血T淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、NK细胞比率,免疫后30 d,观察脑、脊髓组织病理变化,免疫组织化学生长相关蛋白43(Growth associated protein 43,Gap-43)显示神经再生的形态学证据.结果:FK506能减轻EAE的临床症状,促进EAE的临床缓解和恢复;减轻中枢神经系统的炎症浸润;减轻髓鞘和轴突损伤,促进轴突再生作用,且停药后未见动物复发.结论:FK506对实验性变态反应性脑脊髓炎有一定的实验性治疗作用.     

C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立

目的:建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的小鼠模型,为探讨多发性硬化的免疫病理机制和实验性治疗提供依据.方法:C57BL/6小鼠40只,分为3组.EAE组25只,采用皮下注射完全弗氏佐剂与300 μg MOG35-55制备的乳化抗原,辅以腹腔注射109个/ml百日咳疫苗的方法诱导发病;佐剂组8只,用生理盐水代替抗原肽制备免疫乳剂,余同EAE组;正常对照组7只,仅注射生理盐水.采用H-E和LFB染色的方法观察小鼠EAE模型的组织学改变.结果:从免疫后11 d开始,EAE组小鼠有22只陆续出现EAE临床症状,发病率为88%.佐剂组与正常对照组小鼠均未出现临床神经系统症状.光镜下可见EAE组小鼠的大脑和脊髓组织中有大量的炎性细胞浸润,白质脱髓鞘改变明显.结论:此种造模方法简单可行,模型稳定,可在国内广泛推广.     

实验性变态反应性脑脊髓炎模型

实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）是一种以特异性致敏的CD4＋T细胞介导为主的,以中枢神经系统内小血管周围出现单个核细胞浸润及髓鞘脱失为特征的自身免疫性疾病,是人类多发性硬化（MS）的理想动物模型[1],在临床神经免疫学的研究中具有重要意义[2,3] .国内外学者试用多种易感动物建立EAE模型,以期阐明MS及EAE的发病机制,并为其病情的监测、复发的预防、治疗方案的选择以及新疗法或新药物的筛选等提供可靠依据.本文就近年来EAE模型方面的研究综述如下.     

黄体酮对大鼠实验性变应性脑脊髓炎的治疗作用

目的 研究黄体酮对实验性变应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)大鼠的治疗作用.方法 采用注射豚鼠脊髓匀浆的方法 制作雄性Wistar大鼠EAE模型.当EAE大鼠出现神经症状后,开始在治疗组腹腔内注射溶于2.5 ml芝麻油中的黄体酮(4 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续注射4 d),模型组注射等量的芝麻油.分别对两组大鼠进行运动功能评分和脑组织的电镜检查、LFB染色、锇酸Marchi's染色.染色结果 采用IPP图像分析软件计算光密度(OD)值.结果 治疗组和模型组神经功能评分无明显区别,但是在开始治疗后第6、10、25天,治疗组正常髓鞘的积分光密度值明显高于模型组,而退变髓鞘的积分光密度值明显低于模型组.结论 黄体酮有利于EAE大鼠中枢神经系统的髓鞘再生,促进髓鞘修复.     

实验性变态反应性脑脊髓炎T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子-α变化的意义(英文)

目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子(TNF)α变化的意义。方法从豚鼠(GP)脊髓中分离髓鞘碱性蛋白(MBP),主动免疫Lewis大鼠诱导EAE成功后,观察EAE组临床症状,并进行临床评分;应用淋巴细胞增殖试验测定EAE大鼠淋巴结T淋巴细胞增殖程度;应用ELISA技术测定血清TNFα水平。结果EAE临床发病过程中,T淋巴细胞增殖活跃,血清TNFα水平异常升高,并与临床症状呈正相关。结论EAE时T淋巴细胞增殖旺盛和TNFα生成增多,进而导致血脑屏障(BBB)的破坏,炎细胞浸润,从而诱发EAE。     

人胚神经干细胞移植治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的实验研究

目的:研究侧脑室注射人胚神经干细胞(hNSCs)移植治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的有效性及hNSCs在EAE大鼠脑内的状况。方法:从自然流产的孕9～15周的人胚脑组织中分离、培养神经干细胞。用豚鼠全脊髓匀浆免疫Wistar大鼠制备EAE大鼠模型,分别在免疫后10、15、21天经侧脑室注射移植未分化的hNSCs入大鼠体内,观察hNSCs对EAE动物模型神经功能评分、脑内脱髓鞘病灶数目的影响,免疫组化方法观察移植后的hNSCs在EAE大鼠脑内存活、迁徙、分化的状况。结果:从人胎脑中成功培养出hNSCs,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球。绝大多数细胞表达神经干细胞的标记物神经巢蛋白(nestin)。hNSCs移植组各时间点大鼠脑组织切片中均可见Brdu、nestin、NSE、GFAP、CNPase染色阳性细胞,CNPase阳性的少突胶质细胞比例随时间的延长而逐渐增多;hNSCs移植组大鼠自免疫后30天起其神经功能评分显著低于对照组(P<0.05);移植后20、30天脑内脱髓鞘病灶数目明显少于对照组(P<0.05)。结论:hNSCs体内体外均具有多向分化潜能,受炎症部位微环境信号的影响分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞。hNSCs移植能有效改善EAE动物的神经功能评分,减少病灶数目。     

咖啡因对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的IFN-γ和TGF-β的影响

目的：探讨咖啡因对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠的中枢神经系统炎性因子干扰素-γ（IFN-γ）、转化生长因子-β（TGF-β）的影响。方法：Wistar大鼠随机分为EAE模型阳性对照组、咖啡因处理组（10mg／kg、30mg／kg）、阴性对照组。复制豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠的EAE模型，应用咖啡因干预，观察EAE的发病率变化；通过HE染色技术观察神经组织炎性细胞浸润情况；应用半定量RT-PCR法测定颈髓IFN-γ、TGF-β含量。结果：咖啡因处理组大鼠EAE发病率下降、脑脊髓组织炎性细胞浸润减轻；EAE模型阳性对照组、咖啡因处理组（10mg／kg、30mg／kg）、阴性对照组的颈髓IFN-γ含量分别为1．23±0．58、0．65士0．10、0．25±0．07、0．26±0．12，TGF-β含量分别为0．91±0．10、1．05±0．01、1．19±0．01、0．75±0．07。结论：咖啡因处理可以减少IFN-γ、提高TGF-β的含量，减轻EAE的中枢神经组织损伤。     

应激对大鼠自身免疫性脑脊髓炎模型的影响

目的:观察应激刺激对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)SD大鼠细胞免疫的影响。方法:用豚鼠脊髓抗原免疫SD大鼠,制作SD大鼠EAE模型,并随机分为抗原免疫+应激处理组(A组)和单纯抗原免疫组(B组),观察两组大鼠EAE的发病率及病情严重程度。3周后处死SD大鼠,检测大鼠外周血CD4+、CD8+细胞比例和CD4+/CD8+比值。结果:接种豚鼠脊髓抗原的两组大鼠10d后开始发病,A组大鼠EAE发病率和病情严重评分均高于B组,差异有统计学意义(P<0.01)。A组外周血CD4+比例、CD4+/CD8+比值均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+细胞比例与B组相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应激刺激对EAE大鼠细胞免疫有抑制作用,促发并加重大鼠EAE病情。     

黄岑苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响

目的观察不同浓度黄岑苷(baicalin)对实验性自身免疫脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型的作用,并研究其初步机制。方法建立实验性自身免疫性脊髓炎小鼠模型,免疫后第3天给予高低剂量黄岑苷灌胃,每天1次,共20 d。对小鼠活动进行神经功能评分,TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况,ATP水平检测试剂盒检测脊髓组织ATP含量水平,免疫印迹法(Western blot)检测Bax、Bcl-2、cleaved cas-9和cleaved cas-3蛋白表达水平。结果黄岑苷能够提高实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠神经功能,延后发病时间;黄岑苷干预后,Tunel染色结果显示脊髓组织凋亡细胞数下降,ATP水平下降,免疫印迹法结果显示Bcl-2的蛋白表达显著上升,Bax、cleaved cas-9和cleaved cas-3的蛋白表达显著下降。结论黄岑苷可通过抑制线粒体内源性凋亡途径抑制细胞凋亡,保护线粒体,提高实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠神经功能,为预防疾病提供了实验理论依据。     

PKA干预淫羊藿苷治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎对中枢神经CREB表达的影响*

目的 研究淫羊藿苷（ICA）治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）对环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）的影响,并探讨ICA治疗的作用机制。方法 复制C57BL/6小鼠EAE模型,并将其分为3组,每组 6只。模型对照组：予生理盐水3?ml/d灌胃;ICA组：予以ICA 300?mg/（kg·d）灌胃;ICA+H89组：予以ICA 300?mg/（kg·d）灌胃并予以蛋白激酶A（PKA）特异性阻断剂H89 5?mg/（kg·d）腹腔注射;另取6只未经模型复制的C57BL/6小鼠同等条件下饲养作为正常对照组,予生理盐水3?ml/d灌胃。EAE小鼠在发病达高峰时开始给药,1次/d,连续给药5?d。每日进行神经损害评分,至给药结束后次日。给药结束后次日进行神经损害评分后处死小鼠,立即采集脊髓颈膨大部分进行Western blotting检测,检测CREB的表达。结果 ICA组小鼠神经损害表现明显改善,与治疗前比较差异有统计学意义（P?<0.05）,而ICA+H89组小鼠及模型对照组小鼠神经损害评分均无改善,治疗前后比较差异无统计学意义（P?>0.05）。模型对照组脊髓组织中CREB的表达较正常对照组降低（P?<0.05）。ICA组治疗后CREB的表达与模型对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,ICA组CREB的表达升高。但同时给予ICA与H89治疗的小鼠并不能提高脊髓组织中CREB的表达,与模型组比较差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 ICA可能是通过PKA途径提高中枢神经系统中CREB的表达,从而发挥对EAE的治疗作用。