GM—CSF基因转导的肿瘤疫苗研究

目的：观察ＧＭ－ＣＳＦ基因转导的肿瘤细胞免疫小鼠的抗肿瘤效果。方法：用电穿孔法将小鼠ＧＭ－ＣＳＦ的表达质粒导入ＲＭＡ淋巴瘤细胞,经Ｇ４１８筛选后,将ＧＭ－ＣＳＦ高表达克隆（ＲＭＡ－ＧＭ）细胞皮下接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,观察成瘤性,以及经丝裂霉素－Ｃ处理灭活的ＲＭＡ－ＧＭ细胞免疫小鼠,观察抗肿瘤作用。结果：ＲＭＡ－ＧＭ细胞免疫小鼠及亲代肿瘤细胞攻击后与对照组相比,肿瘤生长速度减慢,小鼠生存期明显延长     

免疫介异的再生障碍性贫血小鼠脾细胞中肿瘤坏死因子基因表述的研究

以前的研究征明多数再障患者血清ＴＮＦ升高。本文用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法检测免疫介导的再障小鼠脾细胞α－ＴＮＦｍＲＮＡ的表达和用ＥＬＩＳＡ检测脾细胞诱生ＴＮＦ的量的改变。结果显示：再障组小鼠的ＴＮＦｍＲＮＡ水平和脾细胞诱生的α－ＴＮＦ的旦均比正常组者明显降低。（Ｐ＜０．００１），这一结果提示免疫介异的再障小鼠血清ＴＮＦ的升高与脾细胞无关。     

肿瘤坏死因子αDNA疫苗的制备及其对肿瘤的治疗作用

目的观察pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis肺癌瘤局部注射的治疗效果及相关免疫机理。方法用双酶切的方法由pBluescdpt／TNFα载体上切下TNFα基因片段，构建真核表达载体，转染COS及Hda细胞，并对小鼠Lewis瘤体内注射pcTNFα重组质粒，观察疗效。结果构建了携带TNFα的重整pcTNFα真核表达质粒，肿瘤局部注射pcTNFα组肿瘤生长缓慢，存活期比对照组明显延长。结论pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis瘤局部注射，有一定的抗肿瘤效应。     

肿瘤坏死因子α基因转导人脑胶质瘤浸润淋巴细胞的抗肿瘤活性研究

应用脂质体转染技术构建能表达肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）基因的重组逆转录病毒。采用鱼精蛋白促进法,将重组病毒介导ＴＮＦ－α基因转染人脑胶质瘤浸润淋巴细胞（ＧＩＬ）。在体外,转染后的ＧＩＬ（ＴＮＦ－α／ＧＩＬ）的抗肿瘤活性比ＧＩＬ＋ＩＬ－２强２～５倍。在荷瘤裸鼠体内,ＴＮＦ－α／ＧＩＬ能显著抑制肿瘤生长。因此,ＴＮＦ－α基因转染的人脑胶质瘤浸润淋巴细胞（ＴＮＦ－α／ＧＩＬ）是脑胶质瘤免疫基因治疗的一种有效的效应细胞     

黄芪注射液对贫血小鼠脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子的影响

目的 观察黄芪注射液（AMI）对贫血小鼠脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）的影响。方法 在贫血小鼠脂肪细胞培养体系中，分别加入0.1mL不同浓度的AMI（终浓度分别为40μg/mL、400μg/mL）作为药物组1、药物组2，对照组加入等量RPMI-1640培养液，分别收集培养上清液，采用TNF敏感细胞株L929细胞，以MTT比色法检测各实验组TNF活性单位。结果 与对照组比较，各经组脂肪细胞培养上清所含TNF均有明显升高。结论 一定浓度的AMI体外作用，可以刺激贫血小鼠脂肪细胞分泌TNF。     

TNF基因转导肿瘤浸润淋巴细胞的方法学研究

在总结Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ建立的ＴＮＦ－ＮｅｏＲ缺陷型逆转录病毒转染肿瘤浸润细胞（ＴＩＬ）的基础上，选用美国国家卫生院重组ＤＮＡ咨询委员会（ＲＡＣ）批准的逆转录病毒（Ｍｏ－ＭｕＬＶ）的衍生物作载体，对肿瘤坏死因子转导ＴＩＬ进行研究。实验结果提示：ＴＩＬ处于静息期与对数生长后期，当ＴＮＦ－ＮｅｏＲ缺陷型逆转录病毒转导ＴＩＬ细胞时，ＴＩＬ细胞增殖受到影响；最佳转导时间为ＴＩＬ分离培养后９￣２５ｄ。各病毒     

肿瘤坏死因子与感染免疫

抗感染免疫反应是机体在受到病原菌及病毒等的侵害时免疫系统所产生的一种复杂的防御机能,有多种因子参与该反应,其中肿瘤坏死因子(TumorNecrosisFactor,TNF)又名恶病质素(Cachectin)起着十分重要的作用。TNF是一种多肽类细胞因子,与IL-1、IL-6、IFN、PGE2、PAF等炎症介质有着密切的协同作用[1]。TNF可分为三类,TNF-α主要由单核巨噬细胞产生,TNF-β由激活的淋巴细胞产生,TNF-γ是NK细胞产生的细胞素因子(NKCF)[2]。另外,肥大细胞、脑星状和小神经胶质细胞也产生TNF,肝枯否氏细胞是体内最大的固定巨噬细胞池,是产生TNF-…     

肿瘤坏死因子与肿瘤基因治疗

<正>肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)是迄今发现的抗瘤作用最强的细胞因子,体内外实验均显示了强大的抗肿瘤作用。因此,TNF的研究备受人们的关注。现重点介绍近年来有关TNFα结构与功能关系的研究进展及TNFα在肿瘤基因治疗中的应用情况。     

人肿瘤坏死因子α基因cDNA直接注入小鼠骨骼肌表达的初步研究

本实验将带有人肿瘤坏死因子α基因（ＴＮＦ－α基因）ｃＤＮＡ的重组表达质粒直接注入小鼠骨骼肌内，观察了外源基因在小鼠体内的表达情况。双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ法显示，实验组小鼠肌注１５ｄ后血浆中ＴＮＦ蛋白含量逐渐增高并达高峰，然后开始下降。ＲＮＡ ｄｏｔ ｂｌｏｔ结果显示，肌注２０ｄ时实验组中ＥＬＩＳＡ阳性的小鼠，其肌注处肌肉组织有ＴＮＦ－α基因表达。由此表明，直接将外源ＤＮＡ导入骨骼肌细胞内是基因转移     

肿瘤坏死因子研究进展

肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）是近年来研究较深入，应用较广泛的新型细胞因子。ＴＮＦ作为一种细胞因子，不仅具有对瘤细胞的细胞毒杀伤作用，同时也参与抗病毒、抗感染、凝血、发热、休克、多器官功能衰竭、恶液质等多种病理生理过程...     

辛伐他汀对蛛网膜下腔出血大鼠海马TNF-α的影响

目的探讨辛伐他汀对蛛网膜下腔出血大鼠海马肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法将SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组,采用非开颅血管内穿线法制备大鼠SAH模型,治疗组给予辛伐他汀。采用免疫组织化学和免疫印迹方法检测大鼠海马TNF-α表达。结果模型组神经功能缺损明显,海马TNF-α表达明显高于对照组（P〈0.05）。使用辛伐他汀后,TNF-α表达降低（P〈0.05）。结论 TNF-α参与了蛛网膜下腔出血发病过程,辛伐他汀可能通过影响TNF-α途径发挥治疗蛛网膜下腔出血脑血管痉挛作用。     

喉癌病人血清肿瘤坏死因子的测定

①目的探讨喉癌病人血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平的改变及其临床意义。②方法采用ＥＬＩＳＡ法测定３７例喉鳞状细胞癌病人、２５例喉良性疾病病人和４０例正常人血清ＴＮＦ水平。③结果喉癌病人血清ＴＮＦ水平较良性疾病组和正常对照组增高（ｔ′＝５．８２，５．６７，Ｐ均＜０．０１）；以大于正常对照组血清ＴＮＦ的ｘ±２ｓ为阳性，喉癌组阳性率为７５．７％，良性疾病组阳性率为８．０％，两组比较差异有极显著性（χ２＝２４．７２，Ｐ＜０．０１）；喉癌病人血清ＴＮＦ水平与临床分期无关（ｔ＝０．１６，Ｐ＞０．０５）。④结论喉癌病人血清ＴＮＦ水平升高，检测血清ＴＮＦ水平有助于喉癌的诊断。     

应用肿瘤坏死因子基因转染肿瘤浸润淋巴细胞进行肝癌基因治疗的实验研究

目的：探讨转基因肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytem,TIL)治疗肝癌的价值。方法：用转基因技术将肿瘤坏死因子(TNF—α)基因导人人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞，构建转基因TIL。用肝癌细胞株BEL7404注射裸鼠建立裸鼠肝癌移植瘤，用转基因TIL分原位及异位进行治疗，并用TIL作对照。结果：转基因TIL表现出较高的抑制肿瘤作用，对肿瘤的生成率、生长速度的抑制作用比未转基因TIL强。原位注射转基因TIL的抗肿瘤作用较强，优于异位注射治疗。结论：转基因TIL对裸鼠移植性肝癌的实验治疗具有较好作用，本研究为人肝癌的基因治疗研究提供依据。     

肿瘤坏死因子对大鼠纤维连接蛋白的作用

静脉注射肿瘤坏死因子(TNF,30μg/100g体重)后,大鼠血浆纤维连接蛋白(Fn)含量逐渐降低(与实验开始时比),1/2h时最明显(P<0.05)。对照组无明显变化。血浆Fn与TNF一起体外孵育未见Fn降低,因此TNF的上述作用似非直接。与此同时,组织Fn含量及免疫荧光强度均增加,尤以肾内变化为显。由于血浆Fn降低,而组织Fn升高,因此TNF通过增强微血管通透性导致血浆Fn向组织转移的可能性有待进一步证实。     

转TNF-α基因肿瘤浸润淋巴细胞的构建及其生物学特性的研究

目的 :用肿瘤坏死因子 (Tum or necrosis factor- α,TNF- α)基因转染人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞 (Tumor infiltratinglym phocyte,TIL) ,构建转基因 TIL,对其生物学特性进行研究 ,为肝癌基因治疗奠定基础。方法 :用逆转录病毒载体将 TNF- α基因导入人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞 ,构建一种新型的抗肿瘤效应细胞 -转基因 TIL。对转基因 TIL 的增殖能力和细胞表型进行检测 ,用 RT- PCR检测目的基因的表达 ,TNF- α试剂盒检测 TNF- α分泌量 ,用 MTT法检测转基因 TIL 体外抗肿瘤活性。结果 :转基因 TIL 的增殖活性及细胞表型与 IL- 2活化的 TIL 相似 ,转基因 TIL 可持续表达 TNF- α,其分泌量每 2 4 h达 370 pg/5× 10 5cells。转基因 TIL 对肝癌细胞株 BEL74 0 4具有较高的杀伤活性。结论 :转基因 TIL 维持较高的稳定性 ,可持续表达TNF- α,具有良好的体外抗肿瘤作用 ,对肝癌治疗具有良好的应用前景     

肿瘤坏死因子对原发性高血压左室构型的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子（TNF）在原发性高血压心肌肥厚过程中的病理生理作用。方法：原发性高血压病人64制，对照组30例，以超声心动图测定左心室质量指数（LVMI）和室壁相对厚度（RWT）．根据LVMI与RWT把高血压组分成四种构型。用发光免疫法测定血清TNF含量．结果：高血压组TNF寺量正著高于正常对照组，并且与血压升高程度呈正相关；2．正常构型组TNF含量显著高于正常对照组；3．向心性重构组及向心性肥厚组显著高于正常构型组．但两组之间的差别不显著；4．离心性肥厚组TNF显著高于其他构型组；5．TNF与LVMI、左室舒张期末容积（EDV）及收缩期末容积（ESV）正相关，与左心室射血分数（EF）负相关。结论：TNF促进了左室构型向离心性肥厚的发展．     

ROLE OF TUMOR NECROSIS FACTOR IN NEONATAL SEPSIS

ＲＯＬＥＯＦＴＵＭＯＲＮＥＣＲＯＳＩＳＦＡＣＴＯＲＩＮＮＥＯＮＡＴＡＬＳＥＰＳＩＳＳｈｉＹｕａｎ；（史源）ＳｈｅｎＣｈｉｋａｏ；（沈际臬）ＷａｎｇＪｉａｎｇｈｕａｉ；（汪江淮）ＬｉＨｕａｐｉａｎｇ；（李华强）ＱｉｎＳｈｉｗｅｎ；（覃世文）ａｎｄＬｉｕ...     

TUMOR NECROSIS FACTOR-ALPHA POLYMORPHISM AND SECRETION IN MYASTHENIA GRAVIS

Objective To analyze the relationship between tumor necrosis factor-alpha (TNFo) gene promoter -308 polymorphism and myasthenia gravis (MG) in Chinese and analyze secretion of TNFo in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) in MG patients.Methods A biallelic polymorphism at position -308 in the promoter of TNFα gene was screened by PCR amplification and NcoI recognition site. One hundred and twenty-three MG cases and 115 healthy controls were included in this study. MG patients were classified to different groups according to clinical type, age at onset, and sex respectively. PBMC were isolated from 20 patients and 20 healthy controls, and then cultured in the presence or absence of phytohemagglutinin (PHA) and acetycholine receptors (AchR). The supernatants were harvested after incubation and stored until TNFαwas assayed by enzyme-linked immunosorbent assay.Results The frequency of TNFα-308 allele 2 (A) was found significantly increase in MG patients and showed a trend especially in late onset (≥ 40 years) and male patients (P ＜ 0.05). The allele A had no relationship with thymic pathogenesis in MG patients. But frequency of allele A was significantly higher in general type than in ocular type (P ＜ 0.05). MG patients had a higher inducible level of TNFα by PHA and AchR, and could be down regulated after treatment.Conclusion Polymorphism in TNFα gene promoter -308 is associated with onset of MG. The microsatellite allele TNFα2 confer risk for the development of MG in Chinese patients. MG patients have a higher inducible level of TNFα.     

肿瘤坏死因子基因和蛋白及受体在子宫内膜组织的表达

目的探讨子宫内膜癌组织肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）基因和蛋白及受体的表达及意义。②方法分别采用非同位素原位杂交方法、免疫组化方法对４８例子宫内膜癌组织ＴＮＦｍＲＮＡ,ＴＮＦ蛋白及ＴＮＦ受体（ＴＮＦＲ）的表达进行检测。③结果子宫内膜癌组织中１６例ＴＮＦｍＲＮＡ呈阳性表达,均为间质的单个核细胞和平滑肌细胞,腺癌细胞无阳性表达,对照组未见阳性表达。１５例病人ＴＮＦ蛋白呈阳性表达,２５例ＴＮＦＲ呈阳性表达,对照组子宫内膜腺体也有ＴＮＦＲ阳性表达,两组比较差异无显著性（χ２＝２．４５,Ｐ＞０．０５）。ＴＮＦｍＲＮＡ与ＴＮＦ蛋白表达存在不一致性,ＴＮＦ与ＴＮＦＲ表达与组织学分化及肌层浸润深度差异均无显著性（χ２＝２．１７,０．８１,Ｐ＞０．０５）;ＴＮＦＲ蛋白表达明显高于ＴＮＦ,两者比较差异有极显著性（χ２＝４．２９,Ｐ＜０．０５）;ＴＮＦＲ在正常内膜表达与子宫内膜癌表达差异无显著性（χ２＝２．４５,Ｐ＞０．０５）。④结论子宫内膜癌间质细胞能够表达ＴＮＦｍＲＮＡ,并产生ＴＮＦ蛋白。