2株副流感病毒株的分离与鉴定

目的 副流感病毒的分离、鉴定。方法 应用鸡胚和人胚肺成纤维细胞突变株分离病毒,用多株流感国际和国内代表株抗血清进行血凝抑制交互试验,用4类主要呼吸道病毒单克隆抗体间接免疫荧光法做特异性交叉反应鉴定。结果 分离株在鸡胚培养中有较高的血凝效价,但与流感病毒甲、流感病毒乙均不发生血抑反应,而与副流感病毒2型单克隆抗体发生较强免疫荧光反应,在人胚肺成纤维细胞突变株培养出现明显细胞融合病变。结论 分离虽具有高滴度血凝效价,但不是流感病毒,根据与副流感病毒2型单克隆抗体可以发生较强反应和在人胚肺成纤维细胞上的特征性细胞病变,确认为副流感病毒2型。     

人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰研究

目的研究关于人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰。方法常规传代培养人胚肺二倍体成纤维细胞及应用过氧化氢染毒诱导细胞早衰发生,利用细胞衰老综合指标进行评价,包括细胞形态学改变、生长曲线、寿命周期、细胞周期分布及衰老相关β-半乳糖苷酶染色等,同时检测细胞衰老不同阶段增殖细胞核抗原PCNA的mRNA和蛋白水平表达变化。结果人胚肺二倍体成纤维细胞于52PDL(群体倍增水平)处于细胞复制性衰老状态,400μmol/L过氧化氢可短期内诱导细胞过早衰老,衰老的细胞变大扁平,饱和度降低,细胞不可逆的阻滞于G1期,衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性率增加,PCNA表达随着衰老程度的增加而逐渐下降。结论400μmol/L过氧化氢以一定方式作用于细胞可以诱导早衰发生,细胞复制性衰老与细胞早衰具有相同的生物学特征和增殖能力。     

柯萨奇病毒YY157株在不同细胞系中的增殖特性

目的 了解柯萨奇病毒A16型(Cox A16)YY157株在多种细胞系中培养的增殖特性,为疫苗研制提供参考.方法 把YY157株接种于非洲猴肾细胞(Vero)、人胚肺二倍体成纤维细胞MRC-5或KMB17进行适应性传代培养,观察细胞病变情况,检测病毒感染性滴度,绘制增殖曲线.结果 Cox A16 YY157株在3种细胞中培养均产生细胞病变,在Vero细胞中病变早,增殖快,滴度达8.5 lgCCID50/mL;在MRC-5细胞中,此毒株增殖速度比在Vero细胞中慢,滴度达7.5 lgCCID50/mL;在KMB17细胞中,此毒株增殖最慢,滴度只有7.0 1gCCID50/mL.结论 Cox A16型YY157株均可感染Vero、MRC-5和KMB17细胞并增殖,但敏感性和增殖速度有差异.     

重组人巨细胞病毒的转染、培养及其表型鉴定

[目的]对重组人巨细胞病毒进行体外包装培养并鉴定,为该病毒基因组功能研究提供稳定的实验材料.[方法]用试剂盒抽提、纯化重组人巨细胞病毒Towne基因组(Towne-BAC),构建pcDNA3.1(+)-UL82表达质粒;将Towne-BAC与pcDNA3.1(+)-UL82共转人胚肺成纤维细胞;培养病毒、观察细胞病变,抽提病毒RNA;设计人巨细胞病毒IE1、UL138、UL145基因PCR引物并扩增序列, 电泳鉴定. [结果]成功构建pcDNA3.1(+)-UL82,Towne-BAC与pcDNA3.1(+)-UL82共转后发生细胞病变;重组病毒的细胞培养物中分别检测到IE1、UL145基因表达,无UL138基因表达. [结论]成功包装出重组人巨细胞病毒,表型与Towne株吻合.     

人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2启动子区CpG岛的甲基化状态

目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中Foxa2的表达改变及其启动子区CpG岛的甲基化水平变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞[第22代细胞,即22 PDL(populationdoubling levels,群体倍增水平)]组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。用荧光定量PCR方法检测人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达改变,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测启动子区-777～-478 bp甲基化的变化情况,并用亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序检测启动子区域CpG岛的甲基化水平。结果与年轻细胞组比较,中年细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2 mRNA的表达水平无明显变化;而复制性衰老细胞组和早衰细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2的mRNA表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。早衰细胞组的启动子区具有一定的甲基化水平;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰细胞组Foxa2启动子区CpG岛的甲基化水平分别为5.7%,17.1%和43.6%。结论人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达水平逐渐降低,其启动子区CpG岛甲基化水平逐渐升高,参与其表达调控。     

浅析流感病毒鸡胚培养影响因素

目的:探讨流感病毒鸡胚培养影响因素。方法:选取经实时荧光PCR检测阳性同时流感病毒MDCK细胞培养阳性的样本,用原始标本接种SPF鸡胚培养、传代、收获、以人O型血红细胞凝集试验测定病毒滴度,滴度大于等于1:8倍用血凝抑制试验鉴定分型。结果:205.10.1-2016.3.31本流感网络实验室共采用实时荧光PCR检测样本1052份,阳性155份,流感病毒MDCK细胞培养血凝滴度1:8符合要求的阳性86株。选取MDCK细胞培养阳性鸡胚敏感的H1N1及B-Victoria样本共57例原始标本滤过除菌后接种SPF鸡胚经过2-3代鸡胚培养收获血凝滴度1:8符合要求的阳性病毒株20株。结论:流感病毒鸡胚培养的敏感性低于细胞培养,影响鸡胚培养的因素主要有鸡胚的选择,样品的毒力及保存时间,试验时样品的处理无菌操作等。     

锌和硒拮抗二氧化硅致人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸合成的实验研究

目的:观察葡萄糖酸锌(ZnG)和亚硒酸钠(Na2SeO3)对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平的单独以及联合拮抗作用。方法:用RAW264.7细胞和人胚肺成纤维细胞分别于37℃、5%CO2培养箱进行培养,RAW264.7细胞在细胞生长对数期时加入二氧化硅(SiO2),同时加入不同浓度ZnG、Na2SeO3的溶液,24 h后取RAW264.7细胞培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,作用48 h后测人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量。结果:ZnG、Na2SeO3单独与联合作用均可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P<0.05),其中以ZnG 2.25 mg/L和Na2SeO32.0μmol/L浓度的单独与联合作用效果最明显。结论:一定剂量的ZnG、Na2SeO3对SiO2致人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独以及联合拮抗作用。     

H7N9流感病毒在4种细胞中培养情况的研究

目的了解H7N9流感病毒在不同细胞中增殖的感染动力学差异。方法将H7N9流感病毒分别接种于鸡成纤维细胞(DF-1)、狗肾细胞(MDCK)、人支气管上皮细胞(BEAS-2B)、人肺腺癌细胞(A549),观察病毒在各细胞内增殖后细胞病变效应(CPE)、血凝实验滴度及50%组织培养细胞感染剂量。结果 H7N9流感病毒在A549细胞中培养36 h可达到血凝效价最高,同时可见明显CPE,在DF-1及MDCK细胞中培养72 h后血凝效价达到最高;在BEAS-2B细胞中增殖不明显,培养液对豚鼠血无明显凝集,且培养超过96 h尚无明显CPE。DF-1细胞、MDCK细胞、A549细胞对病毒的TCID50实验结果分别为10~(-4.34)、10~(-5.13)、10~(-3.84)。结论本实验使用的H7N9流感病毒不能有效感染BEAS-2B细胞并在其中增殖,但是可以在DF-1、MDCK及A549细胞中有效增殖。增殖能力以MDCK细胞最强,DF-1细胞略弱,A549细胞次之。A549细胞对病毒的吸附能力较强,可快速达到增殖的高峰。     

生物杀虫剂—茶蚕颗粒体病毒的细胞学研究

用生物杀虫剂茶蚕颗粒体病毒接种中国仓鼠肺细胞（ＣＨＬ）和鸡胚细胞未能引起细胞病变，茶蚕颗粒病毒亦不能在其中增殖，接种病毒颗粒后５天的原代细胞和盲代３代的细胞超薄切片的电镜观察未发现病毒包涵体。ＣＨＬ细胞的空斑实验证实了该病毒未感染ＣＨＬ细胞，但进行的ＣＨＬ细胞微核试验出现可疑阳性结果，提示茶蚕颗粒体病毒制剂中某些物质可能会引起遗传物质的改变     

酶标仪检测数据的PC端处理及远程控制

本文利用串行通讯技术和灵活的计算机编程技巧，实现了酶标仪和计算机之间的数据通讯、分析和处理，并可脱离酶标仪面板，做到对酶标仪的远程控制。     

从医方视角探解医患关系困境

目的：从医方视角探解医患关系困境。方法2013年10月-2013年11月,从本市几所主要医院中随机选择600例住院患者及医务人员进行研究。利用问卷调查法,对医患关系相关情况进行调查。结果调查发现,医务人员中有34.3％认为医患关系紧张,患者中有8.6%认为医患关系紧张。患方对医方不满的原因主要有沟通交流障碍和态度问题以及医疗质量问题等方面。结论面对医患关系的困境,医方需要积极的采取患者-医生-医院三位一体的应对策略,不断提高整体医疗质量,为患者提供人性化的医疗服务,努力改善医患关系。     

论医院治疗服务产出的核算方法

讨论了医院用投入法核算治疗服务产出存在的问题，从完整产品的角度提出改进的方法——医院完整治疗产出的核算方法，并通过模拟数据计算证明该方法能对医院治疗服务产出进行准确的测算。     

氢化物发生—原子荧光光谱法测定牙膏中的铅

目的:建立了一种测定牙膏中微量铅的方法——氢化物发生—原子荧光光谱法。方法:采用硝酸—高氯酸消解,氢化物发生—原子荧光光谱法测定。结果:线性范围为0~100μg/L,检出限为0.23μg/L,样品加标回收率为91.7%~102.1%,用标准物质茶叶(GBW10016)对该法验证,验证结果与推荐值一致,相对标准偏差为1.18%。结论:该法检出限低,线性范围宽,精密度好,准确性高,适合牙膏中微量铅的检测分析。     

新形势下对医院文化建设的思考

随着我国卫生医疗事业近年来飞速的发展和民众日益增长的需求,如何从容面对外部严峻的挑战以及如何抓住自身发展的机遇成为医院改革和发展不得不面对的问题,而医院文化建设正是推动医院发展、提高医院综合竞争实力的核心内容。同时,医疗改革的不断深化更是对医院的管理提出了新的要求,这就使得管理者必须科学地运用医院文化这一现代化的医院管理理论提高医院的管理水平,增强医院的综合实力。     

社区慢性精神分裂症患者康复技能训练疗效初探

目的探讨社区慢性精神分裂症应用康复技能训练的远期疗效。方法将100例稳定期精神分裂症患者随机分成技能训练组和对照组各50例。对技能训练组进行共4周的模式化训练,然后随访4周。采用阳性和阴性症状量表（PANsS）和白知力与治疗态度问卷（ITAQ）对患者进行评估。结果训练组患者的PAN—SS总分及其阴性量表分和一般精神病理量表分从训练第4周末分别为（54．86±2．94）分,（14．44±l_67）分,（27．98±1．97）分,明显优于对照组（60．22±2．83）分,（18．28±1．63）分,（29．70±2．131）分,差异具有显著性（P〈O．01）;训练组患者对疾病的自知力在训练第4周末为（10．68±1．95）分,明显强于对照组（8．64±2．19）分,差异具有显著性（P〈0．01）;随访4周两组均无复发。结论技能训练提高了药物治疗的疗效,弥补药物的不足,提高患者对疾病的认识,从而促进患者更好的康复。     

Vaccinology: the name, the concept, the adjectives

The visibility of the term vaccinology has become more pronounced in the 21st century in defining a scientific field that has absorbed aspects from different scientific domains until finally acquiring an identity of its own. As a result, vaccinology brings together a long tradition of researchers who have operated within a linear paradigm and incorporates new generations of scientists who have forged an exciting and diverse network of knowledge within this field. The term vaccinology, which initially appeared in isolation at the time of Jenner and once again with the emergence of the Pasteurian model, acquired further prominence thanks to the efforts of the vaccinologists who chronicled the production of vaccines in the last third of the 20th century. The term has since become truly consolidated, with the appearance of new adjectives during this century. This study provides a historical perspective for the frequency of use and evolution of this increasingly widespread term.     

From the end of the world to the top of the world

I've been on the road a bit this summer. Because of the kind generosity of my London broker, Lloyd and Partners, Ltd., I've been allowed the unique opportunity to have an insider's view of the London market. I observed an interesting renewal situation and sat with underwriters in their boxes amid the hallowed (at least to us insurance geeks) trappings of Lloyd's. I spent several lovely days in Hanover with my long‐time lead reinsurer, Hanover Re, while trying desperately to keep up with my own work back home. It's been stimulating and thought‐provoking, and I know I won't ever view the purchase of insurance in the same way.     

控烟工作中的难点与策略

分析了控烟工作中存在的难点,提出了提高控烟工作效果的策略：（1）加强控烟的关键是扩大禁烟的场所和明确控烟法规的执行主体;（2）从宣传吸烟有害健康转变为宣传被动吸烟有害健康;（3）消除人们为吸烟所找的借口;（4）大力宣传不吸烟、不敬烟和不在他人面前吸烟;（5）控烟应从卫生工作者开始。