中国株HGV部分基因的分子克隆与核苷酸序列分析

采用ＲＴ－ＰＣＲＣ地广东地区３３例肝炎患者血清进行ＨＧＶＲＮＡ检测，结果２例（６．１％）阳性。对其中１株输血后ＨＧＶ（ｃｈ－ｓ）基因组５′端非翻译区（５ＵＴＲ）进行分子克隆与测序，并分别与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的２株ＨＧＶ（ＰＮＦ２１６１，Ｒ１０２９１）和Ｌｅａｒｒ等报道ＧＢＶ－Ｃ相比较，其核苷酸序列的同源性分别为８９．２％，８８．７％，８７．１％，本研究首次证实我国华南地区在ＨＧＶ感染，ＨＧＶ高度保     

聚合酶链反应检测角膜组织中的单疱病毒DNA

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测正常和病变角膜上皮等组织中的ＮＳＶ─１基因ＤＮＡ，结果表明，８例正常角膜上皮中１例检测到ＨＳＶ─１ＤＮＡ，临床诊断为活动期ＨＳＫ的３０例中１６例ＨＳＶ─１ＤＮＡ阳性，其中树枝状角膜炎７１％阳性，３例ＨＳＫ静止期白斑中２例检测到ＨＳＶ─１ＤＮＡ，９例临床诊断非病毒性角膜炎中２例ＨＳＶ─１阳性，表明ＰＣＲ是一快速、敏感、特异的方法，对角膜炎有早期诊断和鉴别诊断价值的技术，还提示角膜组织可能是ＨＳＶ─１另一潜伏部位。     

广东地区非甲—戊型肝炎患者HGV感染情况的调查

采用ＨＧＶ５端非翻译区（５‘ＵＴＲ）序列设计套式引物，建立检测ＨＧＶＲＮＡ的逆转录一巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对广东地区６３例非甲一戊型肝炎患者血甭ＨＧＶＲＮＡ进行检测，结果６例阳性（９．５％），其中３例有输血史，提示广东地区近１０％非甲一戊型肝炎为ＨＧＶ感染所致，其中半数与输血有关。     

聚合酶链反应法检测眼内液中病毒DNA

我们采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测了１组疑曾有病毒感染的手术患者眼内液中ＣＭＶ，ＨＳＶ１，ＨＳＶ２之ＤＮＡ，获得了较为理想的结果，报告如下。１对象与方法１．１对象：检测对象选自涉嫌曾有病毒感染的单纯眼部疾患的１３例手术患者。男９例，女３例，共１３眼...     

PCR检测HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA

本研究旨在评价ＨＢｅＡｇ阴性的慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ．ＥＢ）与病情的关系，以ＰＣＲ．ＥＢ检测２９例ＨＢｅＡｇ阴性的慢性乙肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ。阳性１３例，阴性１６例，阳性组与阴性组比较，前者血清胆红素及肝功能损伤程度显著地后者，提示（１）ＨＢＶ的复制水平与病情相关，（２）患者血清ＨＢＶＤＮＡ的检测可作为该类患者病情评价的指标。     

用多聚酶链反应检测泪液中单疱病毒DNA

本文应用ＰＣＲ技术，以单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）多聚酶基因引物检测２０例正常人泪液，结果全部为阴性。检测６８例各种类型角膜炎泪液，２９例阳性结果。其中临床诊断树枝状或地图状角膜炎１２例，全部检测到ＨＳＶＤＮＡ；角膜没有典型病变、临床未定性角膜炎３０例，有１３例（４３．３％）阳性结果；单纯盘状角膜炎１２例，全部为阴性。实验结果表明：应用ＰＣＲ技术能够从单疱角膜炎（ＨＳＫ）患者的泪液中检测到ＨＳＶＤＮＡ，可以作为ＨＳＫ的病原学诊断方法，尤其对于早期或没有典型病变、角膜炎不能定性者，价值更高。     

PCR对单疱病毒性角膜炎的诊断

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对临床诊断活动期ＨＳＫ３０眼，匐行性角膜溃疡５眼，原因未明角膜炎３眼进行ＨＳＶ－１ＤＮＡ检测，选择ＨＳＶ的胸苷激酶（ＴＫ）基因为目的基因，扩增片段为１１０ｂｐ。ＰＣＲ法检测同时将上述标本进行组织培养。３０眼活动期ＨＳＫ角膜上皮标本２８眼检出ＨＳＶ－１ＤＮＡ，组织培养阳性９眼；５眼匐行性角膜溃疡全部未测出ＨＳＶＩＤＮＡ；３眼原因未明角膜炎中１眼检出ＨＳＶ－１ＤＮＡ，组织培养均为阴性。结果表明：ＰＣＲ法可用于ＨＳＫ的病原学诊断，其特异性强，灵敏度高，适于临床标本的快速检测，尤其对于临床没有典型病变，角膜炎不能定性者价值更高。     

PCR检测HBV DNA与HBV不同血清标志物组合的关系探讨

聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术可检测出乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ ＤＮＡ，血清ＨＢＶ ＤＮＡ是病毒复制的直接标志。酶免疫法９ＥＬＩＳＡ）检测的是血清病毒感染标志物。应用这两种方法分别对４６０例患者进行检测，可发现多种血清学标志物（ＨＢＶ－Ｍ）组合模式都有一定的ＨＢＶ ＤＮＡ检出率，说明以往仅用血清学标志物监测乙型肝炎感染具有一定局限性。ＰＣＲ操作精细，费用较高，仅能同复制的病毒，难以表达非复制状态的感染     

慢性乙型与丙型肝炎患者重叠HGV感染情况的调查

采用逆转录－－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对深圳地区６１便慢性乙型肝炎与３３例慢性丙型肝炎患者血清ＨＧＶＲＮＡ进行检测。结果两且患者ＨＧＶＲＮＡ的一率分别为８．２％和２１．２％，两组间的差异有显著性（Ｐ〈０．０１），生丙型肝炎患者ＨＧＶ感染较乙型肝炎常见。３３例慢性丙型肝炎中，１５这血粮食或血制品的患者ＨＧＶＲＮＡ阳性率为４０．０％。明显高于１８例无血制品接触史患者的１．３％（Ｐ〈０．０５）。     

正常人角膜单疱病毒基因存留的研究

目的研究正常人角膜内单疱病毒（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ，ＨＳＶ）基因存留的可能性。方法用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术对２２例（２２片）正常人角膜、６例（６片）胚胎角膜（阴性对照）及６例单疱病毒性角膜炎（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｋｅｒａｔｉｔｉｓ，ＨＳＫ）急性期患者角膜（阳性对照）进行检测。结果２２片正常角膜中２０片存有ＨＳＶＤＮＡ，２片角膜ＨＳＶＤＮＡ阴性，６例胚胎角膜ＰＣＲ为阴性，６例ＨＳＫ急性期患者角膜为阳性。结论正常人角膜中有ＨＳＶＤＮＡ存留，与ＨＳＶ血清抗体阳性结果相符     

RDS／peripherin表达载体的构建和在COS—1细胞的表达

目的 构建大鼠ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,并观察在ＣＯＳ－１细胞中的表达,方法 将全长度的ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ（１．５ｋｂ）插入到真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＭＡＸ中,构建了ＲＤＳ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,采用电穿孔技术将其转染ＣＯＳ－１细胞,转染４８ｈ后,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＲＤＳ／ｐｅｒｉｈｐｅｒｉｎｃＤＮＡ的表达,结果 采用ＲＴ－ＰＣＲ     

多聚酶链反应对单疱病毒性角膜炎泪液HSVDNA的检测

应用ＰＣＲ方法检测４６例单纯疱疹病毒性角膜炎（ＨＳＫ）患者泪液中的单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）ＤＮＡ，并跟踪检测部分局部用药后的变化。结果发现随用药时间的延长，ＨＳＶＤＮＡ阳性的例数逐渐减少，用药后３０天左右大多数泪液中已不存在ＨＳＶＤＮＡ。实验结果表明ＨＳＫ发病当日及１５日以上ＨＳＶＤＮＡ检出率较低，而发病２～１５日检出率较高，二者有显著差异。     

PCR在检测单纯疱疹性角膜炎中的诊断价值

目的应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测技术，对临床可疑为单纯疱疹性角膜炎（ＨＳＫ）进行早期、快速诊断。方法用棉签擦拭病变处角膜上皮细胞，经离心、沉淀、裂解后作模板；选用Ｐｒｏｍｅｇａ公司提供的ＰＣＲ检测人单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）－Ⅰ、Ⅱ试剂盒，设计３条引物，扩增片段分别为４６９ｂｐ和３９１ｂｐ，采用聚合酶链反应检测技术，检测其单纯疱疹病毒特异性ＤＮＡ片段。结果观察组共扩增３２例，３６眼，阳性率为９３．７５％，对照组扩增２８例２８眼，阳性率仅为２．８％。结论ＰＣＲ检测单纯疱疹病毒性角膜炎快速、简便、特异性高     

聚合酶链反庆检测角膜组织中的单疱病毒DNA

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测正常和病变角膜上皮等组织中的ＨＳＶ－１基因ＤＮＡ。结果提示角膜组织可能是ＨＳＶ－１另一潜伏部位。     

大鼠晶体上皮细胞Cu—ZnSOD的分子克隆表达和活性鉴定

不同来源的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的克隆已有报道，用ＲＴ－ＰＣＲ方法我们成功地从大鼠晶休下皮细胞中克隆出了ＣＵ－ＺｎＳＯＤｃＤＮＡ并利用ｐＭａｌ载 大肠杆菌中高产表达出ＭＢＰ－ＳＯＤ融合蛋白可占菌体总蛋白４０％左右，采用的蛋白纯化系统的亲和层析柱就是利用的ＭＢＰ融合蛋白可被快速纯化而设计的，实验证明此方法可快捷、高效地表达有生物学活性的ＭＢＰ－ＳＯＤ融合蛋白。     

利用PCR方法直接从7H12B培养基中鉴定结核分枝杆菌的探讨

用ＰＣＲ法直接从７Ｈ１２Ｂ培养基中鉴定结核分枝杆菌，５９例痰标本经ＮＡＰ试验鉴定有２例ＭＯＴＴ，５７例ＭＴｂ，ＰＣＲ法与其完全一致。１５株标准菌株和１０株ＭＯＴＴ野生ＰＣＲ法鉴定结果完全正确，除卡介菌，人型和牛型ＭＴｂ外，ＰＣＲ法结果均为阴性，其牧民性和敏感性为１００％，且ＰＣＲ法从７Ｈ１２Ｂ培养基中鉴别ＭＴｂ和ＭＯＴＴ具有快速、准确价廉之优点，可经大量试验验证后推广应用。     

双通道视觉质量分析系统评价弱视儿童的视觉质量

目的　应用双通道视觉质量分析系统（ｏｐｔｉｃａｌｑｕａｌｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍ,ＯＱＡＳⅡ）比较弱视儿童与正常儿童视觉质量和散射的差异,为临床应用提供一定的参考依据。方法　在广西视光中心弱视门诊就诊患儿中随机选取弱视儿童２８例（５３眼）和正常儿童２８例（４７眼）作为弱视组和正常对照组,所有入选儿童行客观视觉质量分析系统（ＯＱＡＳⅡ,Ｖｉｓｉｏｍｅｔｒｉｃｓ公司）检测、散瞳检影验光和标准对数视力表评估。比较两组屈光度、视力、ＭＴＦ截止空间频率（ＭＴＦｃｕｔｏｆｆ）、斯特列尔比值（ｓｔｒｅｈｌｒａｔｉｏ,ＳＲ）、客观散射指数（ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓｃａｔｔｅｒｉｎｇｉｎｄｅｘ,ＯＳＩ）值及对比度为１００％、２０％、９％时的ＯＶ值（ＯＱＡＳｖａｌｕｅ,ＯＶ１００％、ＯＶ２０％和ＯＶ９％）。结果　弱视组矫正视力和等效球镜分别为０．２６±０．１７ｌｏｇＭＡＲ和（２．９１±３．２５）Ｄ,弱视组ＭＴＦｃｕｔｏｆｆ、ＳＲ、ＯＳＩ、ＯＶ１００％、ＯＶ２０％和ＯＶ９％分别为（３０．９１±１５．２４）ｃ?ｄ－１、０．２０±０．１１、１．１５±１．４２、（１．０３±０. ５１）ｃ?ｄ－１、（０．７８±０．４５）ｃ?ｄ－１、（０．５２±０．３８）ｃ?ｄ－１;正常对照组ＭＴＦｃｕｔｏｆｆ、ＳＲ、ＯＳＩ、ＯＶ１００％、ＯＶ２０％和ＯＶ９％分别为（３７. ４９±９．８１）ｃ?ｄ－１、０．２３±０. ０７、０. ７４±１．３９、（１．２５±０．３３）ｃ?ｄ－１、（０．９４±０．３０）ｃ?ｄ－１、（０．６１±０．２１）ｃ? ｄ－１。两组儿童ＭＴＦｃｕｔｏｆｆ、ＯＶ１００％和ＯＶ２０％比较,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。弱视儿童的球镜和柱镜度数与ＭＴＦｃｕｔｏｆｆ、ＳＲ、ＯＳＩ、ＯＶ１００％、ＯＶ２０％和ＯＶ９％均存在统计学意义的相关性（均为Ｐ＜０．０５）。结论　弱视儿童的视觉质量较正常儿童差,且主要表现在中高频对比度部分下降,散射不是导致弱视儿童视觉质量下降的因素。     

随机点立体图刺激的立体视觉诱发电位的神经起源探讨

记录Ａ组３７例正常人随机点立体图刺激的立体视诱发电位（Ｓ－ＶＥＰ）和Ｂ组４０例正常人图形翻转刺激的图形翻转诱发电位（Ｐｒ－ＶＥＰ）。发现：Ａ组有１３．５％，３５．２％和５１．３％的受检者，其Ｓ－ＶＥＰ最大振幅分别出现在颅表Ｏ１，Ｏｚ及Ｏ２处，Ｂ组受检者Ｐｒ－ＶＥＰ最大振幅在Ｏ１、Ｏｚ及Ｏ２处的分布比例为２．５％，９２．５％和５％，两组资料有非常显著性差异。认为Ｓ－ＶＥＰ与Ｐｒ－ＶＥＰ的神经起源有差     

应用PCR技术诊断单疱病毒性角膜炎

目的 探讨ＰＣＲ对ＨＳＫ的诊断价值。方法 应用ＰＣＲ技术对临床诊断活动期ＨＳＫ８８眼匐行性角膜溃疡５眼,原因不明角膜炎５眼进行ＨＳＶ－１ＤＮＡ检测。结果 活动期ＨＳＫ具有上皮病变者３０眼中２４眼检出ＨＳＶ－１ＤＮＡ,５眼匐形性角膜溃疡全部未检出ＨＳＶ－１ＤＮＡ;５眼原因不明角膜炎中１眼检出ＨＳＶ－１ＤＮＡ。结论 ＰＣＲ是一种快速、灵敏、特异性强的方法,对胸膜炎的早期诊断及鉴别诊断具有重要意义,具有     

现代分子生物学技术对眼遗传病基因诊断的贡献

以重组ＤＮＡ技术为基础的基因诊断方法的产生使人们对疾病的认识从传统的表型诊断步入了逆诊断的新阶段。近十年来，基因诊断技术不断产生，其实用性也不断提高，可用于临床的早期诊断和携带者检测。应用ＲＦＬＰ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和ＰＣＲ等方法使人们对视网膜色素变性（ＲＰ）、视网膜母细胞瘤（ＲＢ）、Ｌｅｂｅｒ氏病、家族性渗出性玻璃体视网膜病变（ＦＥＶＲ）等眼科遗传病发病机理有了新的认识。ＰＣＲ／ＡＳＯ，ＰＣＲ／ＤＥＥＧ和ＰＣＲ／ＳＳＣＰ等新技术的产生，必将会促进人们对眼科遗传病的研究。