裸鼠骨肉瘤移植瘤模型建立及~(125)I-抗人骨肉瘤单克隆抗体在模型动物中的定位

以人的骨肉瘤培养细胞建立动物骨的骨肉瘤移植瘤模型,现国内外尚未见报道,并在国内首先建立分泌抗骨肉瘤细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系,同时在此基础上标记~(125)I对骨肉瘤移植瘤模型动物进行ECT定位观察。 本实验用已建系的HOS-8603骨肉瘤培养细胞接种NC裸鼠下肢骨的骨髓腔内,建成动物骨的骨肉瘤移植瘤模型。骨移植瘤病理改变为骨母细胞型,光镜下瘤细胞异形性明显,有骨样组织,AKP染色阳性。电镜见瘤细胞及核形状均不规则,粗面内质网较多,线粒体不等并有退化改变,还是纵横交     

抗HBx单克隆抗体在荷人肝癌裸鼠模型中的放射免疫定位研究

HBVX 蛋白与原发性肝细胞癌的关系十分密切,X蛋白在癌组织内有过量表达。本研究应用基因工程技术合成的含HBVX蛋白特异性融合蛋白免疫动物,成功地制备了抗HBV单克隆抗体。抗HBx单抗经~(131)I标记后在裸鼠人肝癌模型中进行放射免疫     

肝动脉灌注~(131)I-抗人肝癌单克隆抗体治疗不能切除的肝癌

32例经剖腹探查证实不能手术切除、病理诊断为肝细胞肝癌(HCC,下称肝癌)的患者行肝动脉结扎加插管,经导管灌注~(131)I标记的抗人肝癌单克隆抗体Hepama-1(~(131)I-Hepama-1).放射免疫显像显示,标记抗体浓聚瘤内,第5天平面扫描显像,瘤/肝比值中位数为1.7(0.8～3.8),并随时间延长而增高。治疗后,甲胎蛋白(AFP)下降占55％(11/20),71.9％(23/32)病人肿瘤有不同程度缩小,17例     

~(131)I-抗AFP单克隆抗体肝癌免疫显像的研究

用放射性核素标记抗体,利用抗原抗体的免疫特异性结合,导向在靶器官癌灶区出现放射性浓聚,称之为放射免疫显像(RII)。由于杂交瘤技术的日趋完善和广泛应用,可以研制各种类型的单克隆抗体,促使RII的     

Artemis对人肝癌细胞系BEL-7402/5FU DNA损伤的影响

目的探讨转染sh Artemis干扰质粒对人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤的影响。方法将人肝癌细胞分为正常对照组、脂质体对照组、空质粒对照组和转染sh Artemis干扰质粒实验组(sh Artemis实验组);建立DNA损伤模型,分别用0.625、1.25、2.5、5.0和10.0μg/m L的丝裂霉素C作用BEL-7402/5FU细胞24和48 h,MTT法检测细胞活性,Western blot观察磷酸化组蛋白H_2AX(γ-H_2AX)的表达;转染Artemis干扰质粒,检测Artemis、γ-H_2AX表达;彗星实验检测DNA的损伤。结果 0.625、1.25、2.5、5.0和10.0μg/m L的丝裂霉素C作用48h后肝癌细胞活力明显下降(P0.05);丝裂霉素C刺激细胞48 h后,γ-H_2AX的表达量随着药物浓度的增加而增加;转染sh Artemis干扰质粒后,γ-H_2AX的表达量较正常对照组增加(P0.05);sh Artemis实验组较正常对照组拖尾DNA量增加(P0.05)。结论丝裂霉素C能够诱导肝癌细胞损伤;转染sh Artemis干扰质粒促进丝裂霉素C诱导的人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤。     

标记抗人肝癌单克隆抗体SPIO对荷瘤裸鼠的定位诊断作用

目的：探讨标记抗人肝癌单克隆抗体超顺磁性氧化铁粒子（ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ）对荷瘤裸鼠模型的诊断作用。材料和方法：用过碘酸盐法将Ｈａｂ－１８ 抗人肝癌单抗标记到ＳＰＩＯ粒子;建立裸鼠载瘤模型（ｎ＝１２ 只）。结果：实验组（ｎ＝ ８）从尾静脉注入０．３ ｍ ｇ Ｆｅ／２０ｇ 的ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ,给药后２４ 小时成像观察到裸鼠瘤结均有选择性信号下降,对照组（ｎ＝ ４）在注射ＬｇＧ－ＳＰＩＯ后未见明显信号改变。结论：ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ磁共振免疫成像对肝癌的早期定性诊断有较高价值。     

~(131)I-Hb_3单克隆抗体在移植人大肠癌裸鼠体内定位的初步研究

近年来,以单克隆抗体作载体标记核素进行肿瘤的定位诊断已取得了引人注目的成果。本室利用移植人大肠癌的裸鼠模型,研究~(131)I-Hb_3单克隆抗体(以下简称单抗)在肿瘤中的定位情况。 采用6～7周龄的NC系裸小鼠,雌雄不拘;以1×10~7/0.1ml/只的细胞量,接种人类大     

腺瘤样结肠息肉基因在人肝癌细胞系BEL-7402脂肪代谢过程中对线粒体的影响

目的观察在人肝癌细胞系脂肪代谢过程中,腺瘤样结肠息肉基因(APC)对细胞线粒体的影响。方法 APC基因敲减质粒转染人肝癌细胞(BEL-7402)。用油酸刺激各组细胞,使细胞产生脂质堆积。油红O染色法检测各组细胞脂质堆积情况;使用ATP含量检测试剂盒检测各组细胞ATP含量;使用荧光探针标记法检测各组细胞内氧自由基(ROS)的含量。结果给细胞转染质粒后,APC基因的mRNA表达量降低(P0.05),蛋白表达也降低(P0.05);与对照组细胞相比,APC基因敲减组细胞加油酸刺激后细胞脂质堆积减少(P0.05),ATP含量增高(P0.05),细胞内氧自由基数量降低(P0.01)。结论 APC在人肝癌细胞系BEL-7402脂质代谢过程中影响线粒体的生理功能。     

分泌抗HTG(人甲状腺球蛋白)单克隆抗体的杂交瘤细胞系

<正> 内分泌病是免疫介导性疾病中极为复杂的一组疾病,单克隆抗体(McAb)的制备为深入研究该组疾病的发病机制、诊断和防治提供有力的工具。我们选择了与甲状腺炎有关的抗原,于1984年6月建立了一株分泌高效价 HTG McAb 的杂交瘤细胞系。以纯化的 HTG 免疫 BALB/c 小鼠共4次,末次免疫后3天取脾与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,融合剂的分子量为1,000的聚乙二醇。融合率为6.3%(5.2%～7.3%)。融合后7天用间接血凝试验测定细胞上清液,阳     

抗人黑色素瘤单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及其定位显像

本文观察了~(131)I 标记的黑色素瘤 McAb HB8759在荷瘤裸鼠体内的生物学分布及放射免疫显像。静脉注射 ~(131)I—McAb48h 和72h 后肿瘤与非肿瘤在5种主要脏器比活性比值(T/NT)分别平均为6.6和9.6,~(131)I—McAb 注射24h 后在移植瘤中明显定位浓集,48～72h 是放射免疫显像的最佳时间。     

抗人DR5单克隆抗体对人肝癌细胞系HepG2的凋亡作用

探讨抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)对人肝癌细胞系HepG2致凋亡的作用。常规培养人肝癌细胞系HepG2,流式细胞术定量分析检测HepG2细胞表面DR5的表达。MTT法检测mDRA-6的细胞毒性作用;Annexin V-FITC/PI双色标记HepG2细胞,流式细胞术定量分析检测细胞凋亡率;在荧光显微镜下观察mDRA-6对HepG2细胞形态变化的影响。结果显示,HepG2细胞表面有DR5表达,其平均表达百分率为40%。MTT法检测显示在40 mg/L mDRA-6浓度下可杀伤42%的细胞;Hoechst33258染色证实杀伤作用是通过细胞凋亡实现的经流式细胞术检测显示,3 mg/L的mDRA-6作用HepG2细胞6 h导致24.61%的细胞发生凋亡;在荧光显微镜下可观察到mDRA-6诱导导致HepG2细胞呈现典型细胞凋亡的形态特征。上述结果表明,mDRA-6能够诱导人肝癌细胞系HepG2凋亡。     

分泌抗人C_(1q)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以人C_(19)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,用固相C_(19)-ELISA筛选和有限稀释法克隆化以后,获得三株(A_4、B_6及D_5)分泌抗人C_(19)单克隆抗体的杂交瘤细胞系。培养上清和小鼠腹水的特异性抗体效价分别为10~(-3)、10~(-5)及10~(-7)。单克隆抗体与人IgG无交叉反应,与灭活C_(19)呈阴性反应,经人C_(19)吸收后,OD值明显下降,能阻断补体经典途径的活化,从而抑制溶血活性。根据上述结果表明,三株细胞所分泌的单克隆抗体是针对人C_(19)特异性的。经鉴定单克隆抗体A_4属小鼠IgG_(2b)、B_6及D_5属IgG_1亚类。杂交瘤细胞系核型分析表明,染色体数为87～91条。 三株杂交瘤细胞系贮存液氦6个月,体外培养传20代,仍保存分泌特异性单克隆抗体的能力。     

~(131)I-抗胃癌单克隆抗体369及其F(ab′)_2片段在人胃癌移植瘤裸鼠体分布的研究

抗胃癌单克隆抗体3G9(McAb3G9)系本所生化室制备,与管癌组织和细胞有较好的选择性结合,其亚类为IgG_1。 用~(131)I标记3G9及其F(ab′)_2进行体内生物学分布和显像研究,用~(125)I标记正常小鼠     

肝癌铁蛋白L、H亚基单克隆抗体的制备及其在裸鼠肝癌模型的定位研究

用肝癌铁蛋白(L亚基为主)及基因产物铁蛋白H亚基免疫BALB/c小鼠,经细胞融合分别获一株抗铁蛋白L亚基阳性细胞株D6F6及抗H亚基阳性细胞株H9Ft。经鉴定两株单抗均可与肝癌铁蛋白反应,而H,L亚基之间无相互交叉。用此单抗检测肝癌组织中铁蛋白H、L亚基分布,发现肝癌细胞中L亚基阳性率(71.9％)较H亚基阳性率(35.9％)为高(P<0.05)。3例正常肝组织L亚基均为阳性,2例正常肝H亚基则均为阴性。~(131)I-标记H、L亚基单抗作裸     

人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体细胞系的建立

太原市第264医院临床实验科段银安等以注射用HCG(上海生物化学制药厂),加等量福氏完全佐剂皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,300单位/0.5ml/只,每间隔2周加福氏不完全佐剂同样部位和剂量加强免疫两次,末次免疫后第五天尾静脉采血,用被动血凝抑制试验检测免疫应答,选择抗HCG阳性小鼠作细胞融合融合前三天,HCG300单位/只不加佐     

~(131)I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

抗人结肠癌单克隆抗体(McAb)MC3用~(131)I标记后,在裸鼠人肠癌模型上进行肿瘤定位和放射免疫显像研究。结果显示:体外标记抗体特异性结合率为37.5％。裸鼠体内在48～120h的ECT照相可见在肿瘤部     

~(131)I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

抗人结肠癌单克隆抗体(McAb)MC_3用~(131)Ⅰ标记后在裸鼠人肠癌模型上进行肿瘤定位和放射免疫显像研究。结果显示:体外标记抗体特异性结合率为37.5%,裸鼠体内在48～120h的ECT照相可见在肿瘤部位均有放射性的特异性浓聚,其摄取量随时间延长逐渐增加,肿瘤显影清晰,显像的合适时间为96～120h。而给予非特异性的~(131)Ⅰ-NMIgG后,肿瘤部位未见放射性浓聚,而呈全身均匀性分布。120h肿瘤组织与肝脏及正常肠组织的比值分别为3.61和9.81,肿瘤定位指数为4.26。病理组织学检查显示注射~(131)Ⅰ-MC_3裸鼠肿瘤呈大片坏死,仅局部肿瘤边缘尚存少数完整的肿瘤组织。提示McAbMC_3用于肠癌的诊断和导向治疗可能有良好的前景。     

抗人肝癌单克隆抗体HCD78的制备及免疫组化定位

原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，具有发病隐袭、病死率高的特点，早期诊断对预后的意义重大。单克隆抗体（ｍＡｂ）技术问世后，人们试图通过应用抗肝癌ｍＡｂ提高肝癌的早期诊断率。然而目前获得的抗肝癌ｍＡｂ识别的抗原都不是肝癌特异性抗原，而且由于肿瘤异质性的存在，又使其临床应用受到一定影响。本研究应用自建的人肝癌细胞株ＨＣ１０８免疫小鼠，制备了１株能稳定分泌抗人肝癌ｍＡｂ的杂交瘤细胞。免疫组化证实，该ｍＡｂ具有较好的特异性，其识别的肿瘤抗原主要定位于细胞膜。现将建株过程和初步鉴定的结果报道如下：１…     

抗人结肠癌单克隆抗体SC3A在荷瘤裸鼠体内的放射免疫定位研究

本文用~(131)I标记自制的抗人结肠癌单克隆抗体SC3A,进行荷人结肠癌裸鼠体内生物学分布和肿瘤的放射免疫显像研究。结果在注射~(131)I饲—SC3A后24～120h,肿瘤部位的放射性均显示出选择性浓聚,以72～120h的影像最为清晰;而注射~(131)I—鼠IgG则呈全身均匀性分布,无肿瘤部位选择性波聚影像。在72h,13种器官的T/NT均大于2,肿瘤LI为6.94,与扫描显像结果吻合。这些都表明SC3A在生物体内对结肠癌具有良好的选择性和导向作用,抗体可对其供临床体内进一步应用提供了依据。