Klotho水平与小鼠月龄相关并抑制其骨髓源性内皮祖细胞衰老

目的 观察不同月龄小鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs) 数量和部分生物学功能以及外周血抗衰老蛋白klotho(Kl)表达水平,探讨Kl对体外培养的老龄小鼠EPCs数量和功能的影响.方法 采用Western-blot法测定不同月龄小鼠外周血Kl水平;以密度梯度离心法获取老龄小鼠单个核细胞与不同浓度的Kl孵育,分别采用acLDL-DiI 和 FITC-lectin 荧光双阳性细胞计数、MTT 分析和改良的 Boyden 小室法来检测其数量、增殖、迁移能力的变化.结果不同月龄小鼠EPCs数量和功能以及外周血Kl水平均与月龄呈负相关;不同月龄小鼠Kl表达水平与外周血EPCs数量及其增殖和迁移等生物学功能具有相关性;体外培养中Kl 可呈浓度依赖性上调EPCs的数量及其迁移能力、增殖能力.结论月龄增加可导致小鼠内皮祖细胞数量和功能下降,并下调肾脏和外周血Kl水平;Kl可增加体外培养的小鼠内皮祖细胞的数量,改善其功能.     

rhTNF-α对成骨向分化前后的人脂肪基质细胞分泌血管生成相关生长因子的影响

目的：研究在重组人肿瘤坏死因子（recombinant human tumor necrosis factor alpha,rhTNF-α）刺激下人脂肪基质细胞（human adipose tissue-derived stromal cells, hADSCs）增殖的改变及成骨向分化前后血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）和胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor-1,IGF-1）分泌的变化。方法：采用吸脂术获得的第4代hADSCs,以终浓度为0、1、5、10、50、100 μg/L的rhTNF-α刺激hADSCs,分别在48、72、96 h后行MTT法检测不同浓度rhTNF-α对hADSCs增殖的影响;并以该浓度梯度的rhTNF-α刺激hADSCs,24 h后收集上清,以ELISA法检测VEGF、FGF-2和IGF-1的分泌情况;在成骨向诱导的第1、3、7、14天收集细胞上清,ELISA法检测上述3种生长因子分泌的变化,收集细胞上清前24 h更换培养基,并在相应孔中加入rhTNF-α,使其终浓度为10 μg/L。所有ELISA数据均以相应培养孔的细胞数进行校正。结果：rhTNF-α能促进hADSCs的增殖,其作用表现为一定的浓度和时间依赖。相比于对照组,48 h时,10 μg/L rhTNF-α对增殖的促进作用并不明显,但96 h时则表现为促进作用（P<0.01）,而100 μg/L rhTNF-α在48 h表现为抑制作用（P<0.01）,96 h时则表现为明显的促进作用（P<0.01）。相对于对照组,rhTNF-α可以显著促进hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1（P<0.01）;hADSCs经成骨向诱导后,上述3种生长因子的分泌有增加的趋势;不同成骨向分化阶段的hADSCs用10 μg/L rhTNF-α刺激后,在诱导第1天,rhTNF-α显著促进VEGF的分泌（P<0.01）,但对FGF-2和IGF-1的分泌无显著性影响;在诱导第3天和第7天,rhTNF-α对VEGF（P<0.01）、FGF-2（P<0.05）和IGF-1（P<0.05）的分泌均有促进作用;但在第14天则抑制VEGF（P<0.01）、FGF-2（P<0.05）和IGF（P<0.05）的分泌。结论：一定浓度的rhTNF-α对hADSCs的增殖有促进作用;hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1具有rhTNF-α的浓度依赖;在不同成骨向分化阶段,rhTNF-α对hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1这3种生长因子的作用不同。     

Leptin对缺氧状态下大鼠视网膜祖细胞体外增殖和分化的影响

目的 探讨Leptin对体外培养的缺氧状态下视网膜祖细胞（RPCs）增殖、分化的影响及细胞中PTEN蛋白表达的变化。方法 原代培养大鼠RPCs,不同浓度Leptin作用RPCs细胞,分为：常氧培养组（Control组）、缺氧培养（Hypoxia）+0、0.3、1.0、3.0、10、30 nmol/L Leptin组,分别培养至12、24、48 h,CCK-8法检测细胞增殖活性。将原代培养的RPCs细胞分为：Control组、Hypoxia组、Hypoxia+Leptin组,培养48 h后,转换为分化培养基继续培养6 d,采用免疫荧光染色法对GFAP阳性细胞比例和β-tubulin III阳性细胞比例进行统计分析。Control组、Hypoxia组、Hypoxia+Leptin组细胞培养48 h后,采用Western blot法检测各组RPCs中PTEN蛋白表达水平。结果 原代培养的P0代RPCs为圆形悬浮生长,培养2 d后细胞可聚集成神经球。低浓度Leptin（0.3、1.0、3.0 nmol/L）作用RPCs 48 h,细胞增殖活性较Control组及Hypoxia组增强,RPCs细胞增殖活性随Leptin浓度增高呈递增趋势,其中,3.0 nmol/L Leptin作用48 h细胞增殖活性最强（P<0.05）;高浓度Leptin（10 nmol/L,30 nmol/L）组细胞增殖活性较对照组减弱（P<0.05）。细胞培养48 h,与Control组及Hypoxia组相比,Hypoxia+Leptin组β-tubulin III阳性细胞比例和GFAP阳性细胞比例均无显著性差异（P>0.05）,而PTEN蛋白表达量较对照组显著下调（P<0.05）。结论 低浓度Leptin可促进缺氧状态下大鼠RPCs细胞增殖,抑制细胞中PTEN蛋白表达,对细胞分化无明显影响。     

P物质对体外培养成骨细胞增殖和活性的影响

目的: 观察P物质(substance P,SP)对体外培养的成骨细胞增殖和活性的影响. 方法: 采用新生大鼠颅盖骨消化法培养成骨细胞,再加入不同浓度的SP,观察细胞生长数量,测定碱性磷酸酶活性及观察细胞周期变化. 结果: 浓度范围从1×10-12～1×10-6 mol/L的SP对成骨细胞的增殖和活性都有促进作用,在浓度为1×10-8 mol/L对成骨细胞增殖和活性的促进作用最强. 结论: SP对成骨细胞增殖和活性有促进作用.     

裸鼹鼠成纤维细胞原代培养方法的建立

目的建立裸鼹鼠成纤维细胞的原代培养方法,研究裸鼹鼠成纤维细胞的生长特性。方法结合传统的消化培养法和组织培养法进行裸鼹鼠和小鼠成纤维细胞原代培养,CCK-8（cell countingkit）细胞计数比较研究两种物种成纤维细胞的生长速率和细胞周期。以不同浓度接种裸鼹鼠肝脏成纤维细胞,CCK-8计数细胞24h、72h、96h、144h细胞密度。结果结合消化培养法和组织培养法两种细胞原代培养方法,裸鼹鼠及小鼠成纤维细胞的生长状态良好。裸鼹鼠成纤维细胞的增殖速率显著高于小鼠成纤维细胞,处于对数生长期的细胞比例与小鼠比较,显著较高。以1．5×10^4／ml以上的浓度接种裸鼹鼠成纤维细胞能使细胞在两天内进入细胞生长对数期。结论结合消化培养法和组织培养法的原代培养方法能提高细胞原代培养的效率,裸鼹鼠成纤维细胞的增殖能力显著高于小鼠。     

骨碎补总黄酮对大鼠成骨细胞VEGF和FGF-2表达的影响

目的：观察骨碎补总黄酮对体外培养大鼠成骨细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor 2,FGF-2）表达以及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性和矿化结节的影响。方法：在大鼠成骨细胞体系中加入不同浓度的骨碎补总黄酮作用24 h和48 h。采用ELISA和RT-PCR法检测VEGF和FGF-2表达变化,PNPP法检测ALP活性以及von Kossa染色检测矿化结节形成。结果：骨碎补总黄酮可刺激VEGF和FGF-2,使其在蛋白和mRNA水平表达均明显升高,显著提高成骨细胞ALP的活性和促进矿化结节的形成。结论：骨碎补总黄酮可提高成骨细胞VEGF和FGF-2的表达,促进其成骨作用。     

不同浓度淫羊藿苷对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的：观察不同浓度淫羊藿苷对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及功能的影响。方法：利用酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞;用组织化学染色和矿化结节法进行细胞鉴定;用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同淫羊藿苷浓度对大鼠成骨细胞的增殖、分化作用;同时通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性,以观察淫羊藿苷对成骨细胞功能的影响。结果：与各浓度组比较,10μg/L淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖、分化均有促进作用,且作用最强,最为持久。结论：浓度为10μg/L的淫羊藿苷能显著促进成骨细胞增殖,并增强其成骨活性。     

FGF-2对人肺腺癌细胞株A549增殖的影响

目的:观察不同浓度成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)对体外培养的人肺腺癌细胞株A549增殖的影响.方法:以体外培养的人肺腺癌细胞株A549为研究对象,采用MTT比色法测定不同浓度(0,12.5,25,50,75,100 ng/mL)的FGF-2对A549细胞增殖活性的影响.结果:与对照组相比,不同浓度的FGF-2处理组细胞的OD值、增殖比均明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.01).FGF-2浓度为75 ng/mL时细胞增殖比最高,为对照组的183％.结论:FGF-2促进A549细胞增殖,FGF-2对肺腺癌的发生发展具有重要作用.     

吡格列酮对外周血内皮祖细胞数量与增殖能力的影响

目的观察吡格列酮对外周血内皮祖细胞（EPCs）数量与增殖能力的影响。方法采用Ficoll密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种于包被人纤维连接蛋白的培养板上,培养14d后收集贴壁细胞,加入不同浓度（10^-6、10^5、10^-4、10^-3mmol／L）UE格列酮分别培养24、48、72h,同时采用激光共聚焦显微镜鉴定,FITC—UEA—I和Dil—acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,并在倒置荧光显微镜下计数;后采用MTT比色法观察EPCs的增殖能力。结果在作用48h后,不同浓度的吡格列酮均增加了外周血EPCs数量和增殖能力;10^-5mmol／L毗格列酮作用48h时影响最为显著,EPCs数量和增殖能力（分别为54．0±2．9和0．593±0．033）明显高于对照组（分别为30．0±31和0．178±0.018）,差异均有统计学意义（均P〈0．01）.结论吡格列酮可增加EPCs数量并改善EPCs的增殖能力。     

降钙素基因相关肽对大鼠成骨细胞表达转录因子RUNX2的影响

目的：探讨外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠颅盖骨来源成骨细胞RUNX2因子表达水平的影响,进一步了解CGRP促进成骨的作用机制。方法：用酶消化法培养原代大鼠成骨细胞并鉴定;MTT法筛选促进成骨细胞增殖的有效浓度,将含有不同浓度CGRP的条件培养基加入大鼠成骨细胞培养体系中,药物作用48 h后,用半定量RT-PCR和Western blotting方法检测大鼠成骨细胞转录因子RUNX2在mRNA和蛋白水平的表达。 结果：当CGRP浓度在10^-8～10^-6 mol/ L范围时,对成骨细胞增殖有明显促进作用,增殖率分别为71.9%,142.1%,321.0%,P<0.05;浓度为10^-7 和10^-6 mol/ L的CGRP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2在mRNA水平的表达量明显上调,分别增强(46.2±11.2)%和(58.6±14.0)%, P<0.05;转录因子RUNX2的蛋白表达变化趋势与其mRNA的表达变化趋势基本一致。结论：一定浓度的CGRP对大鼠成骨细胞转录因子RUNX2的表达有直接促进作用,RUNX2可能参与了CGRP刺激成骨细胞增殖反应的机制。     

松弛素对TGF—β诱导的内皮细胞间质化的抑制作用

目的：探讨松弛素（RLX）对TGF-α诱导的内皮细胞间质化现象的影响。方法：采用体外分离的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）作为体外细胞模型,通过TGF—β 10ng／mL诱导内皮细胞间质化,100ng／mL和200ng／mLRLX分别预处理,再与TGF—β联合培养48h。光镜下观察细胞形态学改变,CCK-8实验和transwell实验检测细胞增殖和迁移能力,免疫荧光单双染技术观察vimentin和CD31的表达变化,蛋白免疫印迹技术观察各实验组vimentin、CD31、ve—cadherin和α-SMA的蛋白表达。结果：阴性对照组内皮细胞呈铺路石样生长,TGF—β诱导组细胞形态向梭形转化,呈扩散迁移趋势。与阴性对照组相比,TGF—β诱导组细胞增殖、迁移能力明显增强;而RLX可抑制TGF—β诱导的增殖和迁移。免疫荧光单染结果显示,与阴性对照组相比,TGF—β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin明显上升;与SGF—β组相比,RLX联合TGF—β处理组CD31表达上调而vimentin表达下调。免疫荧光双荣结果显示,阴性对照组以内皮性质的细胞为主,仅存在少量的CD31和vimentin双阳性细胞;TGF—β诱导组双阳性细胞明显增多;与TGF—β组相比,RLX联合TGF—β处理组间质效应的双阳性细胞下调,而内皮效应的双阳性细胞增多。蛋白免疫印迹结果显示,与阴性对照组相比,TGF—β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31（0．36±0．076vs0．88±0．086）和ve—cadherin（0．54±0．046vs1．09士0．13）表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin（0．72±0．102vs0．21±0．081）和α-SMA（0．88±0．084vs0．24±0．046）明显上升（P〈0．05）;与TGF—β组相比,RLX联合TGF—β处理组CD31（0．67±0．09、0．59±0．12vs0．36±0．076）和ve-cadherin（0．85±0．09、0．72±0．064 vs 0．54±0．046）表达上调,而vimentin（0．56±0．0u、0．48±0．06 vs 0．72±0．102）和α—SMA（0．65±0．081、0．54士0．032 vs 0．88±0．084）表达下降（P〈0．05）,且呈剂量依赖性。结论：RLX可抑制TGF—β诱导的内皮细胞向间质化细胞转化。     

妇科腹腔镜手术中七氟醚全凭吸入麻醉对血流动力学的影响

目的：研究七氟醚全凭吸入麻醉对妇科腹腔镜手术患者血流动力学的影响。方法：抽取我院妇科于2011年9月至2013年9月期间行腹腔镜手术患者64例作为研究对象,对患者的病历资料作回顾性分析。结果：观察组患者的呼吸频率（RR）、血氧饱和度（SpO2）、二氧化碳分压（PE TCO2）分别为（19.62±2.06）min、（93.56±2.84）、（42.11±3.83）mmHg,对照组患者的RR、SpO2、PE TCO2分别为（25.62±2.49）min、（101.32±3.05）、（48.62±3.67）mmHg,差异具有统计学意义（P〈0.05）。麻醉诱导前两组去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、血浆皮质醇（cort）、血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）无显著差异（P〉0.05）,观察组插管即刻NE[（0.43±0.01）ng/mL]、E[（0.15±0.02）ng/mL]、cort[（336±20）ng/mL]、ATⅡ[（63±4）ng/mL]与插管后NE[（0.42±0.02）ng/mL]、E[（0.16±0.01）ng/mL]、cort[（331±16）ng/mL]、ATⅡ[（60±8）ng/mL],各项水平均明显提升,对照组插管即刻NE[（0.58±0.05）ng/mL]、E[（0.32±0.02）ng/mL]、cort[（375±28）ng/mL]、ATⅡ[（63±5）ng/mL]与插管后NE[（0.65±0.03）ng/mL]、E[（0.33±0.02）ng/mL]、cort[（365±22）ng/mL]、ATⅡ[（62±5）ng/mL],各项水平均明显提升,且观察组上升水平相对较少（P〈0.05）。结论：妇科患者行腹腔镜手术治疗期间,行七氟醚全凭吸入麻醉,可降低对血流动力学的影响,提高临床治疗安全性,     

格列吡嗪的人体相对生物利用度与生物等效性研究

目的研究两种格列吡嗪的相对生物利用度及其生物等效性。方法采用双周期、随机、交叉试验设计,18例男性健康受试者随机分成两组,单剂量、交叉口服受试制剂及参比制剂格列吡嗪5mg,采集不同时间点的静脉血样,用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS／MS）测定给药后不同时间格列吡嗪的血药浓度。结果受试试剂及参比试剂的主要药代动力学参数如下：Tmax分别为（2．61±1．57）小时和（3．42士1．64）小时;Cmax分别为（382．15±109．54）ng／mL和（372．10士103．64）ng／mL;t1／2分别为（4．51土0．95）小时和（4．92土0．76）小时;AUC㈣4分别为（2198．13土735．82）ng／（h·mL）和（2138．23±664．2）ng／（h·mL）;AUCo一分别为（2345．10土755．33）ng／（h·mL）和（2335．62士625．43）ng／（h·mL）。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度F为102．37％±25．39％。统计分析结果表明,两者在不同制剂间和不同周期间差异无显著性（P〉0．05）。结论格列吡嗪的受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

全血分离时间对肠癌患者血浆游离DNA浓度的影响

目的观察全血分离时间对肠癌患者血浆游离DNA浓度的影响。方法收集23例经病理确诊的晚期结直肠癌患者乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血各6mL,分别于2、6h和30h分离全血并将分离后的血浆置于超低温冰箱保存,以绝对定量聚合酶链式反应（PCR）检测不同时间段分离的血浆游离DNA浓度,并比较其随时间发生的变化。结果 2h分离全血时,血浆游离DNA浓度的中位数为20.00ng/mL,平均数为63.59ng/mL（95%CI：30.26-96.92ng/mL）;6h分离全血时,血浆游离DNA浓度的中位数及平均数分别为12.56ng/mL和16.90ng/mL（95%CI：9.26-24.54ng/mL）;30h分离全血时,血浆游离DNA浓度的中位数及平均数分别为60.90ng/mL和90.64ng/mL（95%CI：59.01-122.27ng/mL）。2h和30h分离的血浆游离DNA浓度显著高于6h分离的浓度（P=0.003,P=0.000）,30h分离的血浆游离DNA浓度与2h分离的浓度比较,差异无统计学意义（P=0.218）。结论获取肿瘤患者全血后应尽快分离全血,延长分血时间可能导致游离DNA降解。     

三七总皂苷对HB-EGF诱导的系膜细胞增殖作用研究

目的：观察三七总皂苷对肝素结合性表皮生长因子样生长因子（HB-EGF）诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用。方法：以原代培养大鼠肾小球系膜细胞为细胞模型,以400ng／mL三七总皂苷和100ng／mLHB-EGF为干预因素,实验分对照组、100ng／mLHB-EGF纽和400ng／mL三七总皂苷＋100ng／mLHB-EGF组,刺激系膜细胞24、36、48h,采用MTT方法,观察三七总皂苷对重组HB-EGF诱导系膜细胞增殖的作用情况。结果：HB-EGF刺激36h时,系膜细胞明显增殖,与对照组比较,P〈0．05;三七总皂苷能抑制HB-EGF诱导的系膜细胞的增殖,与HB-EGF组比较,P〈0．05。随着刺激时间的延长,三七总皂苷对HB-EGF诱导系膜细胞增殖的抑制作用增强,但36h与24h比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;与48h比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：三七总皂苷能抑制HB-EGF诱导的系膜细胞增殖作用,且作用随着刺激时间延长而增强。三七总皂苷可能通过抑制HB-EGF对系膜细胞增殖作用而延缓肾小球硬化。     

蛇床子素诱导Hela细胞凋亡及其机制研究

目的：探讨蛇床子素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制。方法：采用MTT法检测各浓度蛇床子素对Hela细胞增殖的抑制作用;光学显微镜观察细胞的形态学变化;凝胶电泳分析DNA的片段化改变;采用RT-PCR检测Hela细胞fas和bcl-2基因mRNA的表达水平。采用10μg/mL的蛇床子素作用于Hela细胞24h后的培养上清称为ost-La;洗去蛇床子素,用新鲜培养液进行24h再培养的Hela细胞培养上清称为ost-Lb;不经蛇床子素处理的Hela细胞同步培养上清作为对照,称为control-L;定量Elisa法测定各上清中TGF-β1含量。结果：蛇床子素可显著抑制Hela细胞的体外增殖,诱导Hela细胞的凋亡,且均呈剂量依赖性。RT-PCR：凋亡相关基因fas的表达量升高,而bcl-2的表达量下降,表达量的变化与蛇床子素的浓度有关。Elisa：TGF-β1的含量在ost-La中为16.732±3.068 ng/mL（P〈0.01）;在ost-Lb中为2.031±0.112 ng/mL（P〈0.01）;在control-L中为385.282±42.613 ng/mL。结论：子素可诱导Hela细胞的凋亡,其机制可能与促进Fas基因表达,抑制Bcl-2基因表达和TGF-β1含量改变有关。     

泮托拉唑钠在健康人体内的相对生物利用度及生物等效性研究

目的建立测定血浆中泮托拉唑的高效液相色谱内标法并研究泮托拉唑钠肠溶片的相对生物利用度及生物等效性。方法20名健康男性试验者随机分为两组,分别单剂量口服泮托拉唑钠肠溶片试验制剂或参比制剂40mg,于服药前（0h）和服药后0．75、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0、3．5、4．0、5．0、6．0、8．0、10．0、12．0h抽取静脉血。7d清洗期后再交叉给药。采用高效液相色谱法测定血浆中泮托拉唑的浓度。通过WinNonlin5．2．1数据统计软件计算主要药动学参数,评价两制剂的生物等效性。结果受试制剂与参比制剂血浆中泮托拉唑片的t1/2：（1．83±0．56）h、tmax：（2．80±0．62）h、Cmax：（2985．6±641．2）ng／mL、AUC0-1：（9682±4478）ng·h／mL;参比制剂的t1,2：（1．96±0．52）h、tmax：（2．90±0．85）h、Cmax：（3231．4±923．5）ng／mL、AUC0-1：（9388±4125）ng·h／mL。以AUC0-1计算,与参比制剂相比受试制剂中泮托拉唑的相对生物利用度为（104．9±26．1）％。结论泮托拉唑钠肠溶片试验制剂与参比制剂在健康人体内具有生物等效性。     

高氧暴露对早产鼠AECⅡ生长增殖的影响及CGRP的干预作用

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对600mL／L氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）生长增殖的影响．方法：原代分离培养孕19d早产鼠AECⅡ,随机分为4组：空气组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组．空气组,高氧组分别在氧体积分数为210mL／L的空气和600mL／L的氧气中暴露24h;高氧CGRP组在暴露前加入CGRP;高氧CGRP拮抗剂组在暴露前同时加入CGRP和CGRP受体拮抗剂,再置于氧体积分数为600mL／L的氧气中培养24h．采用MTF比色法和流式细胞术测定细胞增殖能力和细胞周期;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光技术测定表面活性蛋白C（SPC）的mRNA及蛋白表达．结果：与空气组比较,高氧组细胞存活率下降,G0／G1期细胞比例增高,G2／M及S期细胞比例降低,SPCmRNA及SPC蛋白表达低下（P均〈0．01）．而CGRP干预可促进高氧暴露AECⅡ的增殖能力,使S及G2／M期细胞增多,并提高AECⅡ的SPCmRNA及SPC蛋白表达水平．结论：600mL／L氧暴露24h可抑制早产鼠AECⅡ增殖分化,而CGRP可促进AECⅡ生长,部分解除高氧对AECⅡ的抑制作用．     

落新妇苷对小鼠骨髓来源树突状细胞成熟及免疫功能的抑制作用

目的：探讨落新妇苷对小鼠骨髓来源树突状细胞（dendritic cell, DC）成熟和免疫功能的影响。 方法：采用体外条件培养法得到小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞,加入脂多糖刺激细胞成熟。落新妇苷（低浓度25 μg/mL、中浓度50 μg/mL、高浓度100 μg/mL）处理细胞后,流式细胞仪分析各组细胞凋亡,细胞表面主要组织相容性抗原复合物分子Ⅰa和共刺激分子CD40、CD80和CD86表达;异硫氰酸荧光素标记葡聚糖内吞实验分析各组DC抗原吞噬功能;酶联免疫吸附测定法检测各组DC培养液上清白细胞介素12亚单位p40（p40 subunit of interleukin-12,IL-12p40）水平;氚-胸腺嘧啶核苷掺入法检测体外混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction, MLR）中各组DC刺激同种反应性T细胞的增殖能力,酶联免疫吸附测定法检测MLR上清IL-2、IL-4、IL-10、γ干扰素水平。 结果：各组DC凋亡率差异无统计学意义（P＞0.05）。与脂多糖组相比,高、中、低浓度落新妇苷组细胞表面主要组织相容性抗原复合物分子Ⅰa和共刺激分子表达明显降低,抗原吞噬能力明显升高,分泌IL-12p40明显减少,刺激同种反应性T细胞增殖的能力显著下降（P〈0.05）。与脂多糖组相比,高、中、低浓度落新妇苷组MLR上清中IL-2和γ干扰素水平明显降低（P〈0.05）,而IL-4、IL-10水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论：落新妇苷（25、50、100 μg/mL）能够剂量依赖性地抑制体外培养小鼠骨髓来源DC的成熟,并对其免疫功能具有一定的负性调节作用。     

重组人白介素-10对TNF-α诱导的血管外膜成纤维细胞syndecan-4蛋白表达的影响

目的观察重组人白介素-10（IL-10）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激的血管外膜成纤维细胞（NIH／3T3细胞）增殖和syndecan-4蛋白表达的影响。方法采用体外培养的NIH／3T3细胞,分别应用终质量浓度为20ng／mL TNF-α、100ng／mL IL-10、200ng／mL IL-10、100ng／mL IL-10联用20ng／mL TNF-α、200ng／mL IL-10联用20ng／mL TNF-α作用24h,并设对照组进行比较,采用MTS／PMS法确定NIH／3T3细胞的增殖状态,利用Western blot蛋白免疫印迹法测定NIH／3T3细胞中syndecan-4蛋白的表达。结果（1）MTS／PMS法测定各组细胞增殖率统计分析显示：与对照组比较,TNF-α组能显著刺激NIH／3T3细胞的增殖（P〈0．001）,而IL-10不同剂量组单独应用对NIH／3T3细胞的增殖均无明显作用（P〉0．05）。IL-10联合TNF-α共同作用组与TNF—α组比较,NIH／3T3细胞增殖均显著减少（P〈0．01）。（2）Western blot蛋白免疫印迹法测定显示：与对照组比较,TNF—α组能显著刺激NIH／3T3细胞中的syndecan-4蛋白表达（P〈0．05）,而IL-10不同剂量组单独应用对NIH／3T3细胞的syndecan-4蛋白表达均无明显影响（P〉0．05）。IL-10联合TNF-α共同作用组与TNF-α组比较,NIH／3T3细胞的syndecan-4蛋白表达显著降低（P〈0．001）。结论IL—10可明显抑制TNF-α诱导的NIH／3T3细胞增殖及细胞syndecan-4蛋白的表达。