传染性及非传染性非典型肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

我院于2003年2月至5月承担了广州市SARS的收治工作，现就其外周血T淋巴细胞亚群进行的检测及动态观察结果，分析如下。     

传染性非典型肺炎新实验诊断方案的特点

为防止传染性非典型肺炎 (严重急性呼吸综合征 ,SARS)疫情的再次暴发流行 ,中华医学会和中华中医药学会最近组织有关专家制定了《传染性非典型肺炎新的诊疗方案》。其中实验室诊断部分与以往具有新的特点 ,了解新诊疗方案的诊断要点 ,对于应对疫情再次流行具有重要意义。1 .新方案吸取了春季疫情的经验教训和思考 :笔者作为传染性非典型肺炎诊治方案实验诊断课题组的组长 ,感受到制定方案的过程就是反思春季疫情期间的经验教训、制定措施的过程。在启动这项工作之前 ,中华医学会检验分会分别召开了北京市防治传染性非典型肺炎定点医院参加…     

流式细胞仪单平台技术调查成年人外周血T淋巴细胞亚群绝对计数参考范围

根据淋巴细胞的生物学功能和细胞表面抗原表达 ,可以将人类淋巴细胞分为Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞和ＮＫ细胞。Ｔ淋巴细胞 (ＣＤ3+)主要分为两群 :Ｔ辅助 /诱导细胞 ,其免疫表型为ＣＤ3+ＣＤ4+ＣＤ8-;Ｔ抑制 /细胞毒细胞 ,其免疫表型为ＣＤ3+ＣＤ4-ＣＤ8+。ＣＤ3+ＣＤ4+ＣＤ8-细胞和ＣＤ3+ＣＤ4-ＣＤ8+细胞计数对于诊断与监测免疫缺陷症[1,2 ] 和自身免疫性疾病[3 ,4 ] 等具有重要意义。在ＨＩＶ感染时 ,ＣＤ3+ＣＤ4+ＣＤ8-细胞计数随着疾病的发展而逐步降低[5] ;而在一些自身免疫性疾病、某些免疫反应如急性移植物抗宿主疾病[6] 和移植排斥[7…     

重型和普通型严重传染性非典型肺炎患者淋巴细胞亚群改变初步分析

目的 研究传染性非典型肺炎(SARS)重型和普通型患者外周血淋巴细胞亚群异常变化，以期完善诊断标准。方法 采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪检测155例SARS患者的外周血淋巴细胞及其亚群的表达情况。结果 普通型组与重型组比较，外周血白细胞、淋巴细胞、CD3 CD4 、CD3 CD4-CD8-、NK、CDl9 CD5 、CD45RA CD4 、CD45RO CD4 、CD28 CD4 、CD28 CD8 、CD28 CD8-、CD95 CD4 等亚群的绝对值差异有显著性，两组均低于健康人，且重型组低于普通型组。结论 SARS患者的大部分淋巴细胞及亚群均受到破坏，以T淋巴细胞功能减低最为显著。外周血淋巴细胞各亚群的绝对值和百分比对于反映SARS患者免疫功能的改变情况均有意义。外周血淋巴细胞各亚群检测有望成为新的SARS实验诊断与监测指标。     

SARS患者外周血T淋巴细胞亚群检测的意义

目的 研究SARS患者T淋巴细胞亚群水平。方法 用流式细胞术对7例SARS患者的外周血T淋巴细胞亚群进行系列检测，并选择27名HIV感染者、5名急性腮腺炎和7名麻疹患者作疾病对照，另选20名健康者作正常对照。结果 SARS患者CD3、CD4和CD8绝对数显著低于疾病对照和正常对照；但CD4百分率偏高、CD8百分率偏低，CD4／CD8比值显著高于疾病对照组。疾病日期与T淋巴细胞亚群结果密切正相关。另外，SARS患者CD3^ CD4^ CD8^ 淋巴细胞百分率明显增高。结论 SARS患者T淋巴细胞水平低下。     

传染性非典型肺炎T淋巴细胞功能亚群的表达

严重急性呼吸综合征(SARS,又称传染性非典型肺炎)是一种新的冠状病毒感染性疾病。目前全球约有6000多人受感染并出现相应临床症状,迄今SARS冠状病毒的传播途径、发病机制、影响因素等方面的研究均处于初始阶段。     

1例传染性单核细胞增多症患儿外周血淋巴细胞亚群绝对计数分析

传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)是EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染导致的一种急性传染性疾病,好发于儿童和青少年.IM主要依据临床症状(发热、咽峡炎、皮疹和淋巴结、肝、脾肿大)和实验室检查[外周血异型淋巴细胞>10％、聚合酶链反应(polymera...     

两种T细胞亚群计数方法的比较

目的 比较流式细胞仪MultiTEST自动计数法和传统方法检测艾滋病患者外周血中T细胞亚群百分率和绝对值的差异。方法 选择60份艾滋病患者的外周全血，分别用两种方法测定标本中T细胞亚群的百分率和绝对值，将同一标本取得的两个结果进行线性回归和配对t检验，并对CD4^ T细胞绝对计数作进一步分析，计算其线性方程，进行偏倚估计。结果 两种方法测得的CD3^ 细胞的百分率差异无显著性（P＞0．05），但CD4^ /CD8^ 比值、CD3^ CD4^ `CD3^ CD8^ 细胞的百分率和绝对值及淋巴细胞和CD3^ 细胞绝对值差异有非常显著意义（P＜0．01）。CD4^ T细胞绝对计数的预期相对偏倚在CD4^ T细胞为200个／μl时是32．5％，500个／μl时是15．8％，1000个／μl时是5．5％。结论 两种方法测定的结果不一致，CD4^ T细胞计数的相对偏倚随CD4^ T细胞数量降低而增加。     

流式细胞术测定T淋巴细胞亚群不同商家试剂的比较

T淋巴细胞亚群的测定在临床医学中越来越受到重视。应用流式细胞分析技术来检测人外周血T淋巴细胞亚群 ,具有简便、快速 ,计数细胞量大 ,相对精度好等优点。但是 ,由于流式细胞技术进入临床应用时间短 ,在操作技术规范、试剂质量指标等诸多方面还无严格标准可循 ,因而造成测定结果差异较大 ,可比性差。本文用国外的 3个商家试剂在流式细胞仪上测定T淋巴细胞亚群进行比较 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　仪器　美国B D公司FASCCalibur流式细胞仪。1 2　试剂　试剂① :B D公司三色标记T亚群试剂CD4FITC/CD8PE/CD3Percp、阴…     

严重急性呼吸综合征急性期T淋巴细胞亚群异常改变

目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者T淋巴细胞改变特点 ,探讨其发病机制 ,提高对SARS的早期诊断水平。方法　收集本院急诊留观的 30例确诊为SARS患者和 5 6名健康献血员的抗凝血 ,用特异性荧光抗体标记 ,通过流式细胞仪检测其CD4+ 和CD8+ 的T淋巴细胞亚群变化 ,对其中 2例恢复后的SARS病人复查CD4+ 和CD8+ 的T淋巴细胞亚群 ,并与人类免疫缺陷病毒(HIV)、巨细胞病毒 (CMV)和EB病毒 (EBV)感染患者的T淋巴细胞亚群改变进行比较。结果　与正常人相比 ,SARS患者的CD4+ T淋巴细胞 (简称“T4细胞”)和CD8+ T淋巴细胞 (简称“T8细胞”)数量均显著减少 (2 84± 187个 /mm3 和 2 88± 16 7个 /mm3 ) ,所有SARS患者的T4细胞计数均低于正常 (最低仅4 9个 /mm3 ) ,恢复期 2例SARS病人的T4和T8细胞恢复正常 ;与HIV、CMV、EBV感染者相比 ,SARS患者的T4细胞和T8细胞数量也均显著减少 ,而T8细胞数量的减少则更为严重 ;与正常人相比 ,HIV感染者T4细胞数量也均显著减少 ,但HIV、CMV、EBV感染者的T8细胞数量均显著增加。结论　SARS患者的T淋巴细胞数量显著降低 ,但可逆转 ;T4和T8细胞的检测有助于早期诊断SARS病人。     

健康成人外周血T淋巴细胞亚群绝对计数正常值调查

目的建立健康成年人外周血T淋巴细胞亚群绝对计数正常参考值.方法使用三标荧光抗体及TriCOUNT计数管,分别对298例健康成年人外周血T淋巴细胞亚群进行标记,采用FACSCaliburTM型流式细胞仪进行检测并分析结果,SPSS 10.0 软件进行统计学处理.结果 18～57岁健康成年人外周血中CD3 细胞绝对计数值为(1 242±404)个/μl ;CD3 CD4 细胞的绝对计数值为(651±209)个/μl ;CD3 CD8 细胞的绝对计数值为(524±283)个/μl ;CD3 CD4 CD8 细胞的绝对计数值为(17±10)个/μl .男性CD3 、CD3 CD8 细胞数比女性显著升高(P＜0.01).结论在相同地域、相同种族,可以建立健康成年人外周血的T淋巴细胞亚群绝对计数正常参考值.     

流式细胞仪检测强直性脊柱炎患者T淋巴细胞亚群的结果分析

目的 了解类风湿性关节炎患者T淋巴细胞的异常变化.方法 根据临床症状和X线分期将47例强直性脊柱炎(AS)患者分为两组:确诊AS组和可能AS组.用流式细胞仪检测确诊AS组、可能AS组和健康对照组外周血T细胞亚群及人类白细胞抗原(HLA-B27),同时检测红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白A(IgA).并分析T细胞亚群与CRP、HLA-B27、IgA在AS疾病中的相关性.结果 确诊AS患者CD3+无明显变化,CD4+T细胞(48.16 ±7.17)明显升高,CD4 +/CD8+比值(3.80±0.28)增加,高于可能AS组CD4+ (35.13±6.46)、CD4+/CD8+ (2.32±0.23),CD8+明显减少(20.45±6.41)低于可能AS组(24.40±7.11)(P均＜0.05).T细胞亚群的表达有随着CRP、IgA的升高而升高的趋势.结论 在AS患者的外周血中CD8+T细胞显著降低、CD4+T细胞明显升高,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了AS的发病,AS患者的易感性可能与细胞因子的免疫应答有关.早期检测T淋巴细胞亚群可能为RA的诊断及治疗提供依据.因此,T淋巴细胞亚群比例失衡在RA的发病中可能起着更为重要的作用.     

流式细胞术检测肺结核患者血清中T淋巴细胞亚群的变化

目的 探讨肺结核患者血清中T淋巴细胞亚群的改变。方法采用先进的流式细胞术分别测定了29例结核菌阴性及49例结核菌阳性的初治活动性肺结核患者血清T淋巴细胞亚群计数。结果初治活动性肺结核患者血清中CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋降低，而CD3^＋、CD8^＋升高，与正常对照组比较，CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋差异有显著性（P〈0．05）；老年结核患者的CD3^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋均较青年结核病患者低，其中CD4^＋／CD8^＋差异有显著性；病变范围广泛者的CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋较病变范围小者低，CD3^＋差异有显著性；痰菌阳性者与阴性者比较，CD4^＋／CD8^＋下降，CD8^＋升高，但差异无显著性。结论初治活动性肺结核患者的T细胞亚群变化存在其自身特点。对肺结核患者T淋巴细胞亚群的检测有助于判断病情、了解抗结核治疗效果及预后。     

流式细胞术检测体液T淋巴细胞亚群的临床应用

目的探讨胸水、腹水、肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群的检测方法及临床价值。方法采用流式细胞术检测良、恶性疾病患者的50例胸水、46例腹水、47例肺泡灌洗液(BALF)中T淋巴细胞亚群的水平并分组进行比较。结果 1)胸水:结核性胸膜炎组胸水Ts细胞占T淋巴细胞的(27.36±6.41)%、Th细胞占T淋巴细胞的(67.98±7.41)%、Th/Ts比值为2.60±0.64,肺部恶性肿瘤组胸水Ts细胞占T淋巴细胞的(67.97±4.20)%、Th细胞占T淋巴细胞的(37.61±4.80)%、Th/Ts比值为0.47±0.10,与结核性胸膜炎组比较,恶性组Th、Th/Ts比值显著下降(P0.01)而Ts显著升高(P0.01);2)肺泡灌洗液:肺良性疾病组肺泡灌洗液Ts细胞占T淋巴细胞的(44.54±9.56)%、Th细胞占T淋巴细胞的(49.28±12.88)%、Th/Ts比值为1.13±0.29,肺部恶性肿瘤组肺泡灌洗液Ts细胞占T淋巴细胞的(65.11±7.77)%、Th细胞占T淋巴细胞的(34.57±6.65)%、Th/Ts比值为0.54±0.19,与良性病变组比较,恶性组Th下降(P0.05),Th/Ts比值显著下降(P0.01),而Ts显著升高(P0.01)。3)腹水:结核性腹膜炎组腹水Ts细胞占T淋巴细胞的(33.11±3.34)%、Th细胞占T淋巴细胞的(66.69±3.78)%、Th/Ts比值为2.03±0.28,恶性组腹水Ts细胞占T淋巴细胞的(56.64±9.34)%、Th细胞占T淋巴细胞的(35.86±3.30)%、Th/Ts比值为0.65±0.10,与结核性腹膜炎组比较,恶性组Th、Th/Ts比值显著下降(P0.01),而Ts显著升高(P0.01)。结论胸腹水、肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群检测可用于分析性质并有助于评估患者局部免疫功能状态。     

骨髓增生异常综合征患者T淋巴细胞亚群的特征分析

目的：检测和分析骨髓增生异常综合征（M DS）患者T淋巴细胞亚群的分布,评估M DS患者免疫功能状态。方法：采用FC 500流式细胞仪对35例M DS患者和10例正常对照组外周血标本进行T淋巴细胞亚群检测。结果：M DS组的辅助性细胞T细胞（T h）,辅助性细胞T细胞/抑制性T细胞（T h/T s）和自然杀伤细胞（NK）的表达均低于正常对照组,T s细胞的表达高于正常对照组;随着M DS疾病的进展,抑制性T细胞（T s）的表达是逐渐增加的,其中只有RA/RA S组与RAEB组之间差异有显著性（P=0.027）;M DS患者各组间T h,T h/T s比值和NK细胞的表达均无差异性。结论：T h,T s和NK细胞参与人体重要免疫功能,T淋巴细胞亚群免疫失调,则导致细胞免疫功能紊乱,T h,T s和T h/T s比值成为监测人体免疫功能、反映机体免疫状态的重要指标。     

强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞亚群分析

目的 了解强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞亚群变化规律,探讨患者体内的免疫功能状态.方法 采用三色流式细胞学检测技术分析75例患者及50例健康对照的外周血T细胞亚群、B细胞与NK细胞水平,并对其结果进行比较分析.结果 强直性脊柱炎组总T细胞、T4细胞、T8细胞的百分含量依次为(65.74±9.99)%、(35.70±6.92)%和(23.02±5.35)%;T4/T8比值1.70±0.51,总T细胞、T4细胞、T8细胞的绝对含量依次为(1.25±0.63)、(0.47±0.27)和(0.31±0.19)×109/L.B细胞和NK细胞的百分含量分别为(11.84±4.50)%和(15.43±6.28)%;B细胞和NK细胞的绝对含量分别为(0.22±0.15)和(0.27±0.15)×109/L.与健康对照组比较,患者总T细胞、B细胞和NK细胞绝对含量增加(P＜0.01或P＜0.05),但各淋巴细胞亚群的百分含量无明显改变(P>0.05).与腰背痛组、B27+无临床症状组、B27+非强直组比较,各淋巴细胞亚群的百分含量和绝对含量均略有增高,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 强直性脊柱炎患者机体免疫功能存在一定程度的紊乱,且以总T细胞、B细胞、NK细胞功能亢进为特点.临床腰背痛患者、B27+无症状者、B27+非强直患者均表现出与临床强直患者相似的免疫功能紊乱.     

健康人外周血T细胞亚群参考区间的建立

目的建立健康成人血液T淋巴细胞亚群的参考区间。方法使用三标荧光抗体,分别对100例不同年龄性别健康成年人外周血T淋巴细胞亚群进行标记,采用EPICSXL/XL-MCL型流式细胞仪进行检测并分析结果,SPSS13.0软件进行统计学处理。结果18～65岁健康成年人CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+、CD4+/CD8+正常95%范围分别为59.17～76.15、24.26～40.50、18.76～27.40、0.62～2.42;不同年龄段比较中51～65岁CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+、CD4+/CD8+各项指标与18～30岁比较差异有统计学意义(P0.05)。结论在相同地域、相同种族,可以建立健康成年人外周血的T淋巴细胞亚群正常参考区间。     

常见恶性肿瘤患者机体淋巴细胞亚群和活化T淋巴细胞的分析

目的：对比研究常见恶性肿瘤患者术前与术中淋巴细胞亚群及活性T 淋巴细胞差异状况,研究手术对恶性肿瘤患者淋巴细胞亚群及其活化的影响。方法利用流式细胞仪测42例常见恶性肿瘤患者手术前、中的淋巴细胞亚群及其活性细胞。结果恶性肿瘤患者术中 CD3＋、CD4＋、CD8＋较术前有所降低,CD3＋与 CD4＋淋巴细胞差异有统计学意义（P ＜0．05）,与 CD8＋差异无统计学意义（P ＞0．05）。NK、CD19＋、CD3＋ HLA-DR＋明显升高,NK 细胞与 CD19＋差异无统计学意义（P ＞0．05）,与CD3＋ HLA-DR＋差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论恶性肿瘤患者细胞免疫功能处于抑制状态,手术使恶性肿瘤患者的细胞免疫功能进一步损害。手术、创伤等的应激反应使 NK、CD19＋、活性 T 淋巴细胞的表达上升。恶性肿瘤患者建议手术前使用免疫反应调节剂增强患者的细胞免疫功能,以确保术后的放、化疗等后续治疗的效果。     

不同流式细胞分析系统对外周血淋巴细胞亚群分析结果的影响

目的 探讨部分临床实验室FCM淋巴细胞亚群分析参考范围应用的合理性及不同生产厂家的流式细胞仪和试剂组合对淋巴细胞亚群分析结果的影响.方法 根据国内临床实验室常用的3个流式细胞仪型号(Beckman Coulter Epics XL、Beckman Coulter Cytomics FC500、BD FACS Calibur),分别选取3家北京地区临床流式细胞室(A、B、c室),按照各室的实际检测方案分别测定50份健康人静脉血标本,以验证各室淋巴细胞亚群分析参考范围是否合理.调查3家实验室室内全血质控品使用情况,并将商品化全血质控品分发各室,按照各自的实际实验方案在20个工作日内与常规标本平行处理、检测和分析.针对不同生产厂家的试剂,在同一流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL)上用a、b、c、d 4种不同的试剂组合对20份患者标本进行检测,其中试剂组合a为美国Beckman Coulter公司同厂配套试剂和仪器,试剂组合b、c、d的检测结果分别与试剂组合a比较,计算b、c、d试剂组合偏倚>10%的概率.采用相同试剂和溶血素(美国Beckman Coulter公司)对24份患者标本进行前处理,分别在2台不同厂家和型号的流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur)上检测,比较相同试剂处理标本后不同仪器对淋巴细胞亚群分析结果的影响.采用同厂配套试剂和仪器,比较Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统对20份患者标本检测结果的影响.结果 A室的自然杀伤(NK)细胞及CD+4 T淋巴细胞/CD+8 T淋巴细胞(T4/T8),B、c两室的T4均有大于10%的结果落在相应的参考范围之外,超出相应参考范围的概率分别为16%(9/50)、24%(12/50)、22%(11/50)、12%(6/50).3家实验室20个工作日内的室内质控均在参考范围内.与试剂组合a比较,试剂组合b、c的所有项目偏倚均较大,其中偏倚>10%的概率最低为试剂组合b的T8,为70%(14/20);最高为试剂组合b、c的T淋巴细胞(T3)、T4,均达到100%(20/20).试剂组合d的T3、T8和B淋巴细胞(B)偏倚较大,偏倚>10%的概率分别为35%(7/20)、85%(17/20)、75%(15/20).不同生产厂家的试剂、仪器处理和分析标本的结果,与采用同一生产厂家的试剂、仪器处理和分析的结果相比,T3、T4、T8、B、NK均存在较大偏倚,偏倚>10%的概率分别为71%(17/24)、80%(19/24)、38%(9/24)、33%(8/24)、92%(22/24).Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统相比较,T8、NK和B的偏倚均较大,偏倚>10%的概率分别为55%(11/20)、70%(14/20)、55%(11/20).结论 流式细胞实验室需要建立自己的参考范围并定期验证,以便合理进行调整.建议定期采用全血质控品,并累计质控数据.各实验室应选择同厂配套试剂处理标本.

Abstract：

Objective To investigate the appropriate setting up of normal reference ranges of lymphocyte subsets in some flow cytometry laboratories and to study the effects of different flow cytometers and various reagents by different manufacturers on the analysis of peripheral blood lymphocyte subsets. Methods Three FCM labs (named A, B and C) in Beijing region were selected representing 3 commonly used flow cytometers (Beckman Coulter Epics XL, Beckman Coulter Cytomics FC500, BD FACS Calibur). 50 samples from healthy donors were distributed to 3 labs and tested according to individual lab's standard operating procedure to verify whether the normal reference ranges of peripheral blood lymphocyte subsets established were appropriate. The application of internal quality control was also investigated. Commercial blood quality control reagents were given to the 3 FCM labs and tested within 20 working days paralleled with routine samples. In addition, 20 patients' samples were prepared using 4 different combinations of reagents ( a , b , c and d). The results from combination a, which used the Beckman Coulter reagents and instrument, were compared to the results from combination b, c and d, which used reagents from different manufacturers. Then the prepared samples were tested on Beckman Coulter Epics XL to evaluate the effects of different combinations of reagents on the results of peripheral blood lymphocyte subsets analyzed by the same instrument. Furthermore, 24 patients' samples prepared by same reagents from Beckman Coulter company were tested on both Beckman Coulter Epics XL and BD FACS Calibur respectively to assess the effects of different instruments on peripheral blood lymphocyte subsets. 20 patients' samples prepared by same reagents and instruments were analyzed by Beckman Coulter Epics XL analytic system and BD FACS Calibur analytic system respectively to assess the effects of the two analytic systems on the lymphocyte subsets. Results Over 10% of the results for NK and T4/T8 in lab A as well as T4 in labs B and C fell outside of their normal reference ranges. The probabilities exceeding corresponding normal reference ranges were 16% ( 9/50 ), 24% ( 12/50 ), 22% (11/50) and 12% ( 6/50 ), respectively. The results using internal blood quality control in 3 FCM labs within 20 working days were all within the reference ranges of the quality control provided by the kit. The biases from b and c reagent combinations were substantial compared with that of reagent a combination. Among the biases from b and c reagent combinations, the lowest probability of bias exceeding 10% was T8 of combination b, which had probability of 70% (14/20). The highest probabilities of hias exceeding 10% were T3 and T4 of b and c reagent combinations, which reached 100% (20/20) . Furthermore, the biases of T3, T8 and B of d reagent combination compared with that of reagent a combination were also substantial. The probabilities of bias exceeding 10% were 35% (7/20) ,85% (17/20) and 75% (15/20), respectively. Comparing the results of samples prepared and analyzed by reagents and instruments from different manufacturers to that of samples prepared and analyzed by the same company's reagents and instruments showed that there were great discrepancies in T3, T4 , T8 , B and NK. The probabilities of bias exceeding 10% were 71% ( 17/24), 80% (19/24) ,38% (9/24), 33% (8/24) and 92% (22/24), respectively. The biases of T8, NK and B were substantial when compared the results from Beckman Coulter Epics XL analytic systems and BD FACS Calibur analytic systems. The probabilities of bias exceeding 10% were 55% (11/20 ), 70% ( 14/20 ) and 55% (11/20), respectively. Conclusions FCM labs should set up their own normal reference range for peripheral blood lymphocyte subsets. The normal reference range should be verified periodically. It is important to apply internal blood quality control regularly and accumulate the quality control results. The reagents and instrument for preparing peripheral blood samples should be from the same manufacturers.